一次性腹腔注射Diquat诱导构建肉仔鸡慢性氧化应激模型
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腹腔一次注射法构建百草枯致小鼠肺间质纤维化模型董雪松;刘盛业;刘伟;刘淑英;刘志【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2011(19)4【摘要】Objective To develop an easy- and simple method of establishing mouse model of paraquat-induced pulmonary fihrosis. Methods Thirty-three C57 BL/6 J mice were divided randomly into the experimental group ( n = 30) and control group( n = 3 ). Paraquat ( 10 mg/kg) was administrated to the animals of the experimental group by a single in-traperitoneal injection. The mice were killed on the day 2,5,7, 14 and 28 after paraquat administration. The mice in the control group were treated by an intraperitoneal injection of physiological saline and killed on the28th day. The general conditions, macroscopic structure and pathological changes of lung in the mice of both groups were examined and analyzed. Results The manifestation of intoxication was shown at 2 h after paraquat administration and obvious fibrosis of the lung tissue was observed on the day 28 in the experimental group. Conclusions A mouse model of pulmonary fibrosis can be established conveniently and reliably by a single intraperitoneal injection of paraquat. It may be used to study the pathogen-esis and treatment of paraquat-induced pulmonary fibrosis.%目的建立一种简便易行的百草枯(PQ)致肺间质纤维化动物模型.方法 33只C57BL/6J小鼠随机分为实验组(30只)和对照组(3只).实验组腹腔一次性注射PQ10mg/kg,并于染毒后第2、5、7、14、28天处死小鼠,对照组腹腔注射生理盐水并于第28天处死.观察两组小鼠的一般情况、肺组织大体结构和肺组织病理学改变.结果实验组小鼠在染毒后2h即出现中毒性改变,肺组织在第28天出现了明显的纤维化改变.结论腹腔一次性注射PQ能简便、可靠的构建出肺纤维化动物模型,可用于进一步研究PQ中毒所致的肺间质纤维化发病机制和治疗方法.【总页数】3页(P351-353)【作者】董雪松;刘盛业;刘伟;刘淑英;刘志【作者单位】中国医科大学附属第一医院急诊科,沈阳 110001;中国医科大学95期七年制,沈阳 110001;中国医科大学附属第一医院急诊科,沈阳 110001;中国医科大学附属第一医院急诊科,沈阳 110001;中国医科大学附属第一医院急诊科,沈阳110001【正文语种】中文【中图分类】Q95-33;R563.13【相关文献】1.百草枯一次灌胃构建家兔肺间质纤维化模型 [J], 郭书华;尹江宁;任国庆;蔡华忠2.腹腔注射百草枯构建小鼠肺纤维化模型 [J], 祝春青;陈冬波;王喆;王慧娜;葛翠翠;刘兵;邱泽武;吕双红3.百草枯致小鼠肺间质纤维化过程中Smad3蛋白的表达 [J], 董雪松;刘伟;刘淑英;刘志4.辅助性T细胞17活化在百草枯致小鼠肺纤维化模型中的作用 [J], 王彦军;贾文元;黄杨;龚晓亮;肖扬;尹文5.百草枯中毒致小鼠肺纤维化模型的建立 [J], 王萍;李铁刚因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
中国畜牧兽医 2024,51(3):1086-1093C h i n aA n i ma lH u sb a n d r y &V e t e r i n a r y Me d i c i n e 过氧化氢酶对肉鸡生产性能㊁抗氧化能力㊁盲肠微生物及代谢物的影响张文翔1,王建平2(1.固始县动物卫生监督所,信阳465200;2.河南科技大学动物科技学院,洛阳471023)摘 要:ʌ目的ɔ本试验旨在研究过氧化氢酶(C A T )对肉鸡生产性能㊁抗氧化能力㊁盲肠微生物及其代谢物的影响,为C A T 在动物上的应用提供理论依据㊂ʌ方法ɔ选用1日龄黄羽肉鸡600只,随机分为5组:空白对照组(C O N )㊁抗生素组(A n t i )和C A T 低㊁中㊁高剂量组(C A T 1㊁C A T 2和C A T 3),每组6个重复,每个重复20只㊂其中,C O N 组饲喂基础饲粮;A n t i 组在基础饲粮中添加50m g /k g 金霉素;C A T 1㊁C A T 2和C A T 3组在基础饲粮中分别添加100㊁150和200U /k g C A T ,试验期42d ㊂试验结束后,测定生产性能;采集血清㊁盲肠食糜用于测定抗氧化指标㊁微生物菌群及其代谢物含量㊂ʌ结果ɔ与C O N 组相比,C A T 各剂量组平均日增重和平均日采食量均显著提高(P <0.05),且达到了A n t i 组水平,但是增加C A T 剂量没有进一步提高这些指标㊂与C O N 组相比,C A T 各剂量组和A n t i 组血清C A T 和超氧化物歧化酶活性均显著提高(P <0.05),丙二醛㊁蛋白羰基和8-羟基脱氧鸟苷含量均显著降低(P <0.05),且C A T 各剂量组8-羟基脱氧鸟苷与A n t i 组持平㊂盲肠微生物分析显示,与C O N 组相比,C A T 各剂量组变形菌门㊁乳杆菌属和粪杆菌属的数量显著增加(P <0.05),但是梭菌属数量显著降低(P <0.05)㊂与C O N 组相比,C A T 各剂量组盲肠内容物中乳酸㊁乙酸㊁异戊酸含量显著提高(P <0.05),戊酸含量显著降低(P <0.05);C A T 各剂量组甲胺㊁色胺㊁腐胺㊁尸胺和总胺的含量显著降低(P <0.05);C A T 2和C A T 3组亚精胺显著降低(P <0.05),C A T 剂量效应比较分析显示,C A T 2和C A T 3组腐胺㊁尸胺和总胺含量显著低于C A T 1组(P <0.05)㊂ʌ结论ɔ饲粮添加150或200U /k g C A T 可促进动物生长和健康㊂关键词:肉鸡;过氧化氢酶;生产性能;抗氧化能力;盲肠微生物中图分类号:S 829.1文献标识码:AD o i :10.16431/j.c n k i .1671-7236.2024.03.020 开放科学(资源服务)标识码(O S I D ):收稿日期:2023-08-29基金项目:国家自然科学基金(31272466)联系方式:通信作者张文翔,E -m a i l :584287678@q q.c o m E f f e c t o fC a t a l a s e o n t h eP r o d u c t i o nP e r f o r m a n c e ,A n t i o x i d a n t C a p a c i t y,C e c a lM i c r ob e a n dM e t a b o l i t e s i nB r o i l e r sZ H A N G W e n x i a n g 1,WA N GJ i a n p i n g2(1.S u p e r v i s i o n I n s t i t u t e o f A n i m a lH e a l t ho f G u s h iC o u n t y ,X i n y a n g 465200,C h i n a ;2.C o l l e g e o f A n i m a lS c i e n c e a n dT e c h n o l o g y ,H e n a nU n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y ,L u o y a n g 471023,C h i n a )A b s t r a c t :ʌO b je c t i v e ɔT h eef f e c to f c a t a l a s e (C A T )o nt h e p r o d u c t i o n p e r f o r m a n c e ,a n t i o x i d a n t c a p a c i t y ,c e c a lm i c r o b ea n d m e t a b o l i t e s i nb r o i l e r sw a s i n v e s t ig a t e di nthi ss t u d y ,f o r p r o v i d i n g t h e o r e t i c a l f o u n d a t i o n i nt h ea p p l i c a t i o no fC A Ti na n i m a l p r o d u c t i o n .ʌM e t h o d ɔ6001-d a y-o l d Y e l l o w F e a t h e r e d b r o i l e rc h i c k e n s w e r es e l e c t e d a n dr a n d o m l y d i v i d e di n t o5g r o u ps :B l a n k c o n t r o l g r o u p (C O N ),a n t i b i o t i c g r o u p (A n t i ),a n dl o w ,m e d i u m a n dh i g h -d o s e C A T g r o u ps (C A T 1,C A T 2a n dC A T 3),w i t h6r e p l i c a t e s i ne a c h g r o u p a n d20c h i c k e n s i ne a c hr e p l i c a t e .A m o n g t h e m ,C O N g r o u p w a s f e dw i t hb a s i c f e e d ,A n t i g r o u p a d d e d 50m g /k g c h l o r a m ph e n i c o l t o3期张文翔等:过氧化氢酶对肉鸡生产性能㊁抗氧化能力㊁盲肠微生物及代谢物的影响t h eb a s i cd i e t,a n dC A T1,C A T2a n dC A T3g r o u p sw e r es u p p l e m e n t e dw i t h100,150a n d200U/k g C A Ti n t h eb a s i cd i e t,r e s p e c t i v e l y.T h e f e e d i n g t r i a l l a s t e df o r42d.A f t e r t h ee x p e r i m e n t,t h e p r o d u c t i o n p e r f o r m a n c ew a sm e a s u r e d,a n ds e r u ma n dc e c a l c h y m ew e r ec o l l e c t e df o rm e a s u r i n g a n t i o x i d a n t i n d i c a t o r s,m i c r o b i a lc o m m u n i t i e sa n d m e t a b o l i t ec o n t e n t.ʌR e s u l tɔC o m p a r e d w i t hC O N g r o u p,t h eAD Ga n d A D F Io fe a c hd o s e g r o u p o fC A T w e r es i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d(P<0.05),r e a c h i n g t h e l e v e lo f t h eA n t i g r o u p.H o w e v e r,i n c r e a s i n g t h eC A T d o s ed i dn o t f u r t h e ri m p r o v e t h e s e i n d i c a t o r s.C o m p a r e dw i t hC O N g r o u p,t h es e r u m C A Ta n ds u p e r o x i d ed i s m u t a s e a c t i v i t i e sw e r e s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d i na l l d o s e g r o u p s o fC A Ta n dA n t i g r o u p(P<0.05).T h e l e v e l so f m a l o n d i a l d e h y d e,p r o t e i n c a r b o n y la n d8-h y d r o x y d e o x y g u a n o s i n e w e r e s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d(P<0.05),a n dt h e8-h y d r o x y d e o x y g u a n o s i n el e v e l s i na l ld o s e g r o u p so fC A T w e r e c o n s i s t e n tw i t h t h o s e i nA n t i g r o u p.C e c a lm i c r o b i o t aa n a l y s i s s h o w e dt h a t c o m p a r e dw i t hC O N g r o u p,t h en u m b e ro fP r o t e o b a c t e r i a,L a c t o b a c i l l u s a n d F a e c a l i b a c t e r i u m i ne a c hd o s e g r o u p o f C A Ts i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d(P<0.05),b u t t h en u m b e ro f C l o s t r i d i u m d e c r e a s e ds i g n i f i c a n t l y (P<0.05).C o m p a r e dw i t hC O N g r o u p,t h e l e v e l so f l a c t i c a c i d,a c e t i c a c i da n d i s o v a l e r i c a c i d i n t h e c e c a l c o n t e n t s o f e a c hd o s e g r o u p o fC A T w e r e s i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d(P<0.05),w h i l e t h e c o n t e n to f v a l e r i c a c i d w a s s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d(P<0.05);T h el e v e l s o f m e t h y l a m i n e, t r y p t a m i n e,p u t r e s c i n e,c a d a v e r i n e,a n d t o t a l a m i n e i ne a c hd o s e g r o u p o fC A T w e r e s i g n i f i c a n t l y r e d u c e d(P<0.05);T h el e v e l so fs p e r m i d i n e w e r es i g n i f i c a n t l y r e d u c e di n C A T2a n d C A T3 g r o u p s(P<0.05),a n dac o m p a r a t i v ea n a l y s i so fC A T d o s ee f f e c t ss h o w e dt h a t t h el e v e l so f p u t r e s c i n e,c a d a v e r i n e a n d t o t a l a m i n e i nC A T2a n dC A T3g r o u p sw e r es i g n i f i c a n t l y l o w e r t h a n t h o s e i nC A T1g r o u p(P<0.05).ʌC o n c l u s i o nɔA d d i n g150o r200U/k g C A Tt of e e dc o u l d p r o m o t e a n i m a l g r o w t ha n dh e a l t h.K e y w o r d s:b r o i l e r;c a t a l a s e;p r o d u c t i o n p e r f o r m a n c e;a n t i o x i d a n t c a p a c i t y;c e c a lm i c r o b e氧化是生命衰老和疾病的最大威胁,环境㊁营养和病原等因素会导致生理过程中产生许多氧化物,同时,机体会本能地启动自身抗氧化系统清除这些氧化物㊂通常情况下,生命自身的氧化和抗氧化是处于相对平衡状态[1-2]㊂但是,对于畜禽而言,在经济性状高度选育㊁集约化生产以及促生长抗生素禁用的综合背景下,动物自身的抗氧化能力变得极其脆弱㊂抗氧化能力降低将对免疫力产生负面影响,对病原的抵抗力下降,最终导致生产性能下降,甚至发生疾病或死亡㊂由此,外源性抗氧化剂的应用随之兴起㊂外源性抗氧化剂主要包括药物类㊁维生素类㊁植物活性成分㊁抗氧化酶类㊁微生物及其代谢物等[3-4]㊂过氧化氢酶(C A T)是机体内的一种抗氧化酶,主要分布于肝细胞㊁红细胞和肠细胞中,约占过氧化物酶体酶总量的40%[5-6]㊂最近研究发现,饲粮添加0.10%C A T能提高乌苏里貉生长前期生产性能㊁养分消化代谢㊁血清生化和免疫指标[7]㊂饲粮添加200U/k g C A T能改善黄羽肉鸡生长性能㊁肠道组织形态和抗氧化能力[8]㊂在母猪和断奶仔猪饲粮分别添加C A T100U/k g和1.5g/k g,显著提高了母猪㊁哺乳仔猪和断奶仔猪的生产性能和抗氧化能力[9-10]㊂可见,C A T在动物肠道内发挥着抗氧化作用,这种作用是否对家禽肠道微生物及其代谢产生影响鲜见报道㊂本研究旨在研究C A T对肉鸡生产性能㊁抗氧化能力㊁微生物及其代谢的影响,为C A T 在动物上的应用提供理论参考㊂1材料与方法1.1主要试剂和仪器C A T购自洛阳欧科拜克生物技术股份有限公司;兽用金霉素购自金河生物科技股份(银川)有限公司;血清抗氧化物质和氧化产物试剂盒均购自南京建成生物研究所;D N A试剂盒购自生工生物工程(上海)股份有限公司;氨态氮试剂盒购自哈希公司㊂气相色谱仪(7890A型号)和液相色谱仪(1100系列)均购自安捷伦科技(中国)有限公司㊂1.2试验动物与基础饲粮黄羽肉鸡苗购自洛阳立华禽业有限公司㊂试验在河南科技大学动物试验基地进行㊂试验选用1日7801中 国 畜 牧 兽 医51卷龄黄羽肉鸡600只,随机分为5组:空白C O N 组㊁A n t i 组㊁C A T 1㊁C A T 2㊁C A T 3,每组6个重复,每个重复20只㊂其中,C O N 组饲喂基础饲粮;A n t i 组在基础饲粮基础上添加50m g /k g 金霉素;C A T 1㊁C A T 2㊁C A T 3组在基础饲粮基础上分别添加100㊁150㊁200U /k g C A T ㊂试鸡采用地面刨花垫料平养,每个重复为一圈,自由采食和饮水㊂每日检查鸡群健康状况两次㊂试验鸡体重和采食量每周称量一次㊂病死鸡及时捡出并称量体重㊂试验期间,记录初始体重(I B W )㊁终末体重(F B W ),计算平均日采食量(A D F I )㊁平均日增重(A D G )㊁料重比(F /G )和死亡率㊂饲养试验持续至42日龄㊂基础饲粮营养水平参照黄羽肉鸡饲养标准N Y /T3645 2020配制,其原料组成和营养水平见表1㊂表1 基础饲粮组成与营养水平(风干基础)T a b l e 1 C o m p o s i t i o na n dn u t r i t i o n l e v e l s o f b a s a l d i e t (a i r d r y b a s i s )%原料I n g r e d i e n t s 含量C o n t e n t s 营养成分N u t r i e n t c o m p o n e n t s ②含量C o n t e n t s 玉米C o r n 66.3代谢能M E /(M J /k g)12.83豆粕S o y m e a l 21.0粗蛋白质C P 21.22玉米蛋白粉C o r n g l u t e nm e a l5.0钙C a 0.98豆油S o y o i l 3.0总磷T o t a l P 0.66赖氨酸L y s 0.3非植酸磷N o n -p h y t a t eP 0.40蛋氨酸M e t 0.2赖氨酸L ys 0.84食盐S a l t 0.3蛋氨酸M e t0.48石灰粉L i m e s t o n e1.5蛋氨酸+胱氨酸M e t +C y s -C ys 0.75磷酸氢钙D i c a l c i u m p h o s p h a t e 1.4预混料P r e m i x①1.0总计T o t a l100.0①预混料为每千克饲粮提供:维生素A9000I U ;维生素D 34000I U ;维生素E50I U ;维生素K2m g ;维生素B 12mg ;维生素B 25m g ;维生素B 515m g ;维生素B 340m g ;维生素B 62m g ;维生素B 70.1m g ;维生素B 90.55m g ;维生素B 120.01m g ;M n 120m g ;I 1.2m g ;F e 40m g ;C u16m g ;Z n100m g ;S e 0.3m g㊂②依据中国饲料数据库(2020)计算值①P r e m i x p r o v i d e d p e r k g o f d i e t :V A9000I U ;V D 34000I U ;V E50I U ;V K2m g ;V B 12m g ;V B 25m g ;V B 515m g ;V B 340m g ;V B 62m g ;V B 70.1m g ;V B 90.55m g ;V B 120.01m g ;M n 120m g ;I 1.2m g ;F e 40m g ;C u 16m g ;Z n 100m g ;S e 0.3m g .②C a l c u l a t e db y Ch i n e s eF e e dD a t a b a s e (2020)1.3 样品采集饲养试验结束,每个重复随机抽取5只试验鸡,C O 2窒息,心脏采血制备血清,用于测定血清抗氧化活性和氧化产物指标㊂解剖,摘取两侧盲肠,无污染收集内容物,干冰暂时冻存,然后转至-80ħ冻存,以备微生物代谢物㊁种群定量及其代谢物含量分析㊂1.4 样品检测饲料样品C A T 活性,按照G B /T5522 2008分析㊂血清中的C A T ㊁超氧化物歧化酶(S O D )㊁谷胱甘肽过氧化物酶(G P x )㊁丙二醛(M D A )㊁蛋白羰基(P C O )和8-羟基脱氧鸟苷(8-O H d G )按照相应试剂盒说明书测定㊂盲肠微生物菌群由上海派森诺生物科技有限公司采用I l l u m i n aM i s e q 测序平台测定㊂试验鸡盲肠微生物测序及生物信息学分析中,将每个重复的盲肠内容物样品合并,混匀,提取D N A ㊂采用微生物16S r R N A 特异性引物[11](F :5'-T C G T C G G C A G C -G T C A G A T G T G T A T A A G A G A C A G C C T A C G G G -N G G C WG C A G -3',R :5'-G T C T C G T G G G C T C G G -A G A T G T G T A T A A G A G A C A G G A C T A C H V G G -G T A T C T A A T C C -3')对微生物V 3-V 4区进行扩增㊂P C R 扩增体系20μL :5ˑH i g h -F i d e l i t y G C 缓冲液5μL ,D N A 模板2μL ,上㊁下游引物(10μm o l /L)各1μL ,2.5m m o l /L d N T P s 2μL ,H i g h -F i d e l i t yD N A 聚合酶(5U /μL )0.25μL ,d d H 2O8.75μL ㊂P C R 扩增条件为:98ħ预变性2m i n ;98ħ变性15s ,55ħ退火30s ,72ħ延伸30s ,共25个循环;72ħ延伸5m i n ㊂所有样品均重复3次㊂盲肠短链脂肪酸,包括乳酸㊁乙酸㊁丙酸㊁丁酸㊁戊酸㊁异丙酸㊁异戊酸和支链脂肪酸(B C F A ),采用气相色谱法测定㊂生物胺,包括甲胺㊁色胺㊁腐胺㊁尸胺㊁酪胺㊁亚精胺和精胺,采用液相色谱法分析㊂氨态氮(N H 3-N ),按照试剂盒说明书进行定量㊂88013期张文翔等:过氧化氢酶对肉鸡生产性能㊁抗氧化能力㊁盲肠微生物及代谢物的影响1.5数据统计分析试验数据采用S P S S23.0软件进行单因素方差分析,表中数据表示为平均值和标准误(S E M)㊂组间差异采用T u k e y检验法进行多重比较,显著性水准设为P<0.05㊂其中每个重复的生产性能数据为该重复中20只鸡的平均值,血清指标和盲肠指标的数据为该重复5只解剖鸡的均值㊂2结果2.1生产性能和死亡率分析由表2可知,C A T各剂量组平均日增重和平均日采食量均显著高于C O N组(P<0.05),且与A n t i 组无显著差异(P>0.05),C A T各剂量组间也没有显著差异(P>0.05)㊂试验各组之间料重比和死亡率差异均不显著(P>0.05)㊂表2各组生产性能和死亡率比较分析T a b l e2C o m p a r i s o no n p r o d u c t i o n p e r f o r m a n c e a n dm o r t a l i t y i nd i f f e r e n t g r o u p s项目I t e m s对照组C O N抗生素组A n t i过氧化氢酶组C A TC A T1C A T2C A T3标准误S E MP值P-v a l u e初始体重I B W/g39.941.141.340.840.40.9230.896终末体重F B W/k g1.80b2.15a2.09a2.06a2.13a0.0260.031平均日增重A D G/(g/d)41.9b50.2a48.8a48.1a49.8a2.0120.029平均日采食量A D F I/(g/d)107b126a123a122a124a5.6700.041料重比F/G2.562.512.522.532.490.0840.607死亡率M o r t a l i t y/%4.172.502.503.333.330.7030.329同行数据肩标不同字母表示差异显著(P<0.05);肩标相同字母或无字母标注表示差异不显著(P>0.05)㊂下同I n t h e s a m e r o w,v a l u e sw i t hd i f f e r e n t l e t t e r s u p e r s c r i p t sm e a ns i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P<0.05);W h i l ew i t ht h es a m eo rn o l e t t e r s u p e r s c r i p t sm e a nn o s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e(P>0.05).T h e s a m e a sb e l o w2.2血清抗氧化指标比较分析由表3可知,C A T各剂量组血清C A T和S O D 活性显著高于C O N组(P<0.05),且与A n t i组无显著差异(P>0.05),C A T各剂量组间也没有显著差异(P>0.05)㊂同时,血清抗氧化产物分析显示, C A T各剂量组M D A含量均显著低于C O N组(P<0.05),但是只有C A T3组降低幅度与A n t i组相当(P>0.05),且C A T各剂量组之间差异不显著(P>0.05);C A T各剂量组P C O含量显著低于C O N组(P<0.05),显著高于A n t i组(P<0.05),但是无剂量效应;C A T各剂量组8-O H d G水平显著低于C O N组(P<0.05),与A n t i组持平(P>0.05)㊂表3各组血清抗氧化能力比较分析T a b l e3C o m p a r i s o no n s e r u ma n t i o x i d a t i v e c a p a c i t y i nd i f f e r e n t g r o u p s项目I t e m s对照组C O N抗生素组A n t i过氧化氢酶组C A TC A T1C A T2C A T3标准误S E MP值P-v a l u e过氧化氢酶C A T/(U/m L)2.21b3.25a3.05a3.17a2.95a0.128<0.001超氧化物歧化酶S O D/(U/m L)26.3b32.2a30.6a33.0a34.5a0.8760.001谷胱甘肽过氧化物酶G P x/(U/m L)43248746747948525.250.768丙二醛M D A/(n m o l/m L)2.68a1.77c2.11b2.12b1.91b c0.065<0.001蛋白羰基P C O/(n m o l/m L)0.43a0.28c0.35b0.32b0.32b0.017<0.001 8-羟基脱氧鸟苷8-O H d G/(p g/m L)27.5a20.7b23.2b21.3b23.1b1.4260.0202.3盲肠微生物分析各试验组盲肠微生物分析见图1㊂图1A显示了各试验组盲肠微生物门水平数值,包括厚壁菌门(F r i m i c u t e s),分布范围在74.6%~82.6%(P<0.001);拟杆菌门(B a c t e r o i d e t e s),12.2%~14.0% (P=0.662);变形菌门(P r o t e o b a c t e r i a),0.5%~1.4%(P=0.002);放线菌门(A c t i n o b a c t e r i a), 1.4%~2.8%(P<0.001);其他菌门,1.5%~ 7.9%(P<0.001)㊂与C O N组相比,C A T各剂量组变形菌门的数量显著增加(P<0.05)㊂与A n t i 组相比,C A T各剂量组厚壁菌门数量显著减少(P<0.05),其他菌门数量增加(P<0.05)㊂C A T9801中 国 畜 牧 兽 医51卷各组之间门水平微生物差异不显著㊂图1B 为各组盲肠微生物属水平分布㊂其中,罕见小球菌属(S u b d o l i gr a n u l u m ),分布范围在10.9%~15.4%(P =0.056);瘤胃球菌属(R u m i n o c o c c u s ),5.2%~8.0%(P =0.067);乳杆菌属(L a c t o b a c i l l u s ),6.8%~15.2%(P <0.001);拟杆菌属(B a c t e r o i d e s ),10.7%~18.6%(P =0.142);粪杆菌属(F a e c a l i b a c t e r i u m ),6.2%~14.1%(P <0.001);梭菌属(C l o s t r i d i u m ),3.9%~11.8%(P <0.001);丁酸球菌属(B u t yr i c i c o c c u s ),0.5%~1.5%(P =0.052);链球菌属(S t r e p t o c o c c u s ),2.3%~2.8%(P =0.719);双歧杆菌属(B i fi d o b a c t e r i u m ),1.2%~2.3%(P =0.682);嗜热菌属(D e f l u v i i t a l e a ),0.38%~0.41%(P =0.546);其他菌属(o t h e r s ),25.9%~31.9%(P =0.149)㊂与C O N 组相比,C A T 各剂量组乳杆菌属和粪杆菌属显著增加(P <0.05),但是梭菌属显著降低(P <0.05)㊂C A T 各剂量组之间以及与A n t i 组间盲肠属水平微生物的差异均不显著(P >0.05)㊂图1 各组盲肠微生物的门水平(A )和属水平(B )分析F i g .1 A n a l y s i s o f c e c a lm i c r o b e a t t h e p h y l u m (A )a n d g e n u s l e v e l (B )i nd i f f e r e n t g r o u ps 2.4 盲肠微生物脂类代谢物分析试验各组盲肠微生物脂类代谢物比较分析见表4㊂由表4可知,与C O N 组相比,C A T 各剂量组盲肠内容物中乳酸和乙酸显著增加(P <0.05),但是戊酸含量显著降低(P <0.05);C A T 2和C A T 3组异戊酸含量显著降低(P <0.05),总短链脂肪酸显著增加(P <0.05);C A T 2组支链脂肪酸显著增加(P <0.05);与A n t i 组相比,C A T 各剂量组乳酸和乙酸显著提高,戊酸显著降低(P <0.05)㊂另外,C A T 2组乳酸和支链脂肪酸均显著高于C A T 1组(P <0.05)㊂表4 试验各组盲肠内容物短链和支链脂肪酸比较分析T a b l e 4 C o m p a r i s o no n c e c a l l i p i dm e t a b o l i t e s i nd i f f e r e n t g r o u p s μm o l /g 项目I t e m s 对照组C O N抗生素组A n t i过氧化氢酶组C A TC A T 1C A T 2C A T 3标准误S E MP 值P -v a l u e乳酸L a c t i c a c i d 5.03c4.59c7.56b 8.24a8.11a b 0.127<0.001乙酸A c e t a t e 46.4b36.2c51.7a53.4a56.6a1.113<0.001丙酸P r o p i o n a t e 19.6a b17.1b20.8a b22.2a21.7a1.0400.021丁酸B u t y r a t e 14.5a b12.4b16.3a b17.2a b16.8a b1.0720.037戊酸V a l e r a t e6.57a 5.28b4.36c4.19c4.08c 0.205<0.001异丁酸I s o b u t y r a t e 3.934.653.924.233.970.2910.325异戊酸I s o v a l e r a t e 6.02a5.99a5.60a b4.84b4.75b0.2340.001支链脂肪酸B C F A7.95b c6.94c8.41b c11.50a 9.03b0.437<0.001总短链脂肪酸T o t a l S C F A87.6b85.9b95.4a b103.0a107.0a 3.2230.0019013期张文翔等:过氧化氢酶对肉鸡生产性能㊁抗氧化能力㊁盲肠微生物及代谢物的影响2.5盲肠微生物胺类代谢物比较分析试验各组盲肠微生物胺类代谢物比较分析见表5㊂由表5可知,与C O N组相比,C A T各剂量组盲肠内容物甲胺㊁色胺㊁腐胺㊁尸胺和总胺的含量均显著降低(P<0.05);C A T2和C A T3组亚精胺含量显著降低(P<0.05)㊂与A n t i组相比,C A T各剂量组的甲胺㊁色胺㊁腐胺㊁尸胺和总胺均显著降低(P<0.05)㊂C A T剂量效应比较分析显示,C A T2和C A T3组腐胺㊁尸胺和总胺含量显著低于C A T1组(P<0.05)㊂各组间酪胺和氨态氮均无显著差异(P>0.05)㊂表5试验各组盲肠含氮代谢物比较分析T a b l e5C o m p a r i s o no n c e c a l n i t r o g e nm e t a b o l i t e s i nd i f f e r e n t g r o u p s项目I t e m s对照组C O N抗生素组A n t i过氧化氢酶组C A TC A T1C A T2C A T3S E MP值P-v a l u e甲胺M e t h y l a m i n e/(μg/g)7.71a7.44a5.53b4.64b5.41b0.237<0.001色胺T r y p t a m i n e/(μg/g)17.8a17.3a12.0b10.6b10.9b0.546<0.001腐胺P u t r e s c i n e/(μg/g)227a216a165b123c117c9.482<0.001尸胺C a d a v e r i n e/(μg/g)505a460a352b296c325b c12.63<0.001酪胺T y r a m i n e/(μg/g)19.717.015.915.716.31.0800.165亚精胺S p e r m i d i n e/(μg/g)33.5a30.3a29.5a22.6b23.7b1.206<0.001精胺S p e r m i n e/(μg/g)20.7a b20.6a b21.3a18.2b18.6a b0.7580.028总胺T o t a l a m i n e s/(μg/g)831a769b598c487d513d14.93<0.001氨态氮N H3-N/(m g/g)1.181.271.201.241.270.0380.3243讨论本研究中,3个C A T组(100㊁150和200U/k g)试验鸡的终末体重㊁平均日增重和平均日采食量均显著提高,且料重比显著降低,表明C A T能够改善肉鸡的同化作用和生长性能㊂从理论上,C A T是一个非常有潜力的抗氧化添加剂,但是这方面的研究刚刚起步,报道甚少㊂L i等[12]报道,断奶仔猪饲喂外源性C A T(120U/k g),35日龄后,料重比显著降低,日增重和日采食量有增高趋势,但没有达到显著水平㊂另外,本研究中这些生产性能方面的数据与A n t i组比较差异不显著,表明C A T具有与抗生素类似的促生长效果,但是此方面尚无报道,该效果有待后续研究验证㊂本研究中抗氧化能力分析显示,C A T组的血清S O D和C A T活性显著高于C O N组,且与A n t i组差异不显著;同时,饲粮中添加C A T显著降低了血清蛋白质㊁D N A和脂类的氧化产物,包括P C O㊁8-O H d G和M D A,但是C A T组对P C O和8-O H d G 的降低效果没有达到A n t i组同样的效果;这些数据表明饲粮中添加C A T对肉鸡的抗氧化能力有显著的提高作用㊂类似地,C A T组显著降低了乌苏里貉血清中尿素氮㊁脂多糖和肿瘤坏死因子α,显著增加了血清免疫球蛋白A㊁免疫球蛋白G[7]㊂饲粮中添加C A T显著提高了肉鸡㊁母猪和仔猪初乳肝脏和血清C A T活性㊁总抗氧化能力㊁S O D和G P x活性,降低了M D A含量[8-10,13]㊂但是,在脂多糖应激模型中,饲粮中添加C A T仅对血浆G P x活性有显著的提高作用,对血清C A T活性㊁总抗氧化能力㊁S O D 活性和M D A含量无显著效果[12]㊂可见,C A T应对病原毒素如脂多糖的能力尚有欠缺㊂这也与本研究一致,即C A T组的抗氧化能力多数指标亦未达到A n t i组同等水平㊂肠道微生态对畜禽健康㊁生产性能和产品品质具有重要调控作用[14-16]㊂本研究中,饲粮处理导致盲肠门水平微生物存在显著性差异的有厚壁菌门㊁变形菌门和放线菌门;其中,C A T组的变形菌门显著高于C O N组㊂属水平比较分析显示,乳杆菌属㊁粪杆菌属和梭菌属在组间有显著性差异,其中C A T 组乳杆菌属和粪杆菌属显著高于C O N组,而梭菌属显著低于C O N组㊂乳杆菌属和粪杆菌属多为发酵有益微生物,而梭菌属多属于条件性致病菌[17-19]㊂因此,本研究中这些盲肠微生物数据表明,饲粮中添加C A T对肉鸡肠道微生态具有有益调控作用㊂关于C A T对肠道微生物菌群的影响鲜有报道㊂在呕吐毒素诱导的肉鸡模型中,饲粮中添加C A T显著增加了有助于肠道抗氧化和形态学的微生物,包括乳酸杆菌㊁厌氧菌和厌氧杆菌;降低了有害菌群,如变形杆菌㊁伽马杆菌和肠杆菌[20]㊂Z h o u等[21]报道1901中国畜牧兽医51卷饲喂高表达C A T和S O D的益生菌能降低肠炎模型小鼠肠道活性氧和提高维持肠道稳态的重要微生物㊂这种通过益生菌产生抗氧化酶针对性地解决肠道炎症的思路,在畜禽健康养殖方面值得探讨㊂肠道有益细菌发酵碳水化合物产生的代谢物为短链脂肪酸,主要包括乳酸㊁乙酸㊁丙酸㊁丁酸和戊酸[22]㊂短链脂肪酸具有为机体提供能量㊁调节机体免疫㊁调控肠道细胞代谢㊁维持肠道电解质平衡并促进矿物质吸收利用和改善肠道菌群结构等多种生理功能[23-24]㊂本研究中,C A T组乳酸㊁乙酸㊁丙酸以及总短链脂肪酸含量显著提高,表明饲粮中添加C A T 促进了肠道菌群对碳水化合物的发酵,对机体的肠道微生态㊁营养和健康均具有潜在的调控作用㊂更重要的是,本研究中饲粮中添加C A T显著降低了盲肠胺类代谢物,包括甲胺㊁色胺㊁腐胺和尸胺㊂胺类物质是氨基酸代谢的残渣,是肠道主要的有害物质,这些残渣不仅有直接的毒理作用,还导致有害菌群的扩增,严重危害机体健康[25]㊂关于C A T以及抗氧化酶类添加剂对机体肠道微生物代谢的影响鲜有报道,本试验结果表明,C A T可以作为一种抗氧化酶类添加剂应用于动物生产,但是未来仍需要更多㊁更深层次的探讨㊂4结论本试验条件下,饲粮中添加150~200U/k g的C A T可显著提高肉鸡平均日增重㊁平均日采食量㊁血清C A T和S O D活性;增加盲肠中有益菌群如变形菌门㊁乳杆菌属和粪杆菌属的数量,提高盲肠中乳酸㊁乙酸㊁异戊酸以及总短链脂肪酸的含量,降低甲胺㊁色胺㊁腐胺㊁尸胺和总胺的含量㊂参考文献(R e f e r e n c e 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引言硒是一种结构与硫相似的化学元素,它的原子序数是34,有金属性和非金属性,硒的发现比较早,是由瑞典化学家Berzelil在1817年焙烧黄铁矿制备硫酸时发现的[l],直到1957年被美国营养学家schwartz和Foltz等确认为动物体内必需的微量元素。
Rotrku在1973年研究表明硒是谷肤甘肤过氧化物酶(GSH一PX)的组成部分[2]人和动物主要从食物中摄取硒,如果机体的硒不足,将会严重影响人和物的健康与生长,严重的话会引起疾病的发生,如缺硒导致人的大骨节病、克山病、禽的渗出性素质、羊的白肌病、及多种动物繁殖性能降低等疾病。
因此在机体内摄入足够的硒,才能保证畜禽健康生长和发育,免疫和繁殖等功能提高,生长性能得到提高。
目前,补硒的一般来源主要是无机硒,如亚硒酸钠,但大量试验研究发现无论在生物利用率、抗氧化作用效果、组织器官的沉积率和提高机体免疫力与繁殖力等方面,有机硒的作用效果都要比无机硒好[3~7]。
而且随着近几年对硒的研究发现,亚硒酸钠有过氧化特性,生物利用率较低,并且毒性较大而,它的使用会对动物生长发育和环境造成严重的影响,相比生物源性的有机硒而言,有机硒的生物活性大大优于无机硒,并且动物胃肠道更容易吸收有机硒并将其很好的利用,因此,如果大力推广使用有机硒源则对动物的生产是非常有利的。
目前动物生产上使用的有机硒主要是富硒酵母,科室富硒酵母的价格相对昂贵,所以其推广应用受到了一定的限制。
另外随着对硒研究的不断深入,人们对硒的营养价值、生物功能、添加最适量和如何有效的补充硒的研究更加深入和重视。
1 硒的理化性质硒是哺乳动物和人所必需的微量元素之一,自然界中,硒主要以有机硒和无机硒的形式存在,一般无机硒是使用较普遍的硒源,主要存在形式有硒酸盐(Se6+)和亚硒酸盐(Se4+)等,有机硒则以硒代蛋氨酸、硒代胱氨酸和硒代半胱氨酸等形式存在。
目前已知的哺乳动物体内的硒蛋白主要分为六类:谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)家族、碘化甲状腺原氨酸脱碘酶(ID)家族、硫氧还蛋白还原酶(TR)、硒代磷酸合成酶(SPS)、硒蛋白P、硒蛋白W、精子被膜硒蛋白等,这些硒蛋白参与动物体内多项代谢与生理作用。
动物氧化应激研究进展动物氧化应激研究进展随着我国畜牧业特别是现代养殖业集约化程度的提高以及人们对动物福利意识的增强,动物应激医学已成为动物医学的重要组成部分。
在动物应激医学研究中,动物氧化应激又逐渐成为国内外学者的热点研究课题。
1 氧化应激概念与起因1.1 氧化应激概念动物在正常生理代谢过程中,会产生许多自由基,这些自由基通常不会导致组织细胞的损伤,机体依靠自身体内的抗氧化防御体系,主要包括抗氧化酶类(包括超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT、谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px、谷胱甘肽硫转酶GST等)以及非酶类的抗氧化剂(包括维生素C、维生素E、谷胱甘肽、褪黑素、a-硫辛酸、类胡萝卜素、微量元素铜、锌、硒等),可以保护机体组织和细胞防止自由基的损伤。
当动物机体细胞内产生的自由基的水平高于细胞的抗氧化防御能力时,氧化还原状态失衡,过量的自由基存在于组织或细胞内,即诱发氧化应激,并导致氧化损伤。
因此,氧化应激(Oxidative Stress)是机体应答内外环境,通过氧化还原反应对机体进行多层次应激性调节和信号转导,同时造成氧化损伤的重要生命过程。
器官和组织对氧化应激的易感性依赖于它的抗氧化系统的状态和氧化剂与抗氧化之间的动态平衡。
氧化应激可导致细胞膜磷脂过氧化、蛋白质过氧化(受体和酶)以及DNA的氧化损伤。
脂质、蛋白质和DNA的氧化会对机体造成不同程度的危害,从而影响机体的生长、发育、衰老等过程。
急性和慢性的应激都能通过产生自由基诱导胃肠道、免疫系统等多方面的氧化应激。
1.2 氧化应激的起因1.2.1 自由基的产生细胞在正常新陈代谢和先天免疫反应过程中,都会产生活性氧代谢物(ROM)——自由基。
首先,肠上皮细胞的主动新陈代谢本身就是ROM的来源,其生成与电子传递链的活性有关。
所产生的活性物质包括超氧化物阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(·OH),它们都是线粒体中氧化磷酸化不可避免的产物。
小鸡腹腔注射的操作方法
小鸡腹腔注射是一种常用的给药方法,适用于给小鸡注射抗生素、疫苗等药物。
下面是小鸡腹腔注射的操作方法:
1. 准备好所需的药物和注射器:选择适当的药物和相应规格的注射器,并确保注射器是干净的。
2. 消毒操作环境:在注射前,确保操作环境整洁干净,并用消毒剂或酒精对注射区域进行消毒。
3. 固定小鸡身体:轻轻在一只平坦的表面上,将小鸡的脚固定住,使得小鸡身体保持稳定。
4. 找准注射位置:将小鸡放在侧面,用手轻轻捏住小鸡的腹部,找到注射部位。
5. 准备注射点:用消毒剂或酒精擦拭注射部位,确保部位干燥和清洁。
6. 技巧插针:用一只手将皮肤稍微拉起,然后用另一只手将注射器插入皮肤下方的腹腔中,使针头进入腹腔。
7. 缓慢注射:缓慢地推动注射器活塞,注射药物到腹腔中,确保药液均匀分布。
8. 拔针清理:注射完成后,将注射器从腹腔中拔出,并用消毒剂或酒精消毒注射部位。
9. 观察小鸡:注射完成后,观察小鸡的反应,确保没有异常情况。
需要注意以下几点:
- 操作要轻柔:在操作过程中要尽量避免给小鸡造成疼痛或伤害,注射时要轻柔而稳定。
- 注射量控制:根据药物使用说明书上的建议,确保使用正确的药物剂量,并遵守正确的注射间隔。
- 工具消毒:每次使用注射器前都要确保注射器是干净、消毒过的。
- 观察反应:注射完成后,要留意小鸡的反应,如果出现异常症状,应及时就医。
请注意:这里提供的操作方法仅供参考,请在实施注射操作之前咨询兽医或专业人士的指导。
肉仔鸡体外消化模拟技术的研究张铁鹰;汪儆;卢庆萍;雷祖玉【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2007(040)011【摘要】[目的]本研究建立了一套能够模拟肉仔鸡嗉囊、胃(肌胃和腺胃)和小肠消化与养分吸收的体外消化模拟装置,并对其相关参数进行研究.[方法]通过测定体外养分消化率的方法,确定该装置透析液流速、透析袋截留分子量、饲料粉碎粒度和消化样品重量等适宜参数.[结果]粗蛋白和淀粉消化率随透析液流速的增加而增加,当透析液流速为2.0 ml·min-1时的粗蛋白和淀粉消化率显著高于流速为1.0和1.5 ml·min-1(P<0.01),但与2.5 ml·min-1的流速间无显著差异(P>0.05).透析袋截留分子量由1 200~2 000 D增加到12 000~14 000 D时,粗蛋白和淀粉体外消化率均显著提高(P<0.01).饲料样品粉碎粒度由过40目降至过60目筛后,粗蛋白和淀粉体外消化率随之提高(P<0.05).当饲料样品为1.5 g时,粗蛋白和淀粉的体外消化率均显著低于0.5和1 g(P<0.01),而测定样品重量为0.5和1 g间均无显著差异(P>0.05).经检验该装置粗蛋白和淀粉体外消化率变异系数均小于5%,稳定性较好.[结论]本研究所建立的肉仔鸡体外消化模拟装置适宜的透析液流速、透析袋截留分子量、饲料粉碎粒度和消化样品重量分别为2.0 ml·min-1、12 000~14 000 D、过60目和1 g样品重.【总页数】7页(P2600-2606)【作者】张铁鹰;汪儆;卢庆萍;雷祖玉【作者单位】中国农业科学院畜牧研究所/动物营养学国家重点实验室,北京,100094;中国农业科学院畜牧研究所/动物营养学国家重点实验室,北京,100094;中国农业科学院畜牧研究所/动物营养学国家重点实验室,北京,100094;中国农业科学院畜牧研究所/动物营养学国家重点实验室,北京,100094【正文语种】中文【中图分类】S8【相关文献】1.野生山毛豆蛋白制备及体外消化模拟研究 [J], 于立梅;于新;曾晓房;杨凤卿2.肉仔鸡体外消化模型评定不同添加水平β-甘露聚糖酶作用效果的研究 [J], 黄辉;丁宏标;高秀华;汤海鸥3.单胃动物体外消化模拟技术研究进展 [J], 张铁鹰;汪儆4.肉仔鸡体外消化模拟技术评定不同剂量植酸酶作用效果的研究 [J], 张铁鹰;汪儆;雷祖玉;卢庆萍5.蚕丝蛋白纤维的体外消化模拟研究 [J], 魏子凯;丁绍敏;陆敏兴;林海涛因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
3-硝基丙酸诱导小鼠卵巢氧化应激模型的建立张志毕;张媛;蔡婷;任仲坤;杨晖;张荣平【摘要】通过腹腔注射3-硝基丙酸(3-NPA),建立并评价小鼠卵巢氧化应激模型.雌性小鼠分为对照组和模型组,模型组腹腔注射3-NPA(20 mg/kg),每日1次,对照组注射等量生理盐水.注射14 d后观察小鼠增重、卵巢指数、卵泡发育、排卵数、生育能力和生发泡期(GV期)卵细胞线粒体分布情况,检测卵巢活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)浓度,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,血清雌二醇(E2)和孕酮(P4)浓度.结果表明,通过腹腔注射3-NPA,可显著提高小鼠卵巢ROS和MDA浓度,显著增加抗氧化酶SOD、GSH-Px、CAT活性,表明卵巢氧化应激水平升高,导致闭锁卵泡比率显著增加,排卵数和生育能力显著降低,血清E2和P4水平显著降低,GV期卵细胞线粒体分布异常率显著增加.说明3-NPA可成功诱导建立小鼠卵巢氧化应激模型.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2018(039)002【总页数】6页(P73-78)【关键词】卵巢;3-硝基丙酸;氧化应激;模型【作者】张志毕;张媛;蔡婷;任仲坤;杨晖;张荣平【作者单位】昆明医科大学生物医学工程研究中心,云南昆明650500;昆明医科大学生物医学工程研究中心,云南昆明650500;昆明医科大学第一附属医院,云南昆明650032;昆明医科大学第一附属医院,云南昆明650032;昆明医科大学生物医学工程研究中心,云南昆明650500;昆明医科大学生物医学工程研究中心,云南昆明650500【正文语种】中文【中图分类】S852.33卵巢是哺乳动物卵细胞的来源,并调控雌性激素的分泌。
生理水平的活性氧(reactive oxygen species,ROS)调控卵泡生成、卵成熟和排卵过程[1-2],但高浓度的ROS会导致氧化应激,诱导卵泡闭锁和颗粒细胞凋亡,加速卵细胞老化,影响雌性哺乳动物的生育能力[3]。
急性免疫应激对肉仔鸡血液指标及肌肉脂质过氧化的影响董晓玲;刘国华;蔡辉益;郑爱娟;陈桂兰;李勇【期刊名称】《饲料工业》【年(卷),期】2007(28)19【摘要】细菌脂多糖(Lipopolysaccharide,简称LPS)是存在于革兰氏阴性菌细胞壁外膜中的致病成分。
试验利用细菌脂多糖诱导急性免疫应激,研究短期注射不同剂量细菌脂多糖对肉仔鸡血液生化指标和肌肉脂质过氧化的影响。
选择80只体重相近的21日龄肉仔鸡,随机分为4组,其中3个试验组分别在21、23、25(选择3周龄的肉仔鸡连续3次隔天注射LPS引发急性免疫应激)日龄连续3次经腹腔注射LPS生理盐水稀释液,剂量为每千克体重250、500、1000μg,对照组注射等量生理盐水,试验期6d。
在21、23日龄注射LPS3h后和25日龄注射LPS24h后(21、23日龄取血是检测注射LPS后3h血液指标的变化,在25日龄注射LPS24h后杀鸡测肉质指标时,也取血液测血液指标,观测血液指标随注射时间的变化趋势)取血液制备血浆、血清,测定血清细胞因子、血浆丙二醛和超氧化物歧化酶的含量;26日龄取试鸡胸肌,测定丙二醛及超氧化物歧化酶含量。
结果表明:①LPS刺激显著提高了血清中细胞因子的水平(P<0.05);②LPS刺激显著提高了血浆和胸肌中丙二醛的含量(P<0.05);③低剂量LPS刺激显著降低了血浆中超氧化物歧化酶的含量(P<0.05),而高剂量LPS刺激有显著提高血浆及胸肌中超氧化物歧化酶含量的趋势(P<0.05)。
【总页数】3页(P27-29)【关键词】脂多糖;肉仔鸡;免疫;细胞因子;脂质过氧化;应激【作者】董晓玲;刘国华;蔡辉益;郑爱娟;陈桂兰;李勇【作者单位】中国农业科学院饲料研究所【正文语种】中文【中图分类】S816.3【相关文献】1.日粮中添加共轭亚油酸对肉仔鸡胸肌和腿肌脂质过氧化状态的影响 [J], 刘永祥;徐秋良;刘艳丽;姜东风;杨建平2.不同强度的运输应激对肉仔鸡血液应激指标和肌肉品质的影响 [J], 张林;岳洪源;张海军;武书庚;胥蕾;龚月生;齐广海3.日粮ω6/ω3对爱拔益加肉仔鸡肉品质、血液脂质指标及脂肪酸组成的影响 [J], 齐珂珂;赵桂苹;陈继兰;郑麦青;刘蒙;文杰4.铅与锌联合胁迫对AA肉仔鸡肾脏脂质过氧化的影响 [J], 康永刚5.肉仔鸡幼龄热应激对其生长、血液生化指标及重复热应激的影响 [J], 尹清强;郑秋红;韩彪;康相涛因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
腹腔注射不同剂量DON对肉鸡免疫功能及血液生化指标的影响黄凯;朱风华;宋明明;徐丹;王赫;张瑞星;朱连勤【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2016(0)4【摘要】本试验对腹腔注射不同剂量的脱氧化雪腐镰刀菌烯醇(DON)对肉鸡的毒性作用进行了研究.将32只AA肉公鸡随机分为4组,每组8只.1组为对照组,腹腔注射生理盐水,2~4组为试验组,分别腹腔注射含10、50、100μg/mL的DON生理盐水溶液1 mL.每天注射1次,试验期35 d.结果显示,DON中高剂量组IL-4、IL-6、IgA、IgM、ND和IBD抗体水平、GSH-Px活性、总抗氧化能力显著低于对照组(P<0.05),各试验组谷丙转氨酶活性显著高于对照组(P<0.05),DON高剂量组脾脏淋巴细胞转化率、外周血淋巴细胞转化率显著低于其他各组(P<0.05).由此可见DON对肉鸡具有明显的氧化损伤和免疫毒性,且呈剂量相关性.【总页数】3页(P33-35)【作者】黄凯;朱风华;宋明明;徐丹;王赫;张瑞星;朱连勤【作者单位】青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109;青岛农业大学动物科技学院,山东青岛266109【正文语种】中文【中图分类】S858.31【相关文献】1.不同垫料对肉鸡舍内氨气浓度、肉鸡生产性能及血液生化指标的影响 [J], 刘雪兰;张燕;高金波2.日粮含不同剂量铜对肉鸡血液生化指标的影响 [J], 谭芳;胡坚3.腹腔注射葡萄糖对大黄鱼血液生化指标及糖代谢关键酶表达量的影响 [J], 李弋;邱红;侯迎梅;陆游;申屠基康;周歧存4.低聚糖对肉鸡血液生化指标及免疫功能影响的研究 [J], 王宝维;朱新产;葛文华;王述柏;史美丽;王震5.不同剂量25羟基维生素D3对断奶前犊牛血液生化指标、抗氧化能力和免疫功能的影响 [J], 王丽华;徐宏建;张全宇;张城瑞;张永根因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
气管滴注法建立肉鸡感染O157:H7型大肠杆菌模型牟芮玮;郭琰娜;卢梦涵;梁少姗;杨绵泽;何永明;唐陆平【期刊名称】《中兽医医药杂志》【年(卷),期】2024(43)3【摘要】本试验旨在建立肠出血性大肠杆菌O157:H7(E.coli)感染肉鸡动物模型。
将100只麻黄羽肉鸡饲喂至7日龄,挑选健康、体质量均一的鸡随机分为6组:空白对照组、A组(1×10^(7)cfu/mL E.coli感染组)、B组(1×10^(8)cfu/mL E.coli感染组)、C组(1×10^(9)cfu/mL E.coli感染组)、D组(1×10^(10)cfu/mL E.coli感染组)、E组(1×10^(11)cfu/mL E.coli感染组),每组设3个重复,每个重复5只鸡。
感染组每只肉鸡气管滴注大肠杆菌菌悬液0.5 mL,空白对照组肉鸡气管滴注相同体积的磷酸缓冲液(PBS)。
分别在试验开始前与感染后7 d记录肉鸡的体质量,试验期间记录肉鸡的采食量,并观察其临床变化。
在感染后7 d对肉鸡颈静脉采血以检测肝功能。
解剖摘取肉鸡肝脏、脾脏和结肠组织,计算肝脏和脾脏脏器指数,并对肝脏、脾脏和结肠进行载菌量检测和组织病理学观察。
结果显示,与空白对照组相比,感染大肠杆菌后肉鸡的料重比和肝脏指数、脾脏指数显著升高(P<0.05),肝脏、脾脏中均检测出大肠杆菌,结肠中大肠杆菌数量明显增多。
A~E组肉鸡血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(T-BiL-V)含量均显著高于空白对照组(P<0.05);D组与E组肉鸡血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量显著高于空白对照组(P<0.05);D组、E组肉鸡血清中总胆汁酸(TBA)含量显著低于空白对照组(P<0.05)。
病理组织学观察显示,C~E组肉鸡肝脏眼观呈绿棕色,并存在白色坏死点,镜检发现浆液性渗出和红细胞、炎性细胞浸润现象;E组肉鸡脾脏出现明显的毛细血管玻璃样变和毛细血管充血现象;C~E组肉鸡结肠绒毛萎缩、肠壁变薄,同时,D组、E组肉鸡结肠出现毛细血管充血现象。
气管滴注大肠杆菌对肉仔鸡肺部抗氧化性能的影响
苏兰利;王金荣;黄进;赵银丽;张万里
【期刊名称】《中国家禽》
【年(卷),期】2016(38)9
【摘要】试验通过对肉仔鸡气管滴注大肠杆菌研究大肠杆菌对肺部抗氧化性能的
影响。
选取体重一致、健康状况良好的固始肉仔鸡30只,随机分为两组。
对照组气管滴注无菌培养液1 m L,试验组气管滴注1×10~9cfu/m L大肠杆菌的培养液1
m L,2 h后进行解剖,观察肺部变化,取肺部组织做组织匀浆,用于测定脂多糖(LPS)和丙二醛(MDA)含量,以及谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。
结果显示:试验组肉仔鸡肺部有出血斑和出血点,血液中的LPS有升高趋势(P=0.072),肺组织中的LPS含量显著升高(P〈0.05),MDA含量有升高趋势(P=0.063),SOD活性极显著降低(P〈0.01),GSH-Px活性有降低趋势(P=0.076)。
结果表明:气管滴注大肠杆菌可显著降低肉仔鸡肺部抗氧化性能。
【总页数】4页(P15-18)
【作者】苏兰利;王金荣;黄进;赵银丽;张万里
【作者单位】河南工业大学
【正文语种】中文
【中图分类】S852.61
【相关文献】
1.气管滴注大肠杆菌对肉仔鸡肝脏抗氧化能力的影响
2.苜蓿多糖对不同性别肉仔鸡生长性能、屠宰性能、肉品质及抗氧化性能的影响
3.不同抗氧化剂和添加水平对肉仔鸡生产性能和抗氧化性影响的研究
4.芽孢杆菌在大肠杆菌应激下对肉仔鸡免疫和抗氧化功能的影响
5.枯草芽孢杆菌对脂多糖应激肉仔鸡生长性能、免疫性能和血清抗氧化性能的影响
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一次性腹腔注射Diquat诱导构建肉仔鸡慢性氧化应激模型李驰;闫峻;穆淑琴;马墉;郑梓;高玉鹏【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2017(026)004【摘要】通过对肉仔鸡一次性腹腔注射Diquat,研究试验期间肉仔鸡的生长性能、部分血液生化指标和抗氧化指标的变化,建立肉仔鸡慢性氧化应激模型.选取300只20日龄的健康科宝肉仔鸡,随机分为2组,每组1 5个重复,每重复10只鸡,公母各半.试验期共21 d.试验第1天,处理组按照体质量以8 mg/kg一次性腹腔注射Diquat,对照组注射相应剂量的无菌生理盐水.所有鸡自由采食和饮水,在试验第1、12、21天,空腹12 h,然后前腔静脉采血分离血清,测定血清中的生化指标和抗氧化指标.结果显示,Diquat处理组的平均日增量和平均日采食量显著低于对照组,料体质量比有增高的趋势;血清中ALT、AST、GSH-Px、SOD和COR活性显著高于对照组,MDA浓度显著低于对照组.表明,按照8 mg/kg体质量一次性腹腔注射Diquat溶液可以诱导肉仔鸡产生氧化应激,并且应激效应可持续21 d,血清中ALT、AST、GSH-Px、COR、SOD和MDA的含量变化可以作为反映氧化应激的敏感指标.【总页数】5页(P509-513)【作者】李驰;闫峻;穆淑琴;马墉;郑梓;高玉鹏【作者单位】西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】S831.5【相关文献】1.Diquat诱导的生长猪氧化应激持续时间及适宜的应激标识 [J], 徐静;余冰;陈代文2.不同诱导剂致慢性阻塞性肺疾病模型小鼠氧化应激损伤的实验研究 [J], 覃文慧;杨柯;邓家刚;张帅;黄思诗3.构建Diquat诱导断奶仔猪氧化应激模型的研究 [J], 刘通;李泽青;闫峻;李宁;穆淑琴;李驰;马墉;王文杰4.过氧化氢诱导HUVECs氧化应激模型的构建 [J], 戴青里;孙贵虎;闫斌;郭涛;戴青原;;;;;;;;;;;5.对乙酰氨基酚诱导HepG2细胞氧化应激损伤模型的构建 [J], 龚业滔; 邹思; 杨彬君; 吴岩斌; 易骏; 吴锦忠; 吴建国因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
Diquat诱导的生长猪氧化应激持续时间及适宜的应激标识徐静;余冰;陈代文【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2008(041)012【摘要】[目的]通过考察生长猪一次性腹腔注射diquat后不同时间点的生产性能和血清氧化与抗氧化指标的变化,探明氧化应激的持续时间和血清敏感指标,建立氧化应激模型.[方法]选用DLY生长猪8头,体重(36.00±2.50)kg,随机分为2组,每组4头猪.应激组按8 mg·kg-1体重一次性腹腔注射diquat溶液,对照组腹腔注射相同剂量的灭菌生理盐水.试验期35 d,在试验第0、1、2、3、7、14、21、28、35d空腹前腔静脉采血,检测血清中抗氧化能力、抗氧化酶活力以及代谢产物.[结果]Diquat极显著降低了试验前期和全期试猪的生产性能,显著或极显著降低第7、14、21、28天血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,抑制羟自由基(.OH)能力和抗超氧阴离子自由基(O2)能力,显著提高血清丙二醛(MDA)含量,在第7、14、21、28天血清过氧化氢酶(CAT)活性有降低趋势,过氧化氢(H2O2)含量有增加趋势.到第35天,各指标差异均不显著.[结论]按8 mg·kg-1体重剂量一次性腹腔注射diquat溶液,可诱导生长猪氧化应激,氧化应激效应可持续28 d,血清SOD、GSIt-Px、CAT活性和MDA含量可作为反映氧化应激的敏感指标.【总页数】6页(P4359-4364)【作者】徐静;余冰;陈代文【作者单位】四川农业大学动物营养研究所/教育部动物抗病营养重点实验室,四川雅安,625014;四川农业大学动物营养研究所/教育部动物抗病营养重点实验室,四川雅安,625014;四川农业大学动物营养研究所/教育部动物抗病营养重点实验室,四川雅安,625014【正文语种】中文【中图分类】S8【相关文献】1.一次性腹腔注射Diquat诱导构建肉仔鸡慢性氧化应激模型 [J], 李驰;闫峻;穆淑琴;马墉;郑梓;高玉鹏2.不同比例全株玉米青贮饲粮对生长猪生产性能、养分利用、血液学指标和血清氧化应激指标的影响 [J], 孙静;姜淑贞;杨在宾;杨晨;吴晓静;李思梦;杨维仁;薛峰;李会荣;李祥明3.构建Diquat诱导断奶仔猪氧化应激模型的研究 [J], 刘通;李泽青;闫峻;李宁;穆淑琴;李驰;马墉;王文杰4.短期超量补充维生素E对热应激生长猪呼吸性碱中毒和氧化应激的改善作用 [J], 吴美芹; 孟令凯5.热应激诱导畜禽氧化应激、热休克反应与免疫和炎症反应的机制及营养调控措施[J], 陆灿强;舒邓群;臧一天因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
一次性腹腔注射Diquat诱导构建肉仔鸡慢性氧化应激模型李驰;闫峻;穆淑琴;马墉;郑梓;高玉鹏【摘要】通过对肉仔鸡一次性腹腔注射Diquat,研究试验期间肉仔鸡的生长性能、部分血液生化指标和抗氧化指标的变化,建立肉仔鸡慢性氧化应激模型.选取300只20日龄的健康科宝肉仔鸡,随机分为2组,每组1 5个重复,每重复10只鸡,公母各半.试验期共21 d.试验第1天,处理组按照体质量以8 mg/kg一次性腹腔注射Diquat,对照组注射相应剂量的无菌生理盐水.所有鸡自由采食和饮水,在试验第1、12、21天,空腹12 h,然后前腔静脉采血分离血清,测定血清中的生化指标和抗氧化指标.结果显示,Diquat处理组的平均日增量和平均日采食量显著低于对照组,料体质量比有增高的趋势;血清中ALT、AST、GSH-Px、SOD和COR活性显著高于对照组,MDA浓度显著低于对照组.表明,按照8 mg/kg体质量一次性腹腔注射Diquat溶液可以诱导肉仔鸡产生氧化应激,并且应激效应可持续21 d,血清中ALT、AST、GSH-Px、COR、SOD和MDA的含量变化可以作为反映氧化应激的敏感指标.%By studying the effects of intraperitoneal injection of Diquat on broiler growth performance,biochemical index of blood and antioxidant,proven oxidative stress duration and serum index,establish chronic oxidative stress model.Three hundred 20-day-old healthy Cobb broilers were randomly divided into 2 treatments with 15 replicates of 10 chickens in each replicate,half male and half female.Chickens in group 1 or 2 were intraperitoneally injected with diquat at a dose of 8 mg/kg BW orsaline.They were allowed ad libitum to feed and water.The whole trial period was 21 days.Serum was collected on 1,12 and 21 day for determination of superoxide and anti-oxidative enzyme activities.Diquatinjection reduced ADG and ADFI,F/G had an increasing trend but the difference was not significant;serum ALT and AST activity was significantly higher than the control group;serum GSH-Px,SOD and COR levels were significantly higher than the control group,MDA was significantly lower than the control group.Oxidation stress resulted from intraperitoneal injection of diquat (8 mg/kg) would last for up to 21 days.SerumALT,AST,SOD,GSH-Px,COR activities and MDA content were sensitive indicators for oxidation stress.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2017(026)004【总页数】5页(P509-513)【关键词】Diquat;肉仔鸡;氧化应激;模型【作者】李驰;闫峻;穆淑琴;马墉;郑梓;高玉鹏【作者单位】西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;天津市畜牧兽医研究所,天津300381;天津市畜禽健康养殖技术工程中心,天津300381;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】S831.5动物机体内会不断产生活性氧自由基(ROS)和抗氧化物质,并且两者处于动态平衡状态。
当外来因素或动物机体内部异常引起机体产生的活性氧自由基过多,导致其无法被机体产生的抗氧化物质及时清除,动态平衡遭到破坏,就会对机体造成影响,产生氧化应激,过多的氧自由基会结合并破坏生物大分子,造成大分子物质功能紊乱,进而引起细胞结构和生物功能的异常[1-2]。
断奶、免疫、细菌病毒侵袭、气候环境变化等多种因素均可诱导畜禽产生氧化应激,不同程度降低畜禽的生产性能和健康程度,诱发多种疾病,甚至造成动物死亡,从而增加生产成本,降低经济效益,给养殖业造成巨大损失[3]。
为深入研究氧化应激的生物学效应和抗应激措施,学者利用地塞米松等药物构建慢性氧化应激模型,但存在重复多次注射、氧化应激状态不稳定、操作繁琐等问题,因此,建立稳定可靠、易于操作的肉仔鸡慢性氧化应激模型十分重要。
敌快死(Diquat)是双吡啶基除草剂,具有除草和催枯/熟作用。
有研究[4]指出,给小鼠或大鼠腹腔注射Diquat,可以在动物体内利用分子氧产生和H2O2,诱导氧化应激的产生。
徐静等[5]研究表明,利用Diquat可以诱导生长猪氧化应激,并构建仔猪氧化应激模型,但尚未见到利用Diquat构建肉仔鸡慢性氧化应激模型的报道。
本试验给肉仔鸡一次性腹腔注射Diquat,研究氧化应激可持续的时间和肉仔鸡的生产性能,并检测肉仔鸡血液生化、抗氧化指标变化,旨在形成一种可靠且易于操作的肉仔鸡慢性氧化应激模型的建立方法,为后续试验研究提供科学依据。
1.1 试验材料试验选取健康、体质量相近(0.87 kg±0.10 kg)的20日龄科宝肉仔鸡300只。
体积分数为25%的Diquat溶液由天津市农业科学院植物保护研究所提供。
1.2 试验设计300只健康科宝肉仔鸡随机分为2组(处理组和对照组),每组15个重复,每个重复10只鸡,公母各半。
试验期21 d。
试验第1 天,处理组按照8 mg/kg体质量一次性腹腔注射Diquat溶液,对照组注射相应剂量的无菌生理盐水。
在试验第1、12、21 天空腹前腔静脉采血,分离血清,测定血清中的生化指标和抗氧化指标。
1.3 试验饲粮以玉米、豆粕等为原料配制基础日粮,营养水平参照中国肉鸡饲养标准(NY-T 33-2004),21~42 d饲粮组成及营养水平见表1。
1.4 饲养管理试验在天津市现代畜牧业创新示范基地进行。
笼上平养,自由采食和饮水。
鸡舍自然通风,保持卫生,定期消毒,光照24 h/d。
1.5 测定指标及方法1.5.1 生产性能每天统计记录饲料消耗量,试验第1 天和第21 天,以重复为单位称量试验鸡的空腹体质量,计算全期的平均日增量(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料肉比(F/G)。
平均日增量=(终末体质量-初始体质量)/试验时间平均日采食量=总采食量/试验时间料肉比=平均日采食量/平均日增量1.5.2 相关血清生化指标在试验的第1、12、21 天,空腹12 h,前腔静脉采集血液5 mL,于37 ℃水浴锅里倾斜放置30 min后,4 000 r/min离心10 min,分离血清,-20 ℃保存,待测。
谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)使用东芝120生化检测仪检测。
1.5.3 血清抗氧化酶血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、皮质醇(COR)用XH6080放免仪检测。
1.6 数据分析与处理首先利用Microsoft Office Excel 2010软件对数据进行初步整理,然后用IBM SPSS Statistics 23.0软件进行单因素方差分析,用Duncan’s法进行显著性检验,数据以“平均值±标准差”表示。
2.1 一次性腹腔注射Diquat对肉仔鸡生产性能的影响由表2可知,与对照组相比,处理组的平均日增量降低31.58%,平均日采食量降低22.64%,且均显著低于对照组(P<0.05);处理组的料肉比增加12.63%,有增高的趋势,但差异不显著(P>0.05)。
2.2 一次性腹腔注射Diquat对肉仔鸡血清生化指标的影响由表3可知,试验第1 天,处理组血清中ALT活性高于对照组30%,AST活性高于对照组75%;试验第12 天,处理组血清中ALT高于对照组26%,AST高于对照组76%;试验第21 天,处理组血清中ALT高于对照组40%,AST高于对照组57%。
且所有监测点处理组血清中ALT和AST的活性均显著高于对照组(P<0.05)。
2.3 一次性腹腔注射Diquat对肉仔鸡血清抗氧化指标的影响由表4可知,试验第1 天,处理组血清中GSH-Px活性低于对照组8%,SOD活性低于对照组14%,MDA浓度高于对照组20%,COR质量浓度高于对照组59%;试验第12 天,处理组血清中GSH-Px低于对照组8%,SOD低于对照组15%,MDA高于对照组17%,COR高于对照组46%;试验第21 天,处理组血清中GSH-Px低于对照组7%,SOD低于对照组15%,MDA高于对照组22%,COR高于对照组39%。
且所有监测点处理组血清中GSH-Px和SOD活性均显著低于对照组,MDA和COR水平均显著高于对照组(P<0.05)。
3.1 Diquat对肉仔鸡生产性能的影响Diquat是一种具有较强毒性的化合物,属于氧化还原型双吡啶基除草剂,具有刺激性。
腹腔注射直接进入动物机体,被动物肠道系膜消化、吸收,可引起机体利用血液内的分子氧产生氧自由基,破坏细胞膜结构,影响细胞正常生理功能,消化道黏膜受损,通透性增高,造成肠道感染,诱发肠道疾病,表现为采食量降低,平均日增量减小,降低动物生产性能[6-7]。