公开课动物细胞融合与单克隆抗体ppt课件

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动物细胞融合与单克隆抗体1ppt课件

B. C. 操作步骤基本相同
D. 都能形成杂种细胞
3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（ D ）
A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合 B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成 C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成
4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（ B ）
A．PEG
B．灭活的病毒
C．电刺激
D．离心
5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合
后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能
存活增殖的细胞是
（C
）
①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A.②④
B.①③⑤
C.①②③④
可大量制备
1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ A）
A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞
B.没经过免疫的T淋巴细胞 D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是
（D ）
A. 诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同
D.②③
6.“生物导弹”是指 A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞 C.产生特定抗体的B淋巴细胞 D.在单克隆抗体上连接抗癌药物
（D ）
有梦想，才会有创造！
生物种间杂交想像图已成功的动物细胞融合实例有很多，如人—小鼠、人— 兔、人—鸡、鼠—兔、鸡—鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌—鸡、人—胡萝卜等细胞的融合。
讨论：

动物细胞融合和单克隆抗体公开课ppt课件

8
二：动物细胞融合的成功应用
思考
——单克隆抗体的制备
• 人们获得抗体的传统方法是?
– 将抗原注入动物体,然后从动物血清中提取抗体
• 这种方法的缺点是什么?
– 效率低，产量有限，纯度低，动物抗体注入人体可能产生严重的过敏反应。
• 运用已学知识，设想怎样获得单一类型的抗体？
• 能否用单个B淋巴细胞通过克隆形成的细胞群来
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7
Hale Waihona Puke 结：比较植物体细胞杂交和动物细胞融合
比较项目
植物体细胞杂交
动物细胞融合
原理融合前处理诱导方法
细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
细胞膜的流动性
用纤维素酶、果胶酶去壁
用胰蛋白酶使细胞分散
物理、化学方法
物理、化学、生物方法
用
途
获得部分或完整植株
主要用于制备单克隆抗体
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2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体
3）、为何要进行两次筛选？
第1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞群。
4）、如何进行第2次筛选？培养在多孔培养板上，每孔只有一个杂交瘤细胞。
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病毒颗粒黏附细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接
细胞融合、形成杂种细胞 5
3、动物细胞融合技术的应用
• 细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使
远缘杂交成为可能。
• 利用杂交瘤技术，制备单克隆抗体。
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动物细胞融合与单克隆抗体PPT

跟踪训练
(2011年滦县高二检测)能使动物细胞融 )
合的特有的诱导因素是( A．离心
B．灭活的病毒
C．电激
答案：B
D．振动
单克隆抗体的制备 1．关键思路及操作依据 (1)关键思路
①克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。
②将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得杂交瘤细胞。 (2)用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的原因
)
动物细胞工程动物细胞培养和融合，单克隆抗体的制备胰蛋白酶处理，制作细胞悬液物理方法、化学方法、生物方法单克隆抗体的制备动物血清不可缺少
A.1 C．3
B．2 D． 4
【尝试解答】
【解析】
B
选B。植物细胞工程常采用的技术手段
有植物组织培养和植物体细胞杂交。动物细胞工程
常采用的技术手段有动物细胞培养、细胞融合、单克隆抗体的制备，还有胚胎移植、核移植等。动、
细胞。
远缘杂交的不亲合性，成为研 4．意义：克服了______ 遗传、_________ 细胞免疫、肿瘤和生物_______ 新品种培究细胞_____
育的重要手段。
二、单克隆抗体
1．传统抗体的获得
抗原，使动 (1)方法：①向动物体内反复注射某种_____ 抗体；②从动物_____ 血清中分离所需抗体。物产生_____ 产量低、纯度低、_______ 特异性差。 (2)特点：_______
动物细胞融合 1．原理：膜的流动性。 2．诱导方法：物理法——离心、振动、电激；化学法——聚乙二醇；生物方法——灭活的病毒。
3．动物细胞融合的过程
4．优点：动物细胞融合技术突破了有性杂交方法
的局限性，使远缘杂交成为可能。特别提醒灭活是指用物理或化学的手段使病毒或细菌失去感染能力，但是并不破坏这些病原体的抗原结构。

(展示课)动物细胞融合与单克隆抗体(上课)ppt课件

检验阳性细胞
单克隆抗;体.
体外培养特异性强，灵敏度高
7
单抗制备过程分哪几步？请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？
;.
8
课堂小结：
现在你能主持“太空婚礼”动物科研项目了吗？
比较项目
植物体细胞杂交
单克隆抗体的制备
原理融合前处理
促融方法
第一步过第二步程
比较项目植物体细胞杂交单克隆抗体的制备原理融合前处理促融方法用途过程第一步第二步第三步第四步细胞膜的流动性细胞的全能性酶解法去壁物理法化学法膜的流动性细胞增殖小鼠免疫处理细胞分散物理化学生物法原生质体的制备原生质体的融合与筛选杂种细胞的形成与培养杂种植株的鉴定融合亲本细胞的准备动物细胞融合与两次筛选产特定抗体的杂交瘤细胞培养单克隆抗体的分离提纯单抗有助于疾病的诊断治疗预防获得具优良性状的杂种植株课堂小结
培养液中融合细胞
有几种类型？
多种杂交细胞注射到小鼠体内
骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞
B淋巴细胞--- B淋巴细胞能产在杂第生该专具交1专细次一有瘤一胞筛抗筛细B抗继淋选体选胞体承巴目检作有又双细的验用何能亲胞：阳的特无细-得性培点-限胞-到养？骨增的杂基髓殖遗交上瘤。传瘤培细特细养胞性胞，。既
克隆上述杂交细胞第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产分生开所不需同抗杂体交的细杂胞交，瘤克细隆胞专。一抗体，
;.
5
2. 单克隆抗体的制备问题：如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。
提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？
提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？

人教版教学课件动物细胞融合与单克隆抗体(共20张PPT)

培养液中或小鼠腹腔中培养从培养液或小鼠腹水中提
如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？
融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体。那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。阳性孔中的细胞还不能保证是来自单个细胞，挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，直至确信每个孔中增殖的细胞为单克隆细胞。该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。
产生相应的B淋巴细效应B淋巴细胞胞
融合
培养骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞
多种杂交细胞
（只考虑两两融合）骨髓瘤细胞---骨髓瘤细培养液中细胞有几胞种类型？融合细胞在具有筛选作用的培养基上培养几种类型？ B淋巴细胞--- B淋巴细胞
专一抗体检验阳性 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞克隆上述杂交细胞
注射到小鼠体内
设计方案：
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖
动物细胞融合技术单克隆动物细胞培养技术杂交瘤细胞抗体既能产生特异性抗体，又能大量繁殖的细胞
(1)、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能
迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。
(2)、过程
1、单克隆抗体的制备过程
注射特定抗原蛋白
5、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细胞
灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞进行有丝分裂
6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段

动物细胞融合与单克隆抗体ppt课件

体细胞培养
供体牛
胚胎电激处理使供体核进入受体移植代孕母牛卵母细胞构建重组胚胎
克隆牛
存在的问题（1）成功率非常低
（2）克隆动物表现出遗传和生理缺陷等健康问编辑题版（ppt3）对克隆动物食品的安全2性
问题也存在争议。
专题2 细胞工程
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体环节Ⅰ：学习目标
1.掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
10
例1 下图表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答:
(1)若A、B细胞为动物细胞,从A
和B细胞到C细胞的过程中,常用
灭活的病毒
作为诱导剂来
诱导融合。A、B融合为C的过程
说明细胞膜具有流动性特性。其融合完成的标志是
细胞核融合
。得到的C细胞可称为杂交细胞
。
(2)若A、B细胞为植物细胞,那么这样的细胞已经用酶降解去掉了细胞壁 ,这种酶可能是纤维素酶和果胶酶,由此生成的A和B细
泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单
克隆抗体。 2、怎样才能获得单克隆抗体？
提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和
肿瘤细胞无限增殖能力编同辑时版pp具t 备呢？
பைடு நூலகம்
13
B淋巴细胞接受抗原刺激后，能分泌针对该抗原的特异性抗体，在体液免疫中具有重要功能。
课
动物组织块幼龄动物的器官组织；动物胚胎
前
胰蛋白酶处理分散成单个细胞
复
习
加入培养液
细胞贴壁
细胞悬液适宜条件
接触抑制原代培养
原代培养
传代培养

动物细胞融合和单克隆抗体PPT教学课件

题 • (2)应用 • ①作为诊断试剂，具有准确、_高__效__、简易、_快__速__的优点。 • ②用于_治__疗__疾__病__和__运__载__药__物_。
归
生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）
纳
7.概括单克隆抗体的概念
单：单个细胞克隆:无性繁殖抗体:化学性质单一、特异性强
• 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一特异性强的抗体
A.经过免疫的B淋巴细胞
A
B.没经过免疫的T淋巴细胞
C.经过免疫的T淋巴细胞
D.没经过免疫的Ｂ淋巴细胞
反馈
3、“生物导弹”是指
A.单克隆抗体
B.杂交瘤细胞
D
C.产生特定抗体的B淋巴细胞
D.在单克隆抗体上连接抗癌药物
练
B 4、动物细胞融合技术最重要的用途是
A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体
布
置
1 完成练习册习题
2 总结本章知识体系
作
业
2．Demand，Supply & Equilibrium Price
需求、供给和均衡价格
（对应教材第2章）
微观经济学的形成
• 市场需求理论的现代理论是以Alfred Marshall (18421924)建立的体系为依据的，他的代表作是1890年的 Principles of Economics《经济学原理》，
• 古典学派的创始人是Adam Smith (1723-1790)；他的代表作是An Inquiry into Nature and Causes of the Wealth of Nation《国民财富的性质和原因的研究》
2．1 Demand 需求
• 2．1-1 Demand and Price 需求与价格

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目的获：得产生
相应抗体的B 细胞
（二选）：选能产生所需专
一抗体的杂交瘤细胞
体外培养小鼠腹腔内培养
ppt课件.
√ BB 、B瘤、瘤瘤
（B、瘤）
（一选）选择性培养基：
只有杂交瘤细胞才
能存活
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2.2单克隆抗体的应用特异性强
单克隆抗体最主要的优点：灵敏度高
并能大量制备
诊断试剂——最广泛应用
细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接
细胞融合，形成杂交细胞
（细胞膜具有一定的流动性）
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8
1.2动物细胞融合过程
为什么灭活的病毒能作诱导剂？
灭活丧失感染性保留融合活性
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9
1.3动物细胞融合技术的意义和应用
意义：
Hale Waihona Puke 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能
应用：制备单克隆抗体（最主要的应用）
但是体外
怎样大量
？获得单一抗体
培养的细胞不能无限增
殖
癌细胞
既能产生特异性抗体，
又pp能t课件大. 量增殖的细胞 12
你的设想
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖
单克隆动物细胞培养技术杂交瘤细胞
抗体
动物细胞融合技术
既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞
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细胞继承了_双__亲__细__胞__的__遗__传__物__质____ ，因此不仅能分泌特异__性__抗__体_____ ，还有大量增殖本领。
（3）该方案的目的是__制__备__单__克__隆__抗__体___________。
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课后作业：
比较动、植物细胞杂交技术
比较项目细胞融合细胞融合诱导手段的原理的方法
人工诱导
动物细胞融合（也称细胞杂
交）：是指两个或多个细胞融
合形成一个单核细胞的过程。
杂交细胞
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6
原理：细胞膜的流动性（与植物细胞融合的基本原理相同）
物理法：离心、电激、振动诱导方法化学法：聚乙二醇(PEG)
生物法：灭活的病毒（特有的方法）
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7
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
植物体细胞杂交
用途
动物细胞融合
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单克隆抗体: 单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体
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的方法，设计的生产破伤风杆菌抗
①
体的实验方案。据图回答：
（1）该方案能达到预期效果吗？不能。原因是
__没__有__将__抗__原__注__入__小__鼠__体__内__，__无__法__获_得 __产__生__专__一__抗__体__的_。B淋巴细胞
（2）图中②为细胞融合过程，常用灭活病毒作为诱导剂。该
成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段
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抗体的传统生产方法
抗原反复注射动物
该法制备抗体的缺点：产量低纯度低
特异性差灵敏度低
从动物的血清中分离抗体
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1975年的实验室
一个美丽的发现
每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体
进行无性繁殖（克隆）
C.可形成新个体
D.培养过程会贴壁
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【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单
克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ A ）
A.经过免疫的B淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞
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【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下
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1
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2
番茄-马铃薯（理想图）
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3
有梦想，才会有创造！
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如何实现人、动物之间
细胞的融合呢？
人—鼠（想像图）
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1.1动物细胞融合的概念
A细胞
B细胞
列实验步骤中错误的是（ B ）
A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞
B．用纤维素酶×处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体
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15、右图为某同学根据杂交瘤技术
－－灭活病毒三个“一” 一个新细胞－－杂交瘤细胞
一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势
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B 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）
A.离心
B.灭活的病毒
C.电刺激
D.振动
【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息
A
)
B.能无限增殖
准确、高效、简易、快速
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治疗疾病和运载药物
主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。
“生物导弹” ＝单克隆抗体＋药物
单抗导向，药物为弹头
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动物细胞融合过程两个过程
单克隆抗体制备过程
一个诱导细胞融合的新方法