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天然药物化学实验指导一、前言天然药物化学实验是整个天然药物化学课的重要组成部分。
其主要目的是：通过试验，检验在课堂上所学的理论知识。
使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。
通过试验，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。
在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。
天然药物化学实验要求学生掌握以下技能：提取分离方面要求掌握常用的经典方法的原理及操作。
其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、反流分布法）、重结晶法等。
掌握纸色谱、柱色谱（包括吸附柱、离子交换柱等）的原理和基本操作。
鉴定方面化学方法①掌握一般定性反应在鉴定中的用②掌握重要衍生物（乙酰化物、甲基化物生物碱盐类等）的制备方法及其在结构鉴定中的应用。
③了解重要降解反应的原理及应用。
光谱方法了解UV、IR、NMR、MS在天然物结构测定中的应用。
目前要求学员能了解黄酮类化合物的UV、NMR波谱、蒽醌的IR以及麻黄生物碱的NMR谱特征。
二、天然药物化学实验须知在天然药物化学实验中，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、甚至爆炸性药品，试验操作又常在加温加压等情况下进行，需要各种热源、电器或其他仪器，操作不慎易造成火灾、爆炸、中毒、触电等事故。
但只要加强爱护国家财产和保障人民生民安全的责任心，提高警惕，消除隐患，注意实验规则，事故是可以避免的。
实验规则试验前必须预习实验内容，了解原理和操作规程。
随时记录试验应记的项目，以作正式报告。
试验前应清点并检查仪器是否完整，装置是否正确，合格后方可进行试验。
试验时不准做无关的事情，严禁吸烟，不得擅自离开，并应随时注意反应情况，仪器有否漏气，破裂等。
药品仪器都是国家财产，须节约爱护使用，公用物品，用完后立即放回原处。
不可调错瓶塞，以免污染，仪器要洗刷干净。
操作易燃性有机溶剂，回流、蒸馏、减压蒸馏时，不能明火直接加热，要放沸石或一端封死的毛细管，若在加热时发现无沸石则应冷却后再加，防止爆沸冲出。
天然药物化学实验与指导编者：杨长水于红艳扬州大学医学院药学系目录实验室安全守则 (1)实验一掌叶大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定 (3)实验二槐花米中芦丁的提取、分离和鉴定 (8)实验三人参皂苷的提取、分离与结构鉴定 (11)实验四粉防己生物碱的提取、分离与结构鉴定 (14)附录 (18)1. 常用有机溶剂及有关数据表 (18)2. 常用层析材料及有关数据表 (21)实验室安全守则天然药物化学实验是天然药物化学课程的重要组成部分，是更好掌握天然药物有效成分提取、分离和检验的基本操作技能，是提高学生分析和解决问题能力，使同学进一步理论联系实际，养成严密科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节，为此，提出如下实验须知：1. 遵守实验制度、维护实验室安全。
不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏电等事故的发生。
若发生事故应立即报告指导教师。
2. 实验前做好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天的计划，争取准时结束，实验时应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象以及有关的重量、体积、温度或其他数据，应立即如实记录。
实验完毕后认真总结，写好报告，提取纯化所得单体产物包好，贴上标签（写下日期、样品名称、纯度、m.p.、b.p.、TLC、重量）交给老师。
3. 实验室中保持安静，不许大声喧哗，不许抽烟，不迟到，不随便离开。
实验台面应保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净后，存放在指定位置。
废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。
4. 公用仪器及药品用完后立即归还原处，破损仪器应填写破损报告单、注明原因。
将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电（是否关闭水龙头，拔下电插头）。
关闭门窗。
23实验一 掌叶大黄中蒽醌类成分的提取、分离和鉴定【简介】药典收载的正品大黄为蓼科植物掌叶大黄（Rheum palmatum L.）、唐古特大黄（R.tanguticum Maxim.ex Balf.）及药用大黄（R. officinale Baill.）的根及根茎。
天然药物化学实验报告实验报告：天然药物化学实验摘要：本实验采用天然药物提取法，以姜黄素为目标化合物，通过溶剂提取、分离纯化和结构鉴定等步骤，成功地从姜黄中提取出姜黄素。
利用紫外-可见光谱法对姜黄素进行了定性和定量分析，并对其结构进行了确认。
实验结果表明，本实验方法可用于姜黄素的提取和纯化。
引言：天然药物在中药领域有长久的历史，并且越来越被广泛应用于药物研究和治疗中。
本实验旨在利用化学方法从天然药物中提取目标化合物，以姜黄素为例进行研究。
姜黄素是姜黄根茎中的有效成分，具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种生物活性。
实验材料与仪器：1.实验材料：鲜姜黄，无水乙醇，乙酸，氯仿，丙酮等。
2.实验仪器：电子天平，恒温槽，高速离心机，紫外可见分光光度计等。
实验步骤：1.预处理姜黄样品：将鲜姜黄切碎并研磨成细粉，加入无水乙醇溶液中，将其置于40℃的恒温槽中提取一段时间。
2.溶剂提取：将提取液过滤，所得过滤液用氯仿萃取，重复该步骤两次，所得的有机相合并，并经旋转蒸发机蒸发浓缩。
3.分离纯化：将提取液溶解在正己烷中，通过硅胶柱层析法进行分离纯化。
首先用正己烷进行洗脱，之后用氯仿-甲醇（20:1）溶液进行洗脱。
4.结构鉴定：通过紫外-可见光谱法进行姜黄素的定性和定量分析，利用相对滴定法测定含量，并与标准品对照鉴定。
实验结果：1.提取纯化：通过溶剂提取和硅胶柱层析法，成功地从姜黄中提取出纯化的姜黄素。
提取纯化过程中，利用纸色谱法监测样品的纯化情况。
2.结构鉴定：利用紫外-可见光谱法对姜黄素进行了定性和定量分析。
通过比对标准品和实验样品的吸收峰位置和峰高，确认了所提取的化合物为姜黄素。
讨论与结论：本实验通过天然药物提取法和硅胶柱层析法成功地从姜黄中提取纯化了姜黄素，并进行了结构鉴定。
实验结果显示，本实验方法可用于姜黄素的提取和纯化，并通过紫外-可见光谱法对姜黄素进行了定性和定量分析。
本实验为天然药物的提取和纯化研究提供了一种有效的方法，对于深入研究姜黄素的药理作用和临床应用具有重要意义。
天然药物化学实验指导书前言天然药物化学实验是整个天然药物化学课的重要组成部分。
其目的主要是：1．通过实验检验在课堂上所学的理论知识。
使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。
2．通过实验训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。
3．通过设计性实验，培养学生独立从事科研工作的基本能力。
在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。
天然药物化学实验要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面1．要求掌握常用的经典方法的原理及操作。
其中包括液—固提取法（浸渍、渗漉、煎煮、回流提取）、液—液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法）、重结晶法等。
要求学生了解常见溶剂的性能，并能较好地选择提取溶剂。
２．掌握纸色谱、柱色谱（包括吸附柱、离子交换柱）、薄层色谱的原理及基本操作。
以后要创造条件，使学生能逐步地学到气相色谱、高效薄层及高压液相的基本操作。
（二）鉴定方面１．化学方法①掌握一般定性反应在结构鉴定中的应用。
②掌握重要衍生物（乙酰化物、甲基化物生物碱盐类等）的制备方法及其在结构鉴定中的应用。
③了解重要降解反应的原理及其在结构鉴定中的应用。
（芦丁的酸水解）２．光谱方法了解UV、IR、NMR、MS在天然产物结构鉴定中的应用。
目前要求学生能了解黄酮类化合物的UV、NMR波谱，蒽醌的IR、NMR谱特征。
通过设计性实验逐步培养学生独立进行实验的能力。
对某些实验内容，要求学生有一定的设计能力，为今后从事科研工作打下必要的基础。
本实验指导书主要是供理科基地班天然药物化学实验的参考书。
天然药物化学实验须知在天然药物化学实验中，所用的药品多数是挥发性、易燃、有毒、有腐蚀性、刺激性、甚至爆炸性药品，实验操作又经常在加温、加压等情况下进行，需要各种热源、电器或其他仪器，操作不慎易造成火灾、爆炸、中毒、触电等事故。
但只要加强责任心和防患意识，提高警惕、消除隐患，注意实验规则，事故是可以避免的。
天然药物化学实验教程天然药物化学实验是研究和分析天然药物化学成分和活性的关键领域之一。
下面是一些关于天然药物化学实验的参考内容：1. 实验目的：天然药物化学实验的目的通常是研究和分析天然药物的化学成分、药效和药理活性，探索其潜在的药物作用机制，为药物研发和临床应用提供理论依据。
2. 实验步骤：天然药物化学实验的一般步骤包括药材采集、样品制备、化学成分分离和鉴定、活性测试等。
具体步骤根据研究对象和实验目的的不同而有所差异。
3. 药材采集和样品制备：药材的采集应根据其生长季节和部位选择合适的时间和地点。
采集后要进行鉴定和干燥处理，以保证样品的纯度和质量。
4. 化学成分分离和鉴定：常用的化学成分分离方法有溶剂萃取、柱色谱、薄层色谱等。
分离得到的化合物可以通过质谱、核磁共振等方法进行结构鉴定，以确定其化学成分和结构特征。
5. 活性测试：常用的活性测试方法包括抗氧化活性、抗炎能力、抗菌活性、抗肿瘤活性等。
这些测试可以通过体外实验、细胞实验和动物实验等手段进行。
6. 分子模拟和药效预测：结合计算机辅助药物设计技术，可以进行分子模拟和药效预测，探究天然药物的可能结合靶点和作用机制，以指导后续的药物研发工作。
7. 质量控制和质量标准：天然药物化学实验还需要考虑质量控制和质量标准的建立，包括原料药的质量评价、指纹图谱的建立、有效成分的含量测定等，以保证药材的质量和药物的稳定性。
8. 毒理学评价和安全性研究：天然药物的安全性评价是非常重要的一步，包括毒理学评价、长期毒性实验、代谢动力学研究等。
实验过程中需要遵循伦理和安全的要求，确保实验结果的准确性和可靠性。
9. 文献研究和结果分析：天然药物化学实验还包括对相关文献的研究和结果的分析，以对已有研究成果进行总结和归纳，为进一步的研究提供参考依据。
10. 结论和展望：实验结果的结论和展望是天然药物化学实验中的重要部分，通过对实验结果的分析和解释，得出实验结论，并对未来的研究方向和应用前景进行展望。
《天然药物化学实验》课程课程编号：实验指导书主撰人解军波审核人天津商业大学生物技术与食品科学学院二零零九年十月前言1．实验总体目标天然药物是人类防病治病药物的一个重要来源。
提取、分离天然药物中具有生理活性的化学成分，是天然药物化学研究的一个重要课题。
天然药物化学实验主要是学习天然药物有效成分的提取、分离、纯化、鉴定的方法。
通过实验，加深学生对理论知识的深入理解，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，为将来从事相关研究打下坚实的实践基础。
⒉适用专业年级制药工程专业三年级（第五学期）⒊先修课程分析化学、有机化学⒋实验课时分配⒌实验环境实验室的标准温度为20℃,实验室内的相对湿度一般应保持在50－70％。
实验室的噪音、防震、防尘、防腐蚀等方面的环境条件应符合在室内开展的检定项目之检定规程。
⒍实验总体要求提取、分离、纯化、鉴定是贯穿于天然药物化学实验的全过程的基本操作单元。
正确掌握和灵活处理各个环节的操作技能是训练学生严格认真的科学态度与良好工作习惯，促进理论与实践结合的一个重要环节。
通过本实验让学生掌握、熟悉天然药物化学提取、分离、鉴识技术的基本原理与基本方法，能够进行日常的天然药物研究工作。
⒎本实验的重点、难点及教学方法建议为了保证实验的正常进行和培养学生良好的实验作风及保证实验质量，学生必须遵守下列要求：1、实验前必须充分预习实验讲义，明确实验目的、要求，防止实验盲目性，讲求实验质量。
2、实验时要严格按照规范操作进行，仔细观察实验现象，认真记录有关数据。
要善于思考，学会运用所学理论知识解释实验现象，研究实验中的问题。
3、重视安全操作，遵守实验室安全守则，使用易燃、易爆、有毒物品时要小心谨慎，避免事故发生。
4、要认真写好实验报告，实验报告要清楚、简练、整洁。
目录实验一、芦丁的提取、分离与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1 实验二、汉防己生物碱的提取、分离、鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．3 实验三、甘草酸的制备与鉴定．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6实验一芦丁的提取、分离与鉴定一、实验目的1了解黄酮类化合物的一般性质。
药用植物学实验指导适用专业：（本科）药学、药物制剂（专科）药物制剂技术郑州华信学院医学院药学系药学教研室目录实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造 (2)实验二植物细胞后含物——淀粉粒、草酸钙结晶体 (6)实验三保护组织和分泌组织 (9)实验四机械组织和输导组织 (12)实验五根的显微构造 (15)实验六单子叶植物地上茎和地下茎观察 (18)实验七双子叶植物茎的初生构造和次生构造 (20)实验八大黄、甘草、人参的鉴定 (22)实验一显微镜的构造、使用和保护以及植物细胞的构造一、实验目的：1.了解显微镜的基本构造并掌握显微镜的正确使用方法和保养。
2.掌握撕取表皮的制片方法。
3.掌握植物细胞的基本构造。
二、实验仪器与材料1.仪器：生物显微镜。
2.用具：镊子、刀片、解剖针、载玻片、盖玻片、玻璃皿、吸水纸、擦镜纸、棉布块。
3.材料：洋葱鳞茎的磷叶或大葱磷叶。
4.试液：蒸馏水、稀碘液、10%硝酸钾溶液。
三、实验内容：（一）显微镜的构造1.机械部分次部分是显微镜的骨架，是安装光学部分的基座。
包括：镜座、镜柱、镜臂、镜筒、物镜转换器、载物台、调焦装置等。
（1）基座是显微镜的底座，支持整个镜体，使显微镜放置平稳。
（2）基柱镜座上面直立的短柱，支持镜体上部的各部分。
（3）镜臂弯曲如臂，下连镜柱，上连镜筒，为取放镜体时手握的部分。
直筒显微镜的镜臂下端与镜柱连接处有一活动关节，可使镜体在一定范围内后倾，便于观察。
（4）镜筒上端置目镜，下端与物镜转化器相连。
（5）物镜转换器连接于镜筒下端的圆盘，可自由转动，盘子有3－4个安装物镜的螺旋孔。
当旋转转换器时，物镜即可固定在使用的位置上，保证物镜与目镜的光线合轴。
（6）载物台放置玻片标本的平台，中央有一通光孔，两侧有压片夹或机械移动器，既可固定玻片标本，也可以前后左右各方向移动。
（7）调焦装置调节物镜和标本之间的距离，得到清晰的物像。
在镜臂两侧有粗细调焦螺旋各1对，旋转时可使镜筒上升或下降，大的一对为粗调焦螺旋，旋转一圈可使镜筒移动2mm左右。
天然药物化学实验指导电子版1、从实验微型化出发，改变实验条件微型实验不仅仅是表现为减量和小型化，更是对实验装置的设计改造，对实验方案的改进与探索。
例如我们常常需要根据实验要求和具体情况，寻找适合材料或方法来改善方案，这也是发挥师生的自主创新精神的好机会。
为了易于过滤器，我们从微型化启程，以增加过滤器溶液的体积。
结果辨认出溶液量增大后虽然有利于过滤器，但实验效果并不好，难于观测至现象。
经过进一步实验对其中的一些细节展开了改动：原料表示样量由以前的40 g增大至2 g（考量槐米中芦丁的含量、估算的抽取比非后面的重结晶和鉴别实验）；分别用饱和状态石灰水替代石灰乳，15%hcl替代淡盐酸调节ph（原因就是溶液用量增大后，酸碱调节ph的用量增加，所以必须减少酸碱的浓度，否则溶液ph易过量）；ph由以前的4～5调节至ph=3～4（目的就是增加酸沉时间）；冷却时用表面皿遮住烧杯以增加水分的损失。
条件发生改变后，实验教学质量和效果都获得了很大提升。
2、从教学实践现状出发，激发学生兴趣芦丁的抽取拆分就是实验大纲中一个必搞项目。
芦丁存有比较广为的用途，在医药上用作高血压病的辅助化疗，在食品中搞抗氧化剂，化妆品上搞防晒霜成分之一。
因其在槐米中含量为20%～25%左右，所以通常采用槐米搞抽取实验原料。
芦丁抽取存有几种方法：甲醇流入抽取法、水轻易抽取法、超声波抽取法等。
甲醇抽取法虽然很快就能够观测至晶体，但抽取率为很低；水抽取法时间较长，难引致芦丁水解，抽取率为不及碱提酸沉法；超声波抽取抽取率为较低但杂质含量多，收率较低。
综合以上因素，我们采用工业上以的碱提酸沉法。
能够从天然植物中抽取出来有效率的活性成分（芦丁的价格2.00元/mg），学生非常有兴趣，但经过制药工程、年级学生人的`教学课堂教学，辨认出教学效果不是较好。
主要原因就是：试液困难，真空泵及水槽中到处就是液泡；因溶液量小调节酸碱度需以石灰乳及浓盐酸，不易控制，而且教室中盐酸的气味很难闻；酸沉及重结晶的时间较长，很难在规定的教学时间内顺利完成教学任务，通常须要在1～2 d的时间顺利完成；大部分同学搞出的产品颜色呈圆形褐色或偏绿色与标准品颜色差距很大；大量的残渣很浪费，而且不好处置。
天然药物化学实验指导全文天然药物化学实验注意事项天然药物化学试验的特点是实验周期长,所用溶剂和试剂品种多,而且用量较大。
许多有机溶剂具有易燃、有毒、腐蚀性,刺激性和爆炸性等特点。
在实验操作过程中又经常需要加热或减压等操作,学生将接触各种热源和电器。
如果操作不慎,易引起中毒、触电、烧伤、烫伤、火灾、爆炸等事故。
所以要求每个实验操作者,必须加强爱护国家财产和保障人民生命安全的责任心,严格遵守操作规程,树立严密的科学实验态度,提高警惕,消除隐患,预防事故的发生。
为了确保实验的安全进行,特作如下要求:一、实验前要必须充分预习实验内容,明确实验原理、操作步骤及注意事项。
实验开始前应检查仪器是否完整无损,装置是否正确,经检查合格后方可开始实验。
二、实验时要保持室内整齐、清洁、安静。
不准做与实验无关的事情,不得擅自离开岗位。
在实验过程中应密切观察实验进程是否正常,仪器又无漏气,破裂等现象。
三、倒取和存放易燃性有机溶剂时,要远离火源。
不得随意将易燃性、易爆性的有机溶剂及药品倒入水槽或污水缸内。
不得在烤箱内烘烤留有易燃性有机溶剂的仪器或物品。
四、使用精密仪器及电气设备时,应先了解其原理及操作规程,检查好电路,按操作规程进行。
遇到不明了的问题应及时向老师请教,切忌自作主张,乱倒以仪器。
电线及仪器不应放在潮湿处,不要用湿手接触电器。
电器用完后,应立即清理,关好电源。
五、回流或蒸馏易燃性有机溶剂时,应检查冷凝水是否畅通,仪器装置是否漏气。
不得用明火直接加热,应根据其沸点选用水浴、油浴或砂浴。
蒸馏溶剂时要加入沸石,否则将发生爆沸。
添加溶剂时要移开水浴,待溶剂冷却后再加,并应重新加沸石。
六、实验室中常用的苯、卤代苯、苯酚、苯胺、甲醇、二硫化碳、氰化物、汞和铅盐等化合物均为有毒或剧毒药品。
人体中毒的途径一般为消化道、呼吸道或皮肤吸收。
所以取用毒剧药时要注意切勿洒在容器外,不要接触皮肤或口腔。
室内要通风良好,产生毒气的操作应在通风厨内进行。
天然药物化学实验指导药化教研室天然药物化学实验指导一．说明天然药物化学是一门实验学科，实验教学占重要地位，通过实验要达到以下目的。
1．能检验学生在课堂上所学的理论知识。
使学生对理论知识的理解更加深入，掌握的更加牢固。
2．训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作和实际工作的基本训练。
3．使学生养成严谨的科学态度和良好的科学作风。
实验中，重点是加强对学生基本技能的训练。
二．实验须知1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。
若发生事故应立即采取措施并报告指导老师。
2．实验前做好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法。
安排的实验计划，争取准时结束，实验过程中应养成及时记录的习惯，凡是观察到的现象和结果及有关数据，应随时如实地记录。
实验完毕，要认真总结，写好实验报告，实验所得的提纯物要包好，贴上标签，交给老师。
3．实验室内应保持安静，不得大声喧嚷，不许抽烟。
进入实验室必须穿工作服，实验过程中，不许随便离开。
4．实验台前应保持整洁，与实验无关的物品不得放在台前。
实验中废弃的固体物，要丢入废物桶内。
5．爱护仪器，节约药品，仪器损坏后应填写报损单，注明原因，由指导教师按规定处理。
6．实验过程中要节约用水、用电。
7．每次实验结束后，值日生应将实验室打扫干净，倾倒废物桶，关好水、电、门窗，方可离去。
实验一虎杖蒽醌类成分及白黎芦醇苷的提制和鉴定虎杖系蓼科蓼属植物polyganum cuspidetum siebet zucc.（即Reynoutrin japonica Houobluyn）的根茎。
又名阴阳莲。
民间用于消炎、杀菌、利尿、通经和镇痛。
近年来用于烫伤、止血、消结石和降血脂均有疗效。
虎杖根茎中含有大量的蒽醌类成分和二苯乙烯类成分。
后者具有降血脂的作用。
一、部分已知成分的物理性质1．大黄酚（chrysophanol）OHO OHCH3O金黄色六角形结晶（丙酮中结出）或针状结晶（乙醇中结出），mp196℃，能升华。
不溶于水，易溶于苯、氯仿、乙醚、乙醇、冰醋酸，稍溶于甲醇，难溶于Na 2CO 3和NaHCO 3水溶液可溶于NaOH 及热水溶液。
2．大黄素（Emodin ）HOHO OHCH 3O O橙黄色长针晶（丙酮中结出者为橙色，甲醇中为黄色），mp 256~257℃，能升华，其溶解度如下：Et 2O 0.14%，CCl 4 0.01%，CHCl 3 0.0718%，CS 2 0.009%，几乎不溶于水，易溶于乙醇，可溶于NH 4OH 、Na 2CO 3和NaOH 水溶液。
3．大黄素-6-甲醚（physion ）H 3COHO OHCH 3O金黄色针晶。
mp 207℃。
能升华，溶解性质与大黄酚相似。
4．虎杖苷（polygonln ）为大黄素的苷。
结构未明，可能是混合物，浅黄色针状结晶。
mp 203~205℃。
以甲醇、乙醇或乙酸乙酯重结晶时，若急速冷却，呈胶冻状，多次重结晶后慢慢冷却，得浅黄色针状结晶，不溶于乙醚，难溶于丙酮，可溶于热的乙酸乙酯、热的甲醇或乙醇，冷后均较难溶，可溶于NaHCO 3水溶液，冷水中溶解度不大。
5．大黄素-β-D -葡萄糖苷（Emodin monoglycoside ）mp190~191℃，为浅色针晶（稀乙醇中结出，含一分子结晶水）。
6．大黄素-6-甲醚-8-β-D -葡萄糖苷mp230~2℃，为黄色针晶（稀甲醇中结出）。
7．白黎芦醇（resveratrol ）HO OH OHC C无色针状结晶，mp256~7℃，261℃，264℃，能升华，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、丙酮等。
8．白黎芦醇葡萄糖苷（polydatin, peceid ）HO Oglc OHC C又名3，4，5-三羟基芪-3-β-D -葡萄糖苷，mp225℃，232℃，易溶于甲醇、丙酮、热水，可溶于EtOAc ，稍溶于冷水，但可溶于Na 2CO 3和NaOH 水溶液，难溶于乙醚。
（附注：此化合物具顺，反二种异构体，能够互相转化，所得常是二者的混合物，以反式为多，故前人工作中所报导的熔点有所不同，按本实验方法所得的白黎芦醇苷结晶呈分子结晶水，在130~140℃时先融化，继续加热又固化，至225~6℃全熔）。
二、实验目的1．学习用PH 梯度萃取法分离本性不同的蒽醌类成分。
2．学习脂溶性成分和水溶性成分的分离方法。
3．了解蒽醌类成分的一般性质和鉴别反应。
三、实验原理虎杖中的蒽醌类成分由于结构中羧基和酚羟基数目及位置不同而呈现不同强度的酸性，根据此性质，在用乙醚萃取出脂溶性成分后，以碱度递增的水溶液（5%NaHCO 3，5%Na 2CO 3，2%NaOH ）自乙醚中提出游离蒽醌类成分，达到分离目的。
本实验涉及的知识点：溶剂提取法、萃取、pH 梯度萃取法、色谱检识、重结晶等。
四、实验流程虎 粗 粉醇 提 取 ， 回 收 溶 剂摇 后 放 置制， 结 晶白 梨 芦 醇 苷取酸 化 至 pH2放 置，过 滤强 酸 性 成 分O 3萃 取 左大 素结 晶大 黄 素 精 品萃取同 左 大 黄 素 甲 醚大 黄 酚 收 溶 剂β- 醇鉴识：TLC，定性反应五、实验方法1．乙醇总提取物的制备取虎仗粗粉200g，用95%乙醇回流提取二次（500ml回流1hr，450ml回流30min）。
合并乙醇液。
放置如有沉淀。
抽滤一次，减压回收乙醇至糖浆状（要求乙醇回收至无醇味。
）2．总游离蒽醌的提取将上述糖浆状物转移至三角瓶中，加入30ml水，分散均匀后加100ml乙醚，不断振摇后放置。
将上层乙醚液倾入另一500ml 三角瓶中（切勿将水倒出），或用吸管吸出，瓶中糖浆状物再以乙醚多次萃取，每次萃取的乙醚用量顺序为50ml ，40ml×4，合并乙醚液为总游离蒽醌，乙醚提取的剩余物中含水溶性成分，继续分离，在第4项中做。
3．游离蒽醌的分离（1）强酸性成分的分离上述乙醚液移至分液漏斗中，用5%NaHCO3水溶液（测定pH值）萃取3-4次（40ml，30ml×2或30ml×3），合并碱液层，在搅拌下慢慢滴加6M HCl调pH为2。
放置，抽滤，水洗沉淀至近中性，干燥，得深褐色粉末，为强酸性部分。
（2）中等酸性成分——大黄素的分离以上用NaHCO3 萃取过的乙醚液用5%Na2CO3（测定pH值）萃取5~9次（40ml×3，30ml×4）。
碱液用量视碱水层萃取液色较浅为止。
合并碱液。
加浓HCl调pH为2。
稍放置。
抽滤。
沉滤以水洗至中性，干燥，称重，用甲醇重结晶（1:15~20）。
得大黄素结晶。
mp.256~257℃。
（3）弱酸性成分——大黄酚和大黄素-6-甲醚的分离以上用Na2CO3萃取过的乙醚液用2%NaOH（测pH值）萃取4~5次。
每次20ml，合并NaOH液。
同（2）法处理。
（4）中性成分——甾醇类化合物的分离上述NaOH萃取过的乙醚液，用水洗至中性，以无水Na2SO4脱水，回收乙醚得残留物，即得β-谷甾醇粗品。
用甲醇溶解少量β-谷甾醇，作TCL鉴识用。
4．白黎芦醇葡萄糖苷的分离取“2”中乙醚提取过的糖浆状物，挥去乙醚，置烧瓶中加500ml水，搅拌混合后，直火加热20~30min。
倾出上层液，稍冷过滤。
滤液加活性炭煮沸10min。
趁热过滤。
滤液置蒸发皿中，浓缩至15~20ml。
水液用乙酸乙酯（15ml×2）萃取。
回收乙酸乙酯，残留物用5ml 95％乙醇溶解，作鉴识用。
5．鉴识层析法鉴定（1）游离蒽醌的硅胶TLC对照品：大黄素甲醚或大黄酚，大黄素。
样品：大黄素、大黄素甲醚和大黄酚混合物、强酸性部分。
展开剂：苯-乙酸乙酯（8:2）显色剂：5%KOH喷色。
（2）甾醇类成分的硅胶GTLC。
样品：β-谷甾醇粗品对照品：β-谷甾醇展开剂：环已烷-丙酮（8:2）显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液120℃烘烤数分钟。
定性反应（1）游离蒽醌的反应分别取大黄素、大黄素甲醚和大黄酚混合物少许，强酸性部分用乙醇溶解，做如下反应：A．Bornträgor反应，取试液1ml，滴加2%NaOH液观察颜色。
B．Mg（OAc）2试验，取试液1ml，加入0.5％Mg（OAc）2溶液2～3滴，观察颜色。
（2）甾醇类显色反应Liebberman-Burchard实验：取样品少许，加1mL醋酐溶解，加浓硫酸1滴，观察颜色变化（此试验可在蒸发皿或点滴板上进行）。
（3）白黎芦醇苷的呈色反应取样品少许，用乙醇溶解，做如下反应A．荧光反应：将试液滴在滤纸上，在紫外光下观察荧光。
B．三氯化铁一铁氰化钾反应将试液用毛细管滴在滤纸上，喷上述试剂观察颜色。
C．偶合反应取试液1ml，加0.5ml 5%Na2CO3然后滴入新配制的重氮化试剂1~2滴，观察颜色。
D．Molish反应取试液1ml，加入等体积的10%α—萘酚乙醇液，摇匀，沿试管壁滴加2~3滴浓H2SO4，观察两液界面颜色。
E．G ibb’s反应取试液1ml，滴加0.5% 2，6二氯苯醌4—亚胺氯化物的乙醇溶液2~3滴，并加Na2CO3调PH10左右，观察颜色（G ibb’s 试剂需临用前配制）。
六、思考题1．PH梯度萃取法的原理是什么？适用于哪些中草药成分的分离？2．根据TLC结果，分析各蒽醌类成分的结构与Rf值的关系。
3．试说明各显色反应的机制。
4．此实验在操作方面应注意什么？5．试总结萃取操作程序及注意事项？6．结晶与重结晶操作的关键步骤是什么？7．过滤方式有几种？怎样选用？8．活性炭脱色在什么溶剂中效率最高？为什么加入活性炭时要求溶液不能太热？9．试述有机溶剂和溶液的一般浓缩方式。
10．在水与亲脂性有机溶剂萃取时，为什么样品中不能有醇，体会乙醇总提取液浓缩至无醇味一句的意义。
七、参考文献1．上海药物研究所；中草药有效成分的提取和分离。
2．中国医科院药物研究所：中草药有效成分的研究（第一分册）。
3．药学杂志（日）73：100；195374：379；195476：323；195683：988；19634．中草药通讯2：6；19745．中药材2：；1974。
