hTERT、Skp2、TTF-1mRNA联合检测在非小细胞型肺癌早期诊断中的意义

广东医学
２ ０ １ ５年 ５月 第 ３ ６卷第 １ Ｏ期 Ｇｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ Ｍａ ｙ ．２ ０ １ ５ ，Ｖ ｏ １ ．３ ６ ，Ｎ ｏ ．ｉ ０
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１ ５ ２ ３・
ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 、 Ｓ ｋ ｐ ２ 、 Ｔ Ｔ Ｆ一１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ联合 检测 在 非小 细胞 型 肺 癌 早 期 诊 断 中的意 义 水
联合检测外周血 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 、 Ｓ ｋ ． ｐ ２和 １ Ｔ ｒ Ｆ ｍＲ Ｎ Ａ
【 关键词 】 人端粒酶逆 转录酶 ； Ｓ 期激酶相 关蛋 白 一 ２ ； 非小细胞型肺癌
２ ０ ２ ５年我 国肺癌 年死亡 人数 可达 １ ０ ０万 ， 空气 污 染， 特别是 Ｐ Ｍ ２ ． ５ 含 量持续维 持高位 是肺癌 的发病 率 和病死率 明显上升 的罪魁祸首 。但肺 癌早期 发现率 低也是肺 癌高死亡率 的重要 原 因之一 ， 约７ ０ ％ ～８ ０ ％ 的患 者确诊时 已处 于 中晚 期 ， 而且 ３ ０ ％一 ４ ０ ％接受 根 治性手术 治疗的 Ｉ 期非小细胞 型肺癌 （ Ｎ Ｓ Ｃ Ｌ Ｃ ） 患者最 终 复发并 死于复发 。因此 ， 肺癌 的早期 诊断 、 早 期 治 疗成 为改善肺 癌 的预后 和提高 生存率 的重要 措施 。 循环肿瘤 细胞（ ｃ ｉ ｒ ｃ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｎ ｇ ｔ ｕ ｍ ｏ ｒ ｃ ｅ ｌ ｌ ｓ ， Ｃ Ｔ Ｃ ｓ ） 为脱 离实 体瘤原发 灶 或转 移灶 进 入外 周 血 循环 的一 类肿 瘤 细 胞， 在外 周血 中的数量 稀少 ， 几乎不 存 在于 正 常人 。 经过免疫逃避 未被清除的 Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 可以发展 为转 移灶 ， 而 且可 以形 成循环微 癌栓 。 因此 ， Ｃ Ｔ Ｃ ｓ的检测 不仅 与肿 瘤转 移 、 复发 和预后 评估 有密切 关系 而且对肺 癌 的早期诊 断也 具有 潜 在价 值。本 研究 检 测 Ｎ Ｓ Ｃ Ｌ Ｃ相
小细胞型肺癌 （ Ｎ Ｓ Ｃ Ｌ Ｃ ） 的 患者 、 同期诊断 为肺部 良性 疾病 的 ２ ０例 患者 为研 究对 象， 未进 行任何 治疗前 收集各研 究对象的外周血 ， 实时 荧光 定 量 Ｐ Ｃ Ｒ方 法检 测血 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 、 Ｓ ｋ ｐ ２ 、 １ Ｔ ｒ Ｆ一１ ｍＲ Ｎ Ａ 并进 行 评 价 分析 。结 果 （ １ ）
【 摘要 】 目的
探 讨联合检 测人 端粒酶逆 转录酶 （ ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ ） 、 Ｓ期激 酶相关蛋 白 ２ （ ｓ ｋ ｐ ２ ） 、 甲状腺特异性增 强
选取 ６ ０例 经病理 组织 学确 诊 为非
子 结合 蛋 白（ ｎ１ Ｆ一１ ） 基 因在肺癌 患者外周血 中微转 移 中的 临床 意义 。方法
Ｎ Ｓ Ｃ Ｌ Ｃ患者 外周 血 中 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 、 Ｓ ｋ ｐ ２ 、 Ｔ Ｙ Ｆ一１ ｍＲ Ｎ Ａ 高表达 ； （ ２ ） Ｎ Ｓ Ｃ Ｌ Ｃ患者外 周血 中 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 、 Ｓ ｋ ｐ ２ 、 ｒ ｒ Ｉ 、 Ｆ一１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ
的表 达均与 患者肿瘤 的 Ｔ Ｎ Ｍ 分期显著相 关（ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） ， 与年龄 、 性 别、 吸烟 、 肿瘤的组 织学类型及分化 程度无 明显
肿瘤 。
ห้องสมุดไป่ตู้
１ ． ２ Ｒ Ｔ— Ｐ Ｃ Ｒ检 测外周血靶基 因
所有 研究对 象空 腹抽取外周静脉血 ４ ｍ Ｌ ， Ｅ Ｄ Ｔ Ａ— Ｎ ａ 抗凝 ， 并分 离淋 巴
细胞 ， 提取总 Ｒ Ｎ Ａ 。获 得 合 格样 本 ， 逆 转 录合 成 ｃ Ｄ — Ｎ Ａ。设计 引 物 序 列 如 下 ： Ｂ—ａ ｃ ｔ ｉ ｎ正 义 （ ５ 一Ｃ Ａ Ｃ ．
（ ５ 一Ｔ 兀＇ Ｃ Ｔ Ｇ Ｇ ＡＧ Ａ Ｔ Ｔ Ｃ ｒ Ｉ Ｔ Ｉ Ｔ Ｉ ’ Ｃ Ｔ Ｇ Ｔ Ａ ＧＣ Ｃ 一３ ） 。ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 正义 （ ５ 一Ｃ ＧＧ ＡＡ ＧＡ Ｇ Ｔ Ｇ Ｔ Ｃ Ｔ Ｇ ＧＡ Ｇ Ｃ Ａ Ａ 一３ ） ． ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 反义 （ ５ 一ＧＧ Ａ Ｔ Ｇ ＡＡ ＧＣ Ｇ Ｇ ＡＧ Ｔ Ｃ Ｔ Ｇ ＧＡ 一３ ） 。Ｔ Ｔ Ｆ正 义（ ５ 一Ｔ ＡＣ Ｃ Ａ ＧＧ ＡＣ ＡＣ Ｃ Ａ Ｔ Ｇ Ａ ＧＧ ＡＡ一３ ） ， ｒｒ Ｆ反 义
相 关性（ Ｐ＞ ０ ． ０ ５ ） ； （ ３ ） 外周血 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 、 Ｓ ｋ ｐ ２和 ｒ Ｉ Ｔ ｒ Ｆ ｍＲ Ｎ Ａ 的检 测 对 于早 期 诊 断 Ｎ Ｓ Ｃ Ｌ Ｃ具 有 较 高 的特 异 性 和 较 好
的敏 感性 ， 三种基 因联合检测可 以提 高诊 断的敏感性 （ ８ ０ ％） 。结论 可显著提 高诊断 的敏 感性 ， 具有早期诊 断 Ｎ Ｓ Ｃ Ｌ Ｃ的潜在 价值 。
关标 志基 因 ｈ Ｔ Ｅ Ｒ Ｔ 、 Ｓ ｋ ｐ ２ 、 Ｔ Ｔ Ｆ一１ ｍ Ｒ Ｎ Ａ表 达情 况 并
疗前抽取外周血 检测 。选取同期诊 断为肺部 良性 病变 患者 ２ ０例为对照组 ， 其 中男 ９例 ， 女 １ １例 ， 年龄 ３ ５～ ７ ５ 岁， 中位年 龄 ５ ２岁 ， 该 组患 者均排 除其他 部位 恶性
丁明 ， 仇铁峰 ， 李献文。 ， 金建华。 ， 王科平
江 苏大学附属 医院 呼吸科 （ 江苏镇江 ２ １ ２ ０ ０ １ ） ；江苏 大 学附属 武进人 民医院 呼 吸 内科 ，’ 肿 瘤 内科 （ 江苏 常州 ２ １ ３ ０ ０ ０ ） ；江苏省 南京市胸科 医院胸外科 （ ２ １ ０ ０ ２ ９ ）
Ｇ Ａ Ａ Ａ Ｃ Ｔ Ａ Ｃ Ｃ Ｔ Ｔ Ｃ Ａ Ａ Ｃ Ｔ Ｃ Ｃ一３ ） ， —ａ ｃ ｔ ｉ ｎ反 义 （ ５ 一
Ｃ Ａ Ｔ Ａ Ｃ Ｔ Ｃ Ｃ Ｔ Ｇ Ｃ Ｔ Ｔ Ｇ Ｃ Ｔ Ｇ ＡＴ Ｃ一３ ） ； Ｓ ｋ ｐ ２正 义 （ ５ 一
Ａ Ｇ Ｔ Ｃ Ｔ Ｃ Ｔ Ａ Ｔ Ｇ Ｇ Ｃ Ａ Ｇ Ａ Ｃ Ｃ Ｃ Ｔ Ａ Ｇ Ａ Ｃ Ｃ 一３ ） ， Ｓ ｋ ｐ ２ 反 义