灭菌与灭菌技术

微生物的消毒和灭菌技术一、微生物消毒和灭菌的概念消毒:是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。

通常用化学的方法来达到消毒的作用。

用于用于消毒的化学药物叫做消毒剂。

灭菌:是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内全部杀死的方法, 通常用物理方法来达到灭菌的目的。

灭菌方法分为物理灭菌法和化学灭菌法。

防腐:是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。

用于防腐的化学药物叫做防腐剂。

无菌:不含活菌的意思,是灭菌的结果。

防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作二、微生物的消毒方法常用的消毒方法有物理法和化学法。

物理法就是用物理方法杀灭或清除病原微生物和其他有害生物,主要有热消毒法、紫外线消毒法、电离辐射法、微波法等。

最常用的物理消毒方法是热消毒法和紫外线消毒法。

热消毒法(煮沸法 :是最简单有效的消毒方法,不需要特殊设备即可进行。

杀灭繁殖型细菌与病毒效果好, 对芽胞作用较小。

煮沸时间一般为 10~30分钟。

金属器械、棉织品、食具、玻璃制品等可用煮沸消毒。

但毛皮、呢绒和塑料制品等不能煮沸消毒。

热消毒法不适用于芽胞污染的消毒紫外线消毒法就是利用紫外线照射使微生物诱变致死, 达到将被服中的有害微生物除掉的目的。

消毒用紫外线灯管有 15W 、 20W 、 30W 等规则。

瓦数代表灯管在 25~40℃时紫外线输出能量。

灯管寿命一般为 3000~4000小时, 超过此时限效果不可靠。

紫外线对一般细菌、病毒均有杀灭作用。

革兰阴性菌最敏感, 其次为革兰阳生菌。

但结核杆菌却有较强抵抗力。

一般紫外线消毒对细菌芽胞无效。

紫外线广泛用于室内空气消毒, 如手术室、烧伤病房、传染病房、实验室等。

灯管距地面约 2.0~2.5m 高。

每 10~15cm 2面积可设 30W 灯管一个,最好每照射 2小时后,间歇 1小时后再照,以免臭氧浓度过高。

灯管用铝制灯罩作反向或侧向照射,可用于有人在的条件下消毒空气。

对污染表面消毒时, 灯管距表面不超过 1m , 灯管周围 1.5~2cm 处为消毒有效范围。

浅谈各种灭菌消毒技术方法随着医学技术的进步，消毒灭菌技术越来越被关注。

越来越多的医疗案例的失败缘由是消毒技术的失误，消毒灭菌技术的成功是手术成功的关键，因此，医务人员熟练掌握各种消毒灭菌技术方法尤为重要，提高治疗效果。

标签：消毒灭菌技术；方法1.消毒因子作用的水平根据消毒因子的适当剂量（浓度）或强度和作用时间对微生物的杀灭能力，可将其分为四个作用水平的消毒方法。

（1）灭菌：可杀灭一切微生物（包括细菌芽孢）达到灭菌保证水平的方法。

属于此类的方法有：热力灭菌、电离辐射灭菌、微波灭菌、等离子体灭菌等物理灭菌方法，以及用甲醛、戊二醛、环氧乙烷、过氧乙酸、过氧化氢等消毒剂进行灭菌的方法。

（2）高水平消毒法：可以杀灭各种微生物，对细菌芽孢杀灭达到消毒效果的方法。

这类消毒方法应能杀灭一切细菌繁殖体（包括结核分枝杆菌）、病毒、真菌及其孢子和绝大多数细菌芽孢。

属于此类的方法有：热力、电力辐射、微波和紫外线等以及用含氯、二氧化氯、过氧乙酸、过氧化氢、含溴消毒剂、臭氧、二溴海因等甲基乙内酰脲类化合物和一些复配的消毒剂等消毒因子进行消毒的方法。

（3）中水平消毒法：是可以杀灭和去除细菌芽孢以外的各种病原微生物的消毒方法，包括超声波、碘类消毒剂（碘伏、碘酊等）、醇类、醇类和氯已定的复方，醇类和季铵盐（包括双链季铵盐）类化合物的复方、酚类等消毒剂进行消毒的方法。

（4）低水平消毒法：只能杀灭细菌繁殖体（分枝杆菌除外）和亲脂病毒的化学消毒剂和通风换气、冲洗等机械除菌法。

如单链季铵盐类消毒剂（苯扎溴铵等）、双胍类消毒剂如氯己定、植物类消毒剂和汞、银、铜等金属离子消毒剂等进行消毒的方法。

2.选择消毒、灭菌方法的原则（1）使用经卫生行政部门批准的消毒药、械，并按照批准使用的范围和方法在医疗卫生机构和疫源地等消毒中使用。

（2）根据物品污染后的危害程度选择消毒、灭菌的方法。

1）高度危险性物品，必须选用灭菌方法处理。

2）中度危险性物品，一般情况下达到消毒即可，可选用中水平或高水平消毒法。

常用的基本操作技术（一）消毒和灭菌技术消毒（disinfection）与灭菌（sterilization）两者的意义有所不同。

消毒一般是指利用物理或化学方法消灭病原菌或有害微生物的营养体，而灭菌则是指利用强烈的物理或化学方法杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子。

但日常生活中两者常常通用。

灭菌的方法很多，一般可分为物理灭菌和化学灭菌两大类。

1. 物理灭菌物理灭菌是最常用的灭菌方法。

主要包括热力学灭菌、过滤除菌和紫外线灭菌等。

（1）热力学灭菌又可分为干热灭菌和湿热灭菌两大类。

①干热灭菌干热灭菌是利用高温使微生物的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

细胞内的蛋白质的凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快；含水量越小，凝固减慢。

因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度更高（160~170℃），时间更长（1~2h）。

进行干热灭菌时最高温度不能超过180℃，否则，包扎器皿的纸或棉塞就会被烤焦，甚至引起燃烧。

通常所说的干热灭菌是指利用干燥箱（或称烘箱）进行灭菌，主要用于玻璃器皿如培养皿、移液管和接种工具等的灭菌。

灭菌时将被灭菌的物体用双层报纸包好或装入特制的灭菌筒内，装入箱中，不要摆的太挤，以免妨碍热空气流通。

逐渐加温，使温度上升至160～170℃后保持2h。

灭菌结束后，切断电源，自然降温，待箱内温度降至70℃以下后，才能打开箱门，取出灭菌物品。

注意在温度降至70℃以前切勿打开箱门，以免玻璃器皿炸裂。

另外，灼烧灭菌也属于干热灭菌。

在进行无菌操作时，接种工具如接种环、接种钩、接种铲、镊子等要在酒精灯火焰上充分灼烧，试管口、菌种瓶口在火焰上作短暂灼烧灭菌等。

②湿热灭菌a.高压蒸汽灭菌此法是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾产生蒸气。

待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度，导致菌体蛋白质凝固变性达到灭菌的目的。

一、消毒、灭菌、防腐、化疗、无菌、无菌技术等基本概念的含义是什么？消毒：指杀死病原微生物，但不包括芽胞。

灭菌：是指杀灭物体上所有微生物，包括繁殖体和芽胞。

防腐：是指防止或抑制微生物生长繁殖。

消毒剂：高浓度防腐剂：低浓度化疗：化疗即化学治疗，是利用对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖，以达到治疗该宿主所染疾病的方法。

无菌：物品中没有活的微生物存在。

无菌技术：是指在进行外科手术或分离、转种及培养时防止其他微生物污染实验材料的操作方法。

无菌操作所用的器具和材料，都必须先经灭菌处理。

二、物理消毒灭菌的常用方法有那些？热力灭菌法：高温、低温、干燥辐射杀菌法：电离、非电离物理学方法滤过除菌法超声波杀菌法等离子体渗透压（一）、热力灭菌法分类：干热灭菌法湿热灭菌法1.干热灭菌法A 焚烧：B 烧灼：C 干烤：160°～180℃，2hD 红外线灭菌：2.湿热灭菌法A 巴氏消毒法：61.1-62.8℃，30 min71.7℃，15-30secB 煮沸消毒法：100℃，5min -10minC 流通蒸气消毒法：100℃，15-30minD 间歇蒸汽灭菌法：100℃，15-30min，37℃过夜（3次）E 高压蒸气灭菌法:15磅（121.3℃），15-30min湿热比干热灭菌好的原因：1 细菌蛋白质在有水的情况下易于凝固变性2 湿热穿透力强3 湿热蒸气有潜热存在，水蒸气凝固成水释放潜热，迅速提高被灭菌物体的温度（二）、光线与射线的消毒作用1 日光与紫外线机理：损坏DNA构型->细菌死亡或变异特点：穿透力弱2 电离辐射：包括X射线和γ射线机制：干扰DNA的合成；破坏细胞膜；产生过氧化氢等特点：穿透力强，不升高温度（三）、滤过除菌法用滤菌器除去液体及空气中的细菌用于不耐热的血清、毒素、抗生素（四）、超声波的消毒作用可裂解细菌，尤其对G+更敏感主要用于粉碎细胞，提取细胞组分或制备抗原等（五）等离子体法对微生物有良好的杀灭作用。

消毒、灭菌技术1、加热灭菌(1)干热灭菌法1)火焰灭菌法直接利用火焰把微生物灼烧死。

此法灭菌可靠，简便迅速，适用于接种环、接种针、玻璃棒、镊子、解剖刀等用具的灭菌。

在接种过程中，试管口、三角瓶口也都用火焰作短暂灼烧而达到灭菌的目的。

2)干热空气灭菌法在干燥箱内，通过加热使箱内空气温度上升，而达到灭菌的目的。

具体操作方法是：首先将包扎好的器皿放入干燥箱内，使其勿与箱壁接触，并保持箱内空气流通；然后接通电源加热，使温度升至160～170℃，恒温维持2～3小时；再切断电源停止加热，当箱内温度降至60℃以下时，方可打开箱门，取出被灭菌的物品。

此法只适用于玻璃仪器及金属用具。

(2)湿热灭菌法湿热灭菌法是用煮沸或饱和水蒸气等湿热进行灭菌，此法适用于一切含水物品。

实验室常用高压蒸汽灭菌法灭菌。

高压蒸汽灭菌锅的使用方法：首先，在灭菌锅内加入适量的水，然后把欲灭菌的物品放入，盖上内盖，再对称拧紧外盖上的螺栓；打开锅盖上的放气阀，开始加热；锅内产生蒸汽后，放气阀即有蒸汽排出，约3～5分钟后，待冷湿空气排尽，再关闭放气阀；待压力升到0.1兆帕（121℃）时，维持此压20～30分钟；停止加热，自然冷却，待压力降为零后，打开放气阀，排出残留蒸汽；打开锅盖，取出灭菌的物品，无菌放好。

2、过滤除菌不适于加热灭菌的物质，可以采用过滤法除菌。

过滤除菌就是利用特别的细菌过滤器，以及活性炭、超细纤维等，将液体或空气中的细菌滤掉。

一般以细菌过滤器为常用。

3、化学药剂消毒与灭菌化学药剂消毒是利用化学药剂来杀死微生物。

实验室和生产中常用的消毒剂有：5%苯酚溶液常用于实验室、无菌室和无菌操作箱中的空间消毒；10%的福尔马林溶液常用于容器消毒；70～75%酒精是最常用的消毒剂，可用于一般器皿、器械、皮肤、玻片等表面消毒；0.1%次氯酸钠溶液可用于粮粒表面消毒，5%次氯酸钠溶液可用于霉菌毒素的去毒；3～5%的来苏儿常用于桌面地面及皮肤的消毒。

4、紫外线灭菌法紫外线灭菌法主要应用于无菌室和无菌操作箱的空气灭菌。

灭菌技术知识及运用介绍一、定义和背景1. 灭菌的定义与背景介绍灭菌是一种用于杀死微生物的技术，包括细菌、真菌、原虫和病毒等。

它是一种对人类和动物健康至关重要的技术，在多个领域得到了广泛应用。

在医疗卫生领域，灭菌被广泛应用于医药器械、设备和药品的消毒和杀菌。

在生物制品和食品工业中，灭菌也被广泛应用于生产过程中的消毒和杀菌，以保证产品的质量和安全性。

2. 灭菌技术的应用范围灭菌技术广泛应用于医疗卫生、生物制品生产和食品工业等多个领域。

在医疗卫生领域，灭菌技术被应用于医药器械、设备和药品的消毒和杀菌。

在生物制品生产中，灭菌技术被用于消毒培养基、培养器、注射液等生物制品生产设备。

在食品工业中，灭菌技术被广泛应用于食品瓶盖、容器、食品加工设备等消毒和杀菌。

二、灭菌技术的分类和原理1. 热灭菌技术热灭菌技术是通过加热的方式杀死微生物。

主要分为干热灭菌和湿热灭菌两种方式。

干热灭菌是将杀菌物品置于干热箱中进行灭菌。

干热箱以一定的温度、时间和湿度对物品进行加热灭菌。

该技术主要应用于耐热的器械、容器等物品的消毒。

湿热灭菌是将杀菌物品放置于汽化水中进行加热灭菌，一般使用蒸汽灭菌器来完成。

湿热灭菌可以用于消毒一些湿润的物品，如培养皿、无菌用注射器等。

2. 化学灭菌技术化学灭菌技术使用化学物质来杀死微生物。

主要分为气体灭菌和低温气体灭菌和高温气体灭菌三种方式。

气体灭菌是通过将空气中加入一些杀菌气体（如乙烯气体）来杀死微生物。

该技术广泛应用于医疗卫生领域中医药器械、设备的消毒和杀菌。

低温气体灭菌是在一定的温度、湿度和压力下，使用低温气体（如氧化乙烯）来进行杀菌。

该技术广泛应用于医疗卫生领域中高灵敏度的器械和设备。

高温气体灭菌是使用高温气体来杀死微生物的一种方法。

该技术广泛应用于生物制品生产领域中灭菌高灵敏度和易受细菌污染的物品，例如无菌注射器、培养皿等。

3. 物理灭菌技术物理灭菌技术是使用物理手段来杀死微生物。

主要分为紫外线灭菌、微波辐射灭菌和离子辐射灭菌三种方式。