艾滋病(HIV)检测方法汇总
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艾滋抗体检测检测方法
一说到艾滋病我们都会恐惧不已,因为他对我们健康造成的影响和威胁是比较大的,而且还具有传染性,所以自然而然大家对他的一些常识认识,以及各种检测工作都应该警惕,而以下就是艾滋病抗体的一些检测方法,希望通过这些方法介绍做好大家能够重视。
检测方法
酶联免疫吸附试验
目前应用的ELISA法有8种之多。
它们的特异性和敏感性超过99%。
颗粒凝集法
PA为快速、简便的一种筛选方法。
如属阳性,应经WB证实。
PA不需任何特殊仪器,其结果用肉眼可判别。
全过程仅需5分钟。
缺点有假阳性,且价格昂贵。
快速试剂
(一)人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法)
雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)是用于体外,肉眼观察,定性的免疫分析,检测血清或血浆
中的HIV-1和HIV-2抗体,用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。
本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用,本品检测阳性者,需进行进一步筛查确认。
(二)InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂
InstantCHEKTM-HIV1+2是一种快速、简单、灵敏的检验方法,用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。
该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。
以上就是艾滋病检测的一些方法介绍,希望通过这些介绍,大家可以格外注重这些常识的了解,毕竟本身艾滋病对我们的健康,带来的危害就已经很严重,所以要是我们不注重,预防自然而然就很容易,导致艾滋病发生。
我国HIV常用检测方法和流程初筛抗体+WB法确认目前国内实验室多采用「初筛抗体+WB 法确认」等两步法进行HIV检测及确诊。
初筛实验室初筛阳性,不能出具阳性报告,必须进入复检试验。
对初筛有反应的样品,用原有试剂双份或双孔进行复检试验(或者两种试剂复检),如均无反应,报告「HIV 抗体阴性」;如均有反应或一个有反应一个无反应,需要送检做确证实验,报告HIV 感染待确定。
目前大部分临床实验室为艾滋病初筛实验室,开展常规初筛实验,发现阳性结果初步复检后送省市CDC 或当地其他确认实验室做确认实验。
1、条带条带是HIV确认实验——免疫印迹试验(WB)实验所呈现出的结果,如上图。
原理是WB 采用间接法检测样品中的抗HIV-1/HIV-2 特异性抗体。
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的HIV 蛋白分离开来,经过一系列处理后,硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带,从而确诊抗体的存在。
HIV-1抗体特异带包括env带:gp160/gp120、gp41;gag带:p55、p24、p17(或p18);pol带:p66(或p65)、p51、p31。
HIV-2抗体特异条带包括env带:gp140/gp105、gp36;gag带:p56、p26、p16;pol带:p68、p53、p34。
(由于使用的毒株不同,HIV-2 env带也可为gp125/gp80、gp36)。
2、根据条带判断是否感染HIVHIV-1抗体阳性同时符合以下2条标准可判为HIV-1抗体阳性:①至少有2条env带(gp41和gp160/gp120)出现,或至少1条env带和p24带同时出现;②符合试剂盒提供的阳性判定标准。
(目前实验室判定阳性一般是gp41和gp160/gp120+p24)HIV-2抗体阳性出现HIV-2型特异性指示带的样品:如果同时呈HIV-1抗体阳性反应,报告HIV-1抗体阳性,不推荐进一步做HIV-2抗体确证试验;如果同时呈HIV-1抗体不确定或阴性反应,需用HIV-2型确证试剂再做HIV-2的抗体确证试验。
艾滋病筛查方法文章目录*一、艾滋病筛查方法1. 艾滋病的筛查方法2. 哪些人需要艾滋病筛查3. 艾滋病筛查要注意什么*二、艾滋病的传播途径是什么*三、怎样预防艾滋病艾滋病筛查方法1、艾滋病的筛查方法 1.1、血常规检查常有红细胞,血红蛋白降低,呈轻度正色素、正细胞性贫血。
白细胞常降至4.0×109/L以下。
分类中性粒细胞增加,有核左移现象。
少数表现为粒细胞减少。
淋巴细胞明显减少。
1.2、HIV感染的辅助检查HIV抗体初筛试验(ELISA):敏感性高,可有假阳性出现。
对于初筛阳性的患者,应经确证试验确证。
HIV抗体确证试验(WB):WHO规定,只要出现2个env条带即可判定为阳性。
HIV-RNA:敏感性为100%,但偶尔会出现假阳性,但假阳性结果通常低于2000cp/ml,而急性感染期病毒载量通常很高,平均在106cp/ml。
p24抗原:有助于早期诊断,灵敏性及特异性均较高。
快速检测试验:可采集全血或毛细血管的血液,一般15-30分钟可出结果。
但假阳性及假阴性率均较高,不作为常规检测。
2、哪些人需要艾滋病筛查 2.1、性行为泛滥众所周知,不安全的性行为是传播HIV的主要途经之一,如果你的性行为较为泛滥,无论男女老幼,定期做艾滋病检测是必需的。
2.2、献血或输血我们都知道,有偿献血、输血都有感染HIV的风险,事后应做艾滋病检测,但预防比检测更为重要,在献血和输血时,千万不要使用共用针头或其它器具。
2.3、注射毒品和共用针具注射、针刺,特别是注射毒品和共用针具,都有感染HIV的风险,除了进行检测外,更多的是避免注射毒品和共用针具。
2.4、感染性病如果你的性病检测呈阳性,那么这是一个危险的信号,最大的危险不是来自性病,而是你有可能感染更为可怕的病毒-HIV,及时的进行检测、确诊,可以让你摆脱恐艾或积极采取措施治疗。
2.5、男性同性恋如果在没有使用安全套的情况下,发生肛交、口交等行为,应做艾滋病检测。
四种HIV抗体检测方法的对比分析高平【摘要】目的:采用化学发光法(CLIA)、乳胶层析法、酶联免疫法(ELISA)和免疫印迹法(WB)进行HIV抗体检测,探讨不同方法学的敏感性和特异性.方法:采用化学发光法对2016年12月—2017年10月门诊和住院患者19090例血清标本进行检测,筛查阳性标本根据《全国艾滋病检测技术规范(2015年修订版)》要求,再用ELISA法和乳胶层析法进行复检,如均有反应或一个有反应一个无反应,则送疾病预防控制中心(CDC)进行抗体WB试验.结果:化学发光法检测出的150例阳性标本中,乳胶层析法检出阳性96例,阴性54例;ELISA检出阳性99例,阴性51例;WB试验检出阳性105例,阴性45例;前三种方法与WB试验符合率分别为70%、91%和94%.结论:初筛方法均具有假阳性和假阴性,HIV抗体先筛查,后WB试验有利于提高HIV抗体检测结果的准确性.化学发光法检测人血清HIV具有较高的灵敏度,自动化程度高,能够及时为临床送检标本进行HIV筛选;乳胶层析法符合率较高,操作简单,检测时间快,可用于急诊等快速检测;ELISA法灵敏度和特异性均较高,可作为HIV批量筛查.【期刊名称】《临床医药实践》【年(卷),期】2019(028)005【总页数】4页(P369-371,375)【关键词】HIV抗体;化学发光法;乳胶层析法;酶联免疫法;免疫印迹法【作者】高平【作者单位】内江市第一人民医院,四川内江 641000【正文语种】中文【中图分类】R446艾滋病(AIDS)是由于感染人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的人类免疫功能受损的疾病,可通过性接触、血液及血制品和母婴垂直传播[1]。
近年来,在国际范围内传播和发病率呈上升趋势,在我国感染人数也在逐年增多。
由于艾滋病患者感染HIV后破坏人体内CD4+T淋巴细胞,使人体免疫力降低甚至丧失,最终患者机体在缺乏免疫保护下走向死亡。
因此,艾滋病的防治正成为全世界各个国家和民族所面临的严峻卫生问题和社会难题。
艾滋病检测方法有什么艾滋病这种传染病一般是通过血液啊,母乳啊或者是性传播的方式传染来的,得了这种疾病的患者一般是治愈率还是比较低的,那么我们从生活中是否也对这方面的疾病有所了解呢,多了解一些关于艾滋病的知识可以更好的进行了解,也可以减少疾病的发生,而艾滋病检测方法有什么呢,很多人都不知道,我们来了解一下啊。
一、酶联免疫吸附试验(ELISA)目前应用的ELISA法有8种之多。
它们的特异性和敏感性超过99%。
二、颗粒凝集法(PA)PA为快速、简便的一种筛选方法。
如属阳性,应经WB 证实。
PA不需任何特殊仪器,其结果用肉眼可判别。
全过程仅需5分钟。
缺点有假阳性,且价格昂贵。
三、快速试剂(一)人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2型抗体诊断试剂(胶体硒法)雅培人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂(胶体硒法)是用于体外,肉眼观察,定性的免疫分析,检测血清或血浆中的HIV-1和HIV-2抗体,用于帮助受感染个体的HIV-1和HIV-2抗体。
本品仅用于无偿献血员现场初筛及临床紧急情况的使用,本品检测阳性者,需进行进一步筛查确认。
(二)InstantCHEKTM-HIVl+2金标快速诊断试剂InstantCHEKTM-HIV1+2是一种快速、简单、灵敏的检验方法,用以检测艾滋病病毒(HIV-1和HIV-2)的抗体。
该方法适用于初筛检测,凡由该试剂测定为阳性者,需用另一种方法检测如ELISA或用蛋白印记法确定。
四、HIV-抗体确认实验免疫印迹试验(WB)、条带免疫试验(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉淀试验(RIPA)及免疫荧光试验(IFA)。
国内常用的确认试验方法是WB。
(一_免疫印迹实验(westernblot,WB)是广泛用于许多传染病诊断的实验方法,就HIV的病原学诊断而言,它是首选的用以确认HIV抗体的确认实验方法,WB的检测结果常常被作为鉴别其他检验方法优劣的“金标准”。
上面就是关于艾滋病检测方法了,是不是对大家都有所认识了呢,很多知识我们都是需要了解的,认识了这些我们就可以及时的预防,而且定期的去检查自己的身体,也是对自己的健康负责,有了好的身体才能有金钱和美好的生活。
检测艾滋病的方法,文章告诉你一般都有哪些艾滋病又称获得性免疫缺陷综合征,是由HIV病毒也叫作获得性免疫缺陷病毒感染后,导致的身体免疫系统机能破坏,逐渐成为许多机会性感染疾病的攻击目标,造成多种临床感染症状的综合征。
因此,人体易于感染各种疾病,并可发生恶性肿瘤,病死率较高。
HIV在人体内的潜伏期平均为8~9年,患艾滋病以前,可以没有任何症状地生活和工作多年。
因此艾滋病患者尽早的检测不仅是对自己的健康着想也是对他人的健康负责。
艾滋病患者的检测是非常重要的,下面整理出了如下几种检测办法,让我们一起来看看吧!(1)抗体检测;艾滋病的检测目前主要是抽血做抗体检测,是检测艾滋病应用非常广泛的一种方法,这种方法主要是用于艾滋病的初筛检测。
在发生了一些高危行为是需要及时到医院进行艾滋病抗体的检测,如果检测出现艾滋病抗体阳性,往往说明可能感染了艾滋病,这时候需要到疾控中心进行确证检测实验,如果确证结果也是阳性,则是肯定感染了艾滋病。
如果艾滋病抗体呈现阴性的结果,可能是没有感染艾滋病,也可能是处于艾滋病的窗口期,是需要进行多次的检测,才能判断是否最终发生艾滋病感染。
在各大医院、疾控中心或者是一些私立的医疗机构都可以做此检测。
费用也很便宜。
(2)免疫功能检测;自身细胞免疫功能检测是当前国际上最为先进检测技术。
主要通过血液中的CD4淋巴细胞计数。
HIV进入感染者体内主要侵犯CD4淋巴细胞,侵入细胞内繁殖并大量破坏这种有重要免疫功能的细胞。
于是,患者的免疫功能发生缺陷而被破坏,免疫功能下降而出现各种各样的感染,甚至正常寄生在身体内的细菌、病毒和寄生虫等都可感染形成AIDS。
血液中的CD4淋巴细胞如低于200cel/ 微升,即是感染者已经发病的标志。
这是一项重要的区别HIV感染者与AIDS患者的检验。
(3)金标法;艾滋病快速检测方法,最常见的就是金标法,是国际上比较常用的一种体外诊断方法。
目前市面上出售的各种艾滋病检测试纸,都是使用金标法进行检测的。
艾滋病检测方法有哪些如何检测艾滋病一提起艾滋病,很多人都会避而远之,“谈艾色变”是很多人的第一反应。
一些人怀疑自己感染了艾滋病,每天生活在恐惧与压力中,苦不堪言,这是人们对艾滋病相关知识缺乏了解所致。
其实,艾滋病检测并不神秘,是一种非常普通与常见的检查。
艾滋病主要的检测方法:(一)抗体检测主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。
快速检测法,也称为金标法,也是抗体检测的一种方法,根据免疫层析法的原理,用于HIV抗体检测的定性检测。
(二)抗原检测用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。
现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原,来提高敏感性。
(三)核酸检测用PCR法检测HIV基因,具有快速、高效、敏感和特异等优点,目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。
(四)病毒分离常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。
艾滋病常用的检测方法:(一)酶联法即“酶联免疫法”,简称ELISA。
它的中心就是让抗体与酶复合物结合,然后通过显色来检测。
步骤其实很简单:ELISA用血清来检测,首先血液要经过至少半个小时的凝集,然后取血清(这是有些网友不理解为什么医院抽完了血对血置之不理的原因,其实是误会)。
将酶复合物用稀释液稀释后,加血清及阴性、阳性对照,还有就是质控品(这是严格的要求,它的范围必须在质控范围内)。
经过一个小时的孵育,然后洗板,加底物,半个小时避光反应后加终止液即完成反应部分,然后就是读数。
由数值来判断结果的阴性或阳性。
严格的讲,如果第一次检测为阳性的话,无论是哪个实验室,必须按照CDC的HIV操作规程来进行第二次检测,第二次的方法必须与第一次的不同,如还是阳性,将送艾滋病确认实验室确认。
(二)快速法即“金标法”,又叫“胶体金法”,金标法是国际上较为先进的灵敏,特异,快速,简便,准确率高的体外诊断方法。
艾滋病实验室检测HIV/AIDS 的实验室检测主要包括HIV抗体检测、HIV核酸定性和定量检测、CD4+ T淋巴细胞计数、HIV耐药检测等。
HIV⁃1/2抗体检测是HIV感染诊断的金标准,HIV核酸检测(定性和定量)也用于HIV 感染诊断;HIV 核酸定量(病毒载量)和CD4+ T 淋巴细胞计数是判断疾病进展、临床用药、疗效和预后的两项重要指标;HIV 耐药检测可为HAART方案的选择和更换提供指导。
1.HIV⁃1/2 抗体检测:包括筛查试验和补充试验。
HIV⁃1/2抗体筛查方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验、快速试验(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒、免疫层析等)、简单试验(明胶颗粒凝集试验)等。
补充试验方法包括抗体确证试验(免疫印迹法,条带/线性免疫试验和快速试验)和核酸试验(定性和定量)。
筛查试验呈阴性反应可出具HIV⁃1/2抗体阴性报告, 见于未被HIV感染的个体,但窗口期感染者筛查试验也可呈阴性反应。
若呈阳性反应,用原有试剂双份(快速试验)/双孔(化学发光试验或ELISA)或两种试剂进行重复检测,如均呈阴性反应,则报告为HIV抗体阴性;如一阴一阳或均呈阳性反应,需进行补充试验。
补充试验:抗体确证试验无HIV特异性条带产生,报告HIV⁃1/2抗体阴性;出现条带但不满足诊断条件的报告不确定,可进行核酸试验或2~4周后随访,根据核酸试验或随访结果进行判断。
补充试验HIV⁃1/2 抗体阳性者,出具HIV⁃1/2抗体阳性确证报告。
核酸试验:核酸定性检测结果阳性报告HIV⁃1核酸阳性,结果阴性报告HIV⁃1核酸阴性。
病毒载量检测结果低于检测线报告低于检测线;>5 000拷贝/ml 报告检测值;检测线以上但≤5 000拷贝/ml建议重新采样检测,临床医生可结合流行病学史、CD4+、CD8+T淋巴细胞计数或HIV抗体随访检测结果等进行诊断或排除诊断。
2.CD4+T淋巴细胞检测CD4+T淋巴细胞是HIV感染最主要的靶细胞,HIV感染人体后,出现CD4+T淋巴细胞进行性减少,CD4+/CD8+T淋巴细胞比值倒置,细胞免疫功能受损。
艾滋病自我检测方法艾滋病(Acquired Immune Deficiency Syndrome,简称AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodeficiency Virus,简称HIV)引起的一种严重的传染病。
为了帮助人们更早地发现是否感染了HIV,自我检测成为一种快捷和隐私保护的方式。
本文将介绍几种常见的艾滋病自我检测方法,并讨论其优缺点。
1. 家庭自我检测套装家庭自我检测套装是一种方便、隐私和快速的艾滋病自我检测方法。
这些套装通常包含一个检测试纸、一个消毒棉球和一本使用说明。
使用时,只需按照说明操作,采集自己的血液样本,然后将样本与试纸接触。
几分钟后,根据试纸上的指示,可以确定是否感染了HIV。
优点: - 方便快捷,可以在家里进行检测,避免到医院或诊所的尴尬和等待。
- 隐私性好,没有他人知晓个人状况的风险。
- 检测结果准确可靠,与专业实验室结果相当。
缺点: - 对于初次使用者,可能不了解正确的操作步骤,容易出错。
- 无法提供进一步的咨询和帮助,对于检测结果的解读可能存在困难。
- 部分家庭自我检测套装的准确性可能存在争议,需选择可靠的品牌。
2. 在线艾滋病自我检测服务随着技术的发展,越来越多的在线平台提供艾滋病自我检测服务。
通过这些平台,用户可以在线订购自我检测套装,并将样本回寄至指定实验室进行检测。
几天后,用户可以在平台上获取自己的检测结果。
优点: - 方便灵活,可以随时随地订购自我检测套装,无需前往实体店面购买。
- 提供可靠的实验室检测,确保结果的准确性。
- 在线平台通常提供匿名咨询和实时在线专家支持,方便用户解答问题和提供进一步的指导。
缺点: - 需要等待检测结果,可能需要几天甚至更长时间才能获取。
- 在线平台需要保证用户的个人信息和数据安全,防止泄露和滥用的风险。
- 一些在线平台可能存在服务质量参差不齐的问题,需要选择知名度高和口碑良好的平台。
3. 社区自我测试站点一些社区设置了艾滋病自我测试站点,提供自我检测套装和指导。
艾滋病(HIV)检测方法汇总艾滋病(HIV)检测方法汇总艾滋病(HIV)是一种可导致免疫系统受损的病毒感染。
及早发现和诊断艾滋病对于病人的治疗和预防病毒传播至关重要。
本文将总结并介绍一些常见的艾滋病检测方法,为读者提供相关资讯。
1. 血液测试血液测试是目前最常用的艾滋病检测方法之一。
它可以检测人体内是否存在艾滋病病毒抗体或抗原。
具体来说,常见的血液测试有以下几种:1.1 抗体测试抗体测试是最常见也是最经济实惠的艾滋病检测方法之一。
它通过检测人体血液中是否存在针对艾滋病病毒的抗体来确定感染情况。
这种测试通常需要提供一小份血液样本,可以在医院、社区卫生中心或专门的艾滋病检测中心进行。
结果往往在几分钟到几天内出来。
1.2 RNA检测RNA检测是一种高度敏感的检测方法,可以直接检测血液中的病毒RNA。
它在感染后早期即可检测到病毒存在,能够提供更早的诊断结果。
这种测试一般只在高风险人群或怀疑感染者中使用。
1.3 P24抗原测试P24抗原测试能够检测血液中的P24抗原,该抗原是艾滋病病毒感染早期出现的一种蛋白质。
这种测试一般用于在感染后4-6周进行,可以提供及早的感染信息。
2. 口腔快速测试口腔快速测试是一种简便、非侵入性的检测方法。
它通过检测唾液中的抗体来确定感染情况。
这种测试通常只需要简单地采集一份唾液样本,并在测试盒上进行,而不需要前往医院或实验室。
虽然口腔快速测试方便快捷,但其准确性可能不如其他血液测试。
3. 家庭自测现在市场上也有一些自我检测的艾滋病检测试剂盒。
这些测试剂盒通过血液、唾液或尿液样本来诊断感染情况。
使用者可以在家中进行测试,并等待结果。
然而,这种类型的测试具有一定的误差率,因此不够准确。
如果在使用家庭自测后出现阳性结果,建议尽快就医进行进一步确诊。
总之,艾滋病检测至关重要,可以帮助个人及早发现病毒感染并采取相应的措施。
但是需要注意的是,不同检测方法的准确性和适用性可能不同。
如果有任何疑虑,建议咨询医生或专业人士获取准确的建议和测试方式。
HIV实验室诊断人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)及其相关标志的检测是预防HIV感染和艾滋病临床治疗中重要的环节,在艾滋病的防治工作中具有重要作用,如艾滋病的诊断、HIV感染的诊断、血源及器官供体的筛选、流行病学调查、艾滋病病人及HIV感染者的病情动态观察、临床治疗疗效考核以及HIV疫苗的安全性和效果鉴定等。
HIV感染标志分为病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。
病毒标志是指直接从HIV感染者体内分离出病毒或检出HIV组成成分(抗原或核酸)。
免疫标志是指HIV感染所产生的HIV抗原、抗体等免疫物质。
相关标志是指HIV感染后与艾滋病病情进展有密切关系的某些标志,如CD4细胞、CD8细胞,β2微球蛋白、有关细胞因子等。
这些标志的测定可为HIV感染及临床疗效的考核提供极为重要的诊断、治疗和预后指征。
目前HIV抗体的检测是艾滋病实验室检测中最常用的方法,因为HIV抗体是患者感染HIV后最容易检出并且持续时间最长的免疫学标志,而且抗体的检测方法大多简便、经济,易于推广应用。
在介绍各种HIV实验室诊断方法之前,为了使实验室工作人员能够有效地确保结果准确、可靠、优质,我们必须对作为一种感染因子的HIV以及由它所导致的致命性危害有基本的认识。
实验室工作人员应特别注意病毒的结构、抗原组成,人体的免疫反应,诊断试验的基本原理、试验结果的解释,以及为了准确而有效地提供实验诊断所必需的质量保证措施。
如果由于缺乏技术专长或基本知识而造成不正确的试验结果是不可原谅的。
现将有关内容扼要介绍如下:一、人类免疫缺陷病毒(HIV)概述(一)艾滋病病原体的发现和命名(二)HIV病毒的形态结构、分类和分型HIV病毒是带有包膜的RNA逆转录病毒,在分类上属于逆转录病毒科中的慢病毒亚科。
目前发现有HIV-1和HIV-2两型。
现已将HIV-1分为M组,共10个亚型(A-J)和O组,HIV-2也至少有6个亚型(A-F)。
HIV/AIDS艾滋病诊断就是一个十分严肃得问题,任何诊断得错误结果无论就是假阴性还就是假阳性,对家庭与社会都会造成十分严重得后果。
HIV检测就是诊断HIV感染及艾滋病得重要实验室依据之一,要知道就是否感染了HIV可以通过检测病毒得抗体、抗原、核酸或通过病毒培养来确定。
常用于诊断HIV/AIDS得方法就是HIV抗体检测,它就是诊断HIV/AIDS得主要指标,也就是世界卫生组织与我国卫生部推荐使用得HIV感染诊断方法。
为了最大限度地保证诊断结果准确,HIV诊断采用特殊得检测策略,即先用敏感性高得初筛试剂进行初筛,如果阳性再用特异性强得确认试剂进行确认。
检测HIV抗体常用得初筛方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、凝集试验与各种快速诊断方法,确认得方法有蛋白印迹法(WB)、放射免疫沉淀试验(RIP)、间接免疫荧光试验(IFA)等。
一般先用ELISA做初筛试验;如果阳性,再用蛋白印迹法来确认。
以下介绍一下较常用得HIV抗体测定得方法。
一。
初筛试验方法1.酶联免疫吸附试验(ELISA)酶联免疫吸附试验简称酶标法,就是最常用初筛检测方法,在HIV抗体得测定中有四种模式:间接法、双抗原夹心法、捕获法与竞争法,其中以间接法用得最多。
1)间接法:将HIV抗原纯化后固定于微孔板上,然后加入待测标本,清洗后加酶标记抗人免疫球蛋白(IgG),清洗后加入底物,产生有色反应即为阳性。
(见图1)2)双抗原夹心法:将HIV抗原固定于微孔板上,然后加入待测标本,清洗后加入酶标记得HIV抗原,清洗后加入底物,产生有色反应即为阳性。
(见图2)3)捕获法:将非特异性得兔抗人免疫球蛋白抗体固定于微孔板上,然后加入待测标本,清洗后加入酶标记得HIV抗原,清洗后加入底物,产生有色反应即为阳性.(见图3)4)竞争法::将HIV抗原固定于微孔板上,然后同时加入待测标本与一定数量得酶标HIV抗体,如果标本中有HIV抗体,即与加入得酶标HIV抗体竞争结合固定在微孔板上得抗原,标本中HIV抗体量越多,结合在固相上得酶标抗体就愈少,清洗后加入底物。
几种HIV抗体免疫检测技术艾滋病全称:获得性免疫缺陷综合征,英文简写:HIV,是一种危害性极严重的传染病,是因为受到HIV病毒感染所导致的疾病,HIV病毒是一种以攻击人体免疫系统的病毒。
目前我国的艾滋病患病率一直呈现出上升的趋势,面对这种情况就需要采取相应的措施以控制艾滋病患病率上升的趋势,此刻便对我国现目前的几种HIV抗体免疫检测技术方法进行科普,通过几种HIV抗体免疫检测技术使得医院能够尽早的发现HIV病感染者,对其进行相应的治疗和健康教育,避免HIV病毒的传染传播。
一、ELISA和WB检测技术ELISA:此种检测技术,主要是以病毒抗原包被反应板,运用间接法原理检测HIV抗体,其中这种检测技术拥有四代试剂:第一代ELISA试剂:抗原是HIV全病毒裂解物,特点是能够有效地检测出HIV,存在一定的假阳性率。
第二代ELISA试剂:抗原在细菌或者是真菌当中表达的人工重组HIV抗原或化学合成的HIV 抗原多肽,特点是单一性的抗原取代了多样性的混合抗原,其特异性要比第一代ELISA试剂好。
第三代ELISA试剂:合成的HIV抗原多肽(有些用了重组抗原),特点是应用了双抗原夹心法原理来检测HIV抗体,能够同时检测HIV-1 IgG、IgM、IgA 抗体,并且其敏感性与特异性都要比第一代ELISA试剂和第二代ELISA试剂还好。
第四代ELISA试剂:第四代ELISA试剂主要是在第三代的基础上针对P24抗原和HIV-1抗原一起包被固相载体,特点是能够同时检测 HIV-1 IgG、IgM、IgA 抗体和P24 抗原。
WB检测技术:WB检测技术是属于体外检测和鉴定HIV抗体的方法,主要是用于确证ELISA 检测阳性的个体。
其原理是以病毒抗原、重组抗原或合成肽,在SDA-PAGE电泳后转至硝酸纤维素膜上,随后再与血清或血浆中的HIV的抗体结合,最后通过显色反应来确定条带的存在。
二、HIV抗体快速检测技术关于HIV抗体快速检测技术是建立在ELISA和WB的检测基础上发展的,其主要的特点是能够在较短的时间内通过相对简单的操作就能够及时并且较准确地得到检测结果。
1. HIV病毒的分离与培养(该方法用于科学研究,一般不用于临床诊断)
HIV病毒只感染CD4+的T淋巴细胞,并且还要求淋巴细胞处于增殖状态,只有在特定的实验室条件下才能有效地分离和增殖HIV病毒。
并且要求HIV病毒培养要在生物安全三级实验室进行。
2. HIV病毒的核酸检测(一般用于急性期的检测)
最常用的是HIV-RNA定量测定方法,用于检测HIV感染者血浆中病毒的量,称为HIV 病毒载量测定。
目前有三种方法:反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、核酸序列依赖性扩增技术(NASBA)和分支信号放大系统(bDNA)等。
3. HIV病毒的抗原检测(一般只能用于HIV 感染早期的临床检测)
HIV-P24抗原出现时间较HIV抗体出现的时间更早,因此HIV-P24抗原检测可以用于对HIV早期感染的诊断,在进行HIV抗体检测时,同时进行HIV-P24抗原的检测可以减少假阴性。
除此之外,HIV-P24抗原检测也可以用于体外HIV在细胞培养液中浓度的测定和体外药物实验的效果评价等方面。
4. HIV感染的抗体检测(是诊断HIV感染最常用的方法)
血清学方法进行抗体检测是目前诊断HIV感染的主要检测方法,包括初筛实验和确诊试验。
初筛试验最常用的方法是酶联免疫吸附实验(ELISA),确诊试验用免疫印迹法。
一般用ELISA初筛试验阳性的标本,要进一步用免疫印迹法来确诊后,才能做出最终的诊断结果。
艾滋病的检测方法文章目录*一、艾滋病的检测方法*二、艾滋病的预防方法*三、艾滋病的危害有哪些艾滋病的检测方法1、去医院做艾滋病检测的方法有许多医院使用的也是艾滋病检测试纸,但是因为检测的人比较多,而且手续复杂,出结果的时间要稍长,一般也是当天就能拿到结果。
也有部分医院是使用酶联检测法,此艾滋病检测试剂需要专业医务人员操作,而且因为检测的人比较多,或者需要等别人一起检测,检测样品需要放置一段时间才可以做检测。
时间会慢一些。
一般最快今天做检测,隔天拿结果,具体要看各家医院的效率等。
2、到疾控中心做艾滋病检测的方法目前我国检测艾滋病的方法主要分快速法(也就是艾滋病试纸检测),另外一种是酶联免疫法。
艾滋病检测多长时间出结果呢?一般也是快速法当天拿结果,酶联法隔天或者更长时间,当然有些医院效率慢,即便是使用艾滋病试纸检测出结果的时间也是比较长的,通常最迟不会超过1个星期。
3、自我进行艾滋病检测的方法3.1、查看艾滋病试纸:为方便大家操作,HIV检测试纸被装入塑料卡座内,使用更加方便,检测原理不变,仍旧是双抗原夹心法。
3.2、采血:采血可以采用细小的针;采血可以采用细小的针,还要准备好酒精以及消毒棉。
采血部位:指尖或耳垂。
采血方法:先用酒精棉球消毒采血部位和采血针,然后采备。
注意、第一滴血要弃去,用第二、三滴血做检测。
血滴直接滴入加样孔,或先吸入洁净的吸管,然后滴入加样孔。
3.3、判读结果:加样后10-15分钟内观察结果。
只有一个红色的线(控制线)作为一个负的结果;试纸上出现两条红线,(对照线C和检测线T)为阳性结果;试纸上未出现红线,表示测试实验失败,请另取卡重新检测。
需要指出的是,由于任何测试实验都有“假阳性”结果存在,因此,出现阳性结果先不要紧张,可到当地疾控中心进行确认,也可以向我们咨询,当然这一切是保密的。
艾滋病的预防方法1、预防经性接触传播遵守性道德,固定性伴侣,安全性行为是预防艾滋病经性途径传播的有效措施。
艾滋病的最新检测方法艾滋病(HIV,人类免疫缺陷病毒)是一种通过传播感染人类免疫系统的病毒性疾病。
目前,艾滋病检测的最新方法主要包括抗体检测和核酸检测两种。
抗体检测是目前最常用的艾滋病检测方法之一。
它通过检测人体对病毒的免疫反应,即病毒所诱导的抗体是否存在于血液中。
一般采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)进行初步筛查,然后采用Western blot或免疫黏附抗体试验(IA)进行确认。
抗体检测通常需要在感染后的大约2到8周内进行,因为在感染病毒后,体内需要一定时间才能产生足够的抗体,并进入血液循环中,才能被检测出来。
然而,抗体检测存在的一个问题是,如果在感染后短时间内进行检测,可能会出现假阴性结果,即病毒已经感染但抗体尚未产生。
因此,如果测试结果是阴性,但存在高度疑虑的情况,应重复测试以排除假阴性。
核酸检测是较新的艾滋病检测方法之一,也被称为病毒核酸检测。
它通过检测病毒的RNA或DNA来直接诊断感染与否,而不依赖于人体免疫反应。
核酸检测通常使用聚合酶链反应(PCR)或核酸杂交亚式(NAAT)等高灵敏度的技术。
与抗体检测不同,核酸检测可以在感染后的早期就进行,因为它能够直接检测到病毒的遗传物质。
核酸检测的优点是准确性高,并且可以用于早期感染或无抗体反应的情况。
然而,核酸检测的成本较高,且需要复杂的实验设备和实验技术,因此在资源有限的地区可能无法广泛应用。
此外,对于高危人群、急需诊断或追踪病毒感染情况的个体,还可以使用其他检测方法,如新一代测序技术(NGS),以及p24抗原检测等。
NGS是一种高通量的DNA测序技术,可以对病毒的基因组进行测序,并识别其序列特征,有助于病毒变异和传播的研究。
p24抗原检测是一种检测病毒核心蛋白(p24)的方法,该蛋白在病毒感染的早期就产生,并且可以在抗体出现之前检测到。
此外,还有一些新开发的技术,如血液可视化检测装置(blood viscometer)和光纤免疫传感技术(fiber optic immunoassay),也在艾滋病的早期诊断和病毒监测方面显示出潜力。
艾滋病(HIV)检测方法汇总一、艾滋病简介艾滋病日的概念来源于1988年,全球卫生部大臣关于艾滋病预防计划的高峰会议上(W orld Summit of Ministers of Health on Programmes for AIDS Prevention)提出的。
从此,这个概念被全球各国政府、国际组织和慈善机构采纳。
从此,这个概念被全球各国政府、国际组织和慈善机构采纳。
自1981年世界第一例艾滋病病毒感染者发现至今,短短20多年间,艾滋病在全球肆虐流行,已成为重大的公共卫生问题和社会问题,引起世界卫生组织及各国政府的高度重视。
为号召全世界人民行动起来,团结一致共同对抗艾滋病,1988年1月,世界卫生组织在伦敦召开了一个有100多个国家参加的“全球预防艾滋病”部长级高级会议,会上宣布每年的12月1日为“世界艾滋病日” (World Aids Day) ;1996年1月,联合国艾滋病规划署(UNAIDS)在日内瓦成立;1997年联合国艾滋病规划署将“世界艾滋病日”更名为“世界艾滋病防治宣传运动”,使艾滋病防治宣传贯穿全年。
二、艾滋病(HIV)检测方法(一)抗体检测主要有酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光试验(IFA)。
ELISA用去污剂裂解HIV或感染细胞液提取物作抗原,IFA用感染细胞涂片作抗原进行抗体检测,如果发现阳性标本应重复一次。
为防止假阳性,可做Westernblot(WB,蛋白印迹法)进一步确证。
WB法是用聚丙烯酰胺凝胶电泳将HIV蛋白进行分离,再经传移电泳将不同蛋白条带转移于硝酸纤维膜上,加入病人血清孵育后,用抗人球蛋白酶标抗体染色,就能测出针对不同结构蛋白抗体,如抗gp120、gp41、P24抗体,特异性较高。
快速检测法,也称为金标法,也是抗体检测的一种方法,根据免疫层析法的原理,用于HIV抗体检测的定性检测。
(二)抗原检测用ELISA检测P24抗原,在HIV感染早期尚未出现抗体时,血中就有该抗原存在.由于P24量太少,阳性率通常较低。
现有用解离免疫复合物法或浓缩P24抗原,来提高敏感性。
(三)核酸检测用PCR法检测HIV基因,具有快速、高效、敏感和特异等优点,目前该法已被应用于HIV感染早期诊断及艾滋病的研究中。
(四)病毒分离常用方法为共培养法,即用正常人外周血液分离单个核细胞,加PHA刺激并培养后,加入病人单个核细胞诊断及艾滋病的研究中。
三、艾滋病(HIV)抗体、抗原检测HIV抗体一般在人感染后几周逐渐出现,可延续至终生[15],血清学试验分为初筛和确认试验。
最常用的初筛试验和确认试验分别是酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验(WB)。
常规实验方法:酶联免疫吸附试验、免疫印迹试验(WestBlot)、间接免疫荧光法(IFA)。
快速检测方法:明胶颗粒凝集试验、斑点免疫结合试验、P24抗原的检测、分子生物学方法、RT?PCR检测法、荧光实时PCR检测技术、支链DNA(bDNA)、连接酶酶促链式反应(LCR)、核酸序列依赖性扩增(NASBA)、转录介导的扩增(TMA)1、酶联免疫吸附试验ELISA法的基本原理是免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物,酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、分光光度计观察结果。
初筛用的HIV ELISA试剂目前已经发展到第四代检测试剂。
第一代试剂主要以病毒裂解物或部分纯化的病毒抗原包被反应板,以检测血清中的抗体。
由于包被的抗原不很纯,假阳性率较高。
第二代试剂使用基因工程方法得到的重组抗原和合成肽包被反应板,由于纯化抗原的使用,特异性有了很大提高。
第三代试剂使用双抗原夹心法检测抗体,进一步提高了敏感性。
第四代试剂则在第三代的基础上进一步增加了P24抗原的检测,把HIV抗原和抗P24的抗体同时包被反应板,可同时检测血清中的HIV抗体和P24抗原。
2、免疫印迹试验免疫印迹试验主要用于确认试验,基本原理是HIV全病毒抗原经过SDS?PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后再把这些已经分离的不同蛋白带电转移到硝酸纤维素膜上。
将此膜切割成条状,每一条硝酸纤维素膜上均含有经电泳分离过的HIV病毒抗原。
将待检血清样品用稀释液稀释成1/100,再把它直接加到硝酸纤维素膜上,恒温震荡,使其充分接触反应,血清中若含有抗HIV抗体,就会与膜条上的抗原带相结合。
加入抗人IgG酶结合物和底物后,即可使有反应的抗原?抗体结合带呈现紫褐色,根据出现条带情况判定结果。
有报告说,免疫印迹试验的特异性不是很好, 有大约2%的假阳性率,但免疫印迹试验依然是目前最常用的HIV确认试验。
3、免疫荧光试验(IFA)基本原理为应用H?9或HUT?78培养细胞作为载体,用HIV感染细胞,该细胞内就会含有HIV抗原,将HIV感染的淋巴细胞涂于玻片上,固定,制备为抗原片,加入待检血清,待检血清中的抗HIV抗体与抗原结合后,再与荧光素标记的抗人Ig结合,在荧光显微镜下可见到细胞内有黄绿色荧光。
4、明胶颗粒凝集试验(PA)PA的基本过程是先将样品稀释,然后分别加入经抗原致敏的和未致敏的明胶颗粒,混匀后保温(一般为室温)。
当血清中有HIV抗体存在时,经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原抗体反应,根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。
PA操作简便,无需特殊仪器设备,适合对少量标本的检测。
5、斑点印迹试验(或免疫层析/或渗滤)斑点印迹试验一般采用硝酸纤维素膜作固相载体, 用HIV抗原包被于固相载体,加入待测标本(可为血清、血浆、尿液和其他体液),一定温度反应后洗去未结合于固相载体上的标本,包被抗原和被检血清中抗体结合,用胶体金(或胶体硒)代替底物连接在葡萄球菌蛋白A上,金标记蛋白A具有与人I g结合的能力,因而可与被捕获的HIV抗体结合。
若样品中有HIV抗体,则薄膜上就会产生一桔红色斑点(或线条),一般3~10 min出结果,特异性较好, 较为适宜于偏远地区临床用血检测,但不适于城市地区的献血员筛查。
四、艾滋病(HIV)检测时间艾滋病检测的最佳检测时间,对于艾滋病患者来说是一个非常重要的事项,因为患有艾滋病的人,在早期极少出现让人们感到异常的症状,所以常常被人们所忽略。
一直到了发现症状的时候,艾滋病就已经到了晚期了,治疗已经极为不容易了。
所以在感染早期,及时的进行艾滋病检测,是一项很重要的事项,他能帮助患者及早的发现艾滋病的症状高危后,一般需要2-4周时间就可以检测出艾滋病HIV抗体。
高危行为后,一般需2周时间即可检测出艾滋病抗体。
也就是说2周后就适合作艾滋病检测。
时间越往后,检测的准确性就越高(不同时间检测准确率、。
绝大多数被HIV感染的人,在4周后就能产生足够多的抗体,这个数量能够满足使用目前的HIV抗体测试方法检测出HIV阳性。
五、艾滋病(HIV)潜伏期自1981美国报道首例艾滋病患者以来, 艾滋病在全球范围内广泛传播, 严重威胁着人类的健康。
尽管全世界对艾滋病的防治方法进行了大量的研究, 但至今仍未获得有效的预防药物和治方法, 因此对感染者从感染到艾滋病发病这一段潜伏期时间长度的研究对于了解艾滋病的然史、评价治疗效果、进行流行预测等方面都有着重要的意义。
30年以来, 针对监测系统的不同监测数据, 对艾滋病潜伏期进行了大量的研究,提出了多种不同的方法, 不同方法对艾滋病潜伏期得出了不同的数据,所得到的艾滋病潜伏期结果普遍都在8-9年。
至今为止,除了极少数未被确认的个体报告之外,还没有任何可证实的资料证明有短于1年或者长达20年的艾滋病潜伏期存在。
编辑整理!六、艾滋病(HIV)的临床分期1、急性期大部分病人在艾滋病感染初期,没有任何症状。
但有一部分病人在感染数天至3个月后,有如流行性流感冒样或传染性单核细胞增多症样症状:发热、赛战、关节疼、肌肉痛、呕吐、腹泻、喉痛等,一般在艾滋病毒感染后2至8周出皮疹,血中出现艾滋病毒抗体。
最长约半年后出现抗体。
2、无症状感染期在急性期后,没有临床症状,为无症状的健康人,但体内有艾滋病毒,又称为艾滋病潜伏期。
此后,8年内将有50%的人发展为艾滋病。
有报告称,1至7年内从感染病毒到发病,其比例依次为1.5%,5%,10%,15%,25%,30%和40%。
儿童艾滋病潜伏期短,平均为12个月。
这时用很敏感的方法检测艾滋病感染者浆中的病毒核醒量,可预测5年内发病的机率。
3、艾滋病前期无症状感染期之后,出现明显的与艾滋病有关的症状和体征,有人称之为艾滋病相关综合征,也有人称之为持续性全身性淋巴腺病等。
主要表现在:持续性的淋巴腺肿大,开始于颈部,其次为腋、腹股沟淋巴结等。
一般少有两处以上淋巴结肿大者。
体重减轻10%以上。
周期性发热(38摄氏度左右),常持续数月。
夜间盗汗。
发生单纯疱疹病毒、白色念珠菌(属真菌类)等各种感染。
4、艾滋病期由于免疫系统被严重破坏,各种致命性机会感染、肿瘤等极易发生。
病变可表面在肺、口腔、消化系统、神经系统、内分泌系统、心脏、肾脏、眼、关节、皮肤等等。
已发生机会性感染者,平均存活期为9个月。
七、病毒检测方法的发展1、核酸检测方法研究进展随着分子生物学技术的发展,核酸检测越来越受到人们的重视并将其与抗原抗体反应的高特异性结合起来形成了免疫PCR技术。
这一技术具有特异性强和灵敏度高的特点,可用于单个抗原的检测。
这促进了应用PCR技术进行HIV核酸检测的快速发展。
自2001年起[25],COBAS Ampliscreen HIV? 1 Test等4种HIV核酸检测技术通过了FDA的批准,作为进筛选分析技术来进行HIV?1的检测。
最近,实时荧光PCR检测技术的应用使HIV核酸检测技术又进入到一个新境界[26]。
通过这种技术,不但可以进行定性检测,更重要的是可以进行定量检测。
Barletta等将这一技术应用到HIV的检测中,大大降低了病毒载量的检测限(0.66个拷贝相当于0.33个病毒粒子)。
2002年4月国家药品监督管理局(SDA)批准了第一个HIV荧光PCR检测试剂盒。
2、p24抗原检测方法研究进展随着检测灵敏度不断提高, p24抗原的检测逐渐从主要用于在窗口期辅助早期诊断和进一步缩短窗口期,发展到用于病毒载量测定。
目前,p24抗原在以下几方面都有重要应用:HIV?1抗体不确定或窗口期的辅助诊断;HIV?1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断;第4代HIV?1抗原/抗体ELISA试剂检测呈阳性反应,但HIV?1抗体确认阴性者的辅助诊断;监测病程进展和抗病毒治疗效果。
但现有监测病程进展和抗病毒治疗效果均采用昂贵、操作复杂的病毒RNA测定方法。
我国HIV/AIDS患者绝大部分是在基层,检测1次病毒载量需要上千元(约1 500元),很难在基层普及,对疾病的治疗和控制很不利。