血糖含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法

葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法) 产品编号 产品名称 包装

S0201S 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法) 200次

S0201M 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法) 1000次

产品简介：

 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法) (Glucose Assay Kit with O-toluidine)是一种基于葡萄糖与邻甲苯胺的显色反应，通过比色法

超高灵敏度、超宽线性范围检测血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液、饮料等溶液中葡萄糖含量的试剂盒。

 本试剂盒灵敏度高、线性范围极宽、使用便捷。本试剂盒对于在5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)范围的葡萄糖内有良

好线性，并且具有操作便捷、显色稳定、无需煮沸、成本低、适合高通量检测等优点。本试剂盒检测下限可以达到5mg/dl (20µl

样品)，相当于50ng/ml或278µM；检测上限可以达到2000mg/dl (5µl样品)或10,000mg/dl (1µl样品)，相当于20mg/ml (约111mM)

或100mg/ml (约555mM)。本试剂盒既可以轻松检测正常血样中的葡萄糖浓度，也可以检测高血糖血样品。市售常见血糖仪

的葡萄糖浓度检测范围约为1-30mM，相当于约20-600mg/dl，在检测一些过高血糖或过低血糖样品时会存在困难，而本试剂

盒提供了5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)极宽的葡萄糖浓度检测范围。

 本试剂盒所需样品体积小。本试剂盒推荐的样品用量为5-20µl，也可以使用如1-2µl或更小体积的样品。

 本试剂盒特异性好。与常用的葡萄糖氧化酶-过氧化酶偶联(GOD-POD)法相比，由于邻甲苯胺试剂只与醛糖显色，且不受其

它还原性物质的影响，本试剂盒非常适合血清、尿液等溶液中葡萄糖浓度的检测。

 葡萄糖(glucose)，也被称为dextrose或grape sugar，被认为是自然界中分布最广且最为重要的一种单糖。葡萄糖是一种多羟基

1 血糖浓度测定实验报告

分光光度法原理

导读：就爱阅读网友为您分享以下“分光光度法原理”的资讯，希望对您有所帮助，感谢您对的支持! 分光光度法目录?第一节 基本原理?第二节 仪器结构?第三节 显色与测量条件的选择?第四节 723N型分光光度计操作维护第一节 基本原理?在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,主要有: ?红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.5?1000 ?m ,主要用于有机化合物结构鉴定。 ?紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。?可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。光的吸收定律?1.朗伯—比耳定律布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度成正比：A∝b1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有成正比的

2 关系：A∝ c二者的结合称为朗伯—比耳定律：当一束平行的单色光通过均匀、非散射的稀溶液时，溶液对光的吸收程度与溶液的浓度及液层厚度的乘积成正比。朗伯—比耳定律?朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量。它不仅适用于可见光，也适用于紫外光和红外光；不仅适用于均匀非散射的液体，也适用于固体和气体。朗伯—比耳定律，数学表达式?其数学表达式为?式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度?b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；?c：溶液的摩尔浓度，单位mol/L；?ε：摩尔吸光系数，单位L/mol/cm；摩尔吸光系数ε的讨论? 摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1 mol/L、液层厚度为1cm时,该溶液在某一波长下的吸光度；摩尔吸光系数ε的讨论?（1）摩尔吸光系数是吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数；?（2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质 百度搜索“就爱阅读”,专业资料,生活学习,尽在就爱阅读网,您的在线图书馆

BC2500 -- 第 1 页， 共 2 页葡萄糖含量检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC2500规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。试剂名称规格保存条件试剂一液体10mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体25 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体25 mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三1:1等体积混合，用多少配多少；2、试剂一：1μmol/mL葡萄糖溶液。产品说明：葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。葡萄糖氧化酶（Glucose Oxidase，GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶（Peroxidase，POD）催化过氧化氢氧化4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在505 nm 有特征吸收峰。Glucose Gluconic Acid + H2O2H2O2 + 4-Aminoantipyrine Phenol Colored Compound (Quinonemine)(505nm)技术指标：最低检出限：0.0078 μmol/mL线性范围：0.0625-3 μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、超声破碎仪、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、蒸馏水。操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1. 组织的处理：按照组织质量（g）：蒸馏水体积（mL）为1：5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水），研磨成匀浆，置沸水浴中煮沸10 min（盖紧，防止水分散失），冷却至室温后，8000g，25℃离心10min，取上清液备用。2. 细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为500~1000：1 的比例（建议500 万细菌或细胞加入1mL 蒸馏水），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3 s，间隔10 s，重复30次），置沸水浴中煮沸10min（盖紧，防止水分散失），冷却至室温后，8000g，25℃离心10min，取上清液备用。PODGODBC2500 -- 第 2 页， 共 2 页二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至505nm，蒸馏水调零。2、样本测定（在1.5mL EP管中依次加入下列试剂）：试剂（μL）空白管标准管测定管样本100试剂一100蒸馏水100混合试剂900900900涡旋混匀，置于37℃（哺乳动物）水浴锅/恒温培养箱或25℃（其它物种）水浴锅中保温15min后，于505nm波长处读取吸光度A，分别记为A空白、A标准和A测定。计算ΔA测定=A测定-A空白，ΔA标准=A标准-A空白。（空白管和标准管只需测1-2次）。三、葡萄糖含量计算1、按蛋白浓度计算葡萄糖含量（µmol/mg prot）= C ×ΔA测定÷ΔA标准×V样÷（Cpr×V样）=ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr2、按样本质量计算葡萄糖含量（µmol/g 质量）= C ×ΔA测定÷ΔA标准×V样÷（W÷V样总×V样）= ΔA测定÷ΔA标准 ÷W3、按细菌或细胞数量计算葡萄糖含量（µmol/104 cell）= C ×ΔA测定÷ΔA标准×V样÷（500÷V样总×V样）= 0.002×ΔA测定÷ΔA标准C：葡萄糖溶液浓度，1µmol/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；V样：加入的样本体积，100µL=0.1mL；V样总：样本总体积，1mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞数量，500万。注意事项：如果样本吸光值大于1.3，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。相关发表文献：[1] Meixi Peng, Dan Yang, Yixuan Hou,et al. Intracellular citrate accumulation by oxidized ATM-mediated metabolism reprogramming via PFKP and CS enhances hypoxic breast cancer cell invasion. Cell Death and Disease. March 2019; (IF5.959) [2] Jing Li,Yabing Duan,Chuanhong Bian,et al. Effects of validamycin in controlling Fusarium head blight caused by Fusarium graminearum: Inhibition of DON biosynthesis and induction of host resistance. Pesticide Biochemistry and Physiology. January 2019; 153:152-160. (IF2.87)参考文献：[1] Basagni U, Bonicolini F. Ready to use liquid reagent for determining the glucose content in blood: U.S. Patent 5,077,199[P]. 1991-12-31.[2] Kabasakalian P, Kalliney S, Westcott A. Enzymatic blood glucose determination by colorimetry of N, N-diethylaniline-4-aminoantipyrine[J]. Clinical chemistry, 1974, 20(5): 606-607.相关系列产品：BC0340/BC0345 糖原含量检测试剂盒BC2540/BC2545 纤维素酶（CL）活性检测试剂盒BC0330/BC0335 海藻糖含量检测试剂盒BC2490/BC2495 血糖含量检测试剂盒

实验十 血糖的测定

实验十血糖的测定

实验十血糖的测定

实验十血糖的测量

血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol／l～6．1mmol／l之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。

因此，血糖的测量就是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测量按其发展过程及反应原理的相同，大致分后三类：水解还原法，变小合法（主要存有西南边甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边了解两种方法供选择。

一、葡萄糖氧化酶法

1.介绍葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能够展开血糖测量的操作方式。2.掌控血糖测量的临床意义。【原理】

葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase，god)能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶(peroxidase，pod)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即trinder反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下：

葡萄糖+o2+2h2o

2h2o2

2h2o2+4-氨基安替比林+酚

红色醌类化合物

试管、液体、试管架、恒温水浴箱、分光光度计【试剂】

1.0.1mol/l磷酸盐缓冲液（ph7.0）

称取浓硫酸磷酸氢二钠8.67g及浓硫酸磷酸二氢钾5.3g溶800ml蒸馏水中，用1mol/l氢氧化钠（或1mol/l盐酸）调节ph至7.0，然后用蒸馏水吸收至1l。2.酶试剂

称取过氧化物酶1200u，葡萄糖氧化酶1200u，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml中，用1mol/lnaoh调ph至7.0，加磷酸缓冲液至100ml。 复置冰箱留存，4℃可以平衡3个月。3.酚溶液