植物抗寒性鉴定
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植物抗寒生理的研究进展
植物抗寒生理的研究进展
植物抗寒生理的研究进展主要涉及以下几个方面：
1. 低温适应机制：植物在低温环境下生存和生长的能力是至关重要的。
研究已经发现，植物通过一系列的生理生化机制来适应低温环境，包括产生冷反应基因和相关的基因，以及这些基因之间的相互作用。
2. 植物激素在抗寒中的作用：植物激素在植物抗寒中起着重要的作用。
例如，脱落酸（ABA）可以诱导植物产生抗寒性，而细胞分裂素则可以保护植物免受低温的伤害。
此外，一些植物激素还可以调节植物对低温的响应，如钙调蛋白激酶和MAPK等。
3. 抗寒基因的鉴定和功能研究：随着生物技术的发展，越来越多的抗寒基因被鉴定和研究。
这些基因包括编码保护酶类（如SOD、POD、CAT等）的基因、调节ABA合成和信号转导的基因等。
对这些基因的研究将有助于我们更深入地了解植物抗寒的分子机制。
4. 抗寒锻炼和适应性生理变化：植物在经历低温锻炼后，可以产生一系列适应性生理变化，如增加膜的稳定性、提高保护酶的活性等。
这些变化有助于植物在低温环境下生存和生长。
5. 抗寒育种：通过选择具有抗寒特性的品种，培育出抗寒能力更强的植物，是植物抗寒研究的一个重要应用。
通过结合传统育种方法和现代生物技术，可以培育出既具有优良农艺性状，又具有较强抗寒能力的植物新品种。
总的来说，植物抗寒生理的研究进展在多个领域都有所涉及。
未
来，随着生物技术的不断发展，我们期待在植物抗寒生理的研究中取得更多的突破和进展。
园林植物抗寒性鉴定指标的分析
主要 因素之 一 。
寒性 的高 低 。 比 值 大 时 ， 物 代 谢 缓 慢 ， 寒 性 植 抗 强； 比值 小时 ， 物代 谢 旺盛 ， 寒 性弱 。 植 抗 张 志法 等 ］ 冬 季 自然 低 温下 对金 叶莸 和 金 在 山绣线 菊扦 插 苗根 部 组 织 含 水 量 测 定 发 现 ： 叶 金 莸 的束 缚水 含量 、 束缚 水 ／ 自由水 的 比值都 高 于金 山绣线 菊 ， 这说 明金 叶莸 比金 山绣 线 菊 具 有 更 强
林 植 物 抗 寒 性 测 定 的 主要 方 法 ， 包括 形 态 学观 测 、 水 量 测 定 、 生 质 膜 透性 测 定 、 护 酶 系统 测 定 和 渗 透 调 含 原 保
节物质测定 。 关键词 ： 园林 植 物 ； 寒性 ； 定 指 标 抗 鉴
中 图 分 类 号 ：６ ８ ￥ ８
３ １ 电导 率 ．
王永 格等 ｌ通 过对 小果 卫矛 越冬 形态 学 的观 １ 测 及与 大 叶 黄杨 、 海 道 黄 杨 、 东 卫 矛 、 叶黄 北 胶 小 杨 和 女 贞 相 比较 ， 现 小 果 卫 矛 叶 片 抗 寒 性 高 于 发 大 叶黄 杨 和 女 贞 ， 条 抗 寒 性 高 于 女 贞 。金 华 枝 等 ｛ 通 过 对 北 京 引 种 栽 植 的 ７种 常 绿 阔 叶 植 物 的 越 冬 形 态 学 观 测 发 现 ： 室 中 盆 栽 的 植 物 表 现 良 温
温胁 迫下 ， 着处 理 温度 的下 降 已休 眠 的紫 叶 白 随
收 稿 日期 ： ０ 卜０ — ３ ２ １ ９１
第 一作 者 简 介 ： 兆 英 （ ９ ５） 女 ， 北 省 青 县 人 ， 士 ， 张 １ ７ 一， 河 硕 讲 师 ， 事 同 林 植 栽 培 及 种 子 生 理 研 究 。 Ｅ ｍａｌ ｚ ｙ ｌ ｌ 从 — ｉ ｚ Ｏ １ ＠ ：
寒性 的高 低 。 比 值 大 时 ， 物 代 谢 缓 慢 ， 寒 性 植 抗 强； 比值 小时 ， 物代 谢 旺盛 ， 寒 性弱 。 植 抗 张 志法 等 ］ 冬 季 自然 低 温下 对金 叶莸 和 金 在 山绣线 菊扦 插 苗根 部 组 织 含 水 量 测 定 发 现 ： 叶 金 莸 的束 缚水 含量 、 束缚 水 ／ 自由水 的 比值都 高 于金 山绣线 菊 ， 这说 明金 叶莸 比金 山绣 线 菊 具 有 更 强
林 植 物 抗 寒 性 测 定 的 主要 方 法 ， 包括 形 态 学观 测 、 水 量 测 定 、 生 质 膜 透性 测 定 、 护 酶 系统 测 定 和 渗 透 调 含 原 保
节物质测定 。 关键词 ： 园林 植 物 ； 寒性 ； 定 指 标 抗 鉴
中 图 分 类 号 ：６ ８ ￥ ８
３ １ 电导 率 ．
王永 格等 ｌ通 过对 小果 卫矛 越冬 形态 学 的观 １ 测 及与 大 叶 黄杨 、 海 道 黄 杨 、 东 卫 矛 、 叶黄 北 胶 小 杨 和 女 贞 相 比较 ， 现 小 果 卫 矛 叶 片 抗 寒 性 高 于 发 大 叶黄 杨 和 女 贞 ， 条 抗 寒 性 高 于 女 贞 。金 华 枝 等 ｛ 通 过 对 北 京 引 种 栽 植 的 ７种 常 绿 阔 叶 植 物 的 越 冬 形 态 学 观 测 发 现 ： 室 中 盆 栽 的 植 物 表 现 良 温
温胁 迫下 ， 着处 理 温度 的下 降 已休 眠 的紫 叶 白 随
收 稿 日期 ： ０ 卜０ — ３ ２ １ ９１
第 一作 者 简 介 ： 兆 英 （ ９ ５） 女 ， 北 省 青 县 人 ， 士 ， 张 １ ７ 一， 河 硕 讲 师 ， 事 同 林 植 栽 培 及 种 子 生 理 研 究 。 Ｅ ｍａｌ ｚ ｙ ｌ ｌ 从 — ｉ ｚ Ｏ １ ＠ ：
植物抗寒指标的种类及测试原理
对 氨基 苯磺 酸 反 应 生 成 重 氮 化 合 物 与 ａ荼 胺 反 应 生 成 一
旋 标 记 Ｅ Ｒ波 谱 法 测 定 。 Ｓ 与植 物抗 寒 性呈 正 相关 。
１ ３ 膜 脂 过 氧 化 指 标 ．
法 测定 。Ｈ 在 Ｃ Ｔ 的作 用 下 ， 出 ： Ａ 放 ， 放 （ 量 与 其 ］ ？
（ Ｔ 的活性 成正 比， 出的 可 用氧 电极 定量测 定 。 Ａ 放 与植 物 抗 寒 性 呈 正 相 关 。 １ ２ ３ 过 氧 化 物 酶 Ｐ ）活性 ．． 过氧化物酶广泛存在于植物体 中． 呼吸作 用、 与 光
织 受 害 程 度 呈 正 相 关 。 为 了 消 除 实 验 中 多 种 误差 的
影 响便 于各 研 究结 果 之 间 的 相互 比较 ， 用 相 对 值 采
表 示 。用 相 对 电 导 率 作 为 细 胞 膜 透 性 的 重 要 指 标 ， 现 已被 多 数 实 验 证 实 ， 将 由 相 对 电 导 率 值 用 Ｌ — 并 ｏ ｇｓ ｃ 程 拟 合 的 半 致 死 温 度 作 为 评 价 抗 寒 性 的 主 ｉｉ方 ｔ
Ｈ 和 （ ０ ）。其 活 性 大 小 可 用 被 分 解 ｌ。 的 量 来 表 ＿Ｏ ｛
示 ． 可 用分 解 产 生 的 Ｏ 也 城 来 丧 示 。 。 。
一
定量的 （ 经过氧化后 ． 剩余的
可用碘量
并 制 成 甲酯 后 ， 可进 行 气 相 色谱 分 析 】 即 。也 可 用 自
与 植 物抗 寒 性 呈 负 相 关 。
１ ２ 维 持 膜 稳 定 指 标 ．
植 物 遭 受 低 温 胁 迫 的 主 要 特 征 是 活 性 氧 代 谢 的 失 调 。细 胞 内 活 性 氧 的 大 量 积 累 而 使 细 胞 受 到 了 氧 胁 迫 ， 细 胞 内 活性 氧 的产 生 与 清 除平 衡 遭 到 破 坏 ， 而 使 从
旋 标 记 Ｅ Ｒ波 谱 法 测 定 。 Ｓ 与植 物抗 寒 性呈 正 相关 。
１ ３ 膜 脂 过 氧 化 指 标 ．
法 测定 。Ｈ 在 Ｃ Ｔ 的作 用 下 ， 出 ： Ａ 放 ， 放 （ 量 与 其 ］ ？
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织 受 害 程 度 呈 正 相 关 。 为 了 消 除 实 验 中 多 种 误差 的
影 响便 于各 研 究结 果 之 间 的 相互 比较 ， 用 相 对 值 采
表 示 。用 相 对 电 导 率 作 为 细 胞 膜 透 性 的 重 要 指 标 ， 现 已被 多 数 实 验 证 实 ， 将 由 相 对 电 导 率 值 用 Ｌ — 并 ｏ ｇｓ ｃ 程 拟 合 的 半 致 死 温 度 作 为 评 价 抗 寒 性 的 主 ｉｉ方 ｔ
Ｈ 和 （ ０ ）。其 活 性 大 小 可 用 被 分 解 ｌ。 的 量 来 表 ＿Ｏ ｛
示 ． 可 用分 解 产 生 的 Ｏ 也 城 来 丧 示 。 。 。
一
定量的 （ 经过氧化后 ． 剩余的
可用碘量
并 制 成 甲酯 后 ， 可进 行 气 相 色谱 分 析 】 即 。也 可 用 自
与 植 物抗 寒 性 呈 负 相 关 。
１ ２ 维 持 膜 稳 定 指 标 ．
植 物 遭 受 低 温 胁 迫 的 主 要 特 征 是 活 性 氧 代 谢 的 失 调 。细 胞 内 活 性 氧 的 大 量 积 累 而 使 细 胞 受 到 了 氧 胁 迫 ， 细 胞 内 活性 氧 的产 生 与 清 除平 衡 遭 到 破 坏 ， 而 使 从
南京地区5个常绿阔叶树种的抗寒性评价
由于南京地区气候条件特殊，集中位于中国东部，也在华中诸省的北
季风中，因此当季节变化的时候，抗寒性尤为重要。
因此，在本文中，我们就南京地区5种常绿阔叶树的抗寒性进行评价，了解它们与其余
特征的综合状况，以便更好地了解其特征抗寒性，并为选择恰当的植
物服务。
首先，南京地区常绿阔叶树5种抗寒性状况如下：洋桂木，能够耐受
较低的温度，它的树干和枝叶的抗寒力较强；红碗榆，它能耐受低温，但其单株的抗寒能力较差；榉树，其耐寒能力一般，但它的树干和枝
叶的抗寒力强；樱桃树，其耐寒能力一般，但它的树干的抗寒力较强；水杉，它具有较高的耐寒能力，能够耐受较低的温度。
其次，这5种常绿阔叶树在抗寒性方面，在不同季节有着不同的表现，在夏季，由于高温和丰富的阳光照射，它们的抗寒力较低；而在冬季，随着天气寒冷，它们的抗寒力有所提升，尤其是水杉，其耐寒能力最高，能够耐受更低的温度。
最后，在抗寒性整体评价上，洋桂木和水杉抗寒能力最强，红碗榆的
抗寒能力最弱，榉树、樱桃树的抗寒能力较差，适用于南京地区较温
和的夏区气候。
另外，洋桂木和水杉等也适用于北季风地区，其耐寒
能力较强，可以有效抵抗季节变化时带来的低温天气。
综上所述，在南京地区，5种常绿阔叶树种抗寒性的评价结果表明：洋桂木具有较强的抗寒能力，适合华中地区；水杉耐寒能力最高，适用
于南京地区较低的温度区；红碗榆抗寒能力较低，榉树和樱桃树的抗
寒能力一般，且均适用于南京地区温和的夏季气候。
利用电导法鉴定几种野生花卉的抗寒性和耐热性
利用电导法鉴定几种野生花卉的抗寒性和耐热性李素华;姬金凤【摘要】为了对开发弄利用野生花卉种质资源提供参考,对10种观赏价值较高的野生花卉的电导率进行测定,并配合Logistic方程计算出半致死温度(LT50)以判断其抗寒耐热性.结果表明:处理温度与叶片细胞伤害率呈S型曲线,通过显著性检验,Logistic方程拟合度较高;10种野生花卉的抗寒性强弱依次为天蓝苜蓿＞鼠麴草＞败酱草＞老鹳草＞夏至草＞婆婆纳＞点地梅＞蛇莓＞紫花苜蓿＞通泉草,耐热性从强到弱排序为败酱草＞紫花苜蓿＞蛇莓＞鼠麴草＞天蓝苜蓿＞通泉草＞夏至＞老鹳草＞婆婆纳＞点地梅.%In order to provide a reference for exploitation and utilization of wild flowers,the electrical conductivity of 10 species of high ornamental value of evergreen wild flowers was determined, and the Logistic equation was adopted to determine the semi-lethal temperature for evaluating the cold and heat tolerance. The results showed that the leaf cells showed a sigmoid response to the temperatures. According to significance testing,the Logistic equation has resulted in high fit degree. The cold tolerance of the 10 species decreased in the order of Medicago lupulina , Gnaphaliurnoffine, Patrinia villosa , Geranium zuilfordii , Lagopsis subina .Veronica persica , Androsace umbellate , Indian mockstrawberry, Medicago sativa , Mazus japonicus , and the order of heat tolerance was Patrinia villosa > Medicago sativa > Indian mockstrawberry > Gnaphalium of fine > Medicago lupulina > Mazus japonicus > Horehound>Geranium wilfordii>Veronica persica> Androsace umbellate.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2012(040)011【总页数】3页(P182-184)【关键词】野生花卉;半致死温度;抗寒性;耐热性;电导法【作者】李素华;姬金凤【作者单位】宿迁学院园林园艺教研室,江苏宿迁 223800;宿迁学院园林园艺教研室,江苏宿迁 223800【正文语种】中文【中图分类】S58野生花卉具有分布广泛、适应性强、群体观赏效果佳等特点，合理开发利用野生花卉资源，是丰富花卉市场、美化人居环境的重要手段［1］。
植物的抗性(低温、高温)评价测定实验方法
植物的抗性（低温、高温）评价测定实验方法（张平贤收集）实验一植物体内游离脯氨酸含量的测定一、目的在逆境条件下（旱、热、冷、冻），植物体内脯氨酸的含量显著增加，植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植物的抗逆性，抗旱性强的品种积累的脯氨酸多。
因此测定脯氨酸含量可以作为抗旱育种的生理指标。
另外，由于脯氨酸亲水性极强，能稳定原生质胶体及组织内的代谢过程，因而能降低冰点，有防止细胞脱水的作用。
在低温条件下，植物组织中脯氨酸增加，可提高植物的抗寒性，因此，亦可作为抗寒育种的生理指标。
二、原理磺基水杨酸对脯氨酸有特定反应，当用磺基水杨酸提取植物样品时，脯氨酸便游离于磺基水杨酸溶液中。
然后用酸性茚三酮加热处理后，茚三酮与脯氨酸反应，生成稳定的红色化合物，再用甲苯处理，则色素全部转移至甲苯中，色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。
在520nm波长下测定吸光度，即可从标准曲线上查出脯氨酸的含量。
三、材料、仪器及试剂1. 材料：植物叶片。
2. 仪器：分光光度计；电子分析天平；离心机；小烧杯；普通试管；移液管；注射器；恒温水浴锅；漏斗；漏斗架；滤纸；剪刀；洗耳球。
3 .试剂及配制：2.5﹪酸性茚三酮溶液配制：将1.25g茚三酮溶于30ml冰醋酸和20ml 6mol·L －1磷酸中，搅拌加热（70℃）溶解，贮于4℃冰箱中,2-3日有效。
3％磺基水杨酸配配制：3g磺基水杨酸加蒸馏水溶解后定容至100ml。
10μg·ml-1脯氨酸标准母液配制：精确称取20mg脯氨酸，倒入小烧杯内，用少量蒸馏水溶解，再倒入200ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度（为100μg·ml －1脯氨酸母液），再吸取该溶液10ml, 加蒸馏水稀释定容至100ml, 即为10μg·ml-1脯氨酸标准液。
100μg·ml－1脯氨酸母液:称10mg脯氨酸溶于少量的乙醇中，用蒸馏水定容至100ml冰醋酸；甲苯。
四、实验步骤1、脯氨酸标准曲线的制作1.1取6支试管，编号，按下表配制每管含量为0～12μg的脯氨酸标准液。
不同植物种抗寒性研究
不同植物种抗寒性测定——过氧化氢酶（CAT）活性的测定一、实验目的：1．学习并掌握实验室间接鉴定植物抗寒性的方法和步骤。
2．测定出三种植物的抗寒性能力强弱顺序。
3.通过本实验的设计与实施，增加我们对植物抗寒性的了解，有利于我们对植物的种植与保护，也能使我们掌握基本的实验操作技术，培养探究性学习的能力，通过小组合作学习加强团队精神二、实验原理：低温胁迫下，细胞内易产生H2O2破坏膜系统的稳定，而过氧化氢酶（CAT）能把H2O2分解为H2O和O2，从而清除H2O2维护膜的稳定性。
研究表明，抗寒性强的品种有较高的过氧化氢酶活性，且随温度下降，以抗寒性强的品种下降幅度小，与抗寒性呈显著性相关。
CAT酶活性大小可用一定时间内分解的H2O2量来表示。
在反应系统中加入一定量（反应过量）的H2O2溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的H2O2，即可求出被CAT分解的H2O2量：三、材料及仪器：1．材料及处理：九里香、小叶罗汉松、圆柏将采回的枝条剪成40cm左右的长度，用自来水冲洗数遍（洗掉泥土、灰尘、虫卵），再用蒸馏水冲洗三次，然后用吸水纸吸干水分，最后将枝条末端进行蜡封。
将每个品种蜡封后的枝条分成相等的3份，在 0℃，6℃，12℃的恒温培养箱中各放入一份培养5天，备用。
2．试剂、药品：10%H2SO4 ，0.2mol/L 磷酸缓冲液（pH＝7.8），KMnO4 （AR），新煮沸冷却蒸馏水，0.1mol/L草酸，30%H2O2溶液，凡士林3．仪器：25ml容量瓶，研钵，50ml三角瓶4个，酸式滴定管，1000ml 锥形瓶，离心管，移液管（0.5ml和5ml），滴管，剪刀4．设备：高速台式离心机，恒温水浴锅，天平，玻璃棒，石英砂，恒温培养箱四、实验步骤：实验前的准备阶段，1．试剂配制10%H2SO4；0.2mol/L 磷酸缓冲液（pH＝7.8）；0.1mol/L 高锰酸钾标准液：称取KMnO4（AR）3.160g，用新煮沸冷却蒸馏水配制成1000ml，用0.1mol/L草酸标定；0.1mol/L H2O2：取30%H2O2溶液5.68ml，稀释至1000ml，用标准0.1mol/L KMnO4溶液在酸性条件下标定。
用电导法配合Logistic方程鉴定茶树的抗寒性
［￣ｓｃ 程是 一个典 型的 … 曲线方程 ．方程 为 ＇ ｘ ｉｉ方 ｇｔ Ｓ’ １ ＝
ｋ
，
ｂ为常数 。 在数学上 ， 拐点 — 时的 ｘ值， 即
ｆ ＿ ｚ Ｄ
供试材料取 自四川农 业大学教学实习茶 同，品种 有川茶
１ ｅ” ＋ａ
群体种 、 阳特早 、 平 乌牛早和 云南大叶种等 ４个 品种 ， ２ ０ 于 ０６
年 ５月下旬分别取各 品种 的一芽 三叶春梢和成熟 叶片。
１ 实 验方 法 － ２ １ ＿ 低 温处 理 ＿１ ２
为半致死温度（ ｎ 。因此 ， 者采用 电导法配合 Ｌ ｇ ｔ 方 Ｔ ） 俩 笔 ｏｉｉ ｓｃ
程来计 算不同茶树 品种 叶片和新 梢 的半 致ｌ 温度 （Ｔ 以该 死 Ｌ ，
随着低温加剧茶树叶片及新梢的相对电导率增加电解质渗透率表现出有规律的变化呈现慢快慢的变化规律即呈用直接观察的方法和测定叶片相对电导率的方法比较茶树抗寒性强弱顺序的结果吻合可见用测定叶片相对电导率的方法来反映茶树的抗寒性较为客观真实
维普资讯
实 验 方 法
用 电导法配 合 Ｌ ｇｓ ｃ方程 鉴定茶树 的抗 寒性 ｏｉｉ ｔ
低温处理 ，处理 温度分别是 ： ￣ 一 ℃ 、 １ ℃ 、２ ￣ 一 ５ ， ０Ｃ、８ 一 ５ 一 ０Ｃ、２ ℃
蒸馏水， ６ 后测定浸 液电导率 ， 浸泡 ｈ 其余方法 与 步骤同 １． ．。 ２ ２
成 熟 叶 片 组 织进 行 了抗 寒 性 测 定 。 并 结 合 Ｌ ｇ ｔ 程 分 别 计 算 了各 茶 树 品 种 ｏ ｉｉ ｓｃ方 的 低 温 半 致 死 温度 （ Ｔ （） 列 出了供 试 品种 抗 寒性 的相 对 强 弱 顺 序 为 ： 阳 特 Ｌ ５） ， 平
四种石蒜科植物的抗寒性比较
四种石蒜科植物的抗寒性比较概述石蒜科植物是一类耐寒性比较强的植物，不仅仅分布在寒冷地区，同时在温带及热带的高海拔地区也有其身影。
在不同的环境条件下，不同种类的石蒜科植物的抗寒性也有所不同。
本文将从四个方面分别介绍石蒜科植物的抗寒性能力以及其所处的环境条件。
一、多叶葱多叶葱，也称为多叶韭，是石蒜科的一种植物，其根茎可以作为食材，有着清香的味道。
多叶葱生长在地势高且气温低的地方，非常耐冷，寒冷的环境能够刺激多叶葱发芽和生长，因此在寒冷的冬季，多叶葱的生长速度很快，并长得十分茂盛。
同时，多叶葱还能够耐受低温冻结和高盐胁迫的影响。
二、高山韭高山韭是一种高山植物，主要生长在海拔3000米以上的地方，其形态特征是花小、全株植被密集，冷却方式多样，高山韭的抗寒能力很强，可以在寒冷的高山环境中生长和繁殖。
在生长过程中，高山韭经常会遭受低温冻结的威胁，但仍能够经受住霜冻的影响。
三、贵州韭贵州韭的科学名称为Allium macrostemon Bunge，属于石蒜科植物，是中国特有的植物。
在贵州省的一些地方，贵州韭作为地方特产，深受人们的喜爱。
贵州韭主要生长在贵州省的高山、林下和河谷，海拔高度在1000-3000米之间，中低温环境是贵州韭良好发展的保障。
同时，该植物还能够抵抗寒冷、旱灾、昆虫危害等多种非良好生长的因素，适应性比较强。
四、雅韭雅韭又称为野韭，是一种高山植物，主要分布在我国西藏、四川、云南等高山地区，海拔高度在2000-4000米之间。
雅韭具有相当的抗寒能力和适应性，在生长过程中，不仅能够忍受较长时间的地上低温，同时也能够经受住寒冷、地势高、很少的水和营养、弱光等艰苦生长条件的挑战。
结论石蒜科植物是一类适应性比较强的植物，在寒冷的高原、山区等环境下，石蒜科植物的生长和繁殖都具有良好的抗寒能力，而且不同种类的石蒜科植物的生长环境条件也有所不同，研究不同类型的石蒜科植物的生态特征、适应性和抗寒性能力，对于深入了解高寒、高山等特殊生态环境下的植物生态学规律，进而制定科学的保护和利用措施，具有重要的意义。
自然越冬期姜花属植物生理指标变化及抗寒性评价
自然越冬期姜花属植物生理指标变化及抗寒性评价
姜花属（Hedychium）是热带和亚热带地区常见的植物属，具有鲜艳的花朵和浓郁的香味。
对于姜花属植物在自然越冬期的生理指标变化和抗寒性评价，以下是一般情况：
1. 落叶并进入休眠：在寒冷的季节，姜花属植物通常会落叶，并进入休眠状态。
这是一种适应恶劣环境的生存策略。
叶子的脱落可以减少水分蒸发，同时能够节省能量供给。
2. 生理指标变化：在自然越冬期，姜花属植物的生理指标会发生一系列变化以适应寒冷条件。
其中一些常见的变化包括：
- 内源激素变化：植物的内源激素水平可能发生变化，如脱落叶子的过程中，植物会减少激素生产，进而抑制新的叶片生长。
- 抗氧化物质积累：植物在低温条件下可能会增加抗氧化物质的积累，以应对冷害的风险。
- 内部冻结调节：植物会积极调节细胞液中的溶质浓度，以降低细胞冻结的风险。
这些溶质可以降低冰的结晶点，从而防止细胞内部冻结。
3. 抗寒性评价：对于姜花属植物的抗寒性评价，通常会涉及对以下方面的研究： - 耐寒温度：通过测定植物在不同温度下的存活率或生长表现，评估其耐受寒冷的能力。
- 冻害指标：测量叶片或细胞中的冻害程度，例如电导率、叶绿素含量、细胞膜透性等，以定量评估抗寒性。
- 抗氧化系统：研究抗氧化系统的相关酶活性和抗氧化物质的积累情况，以了解植物对低温胁迫的响应。
这些评价方法和指标的具体应用可能因研究机构、环境条件和研究目的的不同而有所不同。
为了获得更准确和可靠的抗寒性评价结果，建议参考相关的地方性研究和科学出版物，并与相关领域的专家进行进一步讨论。
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5H2O2＋2KMnO4＋4H2SO4 → 5O2＋2KHSO4＋8H2O＋2MnSO4
1．试剂配制 10%H2SO4；0.2mol/L 磷酸缓冲液（pH＝7.8）； 0.1mol/L 高锰酸钾标准液：称取KMnO4（AR）3.160g，用新煮沸冷却蒸馏水配制成 1000ml，用 0.1mol/L草酸标定； 0.1mol/L H2O2：取 30%H2O2溶液 5.68ml，稀释至 1000ml，用标准 0.1mol/L KMnO4溶液 在酸性条件下标定。
2．酶液提取 取剪碎的样品 2.5g 加入磷酸缓冲液（pH7.8）少量，研磨成匀浆，转移到 25ml 容量瓶 中，将研钵冲洗干净，冲洗液转至容量瓶中，并用同一缓冲液定容，4000×g 离心 10min， 上清液为酶粗提液。
3．酶液滴定
取 50ml三角瓶 4 个（两个测定，两个对照），测定加入酶液 2.5ml，对照为煮死酶液 2.5ml；
酶活性（mgH2O2/g F W）＝
a ×1.7 W
A－对照KMnO4滴定ml数； B－酶反应后KMnO4滴定ml数； V－酶提取液总量（ml）； a－反应所用酶液量（ml）； W－样重（g）。 5．注意事项 所用KMnO4溶液及H2O2溶液使用前要经过标定，0.1mol/L H2O2要新配制。 （四）过氧化物酶（POD）活性测定及同工酶分析 1．过氧化物酶（POD）活性测定
SOD 总活性＝ ( ACK − AE ) ×V
ACK
×
1 2
×W
× Vt
SOD
比活力＝
SOD 总活性 蛋白质浓度
式中：SOD 总活性以每克鲜重酶单位表示；比活力单位以酶单位/mg 蛋白表示；
ACK—照光对照管的光吸收值； AE—样品管的光吸收值； V—样液总体积（cm3）； Vt—测定时样品用量（cm3）； W－样重（g）； 蛋白质浓度单位为：mg 蛋白/g 样重。 研究表明，当遭受低温胁迫时，引起 SOD 活性的下降，下降的百分率与品种抗冷性呈 负相关，故能反应品种间抗冷能力的高低。
再加入 2.5ml 0.1mol/L H2O2，同时计算时间，于 30℃恒温水浴中反应 10min，立即加入
10%H2SO4 2.5ml。然后用 0.1mol/L KMnO4滴定，至出现粉红色（30min内不消失）为终点。 4．结果计算
酶活性用每克鲜重样品在 10min内分解H2O2毫克数表示。
(A − B)×V
生理生化指标主要包括超氧物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD） 活性测定及同工酶分析、丙二醛（MDA）及可溶性糖含量等方法。
三、方法步骤
（一）质膜透性测定－电导法 近年来的研究表明，在低温伤害尤其冷害中，膜系统常常是最先受到伤害的部位，寒害 能使脂膜受损伤，透性加大，细胞内离子（主要是K＋离子）外渗量增多，电导率加大。因 此可以用电导仪测定溶液的电导率，求算电解质渗出率（或称伤害率）。伤害率愈高则愈不 抗寒，反之则愈抗寒。 1．电解质渗出率的测定 取处理和对照样品各 0.5g，放入试管中，加 10ml 去离子水，置 25℃下 10h。用玻璃棒 搅拌均匀，然后用电导仪测电导值分别为 T1 和 C1。再将试管放入沸水中 10min，待其冷却 至 25℃时，测得处理和对照得电导值为 T2 和 C2，按下式计算电解质渗出率和伤害度：
在过氧化物酶催化下，过氧化氢分解成水和原子氧，原子氧能氧化联苯胺产生一种蓝色 的化学物质，该蓝色化合物在波长 580nm 处有一最大吸收峰。蓝色物质的生成速度（dx/dt） 与反应系统中过氧化氢分解速率呈正相关。因此，用分光光度计测出蓝色物质密度的变化（单 位时间内反应液中光密度的变化），可以表示过氧化物酶的活性。
常用差示温度分析来测量深过冷。以 DTA 法测定，一般植物在零下几度即散热结冰， 称为高温散热。经过低温锻炼的抗寒木本植物，在连续降温过程中，可见到有多次散热，第 一次在零下几度，主要是细胞外结冰，最后一次散热可达-20～-45℃的低温以下，叫低温散 热。在低温散热前一霎那的温度，即深过冷温度，用 LTE 温度表示。深过冷低温散热时， 可出现细胞内结冰而使组织死亡。日本京都大学 S.K.Kang（1998）等对苹果、桃、梨、柿 子和葡萄 5 种落叶果树通过温度分析测定了两种散热 HTE 和 LTE，发现柿子与葡萄仅有 LTE，所有树种的低温散热温度与花芽的半致死温度一致。
本实验重点学习实验室间接鉴定果树抗寒性的方法和步骤。
一、试材及用具
1．试材及处理：植物枝条或花朵，将采回的枝条剪成 40cm 左右的长度，用自来水冲 洗数遍（洗掉泥土、灰尘、虫卵），再用蒸馏水冲洗三次，然后用吸水纸吸干水分，最后将 枝条末端进行蜡封。将每个品种蜡封后的枝条分成相等的 6 份，其中一份作为对照，其余每 份作为一个低温处理，放于冰箱中（0℃～4℃）保存备用。每次处理时，各取参试品种的一 份枝条放于超低温冰箱或程控冰箱内进行低温处理，处理温度梯度为：CK（0℃），-20℃， -25℃，-30℃，-35℃，-40℃。降温速度为 4℃/h，达到目的处理温度后维持 12h，然后逐步 升温，升温速度亦为 4℃/h。花朵的处理温度梯度为：CK（0℃），-1℃，-3℃，-5℃，-6℃， -7℃，-8℃。
B—浸泡液的体积（ml）； W—样品鲜重（g）。 2．注意事项 （1）在电导测定中一般应用去离子水，若制备困难可用普通蒸馏水代替，但在测定中 设一空白试管，测定样品时要同时测定其空白电导值，按下式计算相对电导度：
相对电导度（L）＝
S1 − 空白电导值
S
－空白电导值
2
（2）CO2在水中的溶解度较高，在测定电导时要防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入 试管，以免影响结果的稳定性。
实验 16 植物抗寒性鉴定
我国植物种类繁多，分布区域广，在晚秋和早春时期发生的冻害和冷害两种低温危害， 常常给越冬作物和果木造成严重伤害。冻害由 0℃以下低温造成，冷害由 0℃以上低温引起， 冷害对植物的伤害程度，除取决于低温外，还取决于低温维持时间的长短。植物抗寒性的强 弱决定其生长季节，因此蔬菜作物利用抗寒品种，可以将露地栽培提前，提早供应市场；而 选育抗寒性强的果树品种，不仅是寒带果树育种者的主攻方向，而且也是温带甚至热带果树 育种者重要育种目标之一。
植物的抗寒性鉴定可分为田间鉴定和实验室间接鉴定两种方法。 1．田间鉴定 田间自然鉴定就是在冻害发生期（早春及晚秋）对受冻的田间植株一定 器官、组织以一定的标准进行评价、比较，然后根据冻害情况评价抗寒性。 陈学森等（2001）对山东省春季“倒春寒”发生后，受害的核果类果树的花器官的抗寒 性进行了调查，选出了当地花期抗寒性较强的红荷包、红丰等杏品种，证明种间的抗寒力大 小顺序是：桃﹥杏﹥李﹥大樱桃。 赵玉田（1993）对不同生态型玉米的抗寒性进行了田间鉴定，测定的项目包括３个抗冷 指标：
（三）过氧化氢酶（CAT）活性的测定 低温胁迫下，细胞内易产生H2O2破坏膜系统的稳定，而过氧化氢酶（CAT）能把H2O2分 解为H2O和O2，从而清除H2O2维护膜的稳定性。研究表明，抗寒性强的品种有较高的过氧化 氢酶活性，且随温度下降，以抗寒性强的品种下降幅度小，与抗寒性呈显著性相关。
CAT酶活性大小可用一定时间内分解的H2O2量来表示。在反应系统中加入一定量（反应 过量）的H2O2溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的H2O2， 即可求出被CAT分解的H2O2量：
2．仪器 烘箱，发芽箱，培养皿，标牌，电导仪，具塞刻度试管（20ml），恒温水浴锅， 温度计，玻璃棒，天平，研钵，石英砂，高速台式离心机，分光光度计，微量进样器，荧光 灯（4000lx），容量瓶（250ml、25ml），聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳槽，刻度吸管（10ml、 5ml），离种在同一条件下的抗寒性差异。该法直接、简单，可进 行大范围、大群体的评价，但受地域、品种数量的限制，只能比较少数几个同一地段的品种 之间的抗寒力差异，不能对他们的抗寒能力进行量化。
2．实验室间接鉴定 实验室间接鉴定，就是根据作物某些生理生化指标及物理指标间 接推断供试材料的抗寒性。
物理指标 Lyons 和 Raison（1970）证明植物低温发生时，生物膜首先发生膜脂的物相变 化，膜的外形和厚度发生变化，膜上产生龟裂，因而膜的透性增大，电解质大量外渗。抗寒 性强的品种细胞膜透性增大程度轻，抗寒性差的品种与之相反。因此，测量电解质外渗量变 化可以比较植物的抗寒性。在黑穗醋栗、梨、猕猴桃（Shaoli Lu，1990）等许多种果树的不 同器官，如花、枝、叶等都有相似结论。另外，通过电导率值配以 Logistic 方程，可以求出 半致死温度，确定植物的临界致死温度。
相对出苗率（%）（RER）：
RER＝
第一期出苗率 第二期出苗率
× 100％
出苗指数（EI）：
EI＝
∑
[(某日出苗数)× (播后天数)]
出苗总数（30d）
幼苗干物重（SDW），取地上部三叶期 10 株幼苗，烘至恒重。 三个抗冷特性以总指数值（TIV）表示，即占各自等级顺序之和。其值反应了低温下种 子出苗生长和干物质积累能力。
电解质渗出率（%）＝
浸泡液电导率值 煮沸后电导率值
×
100％
伤害度（%）＝
处理电导率值T1－对照电导率值C1 处理煮沸后电导率值T2－对照煮沸后电导率值C2
×100%
2．绝对电解质渗出量的测定 有时为了求得电解质的绝对渗出量，需要用分析纯的 KCl 配成不同浓度的标准液（0.01 －10mmol/L），在 25℃下测定其电导率值，并绘制电导率（μS/cm）—浓度（mg/ml）标准 曲线。由标准曲线查知样品的外渗电导率值相当于 KCl 的浓度，再折算每克材料的绝对外 渗量（mg/g），即 绝对电解质渗出量（mg/g），即 绝对电解质渗出量（mg/g）＝A×B/W 式中，A—根据样品电导率值，从标准曲线中查出的与 KCl 相当浓度（mg/ml）；
（3）温度对溶液电导影响很大，故S1与S2必须在相同温度下测定。 （二）超氧物歧化酶（SOD）测定 超氧物歧化酶（SOD）是一种清除超氧阴离子自由基的酶，普遍存在于植物体内。本实 验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有可氧 化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴 离子自由基，超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲月朁 ，后者在 560nm 处有最 大吸收。而 SOD 可清除超氧阴离子自由基从而抑制了甲月朁 的形成。于是光还原反应后， 反应液蓝色愈深说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。 1．试剂配制 0.05mol/L 磷酸缓冲液（pH7.8） 130mmol/L 甲硫氨酸（Met）溶液：称 1.9399g Met 用磷酸缓冲液定容至 100ml。 750μmol/L 氮蓝四唑（NBT）溶液：称取 0.06133g NBT 用磷酸缓冲液定容至 100ml 避 光保存。 100μmol/L EDTA-Na2溶液：称取 0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至 1000ml。 20μmol/L 核黄素溶液：称取 0.00753g 核黄素定容至 1000ml 避光保存。 2．酶液提取 称取处理和对照样品各 0.5g，加入 5ml 磷酸缓冲液，冰浴研磨提取，然后 15000rpm 离 心 10min，所提上清液为酶液。 3．显色反应 3ml反应液为 0.05mol/L磷酸缓冲液 1.5ml，750umol.L-1NBT溶液、130mmol/L甲硫氨酸 （MET）溶液、100umol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）液、20umol/L核黄素各 0.3ml， 蒸馏水 0.25ml和 0.05ml酶提取液（对照管加蒸馏水）。混匀后将１支对照管置暗处，其它各 管于 4000lx日光灯下反应 20min（要求各管受光情况一致，温度高时间缩短，低时间延长）。 4．SOD 活性测定与计算 反应结束后，以不照光的对照管做空白，分别测定其它各管的光吸收，已知 SOD 活性 单位以抑制 NBT 光化还原的 50%为一个酶活性单位表示，按下式计算 SOD 活性。
1．试剂配制 10%H2SO4；0.2mol/L 磷酸缓冲液（pH＝7.8）； 0.1mol/L 高锰酸钾标准液：称取KMnO4（AR）3.160g，用新煮沸冷却蒸馏水配制成 1000ml，用 0.1mol/L草酸标定； 0.1mol/L H2O2：取 30%H2O2溶液 5.68ml，稀释至 1000ml，用标准 0.1mol/L KMnO4溶液 在酸性条件下标定。
2．酶液提取 取剪碎的样品 2.5g 加入磷酸缓冲液（pH7.8）少量，研磨成匀浆，转移到 25ml 容量瓶 中，将研钵冲洗干净，冲洗液转至容量瓶中，并用同一缓冲液定容，4000×g 离心 10min， 上清液为酶粗提液。
3．酶液滴定
取 50ml三角瓶 4 个（两个测定，两个对照），测定加入酶液 2.5ml，对照为煮死酶液 2.5ml；
酶活性（mgH2O2/g F W）＝
a ×1.7 W
A－对照KMnO4滴定ml数； B－酶反应后KMnO4滴定ml数； V－酶提取液总量（ml）； a－反应所用酶液量（ml）； W－样重（g）。 5．注意事项 所用KMnO4溶液及H2O2溶液使用前要经过标定，0.1mol/L H2O2要新配制。 （四）过氧化物酶（POD）活性测定及同工酶分析 1．过氧化物酶（POD）活性测定
SOD 总活性＝ ( ACK − AE ) ×V
ACK
×
1 2
×W
× Vt
SOD
比活力＝
SOD 总活性 蛋白质浓度
式中：SOD 总活性以每克鲜重酶单位表示；比活力单位以酶单位/mg 蛋白表示；
ACK—照光对照管的光吸收值； AE—样品管的光吸收值； V—样液总体积（cm3）； Vt—测定时样品用量（cm3）； W－样重（g）； 蛋白质浓度单位为：mg 蛋白/g 样重。 研究表明，当遭受低温胁迫时，引起 SOD 活性的下降，下降的百分率与品种抗冷性呈 负相关，故能反应品种间抗冷能力的高低。
再加入 2.5ml 0.1mol/L H2O2，同时计算时间，于 30℃恒温水浴中反应 10min，立即加入
10%H2SO4 2.5ml。然后用 0.1mol/L KMnO4滴定，至出现粉红色（30min内不消失）为终点。 4．结果计算
酶活性用每克鲜重样品在 10min内分解H2O2毫克数表示。
(A − B)×V
生理生化指标主要包括超氧物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD） 活性测定及同工酶分析、丙二醛（MDA）及可溶性糖含量等方法。
三、方法步骤
（一）质膜透性测定－电导法 近年来的研究表明，在低温伤害尤其冷害中，膜系统常常是最先受到伤害的部位，寒害 能使脂膜受损伤，透性加大，细胞内离子（主要是K＋离子）外渗量增多，电导率加大。因 此可以用电导仪测定溶液的电导率，求算电解质渗出率（或称伤害率）。伤害率愈高则愈不 抗寒，反之则愈抗寒。 1．电解质渗出率的测定 取处理和对照样品各 0.5g，放入试管中，加 10ml 去离子水，置 25℃下 10h。用玻璃棒 搅拌均匀，然后用电导仪测电导值分别为 T1 和 C1。再将试管放入沸水中 10min，待其冷却 至 25℃时，测得处理和对照得电导值为 T2 和 C2，按下式计算电解质渗出率和伤害度：
在过氧化物酶催化下，过氧化氢分解成水和原子氧，原子氧能氧化联苯胺产生一种蓝色 的化学物质，该蓝色化合物在波长 580nm 处有一最大吸收峰。蓝色物质的生成速度（dx/dt） 与反应系统中过氧化氢分解速率呈正相关。因此，用分光光度计测出蓝色物质密度的变化（单 位时间内反应液中光密度的变化），可以表示过氧化物酶的活性。
常用差示温度分析来测量深过冷。以 DTA 法测定，一般植物在零下几度即散热结冰， 称为高温散热。经过低温锻炼的抗寒木本植物，在连续降温过程中，可见到有多次散热，第 一次在零下几度，主要是细胞外结冰，最后一次散热可达-20～-45℃的低温以下，叫低温散 热。在低温散热前一霎那的温度，即深过冷温度，用 LTE 温度表示。深过冷低温散热时， 可出现细胞内结冰而使组织死亡。日本京都大学 S.K.Kang（1998）等对苹果、桃、梨、柿 子和葡萄 5 种落叶果树通过温度分析测定了两种散热 HTE 和 LTE，发现柿子与葡萄仅有 LTE，所有树种的低温散热温度与花芽的半致死温度一致。
本实验重点学习实验室间接鉴定果树抗寒性的方法和步骤。
一、试材及用具
1．试材及处理：植物枝条或花朵，将采回的枝条剪成 40cm 左右的长度，用自来水冲 洗数遍（洗掉泥土、灰尘、虫卵），再用蒸馏水冲洗三次，然后用吸水纸吸干水分，最后将 枝条末端进行蜡封。将每个品种蜡封后的枝条分成相等的 6 份，其中一份作为对照，其余每 份作为一个低温处理，放于冰箱中（0℃～4℃）保存备用。每次处理时，各取参试品种的一 份枝条放于超低温冰箱或程控冰箱内进行低温处理，处理温度梯度为：CK（0℃），-20℃， -25℃，-30℃，-35℃，-40℃。降温速度为 4℃/h，达到目的处理温度后维持 12h，然后逐步 升温，升温速度亦为 4℃/h。花朵的处理温度梯度为：CK（0℃），-1℃，-3℃，-5℃，-6℃， -7℃，-8℃。
B—浸泡液的体积（ml）； W—样品鲜重（g）。 2．注意事项 （1）在电导测定中一般应用去离子水，若制备困难可用普通蒸馏水代替，但在测定中 设一空白试管，测定样品时要同时测定其空白电导值，按下式计算相对电导度：
相对电导度（L）＝
S1 − 空白电导值
S
－空白电导值
2
（2）CO2在水中的溶解度较高，在测定电导时要防止高CO2气源和口中呼出的CO2进入 试管，以免影响结果的稳定性。
实验 16 植物抗寒性鉴定
我国植物种类繁多，分布区域广，在晚秋和早春时期发生的冻害和冷害两种低温危害， 常常给越冬作物和果木造成严重伤害。冻害由 0℃以下低温造成，冷害由 0℃以上低温引起， 冷害对植物的伤害程度，除取决于低温外，还取决于低温维持时间的长短。植物抗寒性的强 弱决定其生长季节，因此蔬菜作物利用抗寒品种，可以将露地栽培提前，提早供应市场；而 选育抗寒性强的果树品种，不仅是寒带果树育种者的主攻方向，而且也是温带甚至热带果树 育种者重要育种目标之一。
植物的抗寒性鉴定可分为田间鉴定和实验室间接鉴定两种方法。 1．田间鉴定 田间自然鉴定就是在冻害发生期（早春及晚秋）对受冻的田间植株一定 器官、组织以一定的标准进行评价、比较，然后根据冻害情况评价抗寒性。 陈学森等（2001）对山东省春季“倒春寒”发生后，受害的核果类果树的花器官的抗寒 性进行了调查，选出了当地花期抗寒性较强的红荷包、红丰等杏品种，证明种间的抗寒力大 小顺序是：桃﹥杏﹥李﹥大樱桃。 赵玉田（1993）对不同生态型玉米的抗寒性进行了田间鉴定，测定的项目包括３个抗冷 指标：
（三）过氧化氢酶（CAT）活性的测定 低温胁迫下，细胞内易产生H2O2破坏膜系统的稳定，而过氧化氢酶（CAT）能把H2O2分 解为H2O和O2，从而清除H2O2维护膜的稳定性。研究表明，抗寒性强的品种有较高的过氧化 氢酶活性，且随温度下降，以抗寒性强的品种下降幅度小，与抗寒性呈显著性相关。
CAT酶活性大小可用一定时间内分解的H2O2量来表示。在反应系统中加入一定量（反应 过量）的H2O2溶液，经酶促反应后，用标准高锰酸钾溶液（在酸性条件下）滴定多余的H2O2， 即可求出被CAT分解的H2O2量：
2．仪器 烘箱，发芽箱，培养皿，标牌，电导仪，具塞刻度试管（20ml），恒温水浴锅， 温度计，玻璃棒，天平，研钵，石英砂，高速台式离心机，分光光度计，微量进样器，荧光 灯（4000lx），容量瓶（250ml、25ml），聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳槽，刻度吸管（10ml、 5ml），离种在同一条件下的抗寒性差异。该法直接、简单，可进 行大范围、大群体的评价，但受地域、品种数量的限制，只能比较少数几个同一地段的品种 之间的抗寒力差异，不能对他们的抗寒能力进行量化。
2．实验室间接鉴定 实验室间接鉴定，就是根据作物某些生理生化指标及物理指标间 接推断供试材料的抗寒性。
物理指标 Lyons 和 Raison（1970）证明植物低温发生时，生物膜首先发生膜脂的物相变 化，膜的外形和厚度发生变化，膜上产生龟裂，因而膜的透性增大，电解质大量外渗。抗寒 性强的品种细胞膜透性增大程度轻，抗寒性差的品种与之相反。因此，测量电解质外渗量变 化可以比较植物的抗寒性。在黑穗醋栗、梨、猕猴桃（Shaoli Lu，1990）等许多种果树的不 同器官，如花、枝、叶等都有相似结论。另外，通过电导率值配以 Logistic 方程，可以求出 半致死温度，确定植物的临界致死温度。
相对出苗率（%）（RER）：
RER＝
第一期出苗率 第二期出苗率
× 100％
出苗指数（EI）：
EI＝
∑
[(某日出苗数)× (播后天数)]
出苗总数（30d）
幼苗干物重（SDW），取地上部三叶期 10 株幼苗，烘至恒重。 三个抗冷特性以总指数值（TIV）表示，即占各自等级顺序之和。其值反应了低温下种 子出苗生长和干物质积累能力。
电解质渗出率（%）＝
浸泡液电导率值 煮沸后电导率值
×
100％
伤害度（%）＝
处理电导率值T1－对照电导率值C1 处理煮沸后电导率值T2－对照煮沸后电导率值C2
×100%
2．绝对电解质渗出量的测定 有时为了求得电解质的绝对渗出量，需要用分析纯的 KCl 配成不同浓度的标准液（0.01 －10mmol/L），在 25℃下测定其电导率值，并绘制电导率（μS/cm）—浓度（mg/ml）标准 曲线。由标准曲线查知样品的外渗电导率值相当于 KCl 的浓度，再折算每克材料的绝对外 渗量（mg/g），即 绝对电解质渗出量（mg/g），即 绝对电解质渗出量（mg/g）＝A×B/W 式中，A—根据样品电导率值，从标准曲线中查出的与 KCl 相当浓度（mg/ml）；
（3）温度对溶液电导影响很大，故S1与S2必须在相同温度下测定。 （二）超氧物歧化酶（SOD）测定 超氧物歧化酶（SOD）是一种清除超氧阴离子自由基的酶，普遍存在于植物体内。本实 验依据超氧物歧化酶抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。在有可氧 化物质存在下，核黄素可被光还原，被还原的核黄素在有氧条件下极易再氧化而产生超氧阴 离子自由基，超氧阴离子自由基可将氮蓝四唑还原为蓝色的甲月朁 ，后者在 560nm 处有最 大吸收。而 SOD 可清除超氧阴离子自由基从而抑制了甲月朁 的形成。于是光还原反应后， 反应液蓝色愈深说明酶活性愈低，反之酶活性愈高。据此可以计算出酶活性大小。 1．试剂配制 0.05mol/L 磷酸缓冲液（pH7.8） 130mmol/L 甲硫氨酸（Met）溶液：称 1.9399g Met 用磷酸缓冲液定容至 100ml。 750μmol/L 氮蓝四唑（NBT）溶液：称取 0.06133g NBT 用磷酸缓冲液定容至 100ml 避 光保存。 100μmol/L EDTA-Na2溶液：称取 0.03721g EDTA-Na2用磷酸缓冲液定容至 1000ml。 20μmol/L 核黄素溶液：称取 0.00753g 核黄素定容至 1000ml 避光保存。 2．酶液提取 称取处理和对照样品各 0.5g，加入 5ml 磷酸缓冲液，冰浴研磨提取，然后 15000rpm 离 心 10min，所提上清液为酶液。 3．显色反应 3ml反应液为 0.05mol/L磷酸缓冲液 1.5ml，750umol.L-1NBT溶液、130mmol/L甲硫氨酸 （MET）溶液、100umol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）液、20umol/L核黄素各 0.3ml， 蒸馏水 0.25ml和 0.05ml酶提取液（对照管加蒸馏水）。混匀后将１支对照管置暗处，其它各 管于 4000lx日光灯下反应 20min（要求各管受光情况一致，温度高时间缩短，低时间延长）。 4．SOD 活性测定与计算 反应结束后，以不照光的对照管做空白，分别测定其它各管的光吸收，已知 SOD 活性 单位以抑制 NBT 光化还原的 50%为一个酶活性单位表示，按下式计算 SOD 活性。