主管检验技师考试临床医学检验微生物检验讲义第7章细菌形态学检查法

细菌形态学检查法● 考点显微镜的种类及应用不染色细菌标本检查法细菌染色标本检查法【内容讲解】细菌的形态学检查：不染色标本检查法染色标本检查法显微镜是观察细菌形态所必备的基本工具。

形态学检查（镜检）的意义：可以迅速了解标本中有无细菌及大致的菌量；根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的初步识别和分类，为进一步作生化反应、血清学鉴定提供依据。

可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义。

一、显微镜普通光学显微镜暗视野显微镜相差显微镜荧光显微镜电子显微镜普通光学显微镜以自然光或灯光为光源，显微镜的最大分辨率为波长的一半，即0.25μm。

暗视野显微镜多用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察。

相差显微镜利用相差板的光栅作用，将光相的差异转换成光的强度的差异，使细菌中的某部分结构比其他部分深暗，衬托出鲜明的对比。

本法主要用于检查不染色活细菌的形态及某些内部结构。

荧光显微镜以高压汞灯产生的紫外光或蓝紫光为光源细菌经荧光素染色后，置于荧光显微镜下，即可激发荧光，在暗色的背景下可以看到发射荧光的细菌。

用于细菌、病毒等的诊断或鉴别。

电子显微镜以电子流代替光源能分辨1nm的物体，细菌的表面形态和内部超微结构均能清楚地显现。

扫描电子显微镜：适于对细菌表面结构及附件的观察。

透射电子显微镜：适于观察细菌内部的超微结构。

二、不染色细菌标本的检查主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动状况。

压滴法悬滴法毛细管法：厌氧菌动力观察动力判断：细菌如有动力，有明显的方向性位移；细菌如无动力，受水分子撞击细菌呈现布朗运动，只在原地颤动而无位置的改变。

三、细菌染色标本的检查在普通光学显微镜下可以观察细菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构（芽胞、荚膜、鞭毛）、异染颗粒等。

常用染料：①碱性染料（basic dye）—带正电染料。

其阳离子部分为发色基团，可与细胞中带负电的组分结合。

如碱性复红、结晶紫、美蓝等。

②酸性染料（Acid dye）—带负电染料。

第七章细菌形态学检查法一、A11、下列能溶于脂肪溶剂中，不溶于水，化学亲和力低的染料是A、瑞氏染料B、姬姆萨染料C、苏丹类染料D、荧光染料E、酸性染料2、下列属于酸性染料的是A、复红B、甲紫C、美蓝D、伊红E、天青3、细菌染色法中，最常用最重要的鉴别染色法为A、抗酸染色B、革兰染色C、荧光染色D、鞭毛染色E、荚膜染色4、下列微生物染色方法中，正确的是A、立克次体-碘液染色B、结核分枝杆菌-Giemsa染色C、钩端螺旋体-镀银染色D、新型隐球菌-革兰染色E、沙眼衣原体感染标本直接涂片-抗酸染色5、常用的酸性染料有A、碱性复红B、结晶紫C、亚甲蓝D、伊红E、中国蓝6、下列哪种显微镜多用于检查不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察A、普通光学显微镜B、暗视野显微镜C、相差显微镜D、荧光显微镜E、电子显微镜7、观察细菌内部的超微结构需要采用A、相差显微镜B、电子显微镜C、暗视野显微镜D、荧光显微镜E、偏光显微镜8、光学显微镜下能看清细菌形态的最佳放大倍数是A、1000倍B、500倍C、100倍D、10000倍E、600倍9、细菌检查最快速的检测方法是A、电镜检查B、动物实验C、分离培养D、血清学试验E、直接涂片镜检10、细菌染色的基本程序为A、涂片-固定-染色-脱色-复染B、涂片-染色-脱色-复染-固定C、涂片-染色-脱色-固定-复染D、涂片-固定-染色-复染-脱色E、涂片-固定-脱色-染色-复染11、关于细菌的说法错误的是A、细菌等电点在PH2～5，在碱性环境中带负电荷B、细菌等电点在PH2～5，在中性环境中带负电荷C、细菌等电点在PH2～5，在弱酸性环境中带负电荷D、易于与碱性染料结合着色E、易于与酸性染料结合着色12、下列有关显微镜说法错误的是A、暗视野显微镜多用于观察不染色的活细菌和螺旋体的形态及运动观察B、相差显微镜用于检查不染色活细菌的形态及某些内部结构C、荧光显微镜广泛应用于免疫荧光技术中D、电子显微镜可用于观察到活的微生物E、透射电子显微镜适用于观察细菌内部的超微结构答案部分一、A11、【正确答案】 C【答案解析】单纯染料如苏丹类染料，溶于脂肪溶剂中，不溶于水，化学亲和力低。

第七章细菌形态学检查方法本章内容一、显微镜二、不染色细菌标本的检查三、细菌染色标本的检查（一）常用染料（二）常用的染色方法不染色标本的检查观察生活状态下细菌的动力及运动状况。

压滴法和悬滴法，以普通光学显微镜观察，用暗视野显微镜或相差显微镜观察，则效果更好。

螺旋体由于不易着色并有形态特征，故多用不染色标本作暗视野显微镜检查。

细菌染色标本的检查观察细菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构、异染颗粒等。

革兰染色法：革兰阳性/阴性细菌抗酸染色法：结核抗酸杆菌墨汁染色法：新型隐球菌荧光染色法鞭毛染色/芽孢染色常用染料多为人工合成的含苯环的有机化合物1.碱性染料：细菌在碱性、中性、弱酸性的环境中细菌均带负电荷，易与带正电荷的染料结合而着色。

常用的碱性染料有碱性复红、结晶紫、亚甲蓝等。

2.酸性染料：常用来染细胞浆，很少用于细菌的染色。

常用的有伊红、刚果红等。

3.复合染料（中性染料）：如瑞氏染料（伊红亚甲蓝）、吉姆萨染料（伊红天青）等。

4.荧光染料：常用异硫氢基荧光素。

常用染色方法革兰染色：细菌学中最经典、最常用的染色方法。

结果：紫色——G+红色——G-原理：细胞壁结构不同意义：鉴定细菌初步诊断药物选择细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染）结晶紫-碘液-乙醇-稀释复红抗酸染色：原理：分枝杆菌细胞壁特点方法：初染（石炭酸复红）→固定（加热）→脱色（5%盐酸酒精）→复染（碱性美蓝）结果：红色——抗酸细菌蓝色——非抗酸细菌意义：鉴定分枝杆菌荧光染色：结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌、白喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。

鞭毛染色：观察菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量。

异染颗粒染色：白喉棒状杆菌感染检测。

细菌学中最经典最常用的染色方法是A.荧光染色B.抗酸染色C.革兰染色D.鞭毛染色E.异染颗粒染色『正确答案』C『答案解析』细菌学中最经典最常用的染色方法是革兰染色。

在一般环境中细菌带负电荷，易与A.中性染料结合B.姬姆萨染料结合C.碱性染料结合D.酸性染料结合E.以上都不对『正确答案』C『答案解析』在一般环境中细菌带负电荷，易与带正电荷的碱性染料结合。

2018检验技师考试《微生物和微生物检验》大纲
一、考试内容
本次考试涵盖以下方面的内容：
1.微生物的形态结构、生长要素和生命周期；
2.微生物的分类；
3.微生物对环境的影响；
4.传染病的诊断和治疗方法；
5.微生物实验室的安全管理；
6.微生物实验的常规操作和技术。

二、考试要求
1.了解微生物的基本形态结构、生长要素和生命周期，熟悉各类微生物
的特点和分类；
2.掌握微生物对环境的影响和传染病的诊断和治疗方法，知道如何进行
有效的微生物实验操作；
3.熟悉微生物实验室的安全管理措施，包括实验室消毒和安全操作规程；
4.掌握常规微生物实验技术和方法，会进行细菌涂片、染色、培养和鉴
定等操作。

三、考试形式
本次考试采用闭卷形式，考试时间为120分钟，总分为100分。

考试题型包
括选择题、判断题、填空题和简答题，考题难度适中。

四、备考建议
1.合理安排时间，制定科学的复习计划；
2.重在理解，将知识点联系起来，形成体系；
3.做好笔记和练习，不断巩固知识点；
4.多做模拟题，提升应试能力；
5.保持良好状态，保证充足的睡眠和饮食，在考前放松心态。

五、考试重点和难点
1.微生物的分类和特点；
2.微生物实验室的安全管理和操作规程；
3.常规微生物实验技术和方法。

六、
本次考试对于检验技师来说是一个重要的考核，通过合理的备考和实际操作练习，相信大家都能顺利通过考试。

同时，在日后的工作中也要不断提高自身素质，保证自己的实验操作技能和安全防范意识。

怀化医专《微生物学检验》教案编号:３第八章细菌形态学检查形态学检查的目的:①从形态上识别细菌,为细菌分类与鉴别的基础;②了解被检标本中有无细菌;③直接从标本中观察到某些细菌,可对少数疾病初步诊断(如结核,脑膜炎等)。

第一节显微镜(mｉcroscopｅ)一、普通光学显微镜原理自然光的波长为0、4um;显微镜的最大分辨率为0.2um(前者的一半);肉眼的分辨率为0.2ｍm,故放大100０倍,使0.2um放大到０.2mm。

二、暗视野显微镜用暗视野聚光器,使反光镜反射过来的光线不能进入镜筒,视野变暗,线从暗视野聚光器周围斜射到菌体上,由于散射作用使菌体发光。

常用于活的微生物的动力检测。

三、相差显微镜在检查不染色标本时,由于细菌的折光性与周围环境的折光性相近,对比不明显,瞧不清细菌及其内部结构,相差显微镜利用相差板的光栅作用,使光波穿过标本中密度不同的部位时,引起位相差,显出光的强度的明暗对比。

应用于活菌的形态及某些内部结构的观察。

四、荧光显微镜以紫外光或蓝紫光作光源,因其波长比自然光短,故分辨率比普通显微镜要高。

细菌经过荧光素染色后,在荧光显微镜下,由于菌体各种结构对荧光素的溶解、吸附情况不同,因此发出不同色调与亮度的荧光。

五、电子显微镜以强大的电子流代替光源,因电子流的波长仅为０、００5nm,(仅为可见光源的几万分之一),故其放大倍数可达1０万-100万倍,可瞧清1nm的物体。

电镜种类透射电镜:因电子的透射作用,可观察细菌,virus内部结构,通过荧屏显示。

扫描电镜:因电子流对物体的表面进行扫描,可清楚的显露出物体的三维空间的立体结构,可用于对细菌,virus的表面结构观察。

第二节不染色细菌标本检查法仅用于细菌动力的观察。

不能观察细菌的形态与结构特征。

1.压滴法明视野法、暗视野法。

2、悬滴法3、毛细管法:孔径0、5-1.0mm,长约6０－70ｍm毛细管,以此管轻取细菌培养物,待液体进入后,两端火焰封融。

第-章绪论一、A1仁天花是通过下列哪•种疫苗的应用而被消灭的（）。

A、天花病毒疫苗B灭活疫苗C痘苗病毒疫苗D减毒活疫苗E、传代细胞疫苗2、下列微生物哪种为真核细胞型微生物（）=A、细菌B真菌C立克次体D衣原体E、支原体3、关于条件致病菌的致病条件，下列叙述错误的是（）。

A、机体免疫力下降B细菌寄居机体的部位发生改变C机体抵抗力降低D长期使用广谱抗生素引起菌群失调症E、破伤风杆菌感染4、有关微生物的描述哪--项是错误的（）。

A、病毒属于非细胞型微生物B细菌属于真核细胞型微生物C支原体属于原核细胞型微生物D衣原体属于原核细胞型微生物E、立克次体属于原核细胞型微生物5、接种牛痘后产生对天花的抵抗力，这衣明（）=& Ag特异性BAg的交叉反应C先天免疫D过继免疫E、彼动免疫6、关于正常菌群以下叙述不正确的是（）。

A、具有生物拮抗作用B、合成维生素和细菌素C、促进机体免疫D、与衰老有关E、对人体无害，任何情况下均不致病第二章细菌的形态与结构一、A1仁可阻碍细菌细胞壁形成的抗生素是（）。

A、链霉素B、青霉素C、四环素D、红霉素E、庆大霉素2、不属于细菌细胞质中重要成分的是（）。

A、核蛋白体B、质粒C、核质D、糖肽E、胞质颗粒3、关于革兰阳性菌和阴性菌细胞壁结构的描述，哪项正确（）。

A、革兰阴性菌肽聚糖含量丰富，壁厚，坚韧，有外膜B、革兰阴性菌肽聚糖含量少，壁薄，无外膜C、革兰阳性菌肽聚糖含量丰富，壁薄，无外膜D、革兰阳性菌肽聚糖含量少，壁厚，有外膜E、革兰阳性菌肽聚糖含量丰富，壁厚，无外膜4、革兰染色的临床意义在于（）。

A、人多数G+菌是以毒素为主，G・菌是外毒素为主B、人多数G・菌是以毒素为主，G+菌是外毒素为主C、G+S具有某种酶，G・菌缺少某种酶D、G+缺少某种酶，G•菌具有某种酶E、G"i菌有某种特殊因了，G•菌不具有5、有关细菌的菌毛，哪种说法是不正确的（）。

A、分普通菌毛和性菌毛B、普通菌毛遍布细菌农而C、性菌毛又称菌毛D带有性菌毛的菌称为雌性菌E、性菌毛是某项噬菌体吸附于菌细胞的受体6、革兰阳性细菌细胞壁的特有成分是A、脂多糖B外膜C脂蛋白D荚膜多糖E、磷壁酸7、测量细菌人小的单位是（）。