Ca++ Mg++- ATP酶活性测定使用说明

ATP荧光检测仪使用说明解析ATP荧光检测仪是一种用于检测微生物活性的仪器。

ATP是细胞内的能量储存分子，其浓度与细胞活性呈正相关关系。

ATP荧光检测仪可以通过测量样品中ATP分子的荧光强度，快速、准确地评估样品中微生物的活性水平。

本文将对ATP荧光检测仪的使用说明进行详细解析。

第一步：仪器准备1.检查仪器是否安装正确，所有连接口是否连接牢固。

2.检查是否有足够的ATP检测试剂盒和清洗溶液，并确保这些试剂的保存条件符合要求。

3.打开ATP荧光检测仪的电源开关，让仪器预热10-15分钟。

第二步：样品准备1.根据需要选择合适的样品类型（如水质、食品、土壤等）。

2.依据样品特性和使用的ATP检测试剂盒，选择合适的提取方法将样品中的ATP释放出来，常用的提取方法包括破碎细胞、离心沉淀等。

3.提取样品中的ATP后，获取样品的取样体积，根据ATP检测试剂盒的说明书，将相应体积的ATP检测试剂加入样品中。

第三步：测量操作1.将ATP样品和ATP检测试剂混合均匀，确保反应发生。

2.打开ATP荧光检测仪的样品室盖，将混合样品倒入样品室中。

注意不要超过样品室的标记线。

3.关上样品室盖，调节仪器的参数（如增益、积分时间等），确保仪器的测量参数符合试剂盒说明书中的建议。

4.点击仪器上的开始测量按钮，等待一定时间（通常几秒钟到几分钟不等），仪器将测量并记录样品中的ATP荧光强度。

5.把样品室清洗干净，避免交叉污染。

第四步：数据分析1.仪器测量完毕后，ATP荧光检测仪将显示出测量结果。

2.根据ATP检测试剂盒的说明书，将测得的荧光强度转化成对应的ATP浓度。

3.将不同样品的ATP浓度进行比较，并结合样品的特性和背景资料，评估样品中微生物的活性水平。

第五步：仪器的日常维护1.每次使用完毕后，将ATP荧光检测仪的样品室和周围区域彻底清洗干净，以防止污染和交叉感染。

2.定期检查仪器的电源线、通信线和连接线是否完好无损。

3.定期检查ATP检测试剂盒的保质期和存储条件，及时更换过期或损坏的试剂盒。

1. Introduction
ATPLite TM is an Adenosine TriPhosphate (ATP) monitoring system based on firefly (Photinus pyralis) luciferase. This luminescence assay is the alternative to colorimetric, fluorometric and radioisotopic assays for the quantitative evaluation of proliferation and cytotoxicity of cultured mammalian cells. ATP monitoring can be used to assess the cytocidal, cytostatic and proliferative effects of a wide range of drugs, biological response modifiers and biological compounds 1,2,3,4,5,6. The major advantages of this system are high sensitivity, excellent linearity, simplicity, fast results and the lack of cell harvesting or separation steps. Furthermore, the PerkinElmer ATPLite “Constant Quanta TM ” assay system produces a long lived “glow” type signal with a half-life of greater than five hours, therefore a special luminometer with injectors is not required. The kit is ideal for use with the PerkinElmer TopCount Microplate Scintillation and Luminescence Counter and the LumiCount Microplate Reader in both 96- and 384-well microplates. The simplicity of the ATPLite assay system in a 96-well microplate is illustrated in Figure 1.

ATP荧光快速检测仪的操作介绍ATP荧光快速检测仪是一种实时监测微生物污染的现场检测设备，主要利用荧光素酶系统检测样品中的ATP（三磷酸腺苷）含量，从而快速获得样品的微生物负载情况，是目前水质监测、食品卫生、药品生产等行业中常用的检测手段之一。

本文将介绍ATP荧光快速检测仪的基本操作。

准备工作使用ATP荧光快速检测仪进行检测需要准备以下物品：•ATP检测仪•检测笔•校准液•样品采集容器（如杯子或培养皿）•蒸馏纯水•消毒剂在开始检测前，需要先进行一些准备工作：1.样品采集：根据需求选择合适的样品采集容器，正常情况下，采集的样品应全程使用消毒器材，并保证容器内外无杂质。

2.样品浓度：ATP检测仪适用于样品的浓度在10-10-10-12M范围内，需要根据具体情况进行浓度调整。

3.样品准备：将采集好的样品置于ATP检测仪准备好的检测采样区域内，等待检测仪进行检测。

检测流程ATP荧光快速检测仪的操作流程分为以下几步：1.校准：在进行检测前，需要进行ATP检测仪的校准。

选择适合的校准液，在ATP检测仪的校准区域进行校准操作。

注：使用过期的校准液可能会影响检测结果。

2.荧光探针：校准完成后，选择正确的荧光探针，并将探针插入ATP检测仪的检测区域，等待仪器自动校准。

3.采样：将准备好的样品放置于ATP检测仪的样品区域内，按下检测笔，让检测笔尽量贴近样品液面，等待荧光测量结果。

4.结果读取：ATP荧光快速检测仪通常会在3秒内给出样品的ATP负载量（以RLU为单位），通常将结果温馨提示标记为通过或未通过。

需要注意的是，不同行业适用的ATP检测范围可能不同，需要根据实际需求进行设置。

5.维护保养：检测完毕后，需要对ATP检测仪进行清洁，以保证仪器的精度和可靠性。

注意事项在操作ATP荧光快速检测仪时，也需要遵守以下注意事项：1.样品的采集应该全程使用消毒器材。

2.样品的存储时间长短、条件等都会影响检测结果，需要注意存储。

ATP酶活性检测试剂盒（样本无需高速离心样本无需高速离心，，可测Na+k+、Ca2+Mg2+、Ca2+、Mg2+_ATPase)说明书修订日期：2019.01.22 Cat number：KGT026Store at -20 for for 6 months℃For Research Use Only（科研专用）一、试剂盒介绍ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用。

本试剂盒的测定原理是依据ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。

本试剂盒可测不需要高速离心的红细胞膜以及不需要高速离心的组织匀浆中的ATPase。

二、试剂组份组份名称KGT02650tests保存条件试剂A 10mL×3试剂B 10mL×1试剂C 10mL×12-8℃试剂D 粉剂×3 -20℃试剂E 粉剂×1试剂F 粉剂×12-8℃试剂G 10mL×2 RT试剂H 粉剂×3试剂I 粉剂×12-8℃试剂J：2.5 mol/L 硫酸100mL×1 RT 试剂K：10 m mol/L 标准磷储液10mL×1 2-8℃试剂D：-20℃以下保存6个月。

用时每支加双蒸水至5ml，现用现配。

余下的-20℃以下可保存一周。

试剂E：用时每支加双蒸水至5ml，适当加热溶解，4℃保存3个月。

试剂F：用时每支加双蒸水至10ml[注1]，充分加热使其完全溶解，室温保存。

试剂H：用时每瓶加双蒸水至40ml溶解，（溶解后避光4℃可保存一周）。

试剂I：用时加水至100ml溶解，室温保存3个月。

0.5umol/ml标准磷工作液配制：用时将试剂K作20倍稀释: 取0.5ml加蒸馏水定容至10ml。

定磷剂的配制：按双蒸水：2.5mol/L硫酸：试剂H：试剂I=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色，若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。

ATP荧光检测仪器的广泛应用是因为人们越来越重视食品的快速检测，现在为了保持食品的色泽和风味，延长食品的保质期，一些商家开始向食品中添加各种添加剂给食品安全带来了许多隐患。

每年都有很多食物在这种背景下，开展全面的食品微生物检测是非常重要的必要。

那为什么要用ATP荧光检测仪器来测定食品中微生物的含量呢？是这样，传统的检测技术耗时长，检测效率慢，难以适应快速发展社会需求，随着检测技术的不断创新，新的食品快速检测技术和方法正在保障食品产品安全扮演着越来越重要的角色。

随着社会的进步和发展，食品检验设备可以快速检测随着快速发展，新的食品快速检测设备得到了开发和用户的认可，被广泛使用。

ATP荧光检测仪器采用手持设计。

体积小，携带方便，可以满足用户随时进行现场移动快速检查的需求。

它的工作工作原理是ATP荧光法。

三磷酸腺苷在所有生物的细胞中都非常丰富，它是由荧光剂和三磷酸腺苷发出的利用生物发光现象测定样品。

ATP荧光检测仪器详细介绍：可用于医疗系统物体表面及操作人员手等表面洁净度快速测定的专用设备。

也可用于表面洁净度测定及微生物生长控制。

该设备采用化学反应检测ATP，用ATP拭子采集标本。

ATP拭子被缓冲液浸湿，这样有助于从干燥或湿润的表面提取生物物质（ATP）。

拭子也含有一种可以冲破生物膜的试剂，使其下可能存在的生物体暴露出来。

标本采集后，拭子应浸泡在能将细胞内ATP释放出来的容剂中。

而后细胞内部释放出的ATP、以及拭子从设备表面抹取的ATP再和Ultrasnap独特的液体试剂一起反应。

ATP荧光检测仪器特性：灵敏度高——10-15～10-18 mol速度快——常规培养法18-24h以上，而ATP只需要十几秒钟.可行性——微生物数量与微生物体内所含ATP有明确的相关性。

通过检测ATP含量，可间接得出反应中微生物数量可操作性——传统培养方法需要在实验室由经过培训的技术人员进行操作；而ATP快速洁净度检测操作非常简便，只需简单的培训即可由一般工作人员进行现场操作。

货号：QS1701 规格：50管/24样Ca++ Mg++-ATP 酶活性测定说明书可见分光光度法正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定测定意义：Ca++Mg++-ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP水解生成ADP和无机磷。

测定原理：根据Ca++Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。

自备实验用品及仪器:可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：提取液：液体50mL ×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体10mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体5mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体5ml×1 瓶，4℃保存。

试剂四：粉剂×3 支，-20℃保存。

用时每支加1mL蒸馏水，现用现配；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

试剂五：液体5mL×1 瓶，4℃保存。

试剂六：粉剂×1瓶，4℃保存。

用时加入3mL蒸馏水，4℃保存。

试剂七：粉剂×1瓶, 4℃保存。

用时加入25mL蒸馏水，溶解后4℃保存一周。

试剂八：粉剂×1瓶, 4℃保存。

用时加入25mL蒸馏水，溶解后4℃保存一周。

试剂九：液体25mL×1 瓶，室温保存。

试剂十：10mmol/L 标准磷贮备液10mL×1 瓶，4℃保存。

0.5μmol/mL 标准磷应用液配制：将试剂十 20倍稀释，即取 0.1mL试剂十加1.9mL蒸馏水充分混匀。

O: 试剂七:试剂八:试剂九=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷剂应为定磷剂的配制：按H2浅黄色。

若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。

注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。

样品酶液的制备：1、细菌、细胞或组织样品的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

■ 保存
开封后室温保存。
Double Digestion(双酶切反应)时 Universal Buffer(通用缓冲液)的使用表
■ 说明 使用二种酶同时进行 DNA 切断反应 (Double Digestion) 时，为了节省反应时间，通常希望在同一反应体系内进行。TaKaRa 采用 Universal Buffer 表示系统，并对每种酶表示了在各 Universal Buffer 中的相对活性。尽管如此，在进行 Double Digestion 时，有时还 会难以找到合适的 Universal Buffer。 本表以在 pUC 系列载体的多克隆位点处的各限制酶为核心，显示了在 Double Digestion 可使用的最佳 Universal Buffer 条件。在本表 中，各 Universal Buffer 之前表示的 [数字×] 是指各 Universal Buffer 的反应体系中的最终浓度。TaKaRa 销售产品中添附的 Universal Buffer 全为10倍浓度的缓冲液。终浓度为0.5×时反应体系中的缓冲液则稀释至20倍，1×时稀释至10倍，2×时稀释至5倍进行使用。 ■ 注意 ◇ 1 μg DNA 中添加10 U 的限制酶，在50 μl 的反应体系中，37℃下反应1小时可以完全降解 DNA。 ◇ 为防止 Star 活性的产生，请将反应体系中的甘油含量，尽量控制在10%以下。 ◇ 根据 DNA 的种类，各 DNA 的立体结构的差别，或当限制酶识别位点邻接时，有时会发生 Double Digestion 不能顺利进行的可 能。
泳图谱，判断酶中是否夹杂有非特异性核酸酶。 2. 基因组 DNA 分析
对指定的限制酶(在酶的分项介绍中标明)进行该项检测。在适当的细菌 DNA 底物中 (琼脂糖凝胶块 中的 DNA 浓度为0.5 μg/50 μl)加入20～150 U 的限制酶，反应24小时，然后进行琼脂糖电泳，根据电泳 图谱，确认酶中是否含有杂质。 3. 连接—再切检定

用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在 5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本 OD 值
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
再与 HRP 标记的 ATP 酶（ATPase）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底 洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最 终的黄色。颜色的深浅和样品中的 ATP 酶（ATPase）呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下
测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中 ATP 酶（ATPase）活性浓度。
计算 以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标 准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，
即为样品的实际浓度。 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未

即使出厂的时候经过严格的操作，标准检测溶液中可能还会有微量的 ATP 残留，可以 通过在室温下静止的方法烧光其中的 ATP，一般需要 20 分钟，这一步对于测量超微量 ATP 是十分必要的。

本试剂盒使用方便，通常可以在 30-60 分钟内测定完成 10-20 个样品的测定。 本试剂盒提供的试剂可以检测 100 个样品。 包装清单：
ATP 检测试剂
1ml×5 瓶
ATP 标准溶液(1mM)
1ml
ATP 检测裂解液 5×
5ml
说明书
1份
保存条件： -20℃保存，半年有效。-70℃保存，一年有效。 ATP 检测试剂需避光保存。ATP 检测
沈阳中科靓马生物工程有限公司
ATP测定试剂盒使用说明书
产品简介：
本公司提供的 ATP 测定试剂盒(ATP Determination Kit),是基于有 ATP 存在的条件下，萤
火虫荧光素酶可催化底物 D－荧光素氧化并发射荧光（约 560nm，pH7.8），以及在除 ATP
外其它底物处于过量的情况下，光子数量与 ATP 量呈线性关系这一原理。
液 4℃保存请于 5 天内使用完。 注意事项： 1、ATP 检测试剂中含有荧光素酶，反复冻融将导致失活。 2、ATP，特别是裂解后样品中的 ATP 在室温下不稳定，需在 4℃或冰上操作。
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沈阳中科靓马生物工程有限公司
3、5×ATP 检测裂解液要用双蒸水稀释成 1 倍浓度后使用。 4、本试剂盒须与光度计或液闪仪匹配使用。 5、实验时应穿戴一次性手套操作，以免外源 ATP 污染。 使用说明： 1. ATP 标准曲线制定：
⑴．冰浴上溶解待用试剂，把 ATP 标准溶液用双蒸水或去离子水稀释成适当的浓度梯 度。具体的浓度需根据样品中 ATP 的浓度而定。一共需稀释 5 个梯度。加入标准检测溶液 中稀释的 ATP 标准溶液其体积不应超过总检测液的 10％。

ATP含量检测试剂盒（可见分光光度法）使用说明注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC0300规格：100T/48S产品内容：组分规格保存试剂一底物液Ⅰ粉剂×1瓶室温保存底物液Ⅰ配制：用时加10mL煮沸双蒸水溶解，并沸水浴使溶解完全；临用前观察如有结晶，可沸水浴溶解后置于37℃保存待测。

试剂二底物液Ⅱ20mL×1瓶4℃保存试剂三促进剂粉剂×2支-20℃保存稀释液760μL×2瓶4℃保存试剂三应用液（促进剂）配制：临用前取1支试剂三稀释液加入1支试剂三粉剂中，充分溶解备用。

试剂四沉淀剂液体 5.5mL×1瓶4℃保存试剂五显色剂甲液7mL×4瓶4℃保存乙液6mL×4瓶4℃保存显色应用液的配制：用时取一瓶显色剂甲液加入一瓶显色剂乙液中，充分混匀4℃待用，现用现配。

试剂六终止剂50mL×1瓶室温保存试剂七ATP标准品粉剂×2支4℃保存5mmol/L ATP标准品贮备液配制：用时加双蒸水定容至1mL，制备5mmol/L ATP标准品贮备液。

1mmol/L ATP标准品应用液配制：将标准品贮备液与双蒸水1:4稀释，即5倍稀释。

产品说明：三磷酸腺苷（adenosine5'-triphosphate，ATP）是生物体内能量转换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。

ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。

ATP水平的改变，会影响许多细胞的功能。

通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。

通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生状态。

ATP含量测定试剂盒可以用于检测红细胞或组织内的ATP水平。

自备仪器和用品：分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、台式离心机、研钵和蒸馏水。

ATP检测试剂盒(ATP Assay Kit)可以用于检测普通溶液中或细胞或组织内的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。

ATP，作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。

ATP水平的改变，会影响许多细胞的功能。

通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下，ATP水平会下降，而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。

通常A TP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降，在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。

ATP荧光检测操作步骤：
1）取出试管内拭子，涂抹10cmX10cm清洁后的表面（表面不规则也尽量涂抹够100cm2）；2）将拭子放回试管内；
3）测试棒分几种：如果测试棒是上端有试剂的话拆断上端阀门，释放反应液，反应液将沿拭子管冲刷拭子头部棉签，停留于拭子管底部；如果是下端有试剂的话，把测试棒使劲按入底部，接触测试液；
4）充分震荡试管，使反应充分进行；
5）将拭子管放入荧光检测仪，运行仪器后，显示监测结果。

ca2 + -atp 酶活力意义`Ca²⁺-ATP 酶`（也称为`Ca²⁺-ATPase`或`PMCA`）是一种存在于细胞膜上的酶，它在细胞内钙离子（`Ca²⁺`）的稳态调节中起着重要作用。

以下是`Ca²⁺-ATP 酶活力的一些重要意义：1. 钙离子稳态：`Ca²⁺-ATP 酶能够将细胞内的钙离子泵出到细胞外或泵入到细胞内的储存细胞器（如内质网或线粒体）中。

这种泵出和泵入的过程有助于维持细胞内钙离子浓度的稳定，确保细胞正常的生理功能。

2. 信号传递：钙离子作为细胞内的第二信使，参与了许多重要的生理过程，如肌肉收缩、神经递质释放、细胞增殖和凋亡等。

`Ca²⁺-ATP 酶的活力可以调节细胞内钙离子的水平和分布，从而影响这些信号传递过程。

3. 肌肉收缩：在肌肉细胞中，`Ca²⁺-ATP 酶对于钙离子的移除至关重要。

当肌肉收缩时，钙离子内流触发肌肉收缩，随后`Ca²⁺-ATP 酶将钙离子泵出细胞，使肌肉恢复松弛状态。

4. 细胞保护：细胞内钙离子浓度的异常升高可能导致细胞毒性和凋亡。

`Ca²⁺-ATP 酶的活力可以帮助细胞清除多余的钙离子，从而保护细胞免受钙离子超载引起的损伤。

5. 神经传递：在神经元中，钙离子参与了神经递质的释放。

`Ca²⁺-ATP 酶的活力可以调节突触前膜内钙离子的水平，从而影响神经递质的释放和神经元之间的信号传递。

总之，`Ca²⁺-ATP 酶的活力对于维持细胞内钙离子的平衡、信号传递、肌肉收缩、细胞保护以及神经传递等方面都具有重要的意义。

它的正常功能对于许多生理过程的正常运行至关重要。

ATP酶测试盒说明书（不高速可测Na+-k+、Ca2+-Mg2+、Ca2+、Mg2+-ATPase）此试剂盒可测不需要高速离心的红细胞膜以及不需要高速离心的组织匀浆中的ATPase。

比色法：50管/48样一、测定原理：ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷，测定无机磷的量可判断ATP酶活力的高低。

二、试剂组成与配制：试剂一：液体10ml×3瓶，4℃保存6个月。

试剂二：液体10ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂三：液体10ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂四：粉剂×3支，-20℃以下保存6个月。

用时每支加蒸馏水至5ml，现用现配。

余下的-20℃以下可保存一周。

试剂五：粉剂×1支，4℃保存6个月。

用时加蒸馏水至5ml，适当加热溶解，4℃保存3个月。

试剂六：粉剂×1支，4℃保存6个月。

用时加蒸馏水至10ml，充分加热使其完全溶解，室温保存。

试剂七：液体10ml×2瓶，室温保存6个月。

试剂八：粉剂×3瓶，4℃保存6个月。

用时每瓶加水至40ml溶解。

（溶解后避光4℃可保存一周）。

试剂九：粉剂×1瓶，4℃保存6个月。

用时加水至100ml溶解，室温保存3个月。

试剂十：液体100ml×1瓶，室温保存6个月。

试剂十一：10mmol/L标准磷贮备液10ml×1瓶，4℃保存6个月。

0.5μmol/ml标准磷应用液配制：用时将贮备液20倍稀释，即取0.5ml加蒸馏水定容至10ml。

定磷剂的配制：按试剂八：试剂九：蒸馏水：试剂十=1：1：2：1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色，若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。

三、试剂组成与配制：试剂一：液体10ml×6瓶，4℃保存6个月。

试剂二：液体10ml×2瓶，4℃保存6个月。

试剂三：液体10ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂四：粉剂×5支，-20℃以下保存6个月。

MG-ATP酶的作用
MG-ATP酶是一种酶，全名为镁离子依赖型三磷酸腺苷酶（Magnesium-dependent ATPase）。

它在细胞内扮演着重要的生物催化剂角色，能够催化ATP（三磷酸腺苷）的水解反应。

下面是对MG-ATP酶的作用的详细解释：
1.ATP水解：MG-ATP酶主要作用是将ATP分子水解为ADP（二磷酸腺苷）和无机磷酸（Pi）的过程。

该反应释放出能量，被用于驱动许多细胞内的生物化学反应。

2.ADP再生：通过水解ATP生成ADP，MG-ATP酶也促使ADP向ATP的再生。

当其他代谢途径需要更多的能量供应时，ADP可以进一步催化合成ATP，以满足细胞的能量需求。

3.离子调控：MG-ATP酶的催化活性受到镁离子的调控。

镁离子作为必需的辅因子结合在酶的活性位点上，参与催化ATP水解的反应过程。

4.能量转换：MG-ATP酶的活性提供了细胞能量的转换。

通过将ATP水解为ADP和Pi，MG-ATP酶释放出的能量被传递给其他细胞过程的能量需求，如肌肉收缩、主动运输、膜转运等。

5.细胞信号传导：MG-ATP酶参与多种细胞信号传导过程。

例如，离子泵是MG-ATP酶的一种类型，通过ATP水解将离子从一个细胞区域转运到另一个细胞区域，从而在细胞内维持离子浓度梯度和细胞内外的离子平衡。

总之，MG-ATP酶的主要作用是催化ATP水解反应，释放能量并参与细胞的能量代谢、生物化学反应和细胞信号传导等重要过程。

ATP 含量检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0300规格：50T/48S 产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体50 mL×1瓶2-8℃保存试剂二粉剂×1瓶2-8℃保存试剂三液体8 mL×1瓶2-8℃保存试剂四粉剂×3支-20℃保存试剂五粉剂×1瓶2-8℃保存试剂六粉剂×3支-20℃保存标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1．提取液低温条件下，可能有结晶析出，放于60℃水浴加热溶解即可，不影响使用。

2．试剂二：临用前加入7 mL 蒸馏水充分溶解，可加热促进溶解；3．试剂四：临用前取1支加入0.2mL 蒸馏水溶解，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；4．试剂五：临用前加入3.2 mL 蒸馏水充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；5．试剂六：临用前取1支加入0.25 mL 蒸馏水备用，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；6．标准品：5 mg ATP 。

临用前加入0.826 mL 蒸馏水配成10 μmol /mL的ATP 标准溶液，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；7．工作液的配制：临用前请按试剂二(mL)：试剂三(mL)：试剂四(mL)：试剂五(mL)：试剂六(mL)=1：1：0.1：0.4：0.1的比例配制（2.6mL ，约10T 的量），现配现用。

产品说明：ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。

测定ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。

HK 催化葡萄糖和ATP 合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH ，NADPH 在340nm 有特征吸收峰，NADPH 和ATP 含量成正比，以此反应ATP 含量。

实验14 植物组织ATP酶活性测定一、原理ATP酶（adenosinetriphosphatase）可催化ATP水解生成ADP及无机磷的反应，这一反应放出大量能量，以供生物体进行各需能生命过程。

它存在于生物细胞的多个部位，比如细胞质膜上，叶绿体类囊体膜上，对整个生命的维持有着重要的作用。

在生物学研究中，常通过测定酶促反应释放的无机磷量或ATP的减少量以及pH变化等来测定A TP酶的活力。

本实验通过测酶促反应过程中无机磷的释放量来测定叶绿体偶联因子ATPase的活力。

偶联因子是分布在叶绿体类囊体膜表面的一种复合蛋白，它在光合作用能量转换反应中起重要作用。

在正常情况下，膜上的偶联因子催化光合磷酸化反应（ATP合成）的速率很高，而水解A TP的活力是十分低的，但用二硫苏糖醇（DTT）、胰蛋白酶或较高温度等激活后，它水解A TP的活力可大大增加。

因此，偶联因子的测定常用激活后的ATPase水解ATP的活力来表示。

二、材料、仪器设备及试剂（一）材料：新鲜菠菜10g，洗净，去叶柄和中脉备用。

（二）仪器设备：1．分光光度计；2．水浴锅；3．照光设备（光源50，000Lx）；4．台式离心机。

（三）试剂：1. Tris-HCl缓冲液1mol/L（pH8.0）：称60.57g Tris溶于400ml蒸馏水中，用浓盐酸调至pH8.0，再加蒸馏水至500ml。

2. 5mol/L 硫酸溶液：取27.8ml（比重1.84）浓硫酸，慢慢加入到70ml蒸馏水中，冷却后定容至100ml。

3. 10％硫酸钼酸铵溶液：称10g钼酸铵溶于100ml5mol/L 硫酸中。

4. 硫酸亚铁－钼酸铵试剂：称5g硫酸亚铁，加入10ml硫酸钼酸铵，再加蒸馏水稀释到70ml，直至溶解为止（用前临时配制）。

5. STN缓冲液，将0.05mol/L Tris-HClpH7.8缓冲液（内含0.4mol/L 蔗糖、0.01mol/L NaCl)放入冰箱中预冷。

质量好atp检测仪使用方法
使用ATP检测仪时，需要先进行样本处理，确保样本中没有影响ATP酶反应的物质存在。

然后将样本加入测试管中，加入ATP酶试剂和底物试剂，混合均匀后将测试管插入ATP检测仪中进行检测。

检测结果可以通过仪器屏幕上的数字显示进行读取。

在使用ATP检测仪时，需要注意以下几点：
1. 样本处理要彻底，确保样本中没有会影响ATP酶反应的物质存在。

2. 操作要规范，避免污染样本和试剂。

3. 检测仪的使用要按照说明书进行，避免误操作导致错误的结果。

4. 检测仪的存放要干燥、防尘、防震，避免影响仪器的精度和稳定性。

总的来说，ATP检测仪是一种简便、快速、准确的检测方法，可以大大提高检测效率和精度，对于保障食品卫生和生产安全具有重要作用。

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