不同年龄实验大鼠肾脏缺血再灌注的比较研究

1. 建立肾缺血模型，观察肾缺血对肾脏功能的影响。

2. 探讨肾缺血对肾脏组织形态学、病理生理学及生物化学指标的影响。

3. 为临床肾缺血疾病的防治提供理论依据。

二、实验材料1. 实验动物：清洁级雄性SD大鼠，体重200-250g，共40只。

2. 实验仪器：手术显微镜、超声刀、手术器械、生理盐水、肝素、0.9%氯化钠溶液等。

3. 实验试剂：苏木素-伊红（HE）染色试剂盒、Masson染色试剂盒、肾小球滤过率（GFR）测定试剂盒、血清肌酐（Scr）测定试剂盒、尿素氮（BUN）测定试剂盒等。

三、实验方法1. 实验分组：将40只SD大鼠随机分为4组，每组10只，分别为正常组、肾缺血模型组、缺血预处理组、肾缺血+预处理组。

2. 建立肾缺血模型：采用腹主动脉夹闭法建立肾缺血模型。

麻醉大鼠后，无菌条件下进行手术，暴露腹主动脉，使用无创动脉夹闭腹主动脉，持续夹闭时间为45分钟。

3. 缺血预处理：在建立肾缺血模型前30分钟，给予大鼠预先给予一定浓度的肝素和生理盐水溶液，以降低肾缺血引起的肾脏损伤。

4. 观察指标：（1）肾小球滤过率（GFR）：通过测定大鼠尿量、血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）浓度，计算GFR。

（2）肾脏组织形态学：采用HE染色和Masson染色观察肾脏组织形态学变化。

（3）肾脏生物化学指标：检测血清Scr和BUN浓度。

5. 数据处理：采用SPSS 22.0软件进行统计学分析，数据以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用单因素方差分析（ANOVA）和LSD检验。

1. 肾小球滤过率（GFR）：与正常组相比，肾缺血模型组GFR显著降低（P<0.05）；缺血预处理组和肾缺血+预处理组GFR与正常组相比无显著差异（P>0.05）。

2. 肾脏组织形态学：HE染色结果显示，肾缺血模型组肾脏组织出现明显的水肿、炎症细胞浸润和肾小球纤维化等病变；缺血预处理组和肾缺血+预处理组肾脏组织形态学变化与正常组相似。

大鼠急性缺血性肾功能衰竭肾脏/体重指数的变化【摘要】目的：本实验探讨建立大鼠肾脏缺血/再灌注损伤(ir i)模型后不同时段肾脏/体重指数变化及肾功能的改变，并探讨其相关性，以了解肾脏/体重指数在肾脏ir i过程中的变化及与肾脏病变严重程度的关系。

方法：60只健康雄性wistar大鼠随机分为假手术组和手术组两组，大鼠体重有可比性。

每组按时间段又各分为6、12、24、36、72小时组。

手术组建立大鼠肾脏ir i模型。

所有大鼠按分组于术前及术后不同时段采血，称重后处死大鼠并留取肾脏组织，肾组织亦称重。

计算肾脏/体重指数及bun、scr等结果，并作相关性分析。

结果：（1）、手术组术后6小时血清bun、scr、血钾已经显著升高，至术后48小时达高峰，从术后72小时开始回落（p<0.05），但仍高于手术6小时组（p<0.05）；（2）、手术12h、24h、48h组肾脏/体重指数均高于手术6小时组，并随时间延长逐渐增高，且各时段间差异有统计学意义（p<0.05）；手术72小时组肾脏/体重指数低于手术24h、48h组，但仍高于手术12小时组，差异有统计学意义（p<0.05）。

结论：在ir i模型手术后肾脏/体重指数、血清bun、scr、血钾均有不同程度的升高，高峰期均在再灌注后48小时，提示该模型中肾功能损害最严重是在ir i手术后48小时，而肾脏/体重指数变化能一定程度上反映肾脏功能损害程度。

【中图分类号】r 692.5 【文献标识码】a 【文章编号】1004- 7484（2012）05- 0131- 01回落，但仍高于手术12小时组。

以上提示肾脏在手术后显著增大，且随肾功能损害的加剧而增大，增大的原因考虑与肾脏急性缺血时，肾小管上皮细胞变性、坏死，肾小管基底膜断裂，导致肾小管内液反渗入间质造成肾间质水肿，肾脏增大，即反漏学说有关。

但是肾脏/体重指数于手术后12小时才开始升高，推测在早期肾损害出现时，肾小管损伤较轻，肾间质水肿程度尚未明显，因而肾脏/体重指数于手术后6小时仍无明显增高。

大鼠肾缺血再灌注损伤程序性坏死的形态学观察李郭锦;张路;穆长征;宋小峰;郭敏【摘要】目的观察大鼠肾缺血再灌注损伤程序性坏死的形态学变化.方法应用免疫印迹技术、免疫组织化学染色技术以及光学和电子显微镜技术对缺血60min再灌注24h的大鼠肾脏进行观察和分析.结果免疫印迹分析结果表明,与假手术组比较,大鼠肾缺血再灌注后受体相互作用蛋白激酶3(RIPK3)和肿瘤坏死因子受体α(TNFRα]表达增强.缺血再灌注损伤的肾组织内出现RIPK3免疫组化染色阳性细胞,主要分布于肾小管上皮.光镜下皮质和髓质外带的肾小管出现了程序性坏死,表现为细胞肿胀,着色苍白,细胞核固缩.电镜下程序性坏死表现为细胞质肿胀,细胞器肿胀、破碎,含有一个凋亡样细胞核.结论大鼠肾脏缺血60min再灌注24h后部分肾小管细胞发生了程序性坏死,肾组织中RIPK3表达增强.【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2013(039)010【总页数】4页(P792-795)【关键词】肾;再灌注损伤;程序性坏死;大鼠【作者】李郭锦;张路;穆长征;宋小峰;郭敏【作者单位】121001辽宁锦州辽宁医学院附属第三医院影像科;124010 辽宁盘锦盘锦市职业技术学院临床护理系;121001 辽宁锦州辽宁医学院组织胚胎学教研室;121001 辽宁锦州辽宁医学院组织胚胎学教研室;121001 辽宁锦州辽宁医学院组织胚胎学教研室【正文语种】中文【中图分类】R320.2345肾缺血再灌注损伤(renal ischemia-reperfusion injury，RIRI)是诱发急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)的主要原因，如肾移植、肾血管手术后都可发生RIRI，从而诱发AKI[1]。

大鼠常用于建立RIRI引起的AKI动物模型，虽然有关大鼠RIRI 引起肾脏细胞损伤的报道很多，但多集中在细胞坏死和细胞凋亡等[2-3]。

近年来随着对细胞死亡机制研究的深入，出现了从生物化学或分子生物学变化角度分类和命名的新的细胞死亡方式。