最新的AOAC凯氏氮测定公认标准方法(2001) (1)

凯氏定氮法测定氮含量凯氏定氮法，这个名字听起来像是某种古老的魔法，实际上，它就是一门科学技术，专门用来测定食品和土壤中氮的含量。

氮，这个我们常常听到的元素，虽说听起来平平无奇，但它在植物生长、土壤健康和食品营养中可是个大角色。

没有氮，植物就像没有盐的菜，淡得不行，连鸟都不愿意啄上一口。

想象一下，吃个生菜沙拉，结果发现没什么味道，那可真是糟糕透了。

说到这里，凯氏定氮法的魅力就展现出来了。

通过这个方法，我们可以准确测出样品中氮的含量，进而推算出蛋白质的含量。

听起来复杂，其实就是一套巧妙的化学程序。

得准备好样品，像是土壤、饲料、食品什么的。

准备的时候，要小心翼翼，像在做一件艺术品。

然后，把这些样品放进一个特殊的容器里，加点浓硫酸，嘿，这可不是随便的调料。

浓硫酸能把有机物质分解，释放出氮。

这个过程可得小心，别让硫酸飞溅到自己身上，安全第一嘛。

看到那冒着烟的混合物，心里一定会想，哇，这是什么黑魔法呀！反应的时候可是要耐心等待的，有时候一分钟就像过了一个世纪。

就得加些催化剂，这一步就像给这锅汤加点调料，让它更快地煮熟。

催化剂的作用就是加速反应，让氮元素更容易释放出来。

然后，就可以将这个混合物转移到蒸馏器里。

大家可能会问，蒸馏器是什么？简单说，就是一个可以把气体变成液体的设备。

这个时候，氮会以氨的形式出现，跟水结合，形成氨水。

这一步，可不能掉以轻心，操作得不对，可能会错过好多好东西。

得用酸来滴定，检测氨的量。

滴定听上去很高深，其实就是通过逐滴加酸，观察反应的变化。

这个过程就像是在调试一个乐器，得慢慢来，找到那个完美的音调。

等到颜色发生变化的那一刻，心中不禁一阵雀跃，这说明实验快完成了。

计算一下反应中氮的含量，咱就可以得出结果了。

整个过程下来，虽然有点繁琐，但看着最终的结果，心里满是成就感，仿佛自己就是个科学家。

说到氮的意义，可不止于此。

农民们通过测定土壤的氮含量，能知道该施多少肥料，避免了“随便撒撒”的尴尬。

凯氏氮的测定方法（1）、原理当样品与浓硫酸和硫酸钾的混合物（沸点315~370℃）在催化剂硫酸铜或硫酸汞存在时，一起加热，其中的有机氮和氨态氮转化为硫酸铵。

然后加入NaOH溶液使之成碱性，蒸镏使氨释放出来并以硼酸吸收，然后用硫酸滴定硼酸铵。

此法测得的总氮包括了有机氮和原来即以氨态存在的氮，但不包括硝酸盐或亚硝酸盐形式存在的氮，有机氮中的某些化合物如含氮的杂环化合物、吡啶、叠氮化合物、偶氮化合物、硝基和亚硝基化合物等也未包括在内。

以此法测定的总氮称之为凯氏（Kjeldagl）氮，即TKN。

测定同一水样中氨态氮含量后，总凯氏氮和氨态氮的差值即为有机氮。

（2）、药品与仪器①、浓硫酸，密度1.84g/cm3；②、50% NａOH溶液；③、10% CｕSO4溶液；④、4%硼酸溶液；⑤、无水硫酸钾或无水硫酸钠；⑥、0.020mol/L(1/2H2SO4标准溶液：吸取分析纯浓硫酸2.80ml，溶于1000ml蒸镏水中，得到约0.10mol/L(1/2H2SO4)溶液，用碳酸钠标定。

然后从中吸取200ml，用蒸镏水稀释至1000ml 备用。

⑦、混合指示剂：取0.05g甲基红和0.10g溴甲酚绿溶于100ml乙醇中；⑧、1%酚酞的乙醇溶液；⑨、4%Na2S。

9H2O溶液；⑩、蒸镏水：将普通蒸镏水酸化后加入KMnO4进行蒸镏，并重复蒸镏一次，以使其中不含有任何铵盐或氨。

本试验所用蒸镏水均应经过这样的处理；⑩、浮石：在蒸镏水中煮沸后干燥备用；⑩、600瓦可调温电炉两台；⑩、凯氏烧瓶及凯氏蒸镏装置（3）、操作步骤①消化：准确量取一定体积（以含氮0.5~10mg为宜）的废水水样置于凯氏烧瓶，加入10ml浓硫酸、5克硫酸钾或硫酸钠、1ml硫酸铜溶液，并放入几块沸石，将凯氏烧瓶以45度的角度固定于通风橱内加热煮沸，烧瓶内将产生白烟。

继续煮沸，烧瓶中颜色逐渐变黑，直至溶液完全透明无色或浅绿色。

再继续煮沸20分钟。

②蒸镏：将凯氏烧瓶冷却，以约150ml蒸镏水冲洗烧瓶壁，加入2.5ml硫化钠溶液和3~5滴酚酞，然后缓慢沿壁加入50mlNaOH溶液尽量使其不与烧瓶内液体混合。

凯氏定氮法标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述凯氏定氮法是一种常用的分析方法，用于确定物质中的氮含量。

该方法基于凯氏反应，即将有机或无机物中的氮转化为氨，再通过氨测定确定氮的含量。

凯氏定氮法简单、灵敏度高，并能够适用于各种类型的样品。

文章的概述部分旨在介绍凯氏定氮法的基本背景和重要性。

首先，我们将对凯氏定氮法的原理和相关的基本步骤进行阐述。

接着，我们将探讨凯氏定氮法在不同领域中的广泛应用，并特别关注其在环境科学、农业和食品安全等领域的应用情况。

凯氏定氮法具有一些独特的优点，如操作简便、成本低廉、准确性高等。

然而，同时我们也必须认识到凯氏定氮法存在一定的局限性，如对某些有机物的测定存在困难等。

针对这些问题，本文还将展望凯氏定氮法未来的发展方向，并探讨可能的改进和创新。

总而言之，本文将全面介绍凯氏定氮法的原理、步骤和应用，并对其优点、局限性进行评估。

通过深入了解凯氏定氮法，我们可以更好地理解其在实际应用中的潜力和局限性，并为其未来的研究和应用提供参考。

文章结构部分的内容可以如下所示：1.2 文章结构本文将按照以下结构来展开对凯氏定氮法的介绍和分析：第一部分，引言，将对凯氏定氮法进行概述，简要介绍该方法的背景和相关概念。

同时，本部分还将描述文章的目的，即通过对凯氏定氮法的详细介绍和分析，帮助读者更好地理解和应用该方法。

第二部分，正文，将重点介绍凯氏定氮法的原理、步骤和应用。

2.1小节将详细阐述凯氏定氮法的原理，包括氛围压降法和热导法两种常见的方法。

2.2小节将详细描述凯氏定氮法的步骤，包括样品的预处理、试剂的选择和实验操作等。

2.3小节将探讨凯氏定氮法在不同领域的应用，例如土壤分析、环境监测等，以及其在实际应用中的优点和限制。

第三部分，结论，将对凯氏定氮法进行总结并展望其未来的发展。

3.1小节将概述凯氏定氮法的优点，如准确性高、灵敏度好等。

3.2小节将强调凯氏定氮法的局限性，如样品处理过程中的误差、仪器设备的限制等。

凯氏定氮实验的原理与操作方法测定原理待测天然含氮有机物与浓硫酸共热时，被氧化成为二氧化碳和水，而氮转变成氨，氨再与硫酸结合生成硫酸铵。

为了加速有机物质的分解反应，在消化时常加入促进剂，硫酸铜可用作催化剂，硫酸钾或硫酸钠可提高消化液的沸点，氧化剂如过氧化氢也能加速反应。

操作方法样品处理测定某一固体样品中蛋白质的含量都是按100克物质的干重中所含蛋白质的克数来表示。

因此在定氮前应先将固体样品中的水分除去。

步骤：先将样品磨细，在已称重的称量瓶中称入一定量样品，然后置105度（100度无法除去非游离水）的烘箱内干燥2小时后称重，以后每1小时再称重，直至2次称重数不变为止。

若样品属于液体物质，可取一定体积经适当稀释后，取一定量进行消化。

消化根据样品量的多少选择适宜的凯氏烧瓶4个（此处以50毫升为例），其中2个为对照。

向烧瓶内加入准确称量的样品，注意要把样品加至烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。

另外2个作空白对照，好对样品进行校正。

在每个烧瓶中加入约300毫克硫酸钾-硫酸铜混合物（硫酸钾：五水硫酸铜=3：1、6：1或10：1均可），再用量筒加入3毫升浓硫酸。

将上述4个凯氏烧瓶放在通风良好处（最好在通风橱中进行）加热消化。

先用小火加热至沸腾。

此时会产生大量泡沫，应特别注意不能让黑色物质上升到烧瓶颈部，否则将严重影响分析结果。

当混合物停止冒泡，蒸汽与二氧化硫也均匀地放出时，将火焰调节到保持瓶内液体微微沸腾。

假若发现瓶颈上有黑色颗粒，应小心地将烧瓶倾斜振摇，用消化液将其洗下。

在消化过程中要时常转动烧瓶，使全部样品都浸在消化液中。

当消化液呈清澈淡蓝色时即告消化结束。

时间一般在5~6小时！若样品中含赖氨酸或组氨酸较多时，消化时间需要延长1~2倍。

因为这两种氨基酸中的氮在短时间内不易消化完全。

蒸馏采用改良式凯氏定氮仪。

1、洗涤蒸馏仪：用硼酸指示剂（取100毫升2%硼酸溶液，滴加混合指示剂约1毫升，摇匀后呈紫红色即可；混合指示剂：50毫升0.1%甲烯蓝乙醇+200毫升0.1%甲基红乙醇，存于棕色瓶中）检测是否清洗干净。

凯氏氮的测定方法凯氏氮测定方法是一种用来测定水样中有机氮含量的常用方法。

其原理是将有机氮转化为还原的亚硝酸盐，然后用钝化铜融熔法将亚硝酸盐转化为氨气，再用滴定法测定氨气量，从而确定有机氮的含量。

以下是凯氏氮测定方法的详细步骤：1.样品准备：首先，将需要测定的水样加入耐热石英消解坩埚中，并加入足够的高锰酸钾溶液，使水样中的有机氮完全氧化为无机氮。

2.消解：将消解坩埚置于加热器中，经过恒温消解，使样品中的有机氮完全转化为无机氮。

这个步骤可以用挥发性有机胺测定方法来验证消解的腐蚀程度。

3.过滤：将消解液冷却后，用少量去离子水冲洗坩埚，将溶液过滤到蒸馏瓶中，去除固体残渣。

4.具体步骤包括：-测定管：选择一个具有标尺的测量管，并将氮气接口插入管中，使其排放气体的位置在测量管的标尺范围之内。

-填装固体：将适量的铜粉(约6-8g)加入测定管中。

-测量管悬浴在水浴中，开始加热，直到观察到排放气体的位置在测量管标尺内。

这表示亚硝酸盐已经转化为氨气。

5.滴定：停止加热后，将气体通过细长的气体收集管引入滴定瓶中，并用稀硫酸滴定法测定氨气的含量。

6.计算：根据滴定结果，计算出水样中有机氮的含量。

若需确定氨氮含量，还需将有机氮转化为氨氮的计量系数考虑进去。

在进行凯氏氮测定方法时，需要控制一些因素以确保测量的准确性：-保持温度恒定，并适当选择加热速率。

-确保准确的滴定和测量设备，并注意操作的精确性。

-确保和标准溶液的比较和校正。

总结起来，凯氏氮测定方法是一种常用的测定水样中有机氮含量的方法。

通过将有机氮转化为亚硝酸盐，并进一步转化为氨气，然后用滴定法测定氨气的含量，可以确定水样中有机氮的含量。

该方法操作简单，灵敏度较高，广泛应用于环境监测和水质分析中。

凯氏定氮法凯氏定氮法是一种广泛用于土壤、水、肥料和动物组织中测定氮含量的方法。

该方法是由德国化学家凯斯于1883年首次提出的。

凯氏定氮法的原理是利用氮在含钾氢氧化物中的氧化反应。

将样品中的氮以铵离子（NH4 +）的形式存在，加入烧化的硫酸钾，硫酸钾中产生的氢氧根离子（OH-）将氨气与水反应生成氢氧化铵，并将硫酸钾还原成硫酸亚铁（Fe2+）。

然后向还原的溶液中滴加过量的高浓度二氧化钠，使溶液中的氢氧化铵被完全氧化成氮气（N2），同时钠离子（Na+）与氢氧根离子（OH-）中和生成水。

通过测定生成的氮气体积或气压，计算出原样中氮的含量。

凯氏定氮法的步骤如下：1. 取100g样品，加入含有15mL浓盐酸的锥形瓶中，用热板加热溶解。

2. 过滤后将滤液倒入蒸发皿中，置于水浴上加热，使溶液蒸干。

3. 将蒸干的样品装入蒸发皿，加入一定量的硫酸钾和硝酸，加热至燃烧，使硫酸钾氧化氨气和有机氮化合物，同时硝酸氧化硫酸钾。

4. 然后加入一定量的水，将溶液转移到滴定瓶中，用含NaOH的滴定液滴定溶液中的酸，使溶液呈中性。

5. 加入过量的NaOH，使氢氧化铵完全转化为氨气。

6. 用滴定管向滴定瓶中加入用水稀释过的二氧化钠，使溶液中氧化铵转化为氮气并与钠离子中和。

7. 通过测定生成的氮气体积或气压，计算出原样中氮的含量。

凯氏定氮法的优点是测定结果稳定可靠，精度高，操作简便快捷，适用于各种类型的样品。

但是，该方法存在着一些局限性，例如可能会受到含有硫酸盐或硝酸盐的干扰。

此外，由于该方法不能分离不同形式的氮，因此不能区分有机氮和无机氮。

总之，凯氏定氮法是一种简便快速、精度高的测定氮含量的方法，已广泛应用于农业、环境和生物学等领域。

凯氏定氮法标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：凯氏定氮法是一种广泛应用于化学分析中的定量测定方法之一，主要用于测定样品中的氮含量。

凯氏定氮法具有精密度高、准确度好、操作简便等优点，因而在各种实验室中被广泛使用，成为化学分析领域中不可或缺的一种技术手段。

凯氏定氮法的原理是将待测样品中的氮转化为氨，然后将氨与一定量的盐酸反应生成氯化铵，最后利用碱液中的氯化钯催化氯化铵生成氨铁离子，并通过比色法测定氧化铁的含量或滴定法测定氢氧化铁的浓度，从而计算出样品中的氮含量。

凯氏定氮法的操作步骤包括样品准备、试剂配制、试验操作、数据处理等环节。

首先是样品的提取和制备，将待测样品研磨成粉末状或将溶液过滤提取。

其次是配制各种试剂，包括氧化剂、还原剂、盐酸、铁试剂等。

然后是按照一定的比例将样品溶液与试剂混合反应，生成氨气和氯化铵。

最后通过比色法或滴定法测定生成的氨铁离子，计算样品中的氮含量。

在实际操作中，为了提高分析的准确性和可靠性，需要注意几个关键环节。

首先是样品的称量和提取要精确，避免因为操作不当而引入误差。

其次是试剂的配制要准确，遵循操作规程，不得随意更改配制浓度或比例。

最后是在试验操作过程中要注意操作流程，避免外界干扰因素的影响，保证实验的结果准确可靠。

凯氏定氮法广泛应用于生物、环境、食品等领域的氮含量测定中。

在生物领域，凯氏定氮法被用于分析肥料中的氮含量，以指导农业生产。

在环境领域，凯氏定氮法被用于测定水体、土壤中的氮含量，以监测环境污染物的变化。

在食品领域，凯氏定氮法被用于检测食品中的蛋白质含量，保证食品质量和安全。

凯氏定氮法是一种可靠的氮含量测定方法，具有精密度高、准确度好、操作简便等优点。

在化学分析中扮演着重要角色，为各个领域的研究提供了有效的技术手段。

希望通过本文的介绍，读者对凯氏定氮法有了更深入的了解，能够在实验操作中更加熟练和自信。

第二篇示例：凯氏定氮法是一种用于测定样品中氮含量的经典方法，也被称为氮元素定量法。

凯氏定氮仪法
凯氏定氮仪法是一种用于测定水体或土壤中总氮含量的分析方法。

该方法基于凯氏反应，即将水样中的无机氮在酸性条件下全部转化为氨氮，再利用氨氮与硼酸铜溶液中的草酸钯反应生成吡啶并测定其吸光度的原理。

具体操作步骤如下：
1. 取一定体积的水样或土壤样品，加入足量的强酸进行酸化处理，使有机氮转化为无机氮，然后加入还原剂还原有机氮为氨氮。

2. 加入含有草酸钯溶液的硼酸铜溶液，草酸钯与氨氮反应生成吡啶。

吡啶具有特定的吸光度。

3. 用紫外可见光分光光度计测定样品溶液的吸光度，并根据对应的标准曲线，计算出样品中的总氮含量。

凯氏定氮仪法具有操作简单、灵敏度高、准确性好等特点。

因此，广泛应用于水质监测、环境监测、农业科研等领域。

最新的AOAC 凯氏氮测定公认标准方法（2001）的要点和说明――AOAC 公认标准方法988.05、984.13、976.06和990.02由于凯氏定氮法经过100多年的发展，各种相关标准很多，且有些方法对其公认的参比性提出挑战，认为凯氏定氮法存在缺陷，不能测定所有的氮（如氧化态氮和杂环氮化合物）且精度不是最好等，作为参比标准方法有点混乱。

在2001年，AOAC 经过了验证，最后确定了以模块式加热消化、蒸汽蒸馏、硼酸吸收、盐酸滴定、指示剂指示颜色终点法的凯氏定氮方法学作为定氮技术参比试验条件，在欧美的14个权威实验室（FOSS 的凯氏定氮仪技术规范完全符合选定标准，因此成为唯一指定的可选试验仪器，FOSS 公司的实验室也是其中的一个）开展了凯氏定氮法的升级完善认证试验，形成新版（2001年）的AOAC 最新定氮标准，使当今的实验室有了一个包含全自动凯氏分析的现代分析技术的规范新标准，以获得符合GLP （好的实验室规范）执行标准和合格鉴定方法要求的数据质量。

**所有AOAC 公布的标准都经过协作验证试验，并且所有对应的验证试验报告都同时另刊发表，公开供需要者查询。

AOAC 公布的方法也因其严谨的科学性和公开且明确的科学态度而得到全世界的公认，获得最权威的参比方法的美誉。

新的凯氏定氮法标准要点：1.使用模块式整体加热方式消化样品。

推荐使用带强制排废功能的设备； 2.使用硫酸铜/硫酸钾混合催化剂和浓硫酸消化样品； 3.使用水蒸汽蒸馏碱化的消化液。

推荐使用FOSS 的SAfE 蒸馏功能； 4.使用硼酸吸收蒸馏出来的氨； 5.使用稀的强酸滴定。

推荐使用盐酸； 6.使用嗅甲酚绿/甲基红混合酸碱指示剂确定滴定终点； 7. 除已知确切的样品类型如小麦（5.70）外，所有（粗）蛋白质含量计算都使用6.25的转换系数；8. 指定FOSS 的KJELTEC®凯氏定氮仪系列及其样品磨可以作为测定仪器。

新的凯氏定氮法方法学简要说明：模块式整体加热方式的优点：加热模块储热，使消化时温度保持稳定，波动小；整体式的加热模块，使样品消化条件一致化，有利于减少误差；配合FOSS 的消化技术，可以最大限度的提高消化效率和减少化学试剂消耗； 推荐使用强制排废，更有利于稳定的消化和安全操作。