第四章 蛋白质与多肽N-端氨基酸测定-修改2[1]
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第四章蛋白质化学知识点:一、氨基酸蛋白质的生物学功能氨基酸:酸水解:破坏全部色氨酸以及部分含羟基氨基酸。
碱水解:所有氨基酸产生外消旋。
氨基酸的分类:非极性氨基酸(8种):Ala、Val、Leu、Ile、Pro、Met、Phe、Trp;极性氨基酸(12种):带正电荷氨基酸Lys、Arg、His;带负电荷氨基酸Asp和Glu;不带电荷氨基酸Ser、Thr、Tyr、Asn、Gln、Cys、Gly。
非蛋白质氨基酸:氨基酸的酸碱性质:氨基酸的等电点,氨基酸的可解离基团的pK值,pI的概念及计算,高于等电点的任何pH值,氨基酸带有净负电荷,在电场中将向正极移动。
氨基酸的光吸收性:芳香族侧链有紫外吸收,280nm,氨基酸的化学反应:α-氨基酸与水合茚三酮试剂共热,可发生反应,生成蓝紫化合物。
茚三酮与脯氨酸和羟脯氨酸反应则生成黄色化合物。
二、结构与性质肽:基本概念;肽键;肽;氨基酸残基;谷胱甘肽;肽键不能自由转动,具有部分双键性质;肽平面蛋白质的分子结构:一级结构,N-末端分析,异硫氰酸苯酯法;C-末端分析,肼解法蛋白质的二级结构:是指蛋白质分子中多肽链骨架的折叠方式,包括α螺旋、β折叠和β转角等。
超二级结构:超二级结构是指二级结构的基本结构单位(α螺旋、β折叠等)相互聚集,形成有规律的二级结构的聚集体。
结构域:蛋白质的三级结构:蛋白质的三级结构指多肽链中所有氨基酸残基的空间关系,其具有二级结构或结构域。
球状蛋白质分子的三级结构特点:大多数非极性侧链(疏水基团)总是埋藏在分子内部,形成疏水核;大多数极性侧链(亲水基团),总是暴露在分子表面,形成一些亲水区。
蛋白质的四级结构:蛋白质的四级结构是由两条或两条以上各自独立具有三级结构的多肽链(亚基)通过次级键相互缔合而成的蛋白质结构。
变构蛋白、变构效应;血红蛋白氧合曲线。
维持蛋白质分子构象的化学键:氢键,疏水键,范德华力,盐键,二硫键等三、蛋白质的分子结构与功能的关系蛋白质的分子结构与功能的关系:一级结构决定高级结构,核糖核酸酶的可逆变性;变性、复性、镰刀型红细胞贫血症的生化机理;四、蛋白质的性质及分离纯化胶体性质:双电层,水化层; 1. 透析;2. 盐析;3. 凝胶过滤;酸碱性质: 1. 等电点沉淀; 2. 离子交换层析; 3. 电泳蛋白质的变性:蛋白质变性后,二、三级以上的高级结构发生改变或破坏,但共价键不变,一级结构没有破坏。