长枝木霉对小麦禾谷孢囊线虫的致死作用_张树武

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毒杀南方根结线虫的木霉种类鉴定及活性研究

威胁着老棚区设施蔬菜的生产［２］。由于蔬菜的周
年性生产和持续性采摘，高毒高残留的化学杀线剂被限制使用，因此开发利用安全有效的杀线剂已经成为植物线虫病害防治工作中亟待解决的问题。
其在辽宁省，由南方根结线虫（Ｍ毒ｚｏｉｄｏｇｙ咒Ｐ
收稿日期：２０１４一０３一０５
ｉ行∞ｇ一
修订日期：２０１４一０５—２１基金项目：公益性行业（农业）科研专项（２０１１０３０１８）；国家自然科学基金（３１１７１８２３）；沈阳农业大学天柱山学者资助计划＊通信作者ｐｍａｉｌ：ｃｈｅｎｌｉｊｉｅ０２１０＠１６３．ｃｏｍ
②ｐ￡ｚ删渤基因Ｐ（、Ｒ扩增的反应体系：１０×反应
缓冲液（１０×ＰＣＲｂｕｆｆｅｒ）２．５弘Ｌ，ＭｇＣｌ２（２５ｍｍｏｌ／Ｌ）
２．Ｏ“Ｌ，ｄＮｌ、Ｐ（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ）２．Ｏ肚Ｌ，了乙ｑ（５Ｌ『／肛Ｌ）
０．２５“Ｌ，Ｂｔ２ａ／ＣＩａｄＡｃｔ～Ｆ３（１０肚ｎｌＯＩ／Ｌ）１．０“Ｌ，Ｂｔ２ｂ／ＣｌａｄＡｃｔ—Ｒ３（１０肛ｍｏｌ／Ｌ）１．ｏ肛Ｌ，模板２．ｏ肛Ｌ，
２５．ｏ扯Ｌ。ｒＤＮＡ—ＩＴｓ基因ＰＣＲ扩增反应的条件为：
９４℃预变性５ｍｉｎ；９４℃变性３０ｓ，５１℃退火４０
ｉ门ｃｏｇ一
ｓ，
１材料与方法
１．１试验材料供试线虫：南方根结线虫（Ｍ以ｏｉｄＤｇｙ卯Ｐ
７２℃延伸９０ｓ，３０个循环；７２℃延伸７ｒ１１ｉｎ，最后于
４
九打“）２龄幼虫Ｊｚ。繁殖自北方线虫研究所的温室大
玉林市八角根围土壤，ＦＴ８５分离自吉林省抚松县
人参根际土壤，ＦＴｌ９３７来自于实验室前期保存的菌种。将保存菌株从冷库中取出，在ＰＤＡ平板上进行菌株活化，２５℃培养后在４。Ｃ恒温箱中保存待用。将活化菌株接种于查氏培养基，于２５℃１５０ｒ／ｍｉｎ液体摇瓶发酵５ｄ。发酵液抽滤出菌丝，置于４℃恒温箱中保存备用。经ｉ贝４定４种木霉菌发酵液ｐＨ为６．３～６．８之间，均呈弱酸性。１．２试验方法

长枝木霉代谢物对极细链格孢产毒抑制机制解析

长枝木霉代谢物对极细链格孢产毒抑制机制解析邵学辉;张树武;徐秉良【期刊名称】《果树学报》【年(卷),期】2024(41)1【摘要】【目的】明确长枝木霉(SC5)代谢粗提物对极细链格孢(ABL2)产毒抑制机制。

【方法】以富士苹果的叶片为供试材料,通过生长速率法、LC-MS和RT-qPCR技术测定了SC5代谢粗提物对ABL2菌落生长、6种非寄主选择性毒素产生及产毒相关基因表达的抑制作用。

【结果】质量浓度为0.5 mg·mL^(-1)的SC5代谢粗提物对ABL2菌落生长和致病力具有显著的抑制作用,第6天时抑制率分别为38.08%和76.96%;同时,0.5 mg·mL^(-1) SC5代谢粗提物对ABL2菌株产生的非寄主选择性毒素TEN、ALT和TeA均具有显著抑制作用,其中处理2d后对毒素的抑制作用最显著,其含量分别降低69.39%、98.51%和48.99%,并且其合成相关基因TES、TES(1)、PksA和PksJ的表达量显著下调,分别降低89.02%、98.20%、46.49%和40.13%,但是对ABL2菌株非寄主选择性毒素ATX-I含量和参与编码其合成的PksF基因表达量具有提升作用。

【结论】质量浓度为0.5mg·mL^(-1)的SC5代谢粗提物对ABL2菌株生长和致病力具有抑制作用,可能通过调控ABL2菌株TES、TES(1)、PksA和PksJ基因下调表达,进而降低TEN、ALT和TeA的毒素的产生量及致病力。

【总页数】10页(P133-142)【作者】邵学辉;张树武;徐秉良【作者单位】甘肃农业大学植物保护学院·甘肃省农作物病虫害生物防治工程实验室【正文语种】中文【中图分类】S661.1【相关文献】1.海南粗榧内生真菌细极链格孢CH1307产高三尖杉酯碱的发酵条件2.菌核生枝顶孢霉次生代谢物对桃褐斑致病菌的抑制效果3.链格孢菌毒素胁迫下的棘孢木霉转录组构建及生防基因差异表达4.链格孢菌产细交链孢菌酮酸条件的优化研究5.不同培养条件对长枝木霉SMF2和哈茨木霉T39生长与产孢的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

木霉菌对土传病害病原真菌的拮抗作用

木霉菌株：２００６年对采自宁夏１４个市、县的１７０份土样及其它材料进行分离，得到９６株木霉菌株，采用形态分类方法鉴定出９种木霉菌，［１、２］分别为哈茨木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｈａｒｚｉａｎｕｍ）、绿色木
霉（Ｔ．ｖｉｒｉｄｅ）、长枝木霉（Ｔ．ｌｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）、康氏木霉（Ｔ．ｋｏｎｉｎｇｉｉ）、拟康氏木霉（Ｔ．ｐｓｅｕｄｏｋｏｎｉｎｇｉｉ）、顶孢木霉（Ｔ．ｆｅｒｔｉｌｅ）、黄绿木霉（Ｔ．ａｕｒｅｏｖｉｒｉｄｅ）、深绿木霉（Ｔ．ａｔｒｏｖｉｒｉｄｅ）、钩状木霉（Ｔ．ｈａｍａｔｕｍ）以及两种未知名木霉种Ｔ．ｓｐ１和Ｔ．ｓｐ２（可能为新种）。
中哈茨木霉、黄绿木霉、康氏木霉、绿色木霉、拟康
对峙培养试验中观察到，对峙培养２～３ｄ即可见氏木霉和待鉴定种（Ｔ．ｓｐ２）同时对３种病原菌具
到木霉菌对病原菌的抑制作用，之后木霉菌继续有很强的抑制作用，其抑菌率高达６３．６４％～
不同接种时间菌落直径（ｃｍ）
２ｄ
３ｄ
４ｄ
５ｄ
６ｄ
７ｄ
８ｄ
９ｄ
３．６
７．４
８．０（＋）
＋
＋
＋
＋
＋
４．０
７．８（＋）
＋
＋
＋
＋
＋
＋
４．４
７．６（＋）
＋
＋
＋
＋
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＋
６．０
７．８（＋）
＋
＋
＋
＋
＋
＋
６．２

木霉菌与植物病害的生物防治

木霉菌与植物病害的生物防治摘要：木霉菌是重要的植物病害防治菌，广泛分布于自然界。

木霉菌具有广泛的适应性，能够杀伤多种重要的植物病原菌，作用机制多种多样。

除了从自然界分离筛选之外，木霉菌的诱变育种改良技术，原生质体融合技术以及基因操作技术已有效地应用于木霉菌的改造。

木霉菌的大量生产技术以及菌剂的制备技术也有较大发展，已经有10多种商品化制剂。

木霉菌的筛选技术是需要重视的研究领域，而其发展则离不开对生态学和作用机制的详细了解。

木霉菌具有广阔的研究与应用前景。

关键词：木霉菌;；植物病害；生物防治1前言木霉菌(Trichoderma spp.) 属于半知菌类的丝孢纲，丛梗孢目，丛梗孢科，广泛存在于土壤、根围、叶围、种子和球茎等生态环境中1932年，Weindling 发现木素木霉(Trichoderma lignorum) 可以寄生于多种植物病原真菌，建议将该菌用于土传植物病害的生物防治，木霉菌生防研究工作从此开始。

由于木霉菌的广泛适应性、广谱性及多机制性，一直是植病生防学家研究的重点对象。

由于生物技术的发展，木霉菌已由单一地从自然界分离筛选达到有目的地利用生物技术进行改造以获得新型菌株的程度，如原生质体融合技术的引入已成功地研制出商品制剂F-Stop。

截止到1997年，国内外已经登记的木霉菌制剂多达11种，其中包括哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)5个，多孢木霉菌( Trichoderma polysporum) 1个，绿色木霉菌(Trichoderma viride)2个，其他木霉菌( Trichoderma spp. ) 3个，多数用于植物土壤传播病害的防治，如Sclerotinia，Phytophthora，Rhizoctonia，Pythium，Fusarium，Verticillium等。

2木霉菌的分类由于木霉菌株的形态特征复杂，又缺乏稳定性，木霉菌的种类鉴定长期处于混乱状态。

丛枝菌根真菌与小麦孢囊线虫的相互作用

ＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｆｕｎｇｉａｎｄｃｅｒｅａｌｃｙｓｔｎｅｍａｔｏｄｅＷＡＮＧ
ａｅｓｔｉｖｕｍ）的危害日益严重，亟待探索新的生防途径。丛枝菌根真菌（ａｒｂｕｓｃｕｌａｒｍｙｃｏｒｒｈｉｚａｌｆｕｎｇｉ，ＡＭＦ）作为环境功能生物，对寄主植物具有生物药肥双重作用，不仅能促进植物吸收利用养分而且能拮抗土传病原物、提高植物抗病性。本研究以ＡＭＦ与ＣＣＮ相互作用为切入点，试图明确ＡＭＦ与ＣＣＮ相互作用关系，并科学评价不同ＡＭＦ抑制ＣＣＮ、降低病害的
（Ｇ．ｉ）、Ｇｌｏｍｕｓｖｅｒｓｉｆｏｒｍｅ（Ｇ．ｖ）、Ｇｉ．ｍ＋Ｇ．ｍ＋Ｇ．ｉ＋Ｇ．ｖ、ＣＣＮ、ＣＣＮ＋Ｇｉ．ｍ、ＣＣＮ＋Ｇ．ｍ、ＣＣＮ＋Ｇ．ｉ、ＣＣＮ＋Ｇ．ｖ、ＣＣＮ＋Ｇｉ．ｍ＋Ｇ．ｍ
植物病理学报ＡＣＴＡＰＨＹＴＯＰＡＴＨＯＬＯＧＩＣＡＳＩＮＩＣＡ４４（１）：９７ — １０６（２０１４）
丛枝菌根真菌与小麦孢囊线虫的相互作用
王小坤，赵洪海，李敏，刘润进ｈ
ｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６１０９，Ｃｈｉｎａ；ＮｅｍａｔｏｄｅＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＱｉｎｇｄａｏＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｌａＵｉｖｎｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ２６６１０９，Ｃｉｎｈａ）

木霉微生物菌肥的制备及对玉米茎腐病的应用评价

1. 1. 1 菌株。玉米茎腐病病原菌禾谷镰孢菌( Fusarium gra-
大部分仍停留在实验室研究阶段,很难大面积推广应用,因
此,目前国内并没有在玉米上登记使用的木霉菌菌剂。
研究表明,将生防菌添加到有机物料中是一种促进生
防菌定殖并稳定发挥防效的重要方法 [9] 。微生物菌肥是一
种环境友好的新型生物肥料,是将具有促生和抗病特性的
20% ~ 30%,一些高感品种的发病率甚至达 40% ~ 100%
[1-2]
。
壤环境,激发土壤活力,提高土壤肥力,起到促进植物生长
意义。
笔者以非洲哈茨木霉为主要成分研制木霉菌剂及木霉
目前,玉米茎腐病主要测试其对玉米茎腐病的防治效果,以期为后
著,同时长期、大量化学药剂的施用导致的环境污染、农药残
续生防菌肥的研发和推广应用提供依据,并为玉米茎腐病的
留以及食品安全等问题也随之而来。
生物防治提供理论支撑。
木霉菌防治玉米茎腐病在国内外已有相关研究[3-8] ,但
1 材料与方法
由于生防菌施入环境后往往受土壤、气候和人为条件等因素
1. 1 试验材料
的影响,在土壤中难定殖、防效不稳定,很难达到理想效果,
物的制备:将禾谷镰孢菌在 PDA 平板上培养 5 d,取边缘菌
荡培养 3 ~ 5 d 后适量稀释备用。将玉米粒清洗浸泡 12 h,分
装灭菌冷却后,按 1. 5%(v / w)比例将禾谷镰孢菌液接种于玉
米粒培养基中,28 ℃ ,黑暗培养 10 d,即为禾谷镰孢菌玉米粒
接种物。
将土 121 ℃ 湿热灭菌 2 h 冷却后,与木霉菌剂或微生物
was 7 ∶ 1 with rotted sheep manure, Trichoderma microbial fertilizer was prepared in this proportion and the prevention effect of stalk rot on maize

北京地区食用菌上木霉污染菌的种类鉴定

北京地区食用菌上木霉污染菌的种类鉴定
邵凌云;师迎春;国立耘
【期刊名称】《食用菌学报》
【年(卷),期】2008(15)1
【摘要】从北京市食用菌主产区采集感染木霉病的培养料及子实体,分离得到33株木霉菌株,根据形态学进行鉴定,共鉴定出4个种群,分别是哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、康氏木霉 (Trichoderma koningii)、绿色木霉(Trichoderma viride)和长枝木霉 (Trichoderma longibrachiatum),其中优势种为哈茨木霉和康氏木霉.测定了氯化钠对哈茨木霉、康氏木霉以及平菇菌丝生长的抑制作用,得到毒力曲线,并计算EC50 ,结果表明,氯化钠对平菇菌丝生长的抑制作用强于木霉.
【总页数】5页(P86-90)
【作者】邵凌云;师迎春;国立耘
【作者单位】中国农业大学植病系,北京,100094;北京市植物保护站,北京,100029;中国农业大学植病系,北京,100094
【正文语种】中文
【中图分类】S646.01
【相关文献】
1.食用菌木霉种类及棉籽皮菌糠上木霉产孢量研究 [J], 贺字典;高增贵;侯东军
2.食用菌木霉种类鉴定 [J], 贺字典;孙焕顷;高玉峰
3.毒杀南方根结线虫的木霉种类鉴定及活性研究 [J], 焦俊;韩冰洁;王媛媛;朱晓峰;段玉玺;陈立杰
4.咪鲜胺对糙皮侧耳(平菇)污染菌绿色木霉的抑制作用 [J], 高苇;李宝聚;石延霞;金丹
5.食用菌污染菌——绿色木霉生物学特性及防治 [J], 刘春琴;王庆雷
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2株木霉抑菌效果及其促植物生长机制

2株木霉抑菌效果及其促植物生长机制作者：张晓梦田永强潘晓梅李佳佳石晓玲张建强吴康莉来源：《南方农业学报》2020年第11期摘要：【目的】探究绿色木霉（Trichoderma viride）和棘孢木霉（T. asperellum）对8种植物病原菌的抑制效果及其促植物生长机制，为木霉防治植物病害和促进植物生长等的田间应用提供理论参考。

【方法】采用平板对峙法和固体稀释法，检测2株木霉及其活性代谢产物对8种植物病原菌（棉花枯萎病菌、茄子菌核病菌、番茄链格孢病菌、茄腐镰刀病菌、尖孢镰刀病菌、枸杞炭疽病菌、番茄灰霉病菌和番茄匍柄霉病菌）的抑制率;采用平板透明圈法、Salkowski比色法及钼锑抗比色法测定2株木霉的生防因子、生长素及溶磷效果;通过辣椒盆栽试验，测定2株木霉发酵液不同稀释倍数处理对辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶[过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）]活性的影响。

【结果】平板对峙试验结果显示，2株木霉对8种植物病原菌的抑菌率均在60.00%以上;绿色木霉发酵11 d时其无菌滤液对茄子菌核病菌的抑制率达96.78%，但对其他病原菌的抑制率不高;棘孢木霉发酵11 d时无菌滤液对茄子菌核病菌、枸杞炭疽病菌和番茄链格孢病菌的抑制效果较好，抑菌率分别为99.08%、85.33%和68.65%，发酵9 d时无菌滤液对番茄灰霉病菌的抑制率為72.08%;2株木霉均可产生蛋白酶、几丁质酶、纤维素酶和铁载体4种生防因子;绿色木霉发酵9 d时分泌吲哚乙酸（IAA）量为3.389 mg/L，在PKO无机磷液体培养基培养7 d后溶磷量为67.236 μg/mL;棘孢木霉发酵11 d时分泌IAA量达11.638 mg/L，在PKO无机磷液体培养基培养7 d后溶磷量达151.905 μg/mL;盆栽试验结果表明，喷施不同稀释倍数的棘孢木霉发酵液较绿色木霉发酵液更能提高辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶活性。

长枝木霉菌抑菌谱测定及其抑菌作用机理研究

与方法
试验材料供试菌株长枝木霉菌株 (Trichoderma longibrac-
hiatum)由甘肃农业大学植物病理实验室筛选并保存。供试病原菌有小麦叶斑病菌(Bipolaris triticicola)、小麦赤霉病菌 (Fusarium sporotrichioides)、南瓜叶枯病菌(Alternaria cucumerina)、黄瓜枯萎病菌(Fusariurn oxysporum)、百合枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、大豆根腐病菌 (Fusarium solani) 、棉花立枯病菌 (Rhizoctonia solani ) 、西瓜枯萎病菌 (Fusarium oxyspornum)、苹果树腐烂病菌(Valsa ceratosperma)、甘草叶斑病菌(Alternaria azukiae)、独活叶斑病菌(Septoria dearnessii)和大黄叶斑病菌(Ascochyta rhei), 均由甘肃农业大学植物病理实验室提供。 1.2 1.2.1 试验方法菌种活化将 4 ℃低温保存于斜面的长枝木霉菌和 12 种植物病原菌分别接种于 PDA 培养基进行活化, 并置于 25 ℃光照培养箱中培养, 每个菌种活化 3 皿。培养 6 d 后选择生长较好的 1 皿用灭菌打孔器制取菌饼, 接种于 PDA 培养基进行二次纯化, 每个菌种 3 次重复。 1.2.2 抑菌谱和抑菌活性测定采用“对峙培养法”和“生长速率法”。用灭菌的打孔器(d=0.5 cm)制取直径为 0.5 cm 的长枝木霉菌和 12 种植物病原菌菌饼 , 同时将长枝木霉菌与各个病原菌菌饼分别接种于制备好的 PDA 平板上进行对峙培养, 而对照只接种各个病原菌, 且每个处理和对照均重复 3 次。置于 25 ℃和 16 h 光照的人工气候箱中培养 , 每天观察并记录长枝木霉菌和病原菌的对峙生长情况, 并于第 3 d 开始采用“十字交叉法”测量各处理和对照菌落半径, 每天测定 1 次, 连续测定 4 d, 根据生长抑制率公式计算抑菌效果[15]。生长抑制率 (%) = [( 对照菌落半径处理菌落半径 )/对照菌落半径 ]×100 1.2.3 抑菌作用机理观察 (1)

木霉菌与杀菌剂联合使用对水稻纹枯病菌的抑制效果

（黑龙江八一农垦大学/黑龙江省植物抗性研究中心/黑龙江省作物有害生物互作生物学及生态防控重点实验室，黑龙江大庆 163319）
摘要：为明确杀菌剂与木霉菌联合使用对水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）的抑制作用，采用生长速率法和对峙培养法研究了 4 种常用化学杀菌剂（20% 丙环唑乳油、25% 嘧菌酯悬浮剂、20% 噻唑锌悬浮剂、 125 g/L 氟环唑悬浮剂)和 3 种木霉菌(哈茨木霉菌 HZT-1、长枝木霉菌 CZT-2、绿色木霉菌 LZT-3)及其联合使用对水稻纹枯病菌菌丝生长的抑制效果。结果表明，4 种化学杀菌剂对水稻纹枯病菌的 EC50 值从小到大依次为 25% 嘧菌酯（0.001 4 μg/mL）、20% 丙环唑（0.003 7 μg/mL）、125 g/L 氟环唑（0.222 0 μg/mL）、20% 噻唑锌（20.750 0 μg/mL）；3 种木霉菌对水稻纹枯病菌的抑制率从低到高依次为哈茨木霉菌 HZT-1（53.54%）、绿色木霉菌 LZT-3（76.45%）、长枝木霉菌 CZT-2（93.25%）。通过化学杀菌剂对木霉菌的 EC50 值与该化学杀菌剂对 R.solani 的 EC50 值的比值（VEC50）分析，25% 嘧菌酯、20% 噻唑锌与 3 种木霉菌的 VEC50 均大于 1，相容性好，可与木霉菌联合使用；通过协同系数（S）分析联合使用后的增效作用，绿色木霉 LZT-3、长枝木霉 CZT-2 与 25% 嘧菌酯（质量浓度≥1.25 μg/mL）、20% 噻唑锌（质量浓度≥ 10 μg/mL）联合使用 S 值均大于 1，哈茨木霉菌 HZT-1 与高质量浓度 25% 嘧菌酯（质量浓度≥2.5 μg/mL）、 20% 噻唑锌（质量浓度≥20 μg/mL）联合使用 S 值大于 1。因此，长枝木霉 CZT-2、绿色木霉 LZT-3 可以与嘧菌酯、噻唑锌联合使用防治水稻纹枯病。关键词：木霉菌；水稻纹枯病菌；杀菌剂；相容性；协同系数；增效作用中图分类号：S435.111.42 文献标志码：A 文章编号：1004-3268（2021）09-0096-09

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木霉属（ Trichoderma）真菌属于半知菌类（ Deuteromycotina），是一类广泛分布于土壤中的习居菌［14 － 15］．目前，对木霉菌的研究主要集中于其对病原菌的拮抗方面，尤其近年来对哈茨木霉（ T． hatzianum）和绿色木霉（ T． viride）在植物病原菌的拮抗方面有较多研究［16 － 17］，如哈茨木霉 T22 菌株（ Topshield）、哈茨木霉 T39 菌株（ Trichodex）［18］，但有关长枝木霉（ T． longibrachiatum）的研究较少，尤其对小麦禾谷孢囊线虫 2 龄幼虫的致死和寄生作用目前尚未见报道．因此，本文研究长枝木霉分生孢子悬浮液对小麦禾谷孢囊线虫 2 龄幼虫的致死和寄生作用，并对其侵染过程和机理进行初步分析，旨在为新
目前，对植物线虫病害的防治主要采用抗病品种和化学防治等措施［9］，但由于小麦禾谷孢囊线虫种内存在明显的致病型分化现象，不但不同种群对同一寄主存在明显的致病力差异，而且不同种群有不同的寄主范围［10 － 11］．化学杀线剂虽然对小麦禾谷孢囊线虫的防治起到一定的作用，但是高毒高残留、难以降解、污染地下水源和环境等一系列问题限制了其推广和应用［12 ．－ 13］因此，线虫的生物防治开始受到人们的关注，尤其是利用寄生性真菌防治小麦禾谷孢囊线虫病害，是目前国内外线虫生物防治的重点和热点之一［13］．
关键词长枝木霉小麦禾谷孢囊线虫致死和寄生作用
文章编号 1001 － 9332（ 2014） 07 － 2093 － 06 中图分类号 S4 文献标识码 A
Lethal effects of Trichoderma longibrachiatum on Heterodera avenae． ZHANG Shu-wu1，2，3，4 ， XU Bing-liang1，2，3，4 ，XUE Ying-yu1，4 ，GU Li-jun1，2 （ 1 College of Grassland Science，Gansu Agricultural University，Lanzhou 730070，China； 2 Ministry of Education Key Laboratory of Grassland Ecosystem，Lanzhou 730070，China； 3 Gansu Province Pratacultural Engineering Laboratory，Lanzhou 730070，China； 4 Sino-U． S． Center for Grazingland Ecosystem Sustainability，Lanzhou 730070， China）． -Chin． J． Appl． Ecol．，2014，25（ 7）： 2093 － 2098．
Abstract： The lethal effect of the conidia suspension of Trichoderma longibrachiatum against second stage juveniles of Heterodera avenae was observed under microscopic conditions and studied in vitro to preliminarily determine the potential and mechanism of the conidia suspension of T． longibrachiatum against H． avenae． Microscopic observation results showed that the conidia suspension of T． longibrachiatum adhered to or parasitized on the surface of second stage juveniles，even some parasitized nematodes were deformed at the initial stage． Later，the second stage juveniles were wrapped and the integuments were penetrated by a large number of hyphae germinated from the conidia suspension of T． longibrachiatum． Even the body of dead second stage juveniles was completely lysed． In vitro studies showed that different concentrations （ 1． 5 × 105 － 1． 5 × 107 cfu·mL － 1 ） of T． longibrachiatum （ conidia suspension） had strong lethal and parasitic effects on the second stage juveniles of H． avenae，and significant differences existed among the treatments with different concentrations of T． longibrachiatum． In addition，the lethal and parasitic effects increased with increasing the T． longibrachiatum concentration． The mortality and corrected mortality of the second stage juveniles treated with the concentrations of 1． 5 × 107 cfu·mL － 1 were 91． 3% and 90． 4% after 72 hours，and the second stage juveniles were parasitized by 88． 7% after 14 days． Therefore，the conidia suspension of T． longibrachiatum had a great lethal effect on H． avenae，and the strain could be considered as a potential bio-control agent against H． avenae．
应用生态学报 2014 年 7 月第 25 卷第 7 期 Chinese Journal of Applied Ecology，Jul． 2014，25（ 7）： 2093 － 2098
长枝木霉对小麦禾谷孢囊线虫的致死作用*
张树武徐秉良薛应钰古丽君 1，2，3，4
1，2，3，4＊＊
型高效微生物杀线剂的开发和利用奠定理论基础．
1 材料与方法
1. 1 试验材料供试菌株长枝木霉菌株由甘肃农业大学植物病
理学实验室提供．供试病田土样于 2010 年 7 月采自甘肃省兰州市永登县和武威市民勤县等地小麦禾谷胞囊线虫发生较严重的地块．采用五点取样法采集 0 ～ 20 cm 土层土壤，并将表层干土去除后装入自封袋，带回实验室备用． 1. 2 试验方法 1. 2. 1 长枝木霉分生孢子悬浮液的制备向在 PDA 平板上培养 6 d 的长枝木霉菌中加入一滴 Tween-80 和 5 mL 无菌水充分震荡，使长枝木霉菌的分生孢子脱落在无菌水中，收集得到分生孢子悬浮液的原液，并用血球计数板计数原液浓度（ 1． 5 × 107 cfu·mL － 1 ），依次稀释为 1． 5 × 106 、7． 5 × 105 、3． 0 × 105 和 1. 5 × 105 cfu·mL － 1 备用． 1. 2. 2 小麦禾谷孢囊线虫孢囊和 2 龄幼虫的分离孢囊的分离采用“漂浮法”［19］，略作修改．向土样中加入适量的自来水搅拌均匀，使土样完全溶解，静置 2 ～ 3 min 后，把悬浮液倒入嵌在 65 目网筛中的 25 目网筛内，如此重复操作 3 次．倾去上层 25 目网筛上的残余物，剩余物再用缓慢水流收集在干净的烧杯中，并弃去下层沉淀的泥沙，把上层样品倒入垫有双层擦镜纸的漏斗内，然后把双层擦镜纸和过滤后的剩余物一并移入洗净的玻璃培养皿中，并在解剖镜下用镊子（或自制的竹签）从中挑取新鲜而饱满的棕色孢囊，置于 4 ℃ 冰箱备用．
1，4
1，2
（ 1 甘肃农业大学草业学院，兰州 730070； 2 草业生态系统教育部重点实验室，兰州 730070； 3 甘肃省草业工程实验室，兰州
730070； 4 中-美草地畜牧业可持续发展研究中心，兰州 730070）

摘要通过室内显微观察和测定不同时期长枝木霉分生孢子悬浮液对小麦禾谷孢囊线虫 2 龄幼虫的致死作用，初步研究了长枝木霉分生孢子悬浮液对小麦禾谷孢囊线虫的防治潜力和作用机理．结果表明：侵染初期大量分生孢子吸附或寄生于虫体体壁，并且在分生孢子寄生的部位出现明显的缢缩．侵染后期寄生于虫体的分生孢子萌发产生大量菌丝，并形成致密的菌网将虫体缠绕或穿透虫体体壁，甚至有的虫体完全被分解．不同浓度长枝木霉分生孢子悬浮液对 2 龄幼虫具有明显的致死和寄生作用，且不同浓度之间存在显著差异．致死和寄生作用随着长枝木霉分生孢子悬浮液浓度的增加而增强，浓度为 1． 5 × 107 cfu·mL － 1 的长枝木霉分生孢子悬浮液处理后 72 h，2 龄幼虫的死亡率和校正死亡率分别为91． 3% 和 90． 4% ，14 d 后对 2 龄幼虫的寄生率为 88． 7% ．表明长枝木霉分生孢子悬浮液对小麦禾谷孢囊线虫的致死作用较强，该菌具有对小麦禾谷孢囊线虫的防治潜力．