贝伐珠单抗抗血管机制演示文稿

THE RESISTANCE MECHANISM ANDROLES OF BEVACIZUMAB INTREATMENT OF COLORECTALCANCERABSTRACTBackground: Bevacizumab has been demonstrated to be effective in the treatment of colorectal cancer and becomes one of the most common drugs for the treatment of advanced colorectal cancer. However, the resistance of colorectal cancer to Bevacizumab affects the long-term use of Bevacizumab. The recent research results have shown that the Bevacizumab resistance may be related with tumor microenvironment, the activation of other angiogenesis pathway, immune suppression and so on. But the mechanisms involved Bevacizumab resistance are still fully understood.Objective: In this study, we have investigated the roles and mechanism of bevacizumab resistance.Methods: The colon cancer DLD-1 cells were injected s.c. into nude mice and generated a colon cancer xenograft model. When tumor size reached to 100 mm2, Bevacizumab was injected i.p. into nude mice twice each week. Tumor size was measured weekly.Four weeks after theinjection, the xenograft tumor tissues were harvested for isolation of tumor cells. The tumor cells isolated from tumor treated with Bevacizumab treatment were injected s.c. into nude mice to establish second xenograft model. Then Bevacizumab was injected i.p. into nude mice with second xenograft twice each week. Tumor size was measured weekly. Four weeks after the treatment, the xenograft tumor tissues were harvested for histological analysis and immunohistochemistry staining.Results:Bevacizumab treatment significantly inhibited colon cancer xenograft growth at first time treatment. For second generation of xenograft models using tumor cells isolated from Bevacizumab-treated tumor, Bevacizumab treatment still inhibited xenograft tumor growth. The results suggest that Bevacizumab for colon cancer treatment is still effective. Bevacizumab one cycle treatment is not enough to induce the resistance of Bevacizumab. Immunohistostaining showed that the expression of Survivin was gradually increased in the tumor tissues treated with bevacizumab from 3-week treatment to 9-week treatment. The number of CD31 positive cells was significantly lower in the xenograft tumor tissues from bevacizumab-treated mice that those from control-treated mice.Conclusion: Bevacizumab treatment could inhibit xenograft tumor growth even in the tumors that have once treated with bevacizumab. Survivin may play a certain role in mediating the resistance ofbevacizumab. The exact role of Survivin in mediated the resistance of bevacizumab will be further studied.KEY WORDS:colorectal cancer，Bevacizumab，drug resistance，Survivin目录第一章研究背景 (1)第二章贝伐珠单抗动物耐药模型构建 (6)1.材料 (6)1.1 实验动物 (6)1.2 试剂 (6)1.3 实验器材 (6)2.方法 (7)2.1 裸鼠移植瘤模型构建 (7)2.2 观察指标 (7)2.3 移植瘤处理 (7)3.结果 (7)4.讨论 (8)本章小结 (10)第三章探寻预测耐药的生物标志物 (12)1.材料 (12)1.1 组织标本 (12)1.2 主要试剂 (13)1.3 器材及设备 (13)2.方法 (13)2.1 组织脱水及石蜡包埋 (13)2.2 免疫组化染色步骤 (14)3.结果 (15)4.讨论 (19)本章小结 (20)第四章 Survivin稳定转染细胞株构建 (21)1.材料 (21)1.1 细胞株 (21)1.2 pcDNA3.1(+)-Survivin质粒及pcDNA3.1(+)质粒 (21)1.3 主要试剂 (21)1.4 实验器材 (22)2.实验方法 (22)2.1 细胞培养 (22)2.2 脂质体2000转染 (22)2.3 G418筛选克隆 (22)2.4 Western Blot实验验证稳转细胞株。

一文掌握贝伐珠单抗临床应用的70个细节贝伐珠单抗贝伐珠单抗是利用重组DNA技术制备的一种人源化单克隆抗体IgG1，通过抑制血管内皮生长因子(VEGF)在肿瘤生长和增殖过程中起重要的作用。

VEGF家族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D 等多个相关因子，而在肿瘤新生血管形成中最重要的是VEGF-A因子，它可促进血管内皮细胞生长、增殖，并与血管内皮细胞产生的生长因子受体相结合，激活下游信号转导通路，最终促进新生血管的生成。

截至2022年6月，国内可及的贝伐单抗有9个，包括：安维汀(罗氏)、安可达（齐鲁）、达攸同（信达）、贝安汀（贝达）、艾瑞妥（恒瑞）、汉贝泰、扑欣汀、普贝希、博优诺。

并且已进入四大医保适应症，六大说明书适应症。

贝伐单抗知识点汇总1.贝伐单抗是与VEGF结合的重组人源化单克隆抗体，能与VEGF-A结合，阻止其与VEGF受体的相互作用，起到抗新生血管形成的作用，进而抑制肿瘤生长。

肺癌（医保）2.贝伐珠单抗联合以铂类为基础的化疗用于不可切除的晚期、转移性或复发性非鳞状细胞 NSCLC 患者的一线治疗。

3.贝伐珠单抗不适用于晚期肺鳞状细胞癌的治疗。

4.有严重出血或者近期曾有咯血、肿瘤侵犯大血管的患者不应接受贝伐珠单抗治疗。

5.贝伐珠单抗联合以铂类为基础的化疗最多6 个周期，随后给予贝伐珠单抗单药维持治疗或与可用于维持治疗的化疗药物如培美曲塞联合维持治疗，直至疾病进展或出现不可耐受的毒性。

6.贝伐珠单抗推荐剂量为15mg/kg，每 3 周给药一次。

也可以使用7.5mg/kg，每 3 周给药一次。

7. 出现以下情况，停止使用贝伐珠单抗：①严重胃肠道不良反应（胃肠道穿孔、胃肠道瘘形成、腹腔脓肿），内脏瘘形成；②需要干预治疗的伤口裂开以及伤口愈合并发症；③重度出血（例如需要干预治疗）；④重度动脉血栓事件；⑤危及生命（4 级）的静脉血栓栓塞事件，包括肺栓塞；⑥高血压危象或高血压脑病；⑦可逆性后部脑病综合征；⑧肾病综合征。

贝伐单抗不良反应的发生机制及处理方法中华肿瘤杂志 2010年第7期肿瘤生长和增殖过程中需要新生血管的形成，而血管内皮生长因子(VEGF)在其中起重要的作用。

VEGF家族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D等多个相关因子，而在肿瘤新生血管形成中最重要的是VEGF-A因子，它可促进血管内皮细胞生长、增殖，并与血管内皮细胞产生的生长因子受体相结合，激活下游信号转导通路，最终促进新生血管的生成。

贝伐单抗(Bevacizumab)是与VEGF结合的重组人源化单克隆抗体，能与VEGF-A结合，阻止其与VEGF受体的相互作用，起到抗新生血管形成的作用，进而抑制肿瘤生长。

临床试验已证明，贝伐单抗与化疗联合可以显著提高转移性结直肠癌的有效率，并延长患者的无进展生存期和总生存期。

因此，美国食品和药品管理局(FDA)于2004年批准用于临床，成为首个用于临床的靶向VEGF药物。

随后的研究表明，贝伐单抗联合化疗对非小细胞肺癌、转移性乳腺癌及转移性肾癌等多种实体瘤有效。

我国于2010年获批转移性结直肠癌的适应证。

尽管国外的研究已经证明，贝伐单抗临床使用安全性良好，严重不良反应发生率低，相关不良反应与细胞毒药物无重叠，但是贝伐单抗作为靶向VEGF药物，其特有的相关不良反应(如出血、胃肠道穿孔、动脉血栓等)发生率虽然低，但对极少数患者可能是致命的。

为了使中国的肿瘤内科医生能及早认识贝伐单抗的不良反应，更好地在临床安全使用，我们对贝伐单抗在国内外临床应用后出现的相关不良反应的发生情况、可能机制、风险因素和临床处理措施等进行了综合分析，并报告如下。

一、高血压高血压是贝伐单抗治疗中最常见的相关不良反应，发生率为8％一67％。

但是，在所有的临床研究中，并无因高血压致死的病例报道。

在贝伐单抗联合化疗治疗转移性结直肠癌的研究中，按美国癌症研究所的常规毒性判定标准(NCI CTC)，4级高血压的发生率仅为l％。

在一项包含了7个临床研究的Meta分析中，高血压的总体发生率<16％。

初次使⽤贝伐珠单抗纪实本⽂作者：与癌共舞论坛资深版主Keenman在2018年4⽉~7⽉之间，给母亲采⽤吉西他滨减量节拍化疗9次之后，虽然CEA下降36%，但CT影像复查则显⽰略微增⼤，说明吉西他滨减量节拍化疗的效⼒在降低。

（具体治疗过程见《跨越七年——长期抗癌经验的总结》）此时有两个⽅案摆在我⾯前，⼀个是采⽤2992联合1120的靶向药联合⽅案；另⼀个则是重新启⽤⾃2016年12⽉之后没有再⽤过的培美曲塞化疗⽅案。

1贝伐珠单抗能否赋能培美曲塞？考虑到刚刚进⾏过三个⽉的吉西他滨减量节拍化疗，母亲的⾝体需要休养⽣息，为了避免持续的化疗对⾎象造成重⼤打击，所以最终选择了2992联合1120的靶向药⽅案连续使⽤三个⽉。

但在下⼀个化疗周期内采⽤培美曲塞联合贝伐珠单抗则成为重要的选项，原因有如下⼏点：1. 2016年12⽉使⽤培美曲塞联合BIBF1120的两期化疗，从CEA的变动上看仍属于有效控制，只是降CEA的⼒度不如前⼏次那么明显，并不能说明培美曲塞已经耐药，顶多算是有耐药趋势；2. 病友实际使⽤经历上看，停⽤培美曲塞的时间越长，培美曲塞复敏的概率就越⼤；3. 贝伐珠单抗已经⼊医保，价格从原来的⾼⾼在上，变得经济上可承受。

⽽且以前母亲⽤号称“平民贝伐”的BIBF1120联合培美曲塞的化疗效果还不错。

BIBF1120是作⽤在细胞膜内的通路，⽽贝伐珠单抗是作⽤在细胞膜外通路，两者的抗⾎管⽣成机理类似，所以采⽤培美曲塞联合贝伐珠单抗就成为⾮常重要的选项。

2“⽤药助⼿”助⼒“学习纪要”但是，贝伐珠单抗毕竟是单抗类药物，和BIBF1120这⼀类的⼩分⼦TKI是不⼀样的，它有很多的副作⽤，⼀些副作⽤甚⾄可能会导致致命的风险，需要慎之⼜慎！陪伴母亲抗癌多年的经验告诉我，⼀定要遵循“积极不着急，果断不武断”的抗癌⼼态。

在使⽤⼀个新的药物，尤其是有着很多副作⽤的贝伐珠单抗，需要对照贝伐珠单抗的药品说明书，结合母亲的⾝体实际状况，逐条对照，并将需要注意的事项标注出来，做到对可能发⽣的副作⽤及应对策略胸有成⽵。