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小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中 1，25-二羟基维生素 D3(1,25-(OH)2D3)的含量。
小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)检测试剂盒实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠1，25-二羟基维生素 D3(1,25-(OH)2D3)水平。
用纯化的大鼠 1,25-(OH)2D3 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 1,25-(OH)2D3，再与 HRP 标记的 1,25-(OH)2D3 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。
TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的 1,25-(OH)2D3 呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠1，25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48 孔配置 96 孔配置保存说明书 1 份 1 份封板膜 2 片（48） 2 片（96）密封袋 1 个 1 个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：90ng/L 0.5ml×1 瓶 0.5ml×1 瓶 2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1 瓶 1.5ml×1 瓶 2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂 A 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存显色剂 B 液 3 ml×1 瓶 6 ml×1 瓶 2-8℃保存终止液 3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶 2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固 10-20 分钟，离心 20 分钟左右（2000-3000 转/分）。
大鼠神经元特异性烯醇化酶酶联免疫分析（NSE-ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：E0537r预期应用ELISA法定量测定大鼠血清中NSE含量，有助于诊断小细胞肺癌及相关性疾病。
概述烯醇化酶（Enolase）是参与糖酵解的酶，催化2-磷酸甘油酸向磷酸烯醇丙酮酸的转化，由三种亚基（α、β、γ）组成的二聚体同功酶。
其中αγ和γγ烯醇化酶同功酶存在于神经元及神经来源的细胞中，也称为神经元特异性烯醇化酶（Neurone specific enolase ，NSE）。
在正常大鼠群中NSE含量较低，但在某些神经内皮细胞增生的恶性疾病，如神经母细胞瘤（Neuroblastoma），其含量往往上升。
由于小细胞肺癌（Small cell lung carcinoma，SCLC）是最常表现有神经内分泌性质的肿瘤，目前NSE也是SCLC最敏感最特异的肿瘤标志物。
肺癌是近年来发病率日趋增高的癌种，在种种肺癌中小细胞肺癌占大约20%，因此正确诊断肺癌的类型，特别是确定小细胞肺癌的诊断很重要。
小细胞肺癌患者的αγ和γγ同功酶含量均有不同比例的增高，因些必须在同一敏感度下同时检测NSE的αγ和γγ同功酶含量。
本试剂盒所用单抗只针对NSE的γ亚基，而与α或β亚基无交差反应。
据文献报道，NSE含量测定可作为肺癌、成神经细胞瘤、黑素瘤、精原细胞瘤以及中枢精神系统损伤的诊断指标。
同时，也可用于SCLC治疗前后疗效的监测与预后，以及SCLC 与其它型肺癌的鉴别诊断。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定血清中NSE水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入NSE抗原、生物素化的抗大鼠NSE抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的NSE呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
《文件已阅声明表》《Procedure circulation form》文件名称: 神经元特异烯醇化酶检测作业指导书表号: KM-MP03•02•02《文件修改记录页》《Procedure amendment form》表号:KM-MP03.02.03《文件信息表》《Procedure information form》表号:KM-MP03•02•04神经元烯醇化酶（NSE）检测作业指导书（Standard operation procedure for analysis of NSE）1.原理（Test principle）:反应原理“三明治”法，总检测时间：18 分钟。
第一次孵育：20μl 标本和一份生物素抗NSE 特异性单克隆抗体一起孵育，一份钌复合体标记的NSE 特异性单克隆抗体后，反应形成一“三明治”样抗原－抗体复合体。
第二次孵育：加入链酶亲和素包被的微粒，复合体在链酶亲和素和生物素相互作用下形成固相。
将反应液吸入检测池中，检测池中的微粒通过电磁作用吸附在电极表面。
未结合的物质通过ProCell 除去。
在电极上加以一定的电压，使复合体化学发光，用光电倍增器检测发光的强度。
通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果，定标曲线是通过2 定标点和试剂条形码上获得的主曲线生成的。
2.样本收集和储存（Specimen Collection and Storage）:2.1样本收集（specimen collection）：类型（type）：血清（serum）；用量（volume）50μL，仪器加样量（sample volume ）20μL。
2.2拒收标本（specimen rejection）：EDTA抗凝血、严重脂血标本、接受过鼠单克隆抗体者、严重溶血（hemolysis）标本拒收2.3标本储存条件(sample storage conditions)：室温（room temperature）保存6小时； 2-8℃24小时； -20℃3个月；十五天后处理标本。
医疗器械产品技术要求编号：
神经元特异性烯醇化酶(NSE)测定试剂盒(化学发光免疫分析法) 1.产品型号/规格及其划分说明
1.1型号规格
480测试/盒，96测试/盒。
1.2结构组成
校准品靶值批特异，详见定值单。
不同批号的组分不得混用。
1.3适用范围
用于体外定量测定人血清中神经元特异性烯醇化酶（NSE）的含量。
2.性能指标
2.1外观
组分齐全、完整；溶液无混浊，无沉淀或絮状物；微孔板包装袋无破损、漏气现象。
2.2准确度
回收率应在90%～110%范围内。
2.3线性
在[0.5，200]ng/mL范围内，r应不小于0.9900。
2.4空白限
应不大于0.50ng/mL。
2.5精密度
2.5.1批内精密度
手工操作应不大于10.0%，全自动操作应不大于8%。
2.5.2批间精密度
应不大于15.0%。
2.6特异性
根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》规定了校准品的来源、赋值以及不确定度等内容，溯源至企业工作校准品。
2.8稳定性
2.8.1效期末稳定性
NSE试剂盒在2～8℃保存，有效期12个月。
在NSE试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1～2.4，2.5.1项，结果应符合各项要求。
2.8.2校准品复溶后稳定性
复溶后的校准品在2～8℃条件下保存7天后检测2.2～2.4，2.5.1项，结果应符合各项要求。
神经元特异性烯醇化酶神经元特异性烯醇化酶（Neuron-specific enolase）神经元特异性烯醇化酶（neuron-specific enolase，NSE）是一种在神经系统中高度表达的酶，属于烯醇化酶家族。
它是一种非常重要的标记物，用于检测神经元的功能状态、损伤程度以及各种神经系统疾病的诊断和监测。
一、NSE的基本特性NSE是在神经元中高度表达的一个酶，也称为γγ-烯醇化酶，它主要参与糖酵解途径中的催化作用。
在人体中，NSE主要存在于大脑、脊髓和外周神经系统中的神经细胞体和轴突。
由于NSE仅在神经系统中表达，并且与其他组织中的烯醇化酶有明显区别，因此被广泛应用于神经系统疾病的诊断和监测。
二、NSE的生理功能1. 参与糖酵解途径NSE作为一种催化酶，在神经元中参与糖酵解途径，将葡萄糖分解为丙酮酸和乳酸，提供能量给神经细胞。
2. 维持神经元的正常功能NSE在神经元的能量代谢中发挥着重要作用，它能够调节神经元的能量供应，维持神经元的正常功能。
3. 参与神经元的发育和成熟研究表明，NSE在神经系统的发育和成熟过程中起着重要作用。
它参与了大脑皮层神经元的生成和迁移，对神经元的形成和连接具有调控作用。
三、NSE与神经系统疾病的关系由于NSE在神经系统中高度表达，在神经系统疾病中有一些特殊的表现，因此NSE被广泛用于神经系统疾病的诊断和监测。
1. 脑损伤脑损伤是指各种原因引起的大脑功能受损。
在脑损伤过程中，由于神经元受到损伤，会释放出大量的NSE。
因此，NSE的检测可以用作脑损伤的指标，在临床上被广泛应用于脑损伤的诊断和评估。
2. 脑肿瘤脑肿瘤是指发生在大脑、脑膜和脑室内的肿瘤。
研究表明，NSE在脑肿瘤的发生和发展过程中发挥着重要作用。
脑肿瘤细胞中的NSE 水平显著升高，因此可以用作脑肿瘤的标记物，帮助医生进行诊断和治疗监测。
3. 神经退行性疾病神经退行性疾病是一类以神经元损伤和退行性变为特征的疾病，如阿尔茨海默病、帕金森病等。
