植物细胞工程
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植物细胞⼯程
植物细胞⼯程
重点知识归纳及讲解
(⼀)细胞⼯程的概念及分类
细胞⼯程是指应⽤细胞⽣物学和分⼦⽣物学的原理和⽅法,通过细胞⽔平或细胞器⽔平
上的操作,按照⼈的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的⼀门综合科学技术。
根据操作对象的不同,将细胞⼯程分为植物细胞⼯程和动物细胞⼯程两⼤领域。
(⼆)植物细胞⼯程的基本技术
1、细胞的全能性
具有某种⽣物全体遗传信息的任何⼀个细胞,都具有发育成完整⽣物体的潜能,也就是
说,每个⽣物细胞都具有全能性的特点。
2、植物组织培养技术
(1)植物组织培养——就是在⽆菌和⼈⼯控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,
培养在⼈⼯配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产⽣愈伤组织、丛芽,最终形成完整
的植株。
(2)植物组织培养技术:
思考:在组织培养实验中,为什么要强调所⽤器械的灭菌和实验⼈员的⽆菌操作?
植物组织培养中⽤到的培养基会有丰富的营养成分,有利于培养物的⽣长,然⽽各种杂
菌同样也可以在上⾯迅速⽣长,所以植物组织培养过程中污染现象经常发⽣。培养基⼀旦被污
染,迅速⽣长的杂菌不但会与培养物争夺营养,⽽且这些杂菌⽣长的过程中会⽣成⼤量对培养物
有害的物质,导致培养物迅速死亡。造成培养基污染的因素很多,⼀般包括:外植物带菌、培养
瓶和各种器械灭菌不彻底、操作⼈员操作不规范等。所以在组织培养实验中⽤到的植物材料和各
种器械都要进⾏彻底地灭菌,实验⼈员操作⼀定要规范,避免带⼊杂菌。
3、植物体细胞杂交技术
(1)植物体细胞杂交——就是将不同种的植物体细胞,在⼀定条件下融合成杂种细胞,并
把杂种细胞培养成新的植物体的技术。
(2)植物体细胞杂交技术。
思考:为什么番茄——马铃薯杂种植株没有地上长番茄、地下结马铃薯?
⽣物基因的表达不是孤⽴的,它们之间是相互调控、相互影响的,所以番茄——马铃薯
杂种植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质,但这些遗传物质的表达受到相互⼲扰,不能再
像马铃薯或番茄植株中的遣传物质⼀样有序表达,杂种植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是
很⾃然的了。
(三)植物细胞⼯程的实际应⽤1、植物繁殖的新途径
(1)微型繁殖——⽤于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。
(2)作物脱毒:切取茎尖进⾏组织培养,再⽣的植株就有可能不带病毒,从⽽获得脱毒
苗。
(3)⼈⼯种⼦——以植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料,经过⼈
⼯薄膜包装得到的种⼦。
思考:
①⼈⼯种⼦具有哪些优点?
⼈⼯种⼦是通过植物组织培养(⽆性繁殖)得到的,可以完全保持优良品种的遗传特性,
⽣产上不受季节的限制。贮藏、运输⽅便。
②⼈⼯种⽪应具有哪些有效成份?
针对植物种类和⼟壤等条件,在⼈⼯种⼦的包裹剂中可以加⼊适量的养分、⽆机盐、有
机炭源以及农药、抗⽣素、有益菌等。为了促进胚状体的⽣长发育,还可以向⼈⼯种⽪中加⼊⼀
些植物⽣长调节剂。
2、作物新品种的培育
(1)单倍体育种:通过农药培养获得单倍体植株,染⾊体加倍后当年可得到稳定遗传的优
良品种。
(2)突变体的利⽤:对植物组织培养过程中产⽣的突变体进⾏筛选,培育成新品种。
3、细胞产物的⼯⼚化⽣产
(1)细胞产物包括:蛋⽩质、脂肪、糖类、药物、⾹料、⽣物碱等。
(2)实例:我国⽣产的⼈参组织和⼈参皂甙⼲粉。
(3)展望:⽣产抗癌物质——柴杉醇。
课外拓展
⼀、植物组织培养中的愈伤组织是如何形成及再分化的?
植物组织培养中使⽤的外植体⼀般是⾼度分化了的细胞,在植物体中是不会
再分裂繁殖的,只是执⾏某种功能直⾄死亡。这些细胞在培养基上培养时会由原来的
分化状态,变成分⽣状态的细胞,分裂产⽣愈伤组织,这个过程称为脱分化过程。这
种转变在细胞的形态结构和⽣理⽣化上都会产⽣⼀系列变化。组织培养的研究结果表
明分化细胞的脱分化需要两个条件,即创伤和外源激素。
⽬前⼈们对于脱分化过程的本质还不清楚。分化细胞在细胞周期中是处于⼀
种相对静⽌状态的细胞(G0期细胞),脱分化是要打破这种状态,使细胞进⼊细胞周期
中的G1期,并沿着G1期→S期→G2期→M期的循环进⾏细胞分裂,形成愈伤组织。现
在发现细胞周期受基因调控,⼀种称为编码细胞周期依赖性激酶CDK的基因和⼀种细
胞周期蛋⽩可能与植物细胞脱分化的第⼀次分裂启动有关。那么,什么因素诱导细胞
周期调控基因的作⽤,培养实践证明与外源激素有关。⾄于激素如何诱导以及诱导作
⽤的过程⽬前仍不清楚,有待深⼊研究。分化细胞脱分化后细胞结构有两点明显的变
化:⼀是在细胞内出现液泡蛋⽩;⼆是叶绿体转变成原质体。
当细胞脱分化形成愈伤细胞后,经过⼀段时期的分裂,细胞群体变成不是⼀种细胞类型的均⼀群,⼜会产⽣分化,形成分⽣细胞或分⽣细胞团,由此再⽣成植株
有两条途径:⼀是形成体细胞胚(功能类似于受精过程产⽣的胚),通过体细胞胚形成
再⽣植株⼆是⾛器官发⽣的途径再⽣植株,分⽣细胞在⼀定的诱导条件下重建芽的分
⽣组织,分化出芽后再⽣根,成为完整的植株。
⼆、为什么要在避光条件下培养愈伤组织?
对于植物组织培养来说,光照条件⾮常重要,包括光照强度、时间和波长。
但在愈伤组织的诱导阶段往往要暗培养,⽽在分化再⽣的过程中⼀定要有光照。愈伤
组织诱导阶段的暗培养有利于细胞的脱分化产⽣愈伤组织,如果在光照条件下容易分
化产⽣维管等组织,不利于产⽣⼤量的愈伤组织。