鸭瘟病毒感染的诊断与病毒分离鉴定

《上海畜牧兽医通讯》２００７年第６期　・２１　・　

疑似鸭瘟病毒的分离培养、鉴定　

蒋　涛　刘维全　张乐萃　徐　一　王英华。　

（１莱阳农学院动物科技学院　山东青岛　２６６１０９　２中国农业大学生物　

学院北京海淀区　１０００９４　３黄岛出入境检验检疫局２６６５５５）　

【摘要】本实验通过鸭胚屎囊腔接种，对从山东采集的疑似鸭瘟的病鸭肝组织进行了病毒分离，获得了病毒分离　

株。此病毒用常规疫苗无法预防。对病毒进行负染、电镜观察。经形态学、理化特性、生物学特性、致病性、抗原性和　

分子生物学特性测定表明该病毒为不耐酸、不耐碱、不耐热、对氯仿处理敏感、核酸类型为双股ＤＮＡ的有囊膜病毒，　

直径为１２０～２００　ｎｍ。此分离株对１０日龄鸭胚的死亡率为１００％，人工感染１５日龄雏鸭的致死率为１００％。通过人　

工感染雏鸭可成功复制出与自然感染病例相同或相近的肉眼病变及组织学病变。　

关键词：鸭瘟病毒；分离鉴定　

鸭病毒性肠炎（ｄｕｃｋｖｉｒｕｓｅｎｔｅｒｉｔｉｓ，ＤＶＥ），俗称鸭瘟　

（ｄｕｃｋｐｌａｇｕｅ，ＤＰ）．是常见于鸭、鹅、天鹅等雁行目禽类的一种　

急性、高度接触性传染病，是目前对世界范围水禽养殖业危　

害最严重的疫病之一　１］。该病最初在１９２３年发现于荷兰，　

在我国于１９５９年首次报道。１９４９年第１４届国际兽医学会　

建议采用“鸭瘟”作为法定的名称　２。。近年ＤＰＶ的研究进展　

较慢，发病和流行有日趋严重之势，并出现了一些新的特点。　

１９５７年以来，本病广泛流行于我国华南、华中和华东等　

各省（市、自治区）养殖业较发达的地区，造成很大的经济损　

失　Ｉ３］。根据农业部的疫情公报，至今在各养鸭地区仍有散在　

暴发。　

鸭瘟病毒为双股双链ＤＮＡ病毒，疱疹病毒科。无血凝　

特性和血细胞吸附作用，除有芯髓、衣壳、囊膜等常见结构　

外，在衣壳和囊膜间还有疱疹病毒所特有的皮层成分。鸭瘟　

病毒具有疱疹病毒的典型形态结构。　

ＤＰＶ对外界环境具有较强的抵抗力，据报道，将含病毒　

肉鸭常见三大传染病

（一） 鸭病毒性肝炎：

是由鸭病毒性肝炎病毒引起的雏鸭急性传染病，主要发生于3—20日龄雏鸭，春季3-4月份最易流行，一周龄以内的小鸭死亡率可达80%以上，2—3周龄50%左右。4周龄以后发病死亡率很低。其临床症状主要为神经症状，角弓反张。全身痉挛，头竭力向背部后勾，双脚向后反复抽蹬，很快衰竭死亡。

病理变化主要是肝脏肿大，表面有散在大小不等的出血点，胆囊肿大，充满胆汁，肾多数肿胀，脾肿大，成花斑状。

在疫区，一日龄雏鸭，在颈背部皮下，注射高免血清，预防量0.5ml，治疗量1.0ml，连续2—3天。如用鸭病毒性肝炎弱毒苗注射1—7日龄雏鸭，5—6天产后生保护力。

根本解决本病的办法是种鸭在产蛋前一个月，注射鸭病毒性肝炎病毒，二周后重复接种一次，可为其后代提供三周保护力。

（二） 鸭瘟（鸭病毒性肠炎）：

是由疱疹病毒引起的一种急性、高度致死性的传染病，其特征为两脚麻痹，腹泻，粪便呈绿色或青灰色，部分病鸭头颈肿大，俗称“大头瘟”或“软脚瘟”，死亡率可达60—90%。

该病对不同年龄和品种的鸭均可感染，具有诊断意义的病理变化，主要为食道粘膜有条纹状黄色假膜，剥离后留下溃疡。泄殖腔病变与食道相似，但不易剥离。

一旦发病，迅速将鸭群分离成病鸭群、假定健康群和健康群，隔离饲养，并紧急接种疫苗，初期感染的鸭群，注射鸭瘟高免血清1—2ml，有一定疗效，鸭瘟流行地区和受威胁地区，20日龄以上雏鸭接种疫苗，可保护6个月，成年鸭接种疫苗，可保护一年。

（三） 鸭传染性浆膜炎：

本病是由鸭疫里奥氏杆菌引起的急性或慢性传染病，我国在1982年，在北京地区饲养的北京鸭中，首先发现此病，1—3周龄的鸭都易感，但以2—4周龄的雏鸭高发，在污染的环境中，发病率可达90%，死亡率50—90%不等，饲养管理粗放，环境被污染，

饲料中蛋白质含量过低，维生素、微量元素缺乏，都是本病发生的诱因。

本病的临床症状主要为远动失调，头颈震颤，勾向背部，两腿后伸，角弓反张，全身痉挛，抽搐致死。

鸭病，特别是一些烈性的鸭传染病，严重地影响着鸭的健康，会给养鸭业造成重大的损失。因此必须加强饲养管理，认真做好鸭病的防治工作，以防鸭病的的发生。

１、鸭瘟

是一种急性、热性、败血性传染病。任何品种、性别和年龄的鸭都可能感染发病。病鸭的临床特点是头部肿大，流泪，两脚发软，拉绿色稀粪，体温升高，剖检时见肝脏有出血点，泄殖腔出血、水肿和坏死。鸭群感染鸭瘟后，迅速蔓延，发病率和死亡率都很高，往往造成大群死亡。

流行特点：在自然的情况下，不但鸭能感染，而且成年鹅也能感染，均可引起大群发病死亡。任何品种、年龄和性别的鸭都能感染本病，但发病率和死亡率有一定的差异。成年鸭较易感。在流行期间，死亡最严重的是产蛋鸭。20日龄以下的雏鸭较少发病。

健康鸭群和病鸭或病愈不久的带毒鸭一起放牧或在水中相遇，或健康鸭群放牧时经过疫区，都能发生感染。被患鸭的排泄物和分泌物污染的土壤、用具、运输工具、饲料以及饮水，都能成为本病的传染媒介。

鸭瘟的流行有明显的季节性，通常在春夏之际和秋季流行最严重，低洼潮湿能促使本病发生与流行，如将鸭群饲养在地势高和干燥的地方，本病较少发生和流行。鸭群饲料质量低劣、饲养管理不当是本病发生的诱因。不严格执行防疫措施，引入病鸭或带毒鸭，可引起本病的暴发。

症状：健康鸭感染鸭瘟后，一般2-5天就会出现明显的症状，约经1-5天死亡。

发病期，病鸭体温升高到42-44℃，显稽留热型，食欲减退，精神很差，离群独处，羽毛松乱；继而食欲完全消失，渴欲增加，两脚发软，翅膀下 垂，常伏地不愿走动，也不愿下水游泳，如强行驱赶，则步态摇摆稳，走几步之后，立即倒地。如强赶病鸭下水，则只漂浮于水面上。或挣扎着上岸。严重时则完全 不能行走和站立。病鸭下痢。粪便稀薄，呈绿色或灰白色，肛门周围的羽毛被沾污或结块。眼结膜充血、水肿，部分外翻，大多数病鸭流泪和眼睑水肿，眼睑周围的 羽毛沾湿。眼分泌物初为浆液性，继而粘脓样，上下眼睑常粘连。部分病鸭头部大或下颌水肿，故俗称“大头瘟”或“肿头瘟”。病的后期，病鸭体温逐渐下降至常 温以下，精神高度沉郁，不久即死亡。病程一般为2-35天，多呈急性经过。自然流行时，死亡率达90％以上，病程短，通常在发现停食后1-2天即死亡。个 别不死的可转为慢性，病鸭消瘦，生长发育不良，最具特征的症状为角膜混浊，甚至溃疡，一侧性或双目失明。

．．——３７４－－——　江苏农业科学２０１１年第３９卷第６期　

钮慧敏，李银，黄欣梅，等．１株鸭病毒性肝炎病毒的分离与鉴定［Ｊ］．江苏农业科学，２０１１，３９（６）：３７４—３７６　

株鸭病毒性肝炎病毒的分离与鉴定　

钮慧敏　，李银　，黄欣梅　，刘宇卓　，张敬峰　，李彤彤　，刘　飞‘‘　，李祥瑞　

（１．江苏省农业科学院兽医研究所／农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室／国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京２１００１４；　２．南京农业大学动物医学院，江苏南京２１００９５）　

摘要：从南京江浦某鸭场发病死亡的８日龄雏鸭肝脏中分离到１株病毒，该病毒耐氯仿，无血凝性，ＲＴ—ＰＣＲ鉴　

定及序列分析结果表明，该分离病毒为Ｉ型鸭病毒性肝炎病毒。该毒株的病毒含量为１０　ＥＬＤ　／０．１　ｍＬ，病毒回归鸭　

出现与临床发病鸭相同的症状，从攻毒死亡鸭体内分离到Ｉ型鸭病毒性肝炎病毒。　

关键词：鸭病毒性肝炎病毒；分离鉴定；序列分析；病毒回归试验　

中图分类号：￥８５８．３２２．６５　文献标志码：Ａ　文章编号：１００２—１３０２（２０１１）０６—０３７４—０２　

鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）是雏鸭的一种高度致死性的病毒　

性传染病　。该病具有发病急、传播快、死亡率高、死亡姿势　

为角弓反张等特征　，病理变化为肝脏肿大和出血　，常给　

养鸭场造成重大的经济损失。鸭肝炎病毒（ｄｕｃｋ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　ｖｉ—　

ｒｕｓ，ＤＨＶ）有３个血清型　，即Ｉ、Ⅱ、Ⅲ型，我国流行的主要　

为血清Ｉ型　，这３个血清型具有明显的差异，无交叉免疫　

性。目前，已有多种检测ＤＶＨ　Ｉ型抗原的方法，如免疫电镜、　

Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ和病毒中和试验等，这些方法在Ｉ型ＤＶＨ的诊　

断中各有优势　。作为一种新的分子生物学检测技术，　ＰＣＲ具有灵敏度高、快速、特异、操作简单等优点　。随着　

ＰＣＲ技术不断改进，这种针对病原核酸的诊断方法表现出更　

准确、灵敏和特异的特点　，现已成为动物病原检测的重要