Q_JBSW 045-2019混合型饲料添加剂 液态溶菌酶

溶菌酶----新型免疫抗菌抗病毒药物、饲料添加剂溶菌酶研发背景：抗生素是人类应用最广泛的抗菌药物，不仅用于临床，也广泛用于畜禽饲养和农业方面。

在过去的50多年中，由于饲用抗生素在养殖中的长期使用导致大量耐药菌株的产生，且病原菌抗药性逐年增强，致使疗效下降，剂量提高，造成动物疾病越防越难防，越治越难治，给养殖业造成很大的损失和危害。

同时也给全人类的健康造成严重的影响。

因此，世界卫生组织于1994年就细菌耐药性的监测结果给全世界提出了警示：细菌对抗生素产生的耐药性正在以惊人的速度增加，而现在的抗生素药物正在失去原来的疗效。

因此寻求广谱、高效的新一代饲用抗菌药物已成为迫在眉睫的摆在人类面前的课题。

澳大利亚昆士兰大学医学系博士生导师、高级研究员王雯禾博士（1993年毕业于英国剑桥大学达尔文学院获微生物营养学博士学位），一直致力于生命科学的研究和发展，历经十多年的研究发现：酶广泛存在于生物体内，参与新陈代谢等多种生理功能，其中对微生物细胞壁具有水解功能的抗菌酶，如溶菌酶lysozyme能够溶解微生物细胞壁而使微生物死亡，而且溶菌酶lysozyme在人和动物的唾液、眼泪、乳汁以及肌体组织中大量存在，是人和动物自身重要的免疫因子，与人和动物的健康息息相关。

溶菌酶lysozyme的溶菌（杀菌）作用与传统的抗生素药物相比，具有对某一病原菌所有血清型都有效的优点，克服了一种抗生素只能预防一种或其中一种血清型病原菌的不足，更不存在药物残留和耐药性的问题。

王雯禾博士认为，溶菌酶lysozyme作为畜禽、水产饲料添加剂在替代抗生素，控制耐药菌，生产绿色肉蛋奶食品方面是最佳的选择。

并多次鼓励和支持国内年轻的科学家、学者，致力于这一伟大的、划时代的、对全人类的健康有杰出贡献的产品的开发和研究。

并于2003年10月推出最早用于防治动物疾病的产品--溶菌酶系列,由于它不但能溶解（杀死）细菌，增强动物的免疫能力，而且还能和病毒结合使病毒失活，所以它作为预防动物疾病的新型饲料添加剂，正在动物疾病防治的许多领域被广泛应用。

ICS65.120B 46 Q/JHSW 金河生物科技股份有限公司企业标准Q/JHSW 006—2019 混合型饲料添加剂 L-赖氨酸（报批稿）2019-11-26发布2019-12-26实施前言本标准依据GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由金河生物科技股份有限公司提出。

本标准由金河生物科技股份有限公司起草。

本标准由金河生物科技股份有限公司批准。

本标准主要起草人：张兴明、张明明。

本标准为首次发布。

混合型饲料添加剂 L-赖氨酸1 范围本标准规定了混合型饲料添加剂L-赖氨酸产品的技术要求、试验方法、检验规则、标识、包装、运输、贮存和保质期。

本标准适用于以L-赖氨酸盐酸盐为原料，以单硬脂酸甘油酯为载体加工而成的混合型饲料添加剂L-赖氨酸。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 5917.1 饲料粉碎粒度测定 两层筛筛分法GB/T 6435 饲料中水分和其他挥发性物质含量的测定GB 10648 饲料标签GB 12904 商品条码 零售商品编码与条码表示GB 13078 饲料卫生标准GB/T 14699.1 饲料 采样GB/T 18823 饲料检测结果判定的允许误差GB 34466 饲料添加剂 L-赖氨酸盐酸盐《定量包装商品计量监督管理办法》（2005）中华人民共和国农业部公告 第1773号《饲料原料目录》中华人民共和国农业部公告 第2045号《饲料添加剂品种目录（2013）》3 要求3.1 感官本品为类白色至微黄色颗粒状物。

3.2 加工质量指标3.2.1 水分水分不大于10%。

3.2.2 粒度95%通过孔径为850μm的试验筛。

3.3 产品成分分析保证值产品L型L-赖氨酸（以盐酸盐计）含量不低于35.0%；产品M型L-赖氨酸（以盐酸盐计）含量不低于40.0%；产品H型L-赖氨酸（以盐酸盐计）含量不低于45.0%。

溶菌酶在饲料中的应用李鑫1 ，谭志坚1 ，凌欣华2，李巧贤3(1 佛山市正典生物技术有限公司，广东佛山 528138；2 梅州市畜牧兽医技术推广站，广东梅州 514021；3 广东现代农业集团研究院，广东广州 510630)溶菌酶（Lysozyme）又称胞壁质酶或N-乙酰胞质聚糖水解酶，是动物体内一种非特异性免疫因子，具有抗菌消炎、抗病毒、增强免疫力、促进双歧杆菌等有益菌增殖的作用。

本文介绍了溶菌酶的特性、分类和作用机理，重点综述了溶菌酶作为饲料添加剂在猪、鸡、鸭、反刍动物以及水产动物等饲料中的应用。

溶菌酶广泛存在于鸟类和家禽的蛋清中，亦存在于哺乳动物的泪液、唾液、血浆、乳汁、胎盘、体液及组织细胞内，其中以蛋清中含量最丰富。

溶菌酶对革兰氏阳性菌有抗菌作用，而对没有细胞壁的动物体细胞不会产生不利影响，因而安全性很高。

口服溶菌酶，可阻止流感和腺病毒繁殖。

作为抗生素的替代品，溶菌酶被WHO和许多国家认定为无毒、无害、安全的应用于食品和饲料添加剂领域，2010年被我国卫生部批准为食品添加剂。

1 溶菌酶的特性溶菌酶，又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，能水解肽聚糖中的N-乙酰葡萄糖和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键，以此破坏细菌的细胞壁，具有较强的抑菌抗菌活性。

溶菌酶是一种白色、微白色结晶型或无定型粉末,无臭、味甜且易溶于水，不溶于丙酮和乙醚等有机溶剂，在干燥室温可长期保存。

化学性质非常稳定，对热也极为稳定。

当pH在1.2-11.3范围内剧烈变化时，其结构几乎不变。

在酸性环境中，溶菌酶对热的稳定性很强,在pH4-7范围内，100℃处理1 min仍能保持原酶活性，pH3时能耐100℃加热处理45 min,但在碱性环境中溶菌酶对热稳定性较差。

最适pH为6.6，作用的最适温度为45～50℃，等电点pH10.5-11。

2 溶菌酶的分类2.1 c型溶菌酶, 主要分布在脊椎动物和昆虫中, 大部分虾溶菌酶属于c型,如凡纳滨对虾、日本囊对虾、斑节对虾、罗氏沼虾、日本沼虾的溶菌酶。

摘要：在畜牧养殖中，抗生素不仅作为动物发病时治疗的药物进行使用，还会作为促生长剂添加到动物的饲料中使用，目前全球75%的抗生素都用到了动物的生产养殖中。

持续广泛的滥用抗生素，不仅导致了细菌耐药性的产生，也使得肉食品中抗生素残留加大，威胁到了人类的健康。

因此，为了减少抗生素的过度使用、维护环境的安全性，寻找合适的抗生素替代品变得尤为紧迫和重要。

关键词：溶菌酶；猪；禽；应用溶菌酶在猪、禽上的应用顾振宏1，赵子惠2，蒋东平1（1.甘肃省白银市平川区畜牧兽医技术服务中心甘肃白银730900；2.甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000）收稿日期：2023-03-08基金项目：猪IFN-λ1基因克隆、原核表达及抗PoRV 活性研究（项目编号:21JR7RA718）作者简介：顾振宏（1987.9—），男，本科，兽医师，主要从事动物防疫、检疫工作。

1溶菌酶的概述1.1溶菌酶的渊源溶菌酶是1922年由Fleming 从人的唾液和泪水中发现的一种具有溶解有些细菌作用的物质，因此将其命名为溶菌酶。

溶菌酶是一种单体碱性球蛋白，它的相对分子量为14.4ku ，溶菌酶的肽链包括129个氨基酸残基，其中包含18种氨基酸。

溶菌酶肽链N 末端由第40~88位氨基酸残基构成β-反平行折叠结构，含有4对由含硫氨基酸Cys 构成的二硫键，而C 末端由第1~39位和第89~129位氨基酸残基折叠形成α-螺旋结构。

肽链之间的活性位点是溶菌酶的功能核心，能够识别和水解细菌细胞壁的聚糖，从而发挥溶菌作用[1]。

溶菌酶是一种具有杀菌作用的天然抗感染物质，具有序列保守性和无毒副作用的碱性蛋白。

它广泛存在于人体各种组织、禽类和鸟类蛋清中，以及哺乳动物的泪液、血浆、唾液和乳液等液体中。

此外，微生物中同样含有溶菌酶[2]。

据来源不同可分为以下四类：微生物溶菌酶、植物溶菌酶、动物溶菌酶和蛋清溶菌酶[3]。

目前绝大多数的溶菌酶是从蛋清中提取而来的，经常采用的提取方法是：亲和层析法、离子交换树脂法、聚丙烯酸沉淀法和直接结晶法等。

术语和定义溶菌酶酶活性单位：在25℃、pH值为6.2的条件下，于450nm处每分钟引起溶酶小球菌体（Micrococcus Lysodeiktidus）溶液吸光度下降0.001所需要的酶量为一个酶活性单位U。

本定义适合“比浊法”。

溶菌酶效价：溶菌酶在一定浓度范围内，其对数计量与抑菌圈直径（面积）呈对数关系，通过检测其对微生物的抑制作用，比较标准品与样品产生抑菌圈的大小，计算出样品的效价，单位为u。

本定义适合“管碟法”。

技术要求外观和性状要求粉酶为白色或微黄色的结晶或无定形粉末。

技术指标粉酶水分含量：≤12%。

粉酶粒度：420μm孔径分析筛筛上物≤4%。

粉酶炽灼残渣：≤10.0%。

酶活（效价）指标表1 产品成分分析保证值项目指标粉状50型溶菌酶酶活性（效价），≥U/g（u）500000卫生指标符合GB 13078和NY/T 722的有关规定。

试验方法本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682中规定的三级水，所用试液中的标准溶液，在没有注明其他要求时均要求按GB/T 601，GB/T 602制备。

外观的测定取样品少许放入烧杯，下衬白纸进行目测。

粉酶水分的测定按GB/T 6435 规定进行检测。

粉酶粒度的测定按GB/T 5917 规定进行检测。

粉酶炽灼残渣的测定按《中国兽药典》规定进行检测。

卫生指标的测定按饲料卫生标准GB13078和NY/T 722规定的方法进行。

溶菌酶酶活性（效价）的测定溶菌酶微生物测定法系在适宜条件下，通过检测溶菌酶对微生物的抑制作用，计算出溶菌酶活性（效价）的方法。

依据试验设计原理不同，可分为比浊法和琼脂扩散法（即管碟法）。

试剂和溶液溶酶小球菌（Micrococcus Lysodeiktidus）将溶酶小球菌接种于固体培养基上，置37℃培养48小时，用无菌水将菌体洗下，用纱布滤过，滤液离心后，倾去上层清液，用水洗涤菌体数次，然后用少量水悬浮，冰冻干燥，得淡黄色粉末，供测定用，保存一年。

B46天津奥特奇生物制品有限公司企业产品标准Q/12ATQ 013—2019代替Q/12ATQ 013-2017 混合型饲料添加剂酶制剂2019-03-06发布2019-03-07 实施前言本标准根据GB/T 1.1—2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》的要求进行编写。

本标准的附录A、B、C、D、E为规范性附录。

本标准由天津奥特奇生物制品有限公司提出并起草。

本标准主要起草人：徐素惠、张旭。

本标准所代替标准的历次版本发布情况为：——Q/12ATQ 013-2017。

混合型饲料添加剂酶制剂1 范围本标准规定了混合型饲料添加剂酶制剂的要求、试验方法、检验规则、标签、包装、运输、贮存。

本标准适用于以淀粉酶（产自枯草芽孢杆菌）、β -葡聚糖酶（产自长柄木霉）、纤维素酶（产自长柄木霉）、蛋白酶（产自米曲霉）为主要原料，以轻质碳酸钙、硫酸钙、二氧化硅和啤酒酵母粉为载体经混合、搅拌而成的混合型饲料添加剂酶制剂。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。

凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 5917.1—2008 饲料粉碎粒度测定两层筛筛分法GB/T 6435—2014 饲料中水分的测定GB 10648 饲料标签GB/T 13079—2006 饲料中总砷的测定GB/T 13080—2004 饲料中铅的测定原子吸收光谱法GB/T 14699.1—2005 饲料采样JJF 1070—2005 定量包装商品净含量计量检验规则国家质量监督检验检疫总局令（2005）第75号《定量包装商品计量监督管理办法》3 要求3.1 感官色泽均匀，无发霉变质、无结块、无异味、无异嗅。

3.2 加工质量指标3.2.1 粉碎粒度产品应全部通过2 mm分析筛，0.6 mm筛上物应不大于10%。

3.2.2 混合均匀度产品应混合均匀，其混合均匀度之变异系数（CV）应不大于5%。

食品安全国家标准 食品添加剂 溶菌酶1 范围本标准适用于从鸡蛋清中提取溶菌酶，然后经提取、精制等工艺制得的食品添加剂溶菌酶。

2 技术要求 2.1 感官要求感官要求应符合表1的规定。

表1 感官要求项 目要 求检验方法固体液体色泽 白色至淡黄色 浅黄色至深褐色 将适量试样均匀置于烧杯或白瓷盘内，于自然光线下观察其色泽和状态。

状态粉末液体2.2 理化指标理化指标应符合表2的规定。

表2 理化指标2.3 微生物指标微生物指标应符合表3的规定。

表3 微生物指标项 目指 标 检验方法菌落总数/[CFU /g （mL ）] ≤ 50000 GB 4789.2 霉菌和酵母菌/[CFU /g （mL ）] ≤ 100 GB 4789.15 大肠杆菌/[MPN/g （mL ）] ＜ 3.0 SN/T 0738 沙门氏菌/25g （mL ） 不得检出 GB 4789.4金黄色葡萄球菌/25g （mL ）不得检出GB 4789.10定性检验附 录 A项 目指 标 检验方法固体液体酶活力/[u/mg （mL ）] ≥ 符合声称附录A 中A.3 水分，w /% ≤ 6 — GB 5009.3 灰分，w /% ≤ 1.50.3 GB 5009.4 pH3.0～7.0 附录A 中A.4 铅（Pb ）/（mg/kg ） ≤ 2.0 GB 5009.12 总砷（以As 计）/（mg/kg ）≤1.0 GB 5009.11检验方法A.1 一般规定本标准除另有规定外，所用试剂的纯度应在分析纯以上，所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品，应按GB/T 601、GB/T 602、GB/T 603的规定制备，实验用水应符合GB/T 6682中三级水的规定。

试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。

A.2 鉴别试验0.01%醋酸盐缓冲溶液（pH 5.4）于279 nm～281 nm处有最大吸收。

A.3 酶活力的测定A.3.1 方法原理溶菌酶可水解细菌的细胞壁，造成溶壁微球菌的溶解而引起溶液吸光度值的降低。