细胞培养复习题有答案
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第一章大题(细胞基本知识)1、试论述当前细胞生物学研究最集中的领域。
答:当前细胞生物学研究主要集中在以下四个领域:⑴细胞信号转导;⑵细胞增殖调控;⑶细胞衰老、凋亡及其调控;⑷基因组与后基因组学研究。
人类亟待通过以上四个方面的研究,阐明当今主要威胁人类的四大疾病:癌症、心血管疾病、艾滋病和肝炎等传染病的发病机制,并采取有效措施达到治疗的目的。
2、细胞生物学的概念和研究内容答:概念:细胞生物学是以细胞为研究对象, 从细胞的整体水平、亚显微水平、分子水平等三个层次,以动态的观点, 研究细胞和细胞器的结构和功能、细胞的生活史和各种生命活动规律的学科。
细胞生物学是现代生命科学的前沿分支学科之一,主要是从细胞的不同结构层次来研究细胞的生命活动的基本规律。
从生命结构层次看,细胞生物学位于分子生物学与发育生物学之间,同它们相互衔接,互相渗透。
研究内容:细胞生物学的主要研究内容主要包括两个大方面:细胞结构与功能、细胞重要生命活动。
涵盖九个方面的内容:⑴细胞核、染色体以及基因表达的研究;⑵生物膜与细胞器的研究;⑶细胞骨架体系的研究;⑷细胞增殖及其调控;⑸细胞分化及其调控;⑹细胞的衰老与凋亡;⑺细胞的起源与进化;⑻细胞工程;⑼细胞信号转导。
3、细胞的基本共性答:所有的细胞都有相似的化学组成;脂-蛋白体系的生物膜;DNA-RNA的遗传装置;蛋白质合成的机器—核糖体;一分为二的分裂方式。
4、细胞生存所需的最基本的细胞结构和功能。
答:细胞的生存必须具备细胞膜、核糖体、一套完整的遗传信息物质和结构。
功能:①细胞膜为细胞生命活动提供了相对稳定的环境;为DNA、RNA、蛋白质的复制、转录翻译提供了结合位点,使代谢反映高效而有序的进行;又为代谢底物的输入与代谢产物的排除提供了选择性物质运输的通道,其中伴随能量的传递。
②细胞核是遗传信息储存和表达的重要场所和指挥部,细胞的分裂、生长、分化、增值等一切生命活动均受细胞核遗传信息的指导调控。
细胞生物学复习题及参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.核小体结构的直径大约是()A、1nmB、110nmC、10nmD、100nm正确答案:C2.细胞膜的不对称性最主要体现在()A、膜蛋白不同程度镶嵌B、膜内外层脂类含量、比例不同,膜蛋白不同程度镶嵌于脂质双分子层C、膜外层有糖被D、膜内外层脂类分子分布不同正确答案:B3.机体的发育过程主要以()为基础A、细胞的增殖和细胞的分化B、细胞的分裂C、细胞的增殖D、细胞的生长E、细胞的分化正确答案:A4.ATP在线粒体内合成的地方是()A、外膜B、膜间隙C、内膜D、基质E、基粒正确答案:E5.非姐妹染色体之间开始出现交叉的时期是()A、细线期B、粗线期C、双线期D、终变期E、偶线期正确答案:B6.染色体出现成倍状态发生于细胞周期中的()A、G2期和早M期B、晚M期和G1期C、G1期和S期D、G0期和G1期正确答案:A7.原子力显微镜的应用前提是否必须要求样品表面具有导电性()A、是B、不影响C、否D、随机正确答案:C8.在受体酪氨酸激酶信号通路中,起“桥梁”作用连接SH2结构域SH3结构域的接头蛋白是()A、Ras蛋白B、SOSC、GRB2D、Raf蛋白正确答案:C9.由22个单核苷酸所组成的单链RNA分子,无编码功能的RNA是()A、microRNAB、siRNAC、hnRNAD、mRNAE、piRNA正确答案:A10.20世纪初哪些研究进展促进了细胞学进入新的发展时期()A、组织细胞培养技术的建立B、细胞膜理化特性认识的加深C、细胞中核酸和蛋白质分析技术的出现D、电子显微镜的出现与应用E、以上都是正确答案:E11.下列哪些体现了线粒体半自主性A、DNA能独立复制B、含有核糖体C、在遗传上由线粒体基因组和细胞核基因组共同控制D、线粒体DNA与细胞核的遗传密码有所不同E、线粒体DNA不与组蛋白结合正确答案:C12.巨噬细胞吞噬细菌的过程称为()A、受体介导的胞吞作用B、胞饮作用C、胞吐作用D、吞噬作用正确答案:D13.下述哪种细胞最易分裂:A、胃肠上皮细胞B、心肌细胞C、肝细胞D、神经元E、脂肪细胞正确答案:A14.细胞内消耗游离氧的代谢发生在()A、中心体B、溶酶体C、高尔基复合体D、线粒体E、染色体正确答案:D15.下列哪种物质需要载体才能穿越细胞膜()A、二氧化碳B、乙醇C、氨基酸D、尿素正确答案:C16.多细胞生物的所有不同类型的细胞都是由( )A、体细胞发育而成B、卵细胞发育而成C、受精卵发育而成D、体细胞和生殖细胞二者同时发育而成E、生殖细胞发育而成正确答案:C17.与细胞中大分子糖合成有关的细胞器是()A、高尔基复合体B、线粒体C、中心体D、核糖体E、细胞质基质正确答案:A18.当温度降至某一点时,细胞膜可从()转变为晶态。
细胞生物学复习题及答案1、果蝇的母体效应基因bicoid基因的mRNA分布在卵母细胞的什么部位A、均匀分布于细胞中部的细胞质中B、靠近将来发育成背部的一侧C、靠近将来发育成腹部的一侧D、靠近将来发育成尾部的一侧E、靠近将来发育成头部的一侧答案:E2、来自成年人组织的成纤维细胞体外培养平均分裂次数为A、140次B、100次C、50次D、15~30次E、2~5次答案:C3、颗粒结构A、内层核膜B、外层核膜C、核周间隙D、核纤层E、核孔复合体答案:E4、构成蛋白质的基本单位是A、核苷酸B、脂肪酸C、氨基酸D、磷酸E、乳酸答案:C5、有丝分裂过程中,纺锤丝在染色体上的着力位点在A、着丝粒B、动粒C、端粒D、着丝点E、DN答案:B6、在某细胞中检测到caspase-8的激活,此种细胞发生了哪种细胞生物学事件A、细胞衰老B、细胞自噬C、细胞坏死D、死亡受体介导的细胞凋亡E、线粒体介导的细胞凋亡答案:D7、糖蛋白在细胞中的功能包括A、构成细胞抗原B、是细胞识别的重要物质C、信息传递D、构成血型特质E、以上都是答案:E8、蛋白质的空间构象决定蛋白质功能的多样性。
下列哪种作用键不参与蛋白质构象的形成A、肽键B、磷酸二酯键C、二硫键D、氢键E、离子键答案:B9、不属于中间纤维的蛋白为A、角蛋白B、神经丝蛋白C、肌球蛋白D、波形蛋白E、结蛋白答案:C10、能够观察细胞膜内部结构的技术是A、扫描电镜技术B、透射电镜技术C、冰冻断裂电镜技术D、重金属投影E、X射线衍射技术答案:C11、染色质纤维上非组蛋白的主要功能是A、组装核小体B、调控基因表达C、组成异染色质D、协助DNA卷曲成染色体E、特异性解除组蛋白对DNA的抑制作用答案:D12、胰岛素原由( )个氨基酸残基组成,当被运送到高尔基复合体时,被转变酶切除起连接作用的( ),余下两条肽链以( )相连,成为由51个氨基酸组成有活性的胰岛素A、6,B肽,二硫键B、56,A肽,肽键C、86,C肽,二硫键D、56,D肽,氢键答案:C13、为纤毛运动提供动力的蛋白是A、动力蛋白B、驱动蛋白C、肌动蛋白D、管蛋白E、绒毛蛋白答案:A14、三羧酸循环产生ATP的方式是A、1次底物水平磷酸化,3次氧化磷酸化B、1次底物水平磷酸化,4次氧化磷酸化C、1次底物水平磷酸化,5次氧化磷酸化D、2次底物水平磷酸化,3次氧化磷酸化E、2次底物水平磷酸化,4次氧化磷酸化答案:B15、以下关于质膜的错误叙述是A、糖蛋白分布于质膜的外表面B、糖脂分布于质膜的内表面C、膜脂和膜蛋白都具有流动性D、不同细胞膜的膜蛋白含量不同E、不同膜蛋白与膜的结合能力不同答案:B16、细胞老化现象包括A、细胞内环境稳定性降低B、DNA复制能力降低C、蛋白质合成能力下降D、细胞分裂减少甚至停止E、以上都正确答案:E17、衰老过程中,下列哪一项不会出现A、细胞核染色质凝集B、线粒体体积增大C、细胞连接增多D、细胞色素沉积E、细胞核膜内陷分叶答案:C18、染色体的核小体是含有由四种组蛋白分子构成的A、异二聚体B、四聚体C、八聚体D、2个二聚体排列于四聚体两侧E、异四聚体答案:C19、某些不合格的外输性蛋白在进入高尔基复合体后被甄别、捕捉,并由哪种小泡负责遣回内质网A、网格蛋白有被小泡B、COPⅠ有被小泡C、COPⅡ有被小泡D、COPⅠ有被小泡和COPⅡ有被小泡E、网格蛋白有被小泡和COPⅡ有被小泡答案:B20、可用于观察组织或细胞表面三维立体结构的显微镜技术是A、透射电子显微镜B、荧光显微镜C、普通光学显微镜D、扫描电子显微镜E、相差显微镜答案:D21、DNA电泳时出现特征性阶梯状条带是( )的特征之一A、细胞坏死B、细胞衰老C、细胞分化D、细胞凋亡E、细胞分裂答案:D22、LDL进入细胞的方式是A、受体介导的胞吞作用B、被动运输C、主动运输D、协同运输E、吞噬作用答案:A23、溶酶体内环境不同于细胞质,底物只有进入溶酶体才能被消化分解。
植物细胞培养测试题(总8页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--实验室及设备单元复习题1.组培能够进行,其理论依据是____和____-。
2.接种室要求室内____,墙面____,门为____,并设置____,防止出入时带进杂菌。
3.紫外灯灭菌利用_____波长左右的紫外光,它的灭菌强度较弱,须离被灭菌物____。
4.配制培养时,一般先配制母液,其目的在于____-和____-。
6.pH值一般调节为____,常用____和____方法来进行。
7.压力单位中1kg/cm2____Mpa,,在 mPa时锅内温度为____。
9.蔗糖使用浓度为____%,它主要起____作用。
二、名词解释20分1.外植体2.愈伤组织3.灭菌4.细胞全能性5.脱分化三选择题10分1.接种工具灭菌常采用()①灼烧②高压③过滤④熏蒸2.具有促进愈伤组织生成的物质是()①VPP ②VB1 ③VB6 ④甘氨酸3.微量元素母液的配制浓度()① 10倍②100倍③1mg/ml ④10mg/ml四、问答题40分1 配制培养基时,使用生长调节物质的原则是什么?2. 无菌接种室怎样做好接种前的灭菌工作3. 高压灭菌器的使用程序怎样4 MS培养基的名称来源及特点5 为什么要配制母液,配制时要注意什么6 表面灭菌如何操作?培养基章复习题一、填空(20分)1.配制培养时,一般先配制母液,其目的在于_____和______。
2.培养架一般长为_____米,宽为____米。
3.培养基PH值一般调节为_____,常用____和_____方法来进行。
4.培养基中缺铁会使幼苗____,培养基中以_____形式加入铁。
5.磷是构成____的主要成分,这种物质又是细胞膜、细胞核的重要组成部分。
磷也是____的成分、这是一种常见的直接能量物质。
6.琼脂加入浓度大约是___________,蔗糖加入浓度大约是______________ 。
细胞工程复习题及答案细胞工程复题一、名词解释1.细胞工程:以生物细胞、组织或器官为研究对象,运用工程学原理,按照预定目标,改变生物性状,生产生物产品,为人类生产或生活服务的科学。
2.外植体:指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料3.植物组织培养:将植物的器官、组织或细胞,在无菌条件下接种于人工配置的培养基上,使其细胞分裂、增值、分化、发育,甚至形成完整植株的方法。
4.愈伤组织:在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞,多在外植体切面上产生。
5.离体无性繁殖:简称离体繁殖,是指利用组织培养方法进行植物离体培养,在短期内获得大量遗传性一致个体的方法。
6.继代培养:更换新鲜培养基来繁殖同种类型的材料(愈伤组织.芽等)。
7.体细胞杂交:(原生质体融合)指在人工控制条件下不经过有性过程,两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。
8细胞分化:即由于细胞的分工而招致的细胞结构和功用的改变,或发育方式改变的过程。
9细胞脱分化:造就前提下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。
10细胞再分化:即脱分化后的分生细胞在特定的前提下,从头恢复细胞分化能力,并经历器官发生形成单极性的芽或根,或经历胚胎发生形成双极性的胚状体,进一步发育成完全植物体,这一过程成为细胞再分化。
11人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。
12植物细胞全能性:指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息,具备发育完整植株的潜在能力。
13胚状体:在离体培养过程中产生一种形似胚(具有明显的根端和芽端),功能与胚相同的结构。
14单倍体植物:单倍体是指具有配子体染色体数的孢子体(植物个体)。
具有单套染色体的细胞在人工离体条件下培养,使其单性发育成植物体。
这种具有单套染色体的植物称为单倍体植物。
15离体受精:(离体授粉)在无菌前提下造就未受精脂肪或胚珠和花粉,使花粉萌发进入胚珠,完成受精作用。
细胞生物学复习题及参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、Arp2/3复合物生成的新微丝与原微丝的夹角是A、65度B、70度C、60度D、75度E、80度正确答案:B2、染色质中用来连接相邻核小体的连接部分的DNA约为多长A、96个bpB、32个bpC、46个bpD、60个bpE、25个bp正确答案:D3、全能性最高的细胞是A、精子B、受精卵C、卵母细胞D、原始生殖细胞E、内细胞群细胞正确答案:B4、人体中下列何种细胞寿命接近人体本身A、口腔上皮细胞B、神经细胞C、肝细胞D、红细胞E、以上都不是正确答案:B5、观察贴附在培养瓶底壁上的活细胞最适合使用的显微镜是A、透射电镜B、扫描电镜C、荧光显微镜D、普通光学显微镜E、相差显微镜正确答案:E6、下列对粗面内质网的描述哪项是错误的A、与核膜相连B、与细胞膜相连C、有核糖体附着D、与蛋白质的合成和运输相关E、与蛋白质的糖基化有关正确答案:B7、关于蛋白质的错误叙述是A、参与细胞形态的维持B、是细胞中含量最多的有机分子C、由20种不同氨基酸组成D、参与细胞功能的行使E、蛋白质从二级结构开始即具有生物学活性正确答案:E8、下列哪种成分参与构成神经节苷脂的头部结构A、鞘氨醇B、烃环C、肌醇D、胆碱E、唾液酸正确答案:E9、微丝的功能与下列哪项无关A、胞质环流B、细胞移动C、肌肉收缩D、自溶作用E、胞质分裂正确答案:D10、细胞外的液态大分子吞入细胞形成的结构是A、多囊体B、液泡C、吞噬体D、小囊泡E、吞饮体正确答案:E11、影响膜流动性的因素,下列描述哪个错误A、脂肪酸链越长,膜流动性越低B、膜脂结合膜蛋白后,膜的流动性会降低C、相变温度以上时胆固醇的含量增加膜的流动性会降低D、卵磷脂/鞘磷脂的比例高则膜流动性增加E、脂肪酸链所含双键越少,膜流动性越高正确答案:E12、亲核蛋白质(karyophilic proteins)是一类在细胞质中合成、然后输入细胞核内发挥功能作用的蛋白质,它是通过何种方式进入细胞核A、易化扩散B、被动扩散C、跨膜运输D、主动运输E、被动运输正确答案:D13、不属于细胞骨架的成分是A、波形蛋白B、微管C、微丝D、微粱网格系统E、角蛋白正确答案:D14、关于含NLS亲核蛋白的核输入过程,下列顺序正确的选项是①与核输入受体β结合②与核质内的Ran-GTP结合③与NPC的胞质纤丝结合④与核输入受体α结合A、③①④②B、④①③②C、①④②③D、①③④②E、①②③④正确答案:B15、透射电镜生物标本制备中常用的固定剂是A、戊二醛和乙酸B、戊二醛和乙醇C、四氧化锇和乙醇D、甲醇和冰醋酸E、戊二醛和四氧化锇正确答案:E16、细胞分化具有的特点不包括A、细胞分化具有时间性和空间性B、细胞分化在生物体中具有普遍性C、细胞分化具有不可逆性D、细胞分化中可发生转分化和去分化E、细胞分化具有稳定性正确答案:C17、在电镜下可见细胞核的外膜与细胞质中哪种细胞器膜相连A、线粒体B、粗面内质网C、滑面内质网D、高尔基复合体E、溶酶体正确答案:B18、DNA分子中不含有的碱基是A、AB、GC、CD、UE、T正确答案:D19、组成核小体DNA的碱基对的数目约是A、200个B、253个C、146个D、53个E、346个正确答案:C20、单纯性大泡性表皮松解症的主要起因是A、角蛋白基因突变B、动力蛋白基因突变C、驱动蛋白基因突变D、细胞皮层中的微丝结合蛋白基因突变E、Tau蛋白的高度磷酸化正确答案:A21、下列关于衰老细胞中生物大分子和代谢的变化的描述不正确的是A、大多数酶分子失活B、复制和转录受抑制C、不饱和脂肪酸被氧化D、mRNA含量降低E、蛋白质含量增多正确答案:E22、下列关于中间纤维蛋白的结构特点叙述错误的是A、均包含杆状区B、含有4段高度可变的α螺旋区C、尾部常折叠成球状结构D、头部高度可变E、含有3个短小的间隔区正确答案:B23、下列哪种物质在通过核孔复合体时,能通过被动扩散自由进出baoheA、核苷酸B、组蛋白C、RNA转录相关酶D、核糖体蛋白E、DNA复制相关酶正确答案:A24、巢蛋白主要分布于A、肌细胞B、神经干细胞C、各种类型细胞D、上皮细胞E、成纤维细胞正确答案:B25、中心粒在电子显微镜下的结构不包括A、两个筒状小体相互垂直B、在细胞分裂时与染色体相连C、结构与鞭毛一样D、由9组三联微管围成的筒状结构E、可复制为两对正确答案:C26、下列哪项结构组分不属于核孔复合体A、核纤层B、核质环C、中央栓D、胞质环E、辐正确答案:A27、组成微丝的基本单位是A、结合蛋白B、结蛋白C、角蛋白D、肌球蛋白E、肌动蛋白正确答案:E28、由单细胞形成均一细胞群的过程称为A、细胞分化B、细胞建系C、细胞克隆化D、细胞融合E、细胞原代培养正确答案:C29、关于异染色质的正确叙述是A、结构松散,转录活跃B、高度凝集,转录不活跃C、结构松散,转录不活跃D、高度凝集,转录活跃E、易被核酸酶在一些敏感的位点降解正确答案:B30、下列哪项不属于细胞骨架的一种A、微丝B、中间纤维C、微管D、肌动蛋白丝E、纤连蛋白正确答案:E31、关于细胞膜转运功能的错误叙述是A、高度选择性的半透膜B、通道蛋白介导的物质运输均不消耗能量C、通过胞吐作用完成大分子的分泌D、通过受体介导的内吞作用完成大分子的特异性摄取E、由膜运输蛋白完成所有小分子的转运正确答案:E32、细胞骨架系统的出现是真核细胞的特征性结构之一。
1.下列关于细胞周期的叙述中,正确的是()A.细胞周期分为前期、中期、后期、末期8.加入DNA合成抑制剂,细胞将停留在分裂期C细胞分裂间期为细胞分裂期提供物质基础D.成熟的生殖细胞产生后立即进入下一个细胞周期2.下列关于染色体的叙述中,不正确的是()A.染色体是细胞核中容易被碱性染料染成深色的物质B.严格地说,只有在细胞分裂期才能形成染色体C蓝藻细胞在进行有丝分裂时也能形成染色体D .染色体和染色质是同一种物质在细胞不同时期的两种存在状态3.如图是同一细胞不同分裂时期的图像,据图分析可做出的判断是()A.图②③④表示一个完整的细胞周期B.若按分裂的先后顺序排列,应为①T④T③-②C 该种生物的叶肉细胞中共含有6个DNA分子D.图③过程染色体数保持不变4.下列关于高等动物细胞有丝分裂的叙述,正确的是()A .前期核膜解体成磷脂分子和蛋白质分子B.中期是观察染色体数目和形态的最佳时期C后期着丝粒断裂导致染色单体数目加倍D.末期囊泡聚集成的细胞板形成新的细胞膜5.有关动物细胞有丝分裂的叙述,正确的是()A .细胞板在细胞有丝分裂末期形成B.同源染色体配对通常发生在分裂前期C在分裂末期,细胞膜内陷形成两个子细胞D.在分裂中期,两个中心粒复制形成两组中心粒6关于细胞有丝分裂的叙述,正确的是()A.赤道板是有丝分裂过程中出现的一种结构B.有丝分裂间期DNA的复制和有关蛋白质的合成过程需要酶参与C分裂后期细胞中形成纺锤体,使子染色体被拉向细胞两极D.细胞周期中,分裂间期的持续时间通常比分裂期的持续时间短7.在一次有丝分裂中,最可能发生在同一时期的是()A.着丝点的分裂和细胞质的分裂B.染色体数加倍和染色单体形成C细胞板的出现和纺锤体的出现D.染色体复制和中心粒复制8.【2017-2018学年福建省厦门双十中学高一下学期第二次月考】下面是动物细胞有丝分裂不同时期染色体卜)数目、核DNA分子8)数目的柱形统计图,对此进行的有关叙述正确的是()① ② ③A.①时期染色体复制,核DNA和染色体数目都加倍8.③时期核膜、核仁重建,细胞中部出现细胞板C.①一②表示着丝点分裂,染色体数目加倍,但核DNA分子数目不变D.②一③表示染色单体相互分离,染色体和核DNA分子数目也随之减半9.【2019届黑龙江省哈尔滨市第六中学高三上学期10月月考】如图是蛙红细胞的无丝分裂过程,和有丝分裂相比,下列叙述正确的是()A.分裂过程中没有出现纺锤丝,但有染色体的出现B.有DNA和染色体的复制C.分裂过程中细胞核缢裂成两个细胞核,因此子细胞中染色体减少一半D.无丝分裂和有丝分裂都有核膜与核仁的周期性消失和重建10.【2017—2018学年浙江省温州市十五校第二学期联考】下列关于“制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片”实验的叙述,错误的是()A.在解离环节,需要在室温下解离10〜15分钟B.在漂洗环节,需要放入盛有水的培养皿中漂洗1〜2分钟C.在制片环节,需要在盖玻片上覆盖滤纸,然后用橡皮或笔端轻轻敲击盖玻片几下,使细胞分散开D.制作有丝分裂临时装片和永久装片的方法是不同的11 .【2018 年江苏省扬州市高二学业水平测试模拟卷】下列关于“制作并观察植物细胞有丝 分裂的临时装片”活动的叙述,正确的是()A .用稀盐酸解离可使细胞相互分散开B .用清水漂洗可洗去碱性染料以保持细胞活性C 常用苏丹m 染液使染色体着色以利于观察D .可用高倍镜观察植物细胞连续的分裂过程12.【2017-2018学年河南省中原名校(即豫南九校)高一下学期第一次联考】如图表示某 同学进行某次实验的基本操作步骤,下列相关叙述正确的是()A .该实验中所用的解离液就是质量分数为8%的盐酸B .该同学的操作步骤中解离后应该用酒精进行漂洗C .实验过程中采用的龙胆紫染液也可以换用醋酸洋红染液D .最后在观察装片时,会发现绝大部分细胞都处于分裂的间期,如果此时用药物抑制DNA 的复制,则细胞将停留在分裂间期的S 期 13.【2017-2018学年黑龙江省哈尔滨市第三中学高一上学期期末考试】图1细胞进行有丝分裂的部分简图,图2是一个细胞周期中每条染色体中DNA 数目变化,据图回答:(1)图1是 __________ 细胞有丝分裂简图,你的判断依据是 ______________________ 。
1.体外培养的细胞按生长方式可分为哪二种? 按细胞在体外生长的形态特征,可分为哪几种常见类型?⑴按生长方式分为二型:粘附型细胞:附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。
悬浮型细胞:不必附着于固相支持物表面, 而在悬浮状态下即可生长的细胞。
(绝大多数有机体细胞属粘附型细胞。
)⑵可分四型: (1)上皮型细胞 (2)成纤维型细胞 (3)游走型细胞 (4)多形型细胞2.简述体外培养细胞的整个生命活动过程的分期及每代贴附生长细胞的生长过程⑴通常, 体外培养细胞的全部生命期大致可被分为以下三个阶段:①原代培养期: 也称初代培养, 是指从机体中取出细胞接种培养到第一次传代之前的这一阶段。
此期的细胞呈现出活跃移动的特点, 可见细胞分裂, 但不旺盛。
处于原代培养阶段的细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上有很大的相似性。
细胞群具有明显的异质性, 细胞间的相互依存性强, 在软琼脂培养基培养时细胞集落形成率很低。
②. 传代期:通常是培养细胞全生命期中持续时间最长的时期, 原代培养的细胞经传代后常被称做细胞系。
一般情况下, 正常体细胞在传代10-50次左右后, 细胞分裂的能力就会逐渐减弱, 甚至完全丧失, 细胞便进入衰退期。
③衰退期:处于衰退期的培养细胞, 增殖速率已经变得很慢或不再增殖, 直至最后衰退死亡。
以上特点, 主要是针对体外培养的机体正常细胞, 对于体外发生转化的细胞和肿瘤细胞而言, 永生性或恶型性的获得使得这类细胞获得持久性的增殖能力, 这样的细胞群体常被称为无限细胞系或连续细胞系。
⑵每代贴附生长细胞的生长过程:①游离期:细胞接种后在培养液中呈悬浮状态, 也称悬浮期。
此时细胞质回缩, 胞体呈圆球形。
时间:10分钟一4小时②贴壁期:细胞附着于底物上, 游离期结束。
底物:玻璃、塑料、胶原、其它细胞等③潜伏期:此时细胞有生长活动, 而无细胞分裂。
细胞株潜伏期一般为6~24小时。
④对数生长期:细胞数随时间变化成倍增长, 活力最佳, 最适合进行实验研究。
细胞生物学复习题含答案1、对老年斑形成的最合理解释是()A、细胞内水分减少,细胞收缩B、细胞核体积增大,染色质固缩,染色加深C、细胞中的酪氨酸酶活性升高D、细胞内脂褐素累积E、细胞内大分子物质交联变性答案:D2、下列细胞中含线粒体最多的是()A、上皮细胞B、心肌细胞C、成纤维细胞D、淋巴细胞答案:B3、其他条件相同时,在()情况下膜的流动性较高。
A、胆固醇含量高B、饱和脂肪酸含量高C、长链脂肪酸含量高D、在生理温度范围内温度升高答案:D4、细胞分化的普遍规律是()A、基因组改变B、基因组不发生变化C、染色体丢失D、基因发生不可逆变化E、以上都不对答案:E5、真核细胞出现的关键是()的形成A、细胞膜B、细胞核C、线粒体D、核糖体E、DNA答案:B6、在第一次减数分裂时,核膜的解体主要是在()A、偶线期B、粗线期C、终变期D、中期Ⅰ答案:C7、细胞骨架中()的组装没有踏车现象。
A、微管B、微丝C、中间纤维D、三者均是答案:C8、肿瘤细胞常旺盛地进行()A、细胞分裂B、细胞分化C、二者均有D、二者均无答案:A9、以下哪些反应不在线粒体进行()A、糖酵解B、乙酰辅酶A的生成C、三羧酸循环D、氧化磷酸化E、电子传递答案:A10、下列哪种蛋白质转运过程以囊泡转运方式进行?A、胞质→细胞核B、内质网→高尔基复合体C、胞质→内质网D、胞质→线粒体E、胞质→过氧化物酶体答案:B11、细胞学说不包括的内容是( )A、细胞是生命活动的基本结构单位和功能单位B、多细胞生物由单细胞生物发育而来C、细胞只能来自细胞D、细胞的增殖方式都是有丝分裂E、所有生物体都是由细胞构成的答案:D12、要探知细胞内某一DNA的表达水平,可以通过()技术实现。
A、Southern blotB、Northern blotC、Western blotD、原位分子杂交答案:A13、疏水层析是依靠填充物的()将蛋白质按其疏水性的强弱分开A、亲和基团B、电荷C、分子量D、疏水基团答案:D14、由起始实验材料所进行的细胞培养叫()A、原位培养B、三维培养C、传代培养D、原代培养答案:D15、关于细胞周期限制点描述,错误的是()A、限制点对正常周期运转并不是必需的B、它的作用是细胞遇到环境压力或者DNA受损时使细胞周期停止的‘刹车’作用,对细胞进入下一期之前进行检查。
细胞培养(动物细胞培养):动物细胞培养是指将动物活体体内取出的组织用机械或消化的方法分散成单细胞悬液,然后放在类似于体内生存环境的体外环境中,进行孵育培养,使其生存、生长并维持其结构与功能的方法。
组织培养:从生物体内取出活的组织(多只组织块)在体外进行培养的方法。
有时泛指所有的体外培养。
器官培养:是将活体内的器官(一般是胚胎器官)、器官的一部分或器官原基在体外进行培养的方法。
合成培养基:根据细胞生存所需物质的种类和数量,用人工方法模拟合成的、配方恒定的培养基。
无血清培养基:由基础培养基和替代血清的补充因子(生长因子和激素、结合蛋白等)组成。
完全培养基:在合成培养基里添加血清后的培养基。
接触抑制:体外培养的细胞在贴附底物上连接成片、相互接触后失去运动的现象。
无限细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。
去分化(脱分化):细胞在体外不可逆地失去原有特性。
注意:去分化不意味分化能力完全丧失!在适当调节信号刺激下仍能表现出分化特性。
但分化能力会随培养时间延长而逐渐丧失。
不适应:各种分化细胞,在体外培养时逐渐失去各自的形态与功能特征,表现出某种趋同性。
原因:培养条件变化使分化发生阻抑细胞分裂指数(MI):是指细胞群中每1000个细胞中的分裂相数量细胞群体倍增时间:是指培养物中细胞数量翻倍的时间。
原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。
培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。
传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。
1)体外培养细胞,其生长方式主要有贴壁生长和悬浮生长两种,分别称为贴壁细胞和悬浮细胞。
2)一般可将贴壁细胞生长的体外培养细胞大体分为成纤维细胞型、上皮细胞型、游走细胞型、多行细胞型四种类型,最常见的为前两种。
3)体外培养细胞的主要生长特点:①贴附生长②接触抑制③密度依赖性培养细胞分化状态的变化:①去分化(脱分化)②不适应1、细胞培养的基本要求有哪些和工作方法要求:1)培养前准备2)操作间消毒3)洗手和着装4)火焰消毒培养前的准备的基本要求:培养基的选择和无菌配制动物细胞培养用液的类型、配制和无菌处理方法:1)操作程序规范2)试剂设备专人负责3)培养用品定点存放2、平衡盐溶液(BBS):(1)成分:无机盐和葡萄糖,少量酚红。
细胞生物学复习题一.填空1。
染色体末端的端粒在细胞衰老过程中,随着DNA复制而逐渐变短。
2。
人们最初在光镜下观察到的细胞骨架成分是应力纤维.3. 电镜形态学观察是鉴定细胞凋亡的最可靠方法之一.4. 光学显微镜的分辨本领为200nm,而电子显微镜的分辨本领可达0。
2nm。
5. 膜的不对称性是指膜脂的不对称性和膜蛋白不对称性6. 染色体DNA的三种功能元件是自主复制序列着丝粒DNA序列和端粒DNA序列7. 核仁的三种基本结构组分是纤维中心、致密纤维组分和颗粒组分8. 由于真核生物具有核膜,所以,其RNA转录和蛋白质的合成是分开进行的;而原核生物没有核膜,所以RNA转录和蛋白质的合成是偶联进行的.9。
构成细胞最基本的要素是基因组、细胞质膜和完整的代谢系统。
10. 组成生物膜的基本成分是膜脂,体现膜功能的主要成分是膜 .11. 细胞连接主要为封闭连接、锚定连接、通讯连接。
12。
细胞化学通讯主要为内分泌 , 旁分泌,自分泌.13。
线粒体的功能区隔主要有: 外膜、内膜、膜间隙和基质。
14。
O-连接的糖基化主要发生在高尔基体,N-连接的糖基化发生在粗面内质网。
15. 细胞内能进行蛋白质修饰和分选的细胞器有内质网和高尔基复合体。
16。
高尔基体呈弓形或半球形,凸出的一面对着细胞体称为形成面(forming face)或顺面(cis face)。
凹进的一面对着细胞膜称为成熟面或反面(trans face)。
顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡.17. 细胞的有丝分裂发生在体细胞;细胞的减数分裂发生在生殖细胞。
18。
粗面内质网的主要功能有合成分泌蛋白,合成膜整合蛋白,合成细胞器驻留蛋白等,光面内质网的功能且有(1)脂类的合成与转运(2)解毒作用(3)糖原的代谢(4)储存和调节Ca2+ 浓度等。
19。
真核细胞周期包括___G1_, _S__,_G2_和_M_四个主要时期。
20。
在粗面内质网内主要进行_N—连接_糖基化修饰,高尔基体主要进行__O-连接___糖基化修饰。
细胞生物学复习题(含参考答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.细胞凋亡与细胞死亡最主要的区别是()A、炎症反应B、细胞变形C、细胞核肿胀D、内质网扩张正确答案:A2.下述哪种细胞最易分裂()A、心肌细胞B、神经元C、肝细胞D、脂肪细胞E、胃、肠上皮细胞正确答案:E3.最先被认识的成体干细胞是()A、皮肤干细胞B、肝干细胞C、造血干细胞D、间充质干细胞E、神经干细胞正确答案:C4.葡萄糖分解过程中产生的能量主要以()分子形式被利用和储存A、ATPB、GTPC、NADHD、CTPE、ATP和NADH正确答案:E5.决定红细胞血型的物质是()A、糖蛋白B、磷脂C、糖脂D、胆固醇正确答案:A6.在下列细胞物质运输方式中,不需要能量的是()A、胞吞作用B、钠钾泵C、易化扩散D、Na+驱动的葡萄糖主动运输正确答案:C7.高尔基体的主要生物学功能是()A、合成糖类B、蛋白质合成C、参与细胞氧化过程D、对蛋白质进行加工和转运E、合成脂类正确答案:D8.根据已有研究成果,下列哪项不是产生肿瘤细胞的直接诱发因素()A、长期接触放射性同位素钴60B、急性上呼吸道感染C、在切尔诺贝利核电站核泄露处居住20年D、长期食用富含亚硝酸盐的食品E、长期食用含黄曲霉的谷物正确答案:B9.位于染色体着丝粒和臂的两端,由高度重复序列组成的染色质是()A、常染色质B、核仁相随染色质C、结构异染色质D、兼性异染色质正确答案:C10.以实验的方法在小鼠的染色体DNA中插入特定的外源基因是()技术A、基因剔除小鼠B、转基因小鼠C、基因替换小鼠D、免疫缺陷正确答案:B11.细胞与基底膜之间形成的连接称为A、紧密连接B、桥粒C、间隙连接D、粘合带E、半桥粒正确答案:E12.牛脊神经节切片所观察的神经节细胞外围分布有()A、被囊细胞B、脂肪细胞C、平滑肌细胞D、血细胞正确答案:A13.细胞分裂的哪个阶段可以观察到孟德尔自由组合定律的证据()A、有丝分裂中期B、减数分裂后期ⅡC、减数分裂后期ⅠD、有丝分裂后期正确答案:C14.有关内膜系统的说法错误的是()A、内膜系统包括内质网、高尔基复合体、溶酶体、转运小泡、核膜以及线粒体等功能结构。
一选择1 最早发现细胞的是:胡克2 观察无色透明细胞:相差显微镜;观察运动细胞:暗视野显微镜。
3 信号传递中,重要的脂类是:磷酸酰基醇。
4 多药性蛋白属于ABC转运器。
5 植物细胞与细菌的协助运输借助于质子浓度梯度。
动物则借助钠离子浓度梯度。
6 鞭毛基体和中心粒属于三联微管。
7 叶绿体质子动力势产生是因为类囊体腔的PH值低于叶绿体基质的PH值。
8 Hela细胞属于宫颈癌上皮细胞。
9 电子显微镜的分辨力:0.2nm。
光镜:0.2um。
人眼:0.2mm。
10 鞭毛轴丝由9+2微管组成。
11 矽肺与溶酶体有关。
12 纺锤体的微管包括:星体微管,动粒微管,极微管。
13 具有细胞内消化作用的细胞器是:溶酶体。
14 细胞生命活动所需能量均来自线粒体。
15 信号识别颗粒是一种核糖核蛋白,包括RNA和蛋白质。
16 抑制脂质分裂的是:松弛素。
17 钙离子浓度上升时,PKC转移到质膜内表面。
18 类囊体膜上电子传递方向:PSII---PSI---NADP+。
19 由膜围成的细胞器是胞内体。
20 氚标记的尿嘧啶核苷用于检测细胞中RNA转录。
21 膜脂不具有的分子运动是跳跃运动。
(具有的是:侧向,旋转,翻转)22 膜流的正确方向:内质网——高尔基体——质膜。
23 初级溶酶体来自粗面内质网和高尔基体。
24 线粒体合成ATP。
25 微丝重要的化学成分是肌动蛋白。
26 不消耗能量的运输方式是:电位门通道。
27 肌质网可贮存钙离子。
28 高尔基体功能功能:分泌颗粒形成。
29 微丝在非肌细胞中功能:变形运动,支架作用,吞噬运动。
30 中心粒:9组3联。
31 胞内信使有:CAMP,CGMP,DG。
生长因子:EGFR。
、32 流式细胞术可快速测定细胞中DNA含量。
33 完成细胞膜特定功能的组分为膜蛋白。
34 细胞质外层的一个复合结构体系和多功能体系成为:细胞膜。
35 酪氨酸蛋白激酶受体是血小板衍生生长因子受体。
36 肝细胞解毒作用发生在滑面内质网。
高二生物细胞工程练习题细胞工程是一门综合性的学科,将细胞和分子生物学与工程学相结合,旨在开发新方法和技术来研究、改造和应用细胞。
在高二生物学的学习中,细胞工程是一个重要的话题。
以下是一些细胞工程的练习题,帮助加深对细胞工程的理解和应用。
题目一:细胞培养基本操作细胞培养是细胞工程常用的方法之一。
请你描述一下进行细胞培养时所需的基本操作步骤,包括培养基的配制、细胞的处理、培养环境的控制等。
以细胞培养基本操作为题,撰写一份实验报告。
题目二:细胞转染技术细胞转染是将外源基因或其他物质导入目标细胞中的方法。
请你选择一种常用的细胞转染技术,如热冲击法、电穿孔法或化学转染法,描述其原理、步骤和应用场景,并分析其优缺点。
题目三:细胞组织工程细胞组织工程是一种通过培养和操纵细胞以构建组织和器官的技术。
请你选择一个你感兴趣的细胞组织工程应用领域,如人工皮肤、人工骨骼或人工心脏等,详细介绍其构建原理、方法、难点和应用前景。
题目四:细胞工程在医学中的应用细胞工程在医学领域有着广泛的应用,如干细胞治疗、基因治疗和组织工程等。
请你选择一个你认为最具潜力的细胞工程应用,对其进行详细的介绍,包括原理、方法、临床应用状况和未来发展方向。
题目五:细胞工程的伦理和社会问题细胞工程的发展给我们带来了诸多医学和科学上的突破,同时也涉及到一些伦理和社会问题。
请你选择一个与细胞工程相关的伦理或社会问题,如生命伦理、隐私保护或社会公正等,论述其现状、争议和解决方案。
总结:细胞工程是一个快速发展的领域,其应用潜力和挑战都非常巨大。
通过对细胞培养基本操作、细胞转染技术、细胞组织工程及其应用、细胞工程在医学中的应用以及与细胞工程相关的伦理和社会问题的学习和练习,我们能够更全面地了解细胞工程的核心概念、方法和应用前景,为未来的学习和研究奠定坚实的基础。
同时,也需要我们思考和探讨如何平衡科技发展与伦理道德、社会公正的关系,以推动细胞工程的可持续发展与应用。
细胞生物学复习题(含答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1.高尔基复合体的功能不包括A、蛋白质的糖基化B、蛋白质的分选C、蛋白质的合成D、蛋白质的运输E、部分肽链的水解正确答案:C2.关于微管的超微结构,不正确的叙述是A、外径24nm,内径15nmB、呈中空的圆筒状结构C、原纤维由微管蛋白α、β异二聚体连接而成D、微管蛋白α和β的氨基酸组成和排列不相同E、管壁由13条直径为5nm的原纤维组成正确答案:E3.光学显微镜的分辨极限是A、0.002nmB、0.2μmC、100μmD、2μmE、2nm正确答案:B4.动物精子头部的顶体,在入卵受精过程中起到重要作用,帮助精子溶解、消化围绕卵细胞的滤泡细胞和细胞外被,因而其实质上是A、特化的内质网B、特化的溶酶体C、特化的线粒体D、特化的核糖体E、特化的微体正确答案:B5.微管是有极性的细胞骨架,细胞内微管聚合的核心是A、纤毛B、中心体C、中心粒D、微绒毛E、鞭毛正确答案:B6.细胞内的遗传信息储存的部位主要是A、细胞核B、内质网C、溶酶体D、高尔基体E、线粒体正确答案:A7.下列关于核被膜的叙述不正确的是A、核被膜与其他细胞膜完全一样B、核被膜将遗传物质与细胞质相隔离C、外核膜附着核糖体D、膜上散布着核孔E、内核膜核质面附着核纤层正确答案:A8.原核细胞的染色体是A、一条与RNA、组蛋白结合在一起的DNAB、一条与组蛋白结合在一起的DNAC、一条不与RNA、组蛋白结合在一起的裸露的DNAD、一条以上裸露的DNAE、一条以上与RNA、组蛋白结合在一起的DNA正确答案:C9.细胞内的生命控制中心是A、溶酶体B、细胞核C、内质网D、高尔基复合体E、线粒体正确答案:B10.处于末期阶段的吞噬性溶酶体由于水解酶的活性很小或消失,还残留一些物质未被消化和分解,仍旧残留于溶酶体内,形成电镜下所见到的A、多泡体B、脂褐质C、含铁小体D、残余小体E、髓鞘样结构正确答案:D11.下面哪项不属于胞吞作用A、吞饮作用B、受体介导的胞吞作用C、基团转移D、通过网格蛋白有被小泡介导的胞饮作用E、吞噬作用正确答案:C12.三羧酸循环反应主要进行的场所是A、细胞质基质B、线粒体基粒C、线粒体嵴膜D、线粒体基质E、线粒体内膜正确答案:D13.组成ATP合酶复合体的F1亚基由几种多肽链组成A、1种B、2种C、3种D、4种E、5种正确答案:E14.有关细胞分化不正确的说法是A、生理功能发生变化B、形态结构发生变化C、细胞数目迅速增加D、细胞的遗传物质一般不变化E、生化特征发生变化正确答案:C15.在胚胎发育过程中,细胞分化的规律是A、单能性→全能性→多能性B、全能性→单能性→多能性C、多能性→全能性→单能性D、多能性→单能性→全能性E、全能性→多能性→单能性正确答案:E16.细胞内衰老、死亡细胞器被分解的过程称为A、吞饮作用B、自噬作用C、异噬作用D、自溶作用E、吞噬作用正确答案:B17.下列哪项主要与细胞识别有关A、磷脂B、脂锚定蛋白C、钙网素D、糖萼E、信号识别蛋白正确答案:D18.以下属于肌动蛋白结合蛋白的是A、MAP-1B、MAP-2C、TauD、MAP-3E、Myosin正确答案:E19.相关蛋白质克隆实验表明,溶酶体的膜蛋白具有高度同源性,其在结构上具有共同的特点,均有一段信号肽ua、一个腔内区、一个单次跨膜区和一个胞质尾区。
1.体外培养的细胞按生长方式可分为哪二种? 按细胞在体外生长的形态特征可分为哪几种常见类型?⑴按生长方式分为二型:粘附型细胞: 附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。
悬浮型细胞: 不必附着于固相支持物表面,而在悬浮状态下即可生长的细胞。
(绝大多数有机体细胞属粘附型细胞。
)⑵可分四型:(1) 上皮型细胞(2) 成纤维型细胞(3) 游走型细胞(4) 多形型细胞2.简述体外培养细胞的整个生命活动过程的分期及每代贴附生长细胞的生长过程⑴通常,体外培养细胞的全部生命期大致可被分为以下三个阶段:①原代培养期:也称初代培养,是指从机体中取出细胞接种培养到第一次传代之前的这一阶段。
此期的细胞呈现出活跃移动的特点,可见细胞分裂,但不旺盛。
处于原代培养阶段的细胞与体内原组织在形态结构和功能活动上有很大的相似性。
细胞群具有明显的异质性,细胞间的相互依存性强,在软琼脂培养基培养时细胞集落形成率很低。
②.传代期:通常是培养细胞全生命期中持续时间最长的时期,原代培养的细胞经传代后常被称做细胞系。
一般情况下,正常体细胞在传代10-50 次左右后,细胞分裂的能力就会逐渐减弱,甚至完全丧失,细胞便进入衰退期。
③衰退期:处于衰退期的培养细胞,增殖速率已经变得很慢或不再增殖,直至最后衰退死亡。
以上特点,主要是针对体外培养的机体正常细胞,对于体外发生转化的细胞和肿瘤细胞而言,永生性或恶型性的获得使得这类细胞获得持久性的增殖能力,这样的细胞群体常被称为无限细胞系或连续细胞系。
⑵每代贴附生长细胞的生长过程:①游离期:细胞接种后在培养液中呈悬浮状态,也称悬浮期。
此时细胞质回缩,胞体呈圆球形。
时间:10 分钟一4 小时②贴壁期:细胞附着于底物上,游离期结束。
底物:玻璃、塑料、胶原、其它细胞等③潜伏期:此时细胞有生长活动,而无细胞分裂。
细胞株潜伏期一般为6〜24小时。
④对数生长期:细胞数随时间变化成倍增长,活力最佳,最适合进行实验研究。
⑤停止期(平台期):细胞长满瓶壁后,细胞虽有活力但不再分裂机制:接触抑制、密度限制3.简述体外培养细胞对生存环境的基本要求.⑴细胞的营养需要:①基本营养物质:氨基酸(12种+谷氨酰胺)、维生素、葡萄糖、核糖、脱氧核糖等无机离子。
② 促细胞生长因子:多由血清提供⑵细胞的生存环境:①温度条件对细胞生长的影响:不同生物来源的组织细胞培养温度不同;体外培养动物细胞最常用的温度是37C,耐低温不耐高温。
在生理温度范围内,温度与细胞生长率之间存在正相关关系。
②气相环境对细胞生长的影响:动物细胞培养的气相环境都是采用5%C0与95漉气(提供氧)的混合气体。
O 2参与细胞的能量代谢过程,CO 2用于维持培养液的酸碱度,一般多为开放式培养③培养液的酸碱度对细胞生长的影响:大多数的有机体细胞能在pH6.0〜8.0的环境中生存。
最适宜的pH值范围是7.2〜7.4。
体外培养的正常细胞耐酸能力要强于耐碱能力④无污染、无毒。
4.什么是细胞培养用液, 主要分为哪几类?⑴培养用液是维护组织细胞生存、生长及进行细胞培养各项操作过程中所需的基本溶液。
⑵主要包括:平衡盐溶液;培养基;其他培养用液。
5.D-Hank's 与Hank's 的主要区别是什么?D-Hank's 不含有Ca2+、Mg2+ ,常用于配制胰酶溶液。
6.简述胰酶的常用浓度及配制时的注意事项。
胰酶(trypsin)溶液:浓度一般为0.1 %〜0.25 %,配制时要用不含Ca2+ Mg2及血清的平衡盐溶液。
7.细胞培养中血清的主要作用?(1) 提供基本营养物质;(2) 提供贴壁和扩展因子(3) 提供激素及各种生长因子;(4) 提供结合蛋白(5) 对培养中的细胞提供某些保护作用8.血清的使用与储存有哪些注意事项?(1)使用前的处理:使用前通常在56C加热30分钟,这一过程称为灭活。
热灭活目的:灭活血清中的补体成分。
对于一些品质高的胎牛血清和新生牛血清可以考虑不经灭活直接用于细胞培养。
(2)储存条件:血清一般储存于-20C ,同时应避免反复冻融。
大包装的血清,首先将血清灭活处理,然后分装为小包装,如10ml、20ml、50ml,储存于-20 C,使用前融化。
融化后的血清在4C不宜长时间存放,应尽快使用。
9.简述干粉培养基的配制过程。
DMEM培养液的配制(举例):⑴900 mL ddH2O于1000 mL烧杯中,将DMEM粉1包倒入其中,盛粉袋用50 mL ddH2O分次冲洗,也倒入容器,磁力(或玻棒)搅拌溶解。
⑵用5%—10%的NaHCO调pH至7.2。
⑶加青、链霉素至终浓度100u/mL和100ug/mL⑷用0.22um的滤膜过滤除菌。
⑸分装(200 mL 左右)后4C 冰箱保存。
10.细胞培养工作室可分为那几个部分,各有什么作用?一般包括:准备室、培养室和缓冲室。
作用:⑴准备室:用于进行培养器皿的清洗、包装、培养物质的准备和消毒以及供应物品的保藏等。
⑵培养室:用于进行细胞培养和各种无菌操作的实验室。
其基本条件是:清洁、无菌、干燥、不通风,并具有适宜的光线。
天花板不宜高过2.5M。
⑶缓冲室:(更衣室)11.C O2培养箱的作用及使用中的注意事项。
用于维持适当温度、湿度与pH。
注意事项:⑴质量关键在控温装置,温度变化一般不应超过0.5度;培养箱的温度设在35〜37C,这是人和哺乳动物培养细胞的最适温度。
⑵培养容器需与外界保持通气状态。
⑶箱内空气应保持干净,定期消毒(紫外灯、酒精)⑷水槽:保持一定湿度12.试述清洁液的配方组成及配制时的注意事项。
⑴清洁液:重铬酸钾(g)浓硫酸(ml)蒸馏水(ml),强清洁液63 : 1000:200,次强清洗液120 : 200 : 1000,弱清洁液100 : 100 : 1000⑵配制时应注意安全,须穿戴耐酸手套和围裙,并要保护好面部及身体裸露部分。
配制过程中可使重铬酸钾溶于水中,然后慢慢加浓硫酸,并不停的用玻璃棒搅拌,使产生的热量挥发,配制溶液应选择塑料制品。
配成后清洁液一般为棕红色13.简述消毒灭菌的常用方法、要求条件及主要应用范围。
⑴物理消毒灭菌法①紫外线:用于空气,操作台表面和不能使用其它法进行消毒的培养器皿。
消毒时间:30min (至少);紫外杀菌功能除了紫外本身以外,还可以由产生的臭氧来完成。
紫外灭菌以后,最好过一个小时再进去。
②过滤:0.22卩m(适用于液体)③湿热(高压蒸气灭菌法)15磅,12「C, 20min各种物品有效消毒压力和时间不同,一般要求如下:培养用液、橡胶制品l0 磅l0 分钟布类、玻璃制品、金属器械等15 磅20 分钟④干烤:160C , 2小时(适用于玻璃器皿等)注意:消毒后不要立即打开箱门,以防冷空气骤然进入引起玻璃炸裂,影响消毒效果。
⑵化学消毒灭菌法:①75 %酒精主要用于操作者的皮肤,操作台表面及无菌室内的壁面处理。
②1-2 %o新洁尔灭主要用于器械的浸泡及皮肤和操作室壁面的擦试消毒。
③抗生素主要用于培养用液灭菌或预防培养物污染。
细胞培养中最常用的抗生素是青霉素(常用浓度是100u/ml)与链霉素(100 卩g/ml)。
不要在原代培养中加入抗生素。
14. 如何对玻璃器皿进行有效清洗?玻璃器皿的清洗:浸泡—刷洗(+烘干)—浸酸—冲洗;清洗后的玻璃器皿:干净透明无油迹。
⑴浸泡:①初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡,以使附着物软化或被溶掉。
②新的初次使用的玻璃器皿,在生产及运输过程中,玻璃表面带有大量的干固的灰尘,且玻璃表面常呈碱性及带有一些对细胞有害的物质等。
先用自来水简单刷洗,然后用5%稀盐酸液浸泡过夜,以中和其中的碱性物质。
③再次使用的玻璃器皿则常附有大量刚使用过的残留蛋白质,干固后不易洗掉,用后立即浸入水中,要求完全浸入,不能留有气泡或浮在液面上。
⑵刷洗:用毛刷(特制的羊毛刷)沾洗涤剂刷洗,以除去器皿表面附着较牢的杂质。
刷洗要适度,过度会损害器皿表面光泽度。
自然晾干或烘干后泡酸。
⑶浸酸:玻璃器皿浸泡到清洁液(洗液)中。
清洁液对玻璃器皿无腐蚀作用,而其强氧化作用可除掉刷洗不掉的微量杂质。
浸泡时器皿要充满清洁液,勿留气泡或器皿露出清洁液面。
浸泡时间:一般为过夜,不应少于6小时。
⑷冲洗:在使用后,刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗,使之尽量不留污染或清洁液的残迹。
最好用洗涤装置。
如用手工操作,需流水冲洗十次以上,每次水须灌满及倒干净,然后用蒸馏水清洗3-5 次,晾干(或烘干)备用15.细胞培养中最常用的抗生素及使用浓度是什么?青霉素(常用浓度是100u/ml)与链霉素(100 g/ml)。
16.什么是原代培养?简述原代培养方法的分类及主要操作步骤。
⑴原代培养:取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称原代培养。
⑵原代培养方法分类:贴块法和消化法。
消化法又分为冷消化与热消化;一次性消化与分次消化。
主要步骤:贴块法:将取得洗净并剔去多余成分的组织切成约1mm3 大小的植块,用于植块培养。
消化法:将取得洗净并剔去多余成分的组织剪碎——蛋白酶溶液消化——机械方吹打组织块一对滤过液离心(<1000r/min, <10min)――用培养液悬浮成细胞悬液——计数并调节细胞密度——用于分离细胞培养17.何谓传代培养?简述贴壁细胞的传代操作步骤。
⑴传代培养是指细胞从一个培养瓶以1:2 或其他比率转移,接种到另一培养瓶的培养。
⑵贴壁细胞传代培养:①选取生长良好的细胞,在超净工作台的酒精灯旁,倒去瓶中的旧培养液,加入2〜3ml的D- Hanks液,轻轻振荡漂洗细胞,以除去悬浮在细胞表面的碎片。
②加入适量0.1%—0.25%胰蛋白酶消化液,室温消化,倒置显微镜下观察,待细胞单层收缩突起出现空隙时,倒去酶液。
③用Hanks液洗涤1次,加入适量培养液,反复吹打细胞,使其成细胞悬液。
④以1:2 或1 :3进行分装,并在培养瓶上做好标记,注明代号、日期,轻轻摇匀,37 C CO2培养箱培养。
⑤观察:细胞培养24h后,即可观察培养液的颜色及细胞的生长情况。
18.收集细胞时一般常用的转速和时间是多少?转速:1000r/min ;时间:5min19. 什么是冷冻保存?影响细胞冷冻保存效果的因素有哪些?⑴冷冻保存(cryopreservation):将体外培养物悬浮在加有冷冻保护剂的溶液中,以一定的冷冻速率降至零下某一温度(一般是低于-70 C的超低温条件),并在此温度下对其长期保存的过程。
⑵① 冷冻速率当冷冻速度过慢时,细胞脱水严重,细胞体积严重收缩,超过一定程度时即失去活性。
冷冻速度过慢,还会引起细胞外溶液部分结冰,从而使细胞外未结冰的溶液中溶质浓度增高,产生溶质损伤。
当冷冻速度过快时,细胞内水分来不及外渗,会形成较大冰晶, 造成细胞膜及细胞器的破坏,产生细胞内冰晶损伤。