碱性蛋白酶对蛹虫草蛋白质水解的工艺技术优化研究

第41卷第5期2023年10月沈阳师范大学学报(自然科学版)J o u r n a l o f S h e n y a n g N o r m a lU n i v e r s i t y(N a t u r a l S c i e n c eE d i t i o n)V o l.41N o.5O c t.2023文章编号:16735862(2023)05041405蛹虫草改善糖尿病的分子机制王泽1,2,3,张美娜1,2,3,廖思晴1,2,3,崔明琦1,2,3(1.沈阳师范大学生命科学学院,沈阳110034;2.辽宁省功能性蛹虫草重点实验室,沈阳110034;3.沈阳市功能性蛹虫草产业技术研究院,沈阳110034)摘要:糖尿病是一种以高血糖为特征的慢性代谢性疾病,其致病因素复杂㊁发病率高㊁并发症多发,已成为我国重大的公共卫生问题㊂天然降糖活性物质的挖掘为突破糖尿病治疗瓶颈提供了新视角㊂蛹虫草是东南亚传统的食药两用真菌,富含虫草素㊁腺苷和多糖等天然降糖活性成分㊂针对糖尿病的发病机制及治疗现状,梳理蛹虫草在改善和治疗糖尿病方面的研究进展,研究显示,蛹虫草具有提高胰腺分泌功能㊁改善胰岛素抵抗㊁促进葡萄糖转运与代谢㊁修复糖尿病肾病等生物学功能,为糖尿病治疗提供了安全而有效的入手点㊂以后将更加系统地明确蛹虫草降糖作用的长效性㊁稳定性及网络调控机制,为其在糖尿病治疗领域的深入应用提供理论支撑㊂关键词:蛹虫草;糖尿病;胰岛素抵抗;分子机制中图分类号:R285.5文献标志码:Ad o i:10.3969/j.i s s n.16735862.2023.05.006M o l e c u l a r m e c h a n i s m o f C o r d y c e p s m i l i t a r i s t o i m p r o v ed i a be t e sWA N GZ e1,2,3,Z HA N GM e i n a1,2,3,L I A OS i q i n g1,2,3,C U IM i n g q i1,2,3(1.C o l l e g eo fL i f eS c i e n c e,S h e n y a n g N o r m a lU n i v e r s i t y,S h e n y a n g110034,C h i n a;2.K e y L a b o r a t o r y o fC o r d y c e p sm i l i t a r i s w i t h F u n c t i o n a l V a l u eo f L i a o n i n g P r o v i n c e,S h e n y a n g110034,C h i n a;3.I n d u s t r i a lT e c h n o l o g y R e s e a r c hA c a d e m y f o r C o r d y c e p sm i l i t a r i s w i t hF u n c t i o n a lV a l u e o f S h e n y a n g,S h e n y a n g110034,C h i n a)A b s t r a c t:D i a b e t e s m e l l i t u s(D M)w a s a c h r o n i c m e t a b o l i c d i s e a s e c h a r a c t e r i z e d b yh y p e r g l y c e m i a.I t h a db e c o m e am a j o r p u b l i c h e a l t h p r o b l e mi nC h i n a d u e t o i t s c o m p l e x p a t h o g e n i cf a c t o r s,h ighi n c i d e n c e a n d f r e q u e n t c o m p l i c a t i o n s.T h e e x p l o r a t i o no f n a t u r a l h y p o g l y c e m i c a c t i v es u b s t a n c e s p r o v i d e da n e w p e r s p e c t i v ef o rb r e a k i n g t h r o u g ht h eb o t t l e n e c k o f D M t r e a t m e n t.C o r d y c e p sm i l i t a r i s w a s a t r a d i t i o n a l e d i b l e a n dm e d i c i n a l f u n g u s i nS o u t h e a s tA s i a.I tw a s r i c h i nc o rd y ce p i n,a d e n o s i n e,p o l y s a c c h a r i d e a n d o t h e r n a t u r a l h y p o g l y c e m i c a c t i v e i n g r e d i e n t s.I n v i e wo ft h e p a t h o g e n e s i sa n dt r e a t m e n ts t a t u so fD M,t h er e s e a r c h p r o g r e s so f C o r d y c e p sm i l i t a r i s i ni m p r o v i n g a n d t r e a t i n g D M w a sr e v i e w e d.S t u d i e ss h o w e dt h a t C o r d y c e p sm i l i t a r i s c a ni m p r o v ep a n c r e a t i c s e c r e t i o n f u n c t i o n,i m p r o v e i n s u l i n r e s i s t a n c e,p r o m o t e g l u c o s e t r a n s p o r t a n dm e t a b o l i s m,r e p a i rd i a b e t i cn e p h r o p a t h y a n do t h e rb i o l o g i c a lf u n c t i o n s.I t p r o v i d e das a f ea n de f f e c t i v e s t a r t i n gp o i n t f o rD M t r e a t m e n t.I nt h e f u t u r e,i t i sn e c e s s a r y t oc l a r i f y t h e l o n g-t e r m,s t a b i l i t y a n dn e t w o r kr e g u l a t i o n m e c h a n i s m o ft h eh y p o g l y c e m i ce f f e c to f C o r d y c e p sm i l i t a r i s, w h i c hw i l l p r o v i d e t h e o r e t i c a l s u p p o r t f o r i t s i n-d e p t ha p p l i c a t i o n i n t h e f i e l do fD Mt r e a t m e n t.K e y w o r d s:C o r d y c e p sm i l i t a r i s;d i a b e t e sm e l l i t u s;i n s u l i n r e s i s t a n c e;m o l e c u l a rm e c h a n i s m收稿日期:20230403基金项目:辽宁省教育厅基本科研项目(L J K F Z20220266);辽宁省科技厅自然科学基金资助项目(2023-M S-251)㊂作者简介:王泽(1979 ),女,辽宁丹东人,沈阳师范大学副教授,博士㊂糖尿病(d i a b e t e sm e l l i t u s ,D M )是一类以高血糖为基本特征的慢性进行性疾病,发病原因主要包括遗传㊁环境㊁肥胖㊁年龄㊁妊娠次数㊁不良生活习惯等,目前糖尿病主要分为1型糖尿病㊁2型糖尿病㊁妊娠糖尿病和特殊类型糖尿病㊂多饮㊁多餐㊁多尿及体重逐渐减轻的 三多一少 是糖尿病高血糖阶段的典型症状㊂根据国际最新临床诊断标准,我国糖尿病估测患病率为11.6%,是亚洲糖尿病发病率最高的国家之一[12]㊂同时,由于大约2/3的糖尿病患者没有进行充分的血糖控制,慢性并发症已成为糖尿病患者的主要致死原因,给个人和社会造成极大负担,已成为中国重大的公共卫生问题[3]㊂蛹虫草(C o r d y c e psm i l i t a r i s )亦称北虫草,富含虫草素㊁腺苷㊁多糖等生物活性成分,不仅兼具抗肿瘤[4]㊁免疫调节[5]㊁抗炎[6]等多重药理作用,同时可以多角度地改善糖尿病及其导致的病理损伤㊂研究显示,蛹虫草可以通过激活胆碱能神经,促进机体血糖下降[7],通过抑制小肠绒毛上的α-葡萄糖苷酶活性,避免餐后血糖的迅速升高[8]㊂此外,蛹虫草活性肽[9]㊁多糖[10]和虫草素[11]均具有降血糖的功能㊂根据血清代谢组学研究,蛹虫草可减轻糖尿病小鼠的能量代谢异常㊁氨基酸代谢紊乱和肠道微生物失调[12]㊂因此,本文梳理了蛹虫草在改善糖尿病机制方面的研究进展,以期为糖尿病治疗领域的深入应用提供新的治疗策略㊂1 糖尿病的致病因素及发病机制1.1 1型糖尿病1型糖尿病患者占比约5%~10%[13]㊂机体在异常遗传和环境双重因素影响下,胰岛β细胞氧化应激反应及其介导的胰岛β细胞免疫损伤,是1型糖尿病的典型特征[14]㊂1型糖尿病的发作分为3个阶段:第1阶段是由于T 细胞异常应答导致的胰岛β细胞炎症反应,体内出现一种或多种自身抗体,如谷氨酸脱羧酶抗体㊁蛋白酪氨酸磷酸酶抗体㊁胰岛素自身抗体㊁胰岛细胞抗体等;第2阶段机体出现血糖异常或葡萄糖耐受不良;第3阶段出现 三多一少 的高血糖症状,有时甚至伴有糖尿病酮症酸中毒或糖尿病高渗综合征[15]㊂1.2 2型糖尿病2型糖尿病患者占比高达90%以上,已成为糖尿病医疗研发领域的关注重点㊂2型糖尿病发病早期与遗传有很大关联,当遗传和环境危险因素共同作用时,2型糖尿病的发病风险性会显著提高[16]㊂其中,我国成年人中因超重和肥胖引发的患病率高达70%,已成为2型糖尿病独立的危险因素;此外,吸烟㊁非酒精性脂肪肝[17]㊁特质愤怒和敌意㊁青少年身体质量指数(b o d y m a s s i n d e x ,B M I )的上升也会增加罹患2型糖尿病的风险㊂胰岛素抵抗和β细胞功能障碍是2型糖尿病的显著特点,白色脂肪组织功能障碍产生的异常代谢物使肝脏和肌肉细胞对胰岛素敏感性降低,导致β细胞代偿性分泌胰岛素㊂在营养过剩情况下,肝脏组织葡萄糖的生成主要来源于糖异生,白色脂肪组织脂解产生的游离脂肪酸被肝脏细胞摄取,通过游离脂肪酸β氧化生成乙酰辅酶A ,刺激糖异生和空腹葡萄糖生成㊂此外,2型糖尿病患者在线粒体功能不足的情况下,进入肝脏的游离脂肪酸和甘油合成甘油三酯,引发肝脏脂质堆积,并产生抑制胰岛素传导的脂毒性代谢物,导致肝脏胰岛素抵抗[18]㊂2型糖尿病患者的肌肉胰岛素抵抗主要表现为葡萄糖转运受损,进而导致肌糖原合成率降低[19]㊂营养过剩会增加肌肉内游离脂肪酸摄取和甘油三酯储存,抑制葡萄糖转运,使胰岛素在传递过程中相关底物磷酸化水平降低,产生胰岛素抵抗,导致糖原合成和葡萄糖氧化速率降低,同时氨基酸信号通路和炎症因子介导的信号通路被激活,合成的神经酰胺降低胰岛素信号通路相关底物磷酸化[20],进而导致肌肉葡萄糖转运和糖原合成降低,发生餐后高血糖㊂1.3 其他类型糖尿病妊娠型糖尿病发病主要由于遗传㊁胰岛素信号转导通路障碍㊁胎盘过度分泌激素㊁异常的脂肪细胞因子及炎症反应因子等因素诱发的胰岛素抵抗㊂脂肪分解可能对妊娠型糖尿病发病起重要作用,持续高水平的甘油三酯是妊娠型糖尿病的独立危险因素[21]㊂研究显示:与脂肪分解㊁氧化还原反应和胰岛β细胞增殖相关的基因同中国女性妊娠型糖尿病相关[22];其他特殊类型的糖尿病发病机制复杂,病因较多,在糖尿病中占比较低,主要由于胰岛β细胞存在遗传异常,或由于胰腺分泌疾病㊁药物㊁感染等因素导致糖代谢紊乱[23]㊂514 第5期 王 泽,等:蛹虫草改善糖尿病的分子机制614沈阳师范大学学报(自然科学版)第41卷2糖尿病的药物治疗现状饮食㊁运动㊁药物㊁定期监测及教育是糖尿病调治的必要措施[24]㊂迄今为止,治疗糖尿病的药物主要分为以胰岛素类和非胰岛素类为主的注射制剂,以及以双胍类㊁磺脲类促泌剂㊁糖苷酶抑制剂㊁胰岛素增敏剂㊁钠-葡萄糖协同转运蛋白-2抑制剂㊁胰高血糖素样肽-1受体激动剂和二肽基肽酶-4抑制剂为主的口服降糖药物㊂糖尿病药物的主要作用是将机体的血糖维持在正常水平,同时也存在某些副作用,比如胃肠道反应㊁消化道反应㊁泌尿生殖系统感染,以及长期服用甚至可能加重肝肾损伤,增加低血糖风险等[25]㊂近年来,天然降糖生物活性物质由于其安全性被研究人员广泛关注和开发㊂研究证实,非类黄酮多酚㊁类黄酮等可成为治疗2型糖尿病的有效替代物[26]㊂灵芝提取物可通过激活腺苷酸活化蛋白激酶(a d e n o s i n e5ᶄ-m o n o p h o s p h a t e-a c t i v a t e d p r o t e i nk i n a s e,AM P K)信号通路抑制肥胖引起的胰岛素抵抗[27];海带可溶性膳食纤维可抑制双糖酶的活性[28];茶多酚可以调控患者的糖代谢和脂代谢,具有抗炎和抗氧化的作用,能有效防治2型糖尿病[29]㊂传统药物和天然生物活性物质的联合使用可能会发挥更显著的效果,如白藜芦醇和二甲双胍的联用[30]㊁紫檀提取物和格列本脲的联用[31]㊂3蛹虫草改善糖尿病的分子机制3.1提高胰腺分泌功能胰腺作为机体关键的消化器官,主要功能为分泌激素和消化酶,调节机体血糖㊂胰岛素和胰高血糖素由胰腺分泌,是保证机体血糖处于平衡状态的2种关键激素㊂胰岛素抵抗导致的葡萄糖毒性会使胰腺受损,使胰岛β细胞的胰岛素分泌水平明显降低㊂因此,修复胰腺的结构和功能对糖尿病治疗将起到至关重要的作用㊂蛹虫草可以抑制糖尿病大鼠胰腺内超氧化物歧化酶(s u p e r o x i d ed i s m u t a s e,S O D)㊁谷胱甘肽过氧化物酶(g l u t a t h i o n e p e r o x i d a s e,G S H-P x)和过氧化氢酶(c a t a l a s e,C A T)活性的降低,提高胰腺抗氧化能力[32];可增加大鼠胰岛素瘤细胞I N S-1内三磷酸腺苷含量和C a2+浓度,对于被H2O2损伤的大鼠胰岛素瘤细胞I N S-1,可增强线粒体膜电位,提高抗氧化能力,通过上调胰腺十二指肠同源框-1㊁葡萄糖转运蛋白1和磷酸化蛋白激酶B(p h o s p h o r y l a t e d p r o t e i nk i n a s eB,p-A k t)基因及蛋白质表达增加胰岛素的合成与分泌,促进葡萄糖跨膜转运和葡萄糖代谢,增强受损的胰岛β细胞合成分泌胰岛素的能力[33]㊂3.2改善胰岛素抵抗磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(p h o s p h o i n o s i t i d e-3-k i n a s e/p r o t e i nk i n a s eB,P I3K/A k t)信号通路是控制胰岛素抵抗的重要途径㊂研究表明,蛹虫草水提物可以上调人肝癌细胞H e p G2p-P I3K,p-A k t和磷酸化糖原合成酶激酶-3β(p h o s p h o r y l a t e d g l y c o g e n s y n t h a s e k i n a s e-3β,p-G S K-3β)表达水平约3倍,促进P I3K/A k t信号通路传导,有效降低胰岛素抵抗,促进糖原合成[34]㊂海参虫草复合物喂养糖尿病大鼠5w,大鼠肌肉和脂肪组织中P I3K㊁A k tm R N A表达明显增加,胰岛素敏感性得到提高,明显降低了胰岛素抵抗[35]㊂红景天㊁蛹虫草和大黄的配伍可增加糖尿病小鼠肝脏p-A k t和p-G S K-3β的蛋白表达水平,促进糖尿病小鼠肝脏内胰岛素信号传导[36]㊂3.3促进葡萄糖转运与代谢葡萄糖转运蛋白4(g l u c o s e t r a n s p o r t e r4,G L U T4)是一种胰岛素敏感性葡萄糖转运蛋白,在接收胰岛素信号后被转运至质膜,刺激靶细胞摄取葡萄糖,从而降低血糖,而G L U T4含量随着胰岛素抵抗增强而降低[37]㊂研究表明,海参虫草复合物可以增加糖尿病大鼠骨骼肌和脂肪组织中G L U T4的表达,促进葡萄糖转运,降低糖尿病小鼠的空腹血糖水平[35]㊂AM P K是维持葡萄糖稳态所必需的㊂蛹虫草水提物可以促进人肝癌细胞H e p G2吸收葡萄糖,促进葡萄糖代谢,通过促进细胞内AM P K磷酸化,降低磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶活性,有效抑制糖异生,促进葡萄糖有氧氧化,达到降低血糖的目的[34]㊂3.4修复糖尿病肾病糖尿病代谢异常会导致肾小球硬化,肾脏长期过滤未被吸收的葡萄糖,引起肾小管损伤,导致终末期肾脏病㊂多项研究证实,蛹虫草对糖尿病肾病具有改善作用,其虫草素和腺苷纯化物连续灌胃6w可有效抑制糖尿病小鼠血清尿素氮㊁肌酐㊁尿酸含量,提高肾脏中的总超氧化物歧化酶的活性,降低丙二醛的活性,显著提高肾小球滤过率[38]㊂蛹虫草可抑制糖尿病导致的肝脏和肾脏肿大,下调小鼠血清尿素氮水平[9],链脲佐菌素联合高脂饲料诱导的糖尿病大鼠,经2g ㊃k g -1蛹虫草子实体水提物灌胃4w 后,肾脏中高表达的p -A k t 和p -G S K -3β即可恢复到正常水平,使肾脏的氧化损伤减轻[39]㊂蛹虫草子实体与菌丝体的组合可显著降低糖尿病肾病小鼠肾脏内晚期糖基化终末产物水平,减轻氧化应激,明显降低转化生长因子-β水平,抑制肾脏纤维化[40]㊂陈丹丹[41]发现,蛹虫草可抑制糖尿病肾病小鼠肾脏中J a n u s 激酶/信号转导和转录激活子(j a n u sk i n a s e /s i g n a l t r a n s d u c e ra n da c t i v a t o r so f t r a n s c r i p t i o n ,J A K /S T A T )信号通路上J A K 1,J A K 2,S T A T 1,3,5和6的表达,提高自噬(a u t o p h a g y ,A t g )相关蛋白L C 3,A T G 5,A T G 12和B e c l i n 1的表达,修复肾脏损伤㊂4 结 语糖尿病的危害在于血糖升高后引起机体产生各种急性或慢性并发症,因而控制机体内血糖水平保持稳定对于糖尿病患者至关重要㊂目前,已经有大量研究证实蛹虫草及其生物活性成分具有良好的降血糖作用,然而,对于蛹虫草改善糖尿病的网络机制尚未形成定论,其降糖作用的长效性与稳定性需要进一步探讨,对糖尿病的多种并发症是否具有多角度修复作用仍需深入验证㊂参考文献:[1]X U EL ,WA N G H Y ,H E Y Z ,e t a l .I n c i d e n c ea n dr i s kf a c t o r so fd i a b e t e s m e l l i t u s i nt h eC h i n e s e p o pu l a t i o n :A d y n a m i c c o h o r t s t u d y [J ].B M JO pe n ,2022,12(11):e 060730.[2]HU X ,M E N G L B ,W E IZ M ,e ta l .P r e v a l e n c ea n d p o t e n t i a l r i s kf a c t o r so f s e l f -r e p o r t e dd i a b e t e sa m o ng e l d e r l y p e o p l e i nChi n a :An a t i o n a l c r o s s -s e c t i o n a l s t u d y o f 224,142a d u l t s [J ].F r o n tP u b l i cH e a l t h 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4种方法制备蝉蛹蛋白质效果的比较张巳轩;徐芊芊;孙长婷;张倩;任晶晶;湛孝东;李朝品【摘要】目的:比较4种方法提取蝉蛹蛋白质效果的差异.方法:以蝉蛹为原料,通过控制变量法进行预实验,筛选出碱提取法、盐提取法、酶提取法以及水提取法这4种方法在不同测试因素下蛋白质收率最高的实验条件,并以该条件作为各个方法的最优条件,利用最优条件提取蝉蛹蛋白质并测定蛋白质含量.结果:蛋白质收率为碱提取法41.62％、盐提取法6.77％、酶提取法73.02％、水提取法69.35％.结论:酶提取法收率最高,其次是水提取法、碱提取法,盐提取法收率最低.【期刊名称】《皖南医学院学报》【年(卷),期】2018(037)006【总页数】4页(P598-601)【关键词】蝉蛹;蛋白质;提取;制备【作者】张巳轩;徐芊芊;孙长婷;张倩;任晶晶;湛孝东;李朝品【作者单位】皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院医学寄生虫学教研室,安徽芜湖241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院医学寄生虫学教研室,安徽芜湖 241002【正文语种】中文【中图分类】R282.74蝉蛹(Cicada pupa)又称知了猴、蝉猴、蝉龟，多生活在热带、亚热带和温带区域，属于节肢动物门昆虫纲半翅目蛹科，是蝉不完全变态发育(卵、幼虫、成虫)过程中的幼虫阶段。

蝉蛹是集医学价值与营养价值于一身的一种昆虫资源，蝉蛹含有具有药理活性的物质，可以提高人体免疫力，延缓机体衰老，蝉蛹蜕下的壳富含甲壳素、异黄质蝶呤、赤蝶呤、腺苷三磷酸酶，入药常用于治疗外感风热、咽喉肿痛等症[1]；蝉蛹含有丰富的蛋白质和多种氨基酸[2],是一种高营养价值的食品资源。

堡主竺竺堡兰望望塑堡鱼鳖查竺塑堕型鱼墨基望些丝堕些堑塞查！！查些盔兰参考文献［１】Ｗｅｌｌｓｔｅａｄ，Ｄ．ｔ１９９５．Ｇｒｏｗｔｈｌｉｍｉｔｅｄｔｏｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｃｏｕｎｔｒｉｅｓ．ＭｉｓｓｅｔＷｏｒｌｄＰｏｕｌｔｒｙ．１１（７）：２１·２３【２】刘宝全等，鸡蛋深３ｎＴ技术，农牧产品开发，１９９９（６）：３４．３５【３】ＫａｚｕｋｏＳｈｉｍａｄａａｎｄＳｅｔｓｕｒｏＭａｔｓｕｓｈｉｔａ．１９８０．ＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎＴｈｅｒｍｏｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓａｎｄＡｍｉｎｏＡｃｉｄＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ．Ｊ．Ａｇｉｃ．ＦｏｏｄＣｈｅｍ．２８“１：４１３－４ｔ７【４】郑桂芝，蛋白质水解与水解物之利用，食品工业，１９９７２９（５）：１０～１７【５】赵新怀等，酶促水解大豆蛋白的研究，食品与发酵工业，１９９４（５）：７一ｎ【６］６Ｄｅｅｓｌｉｅ，ｗＤ．，Ｃｈｅｒｙａｎ，Ｍ．１９９８Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｓｏｙｐｒｏｔｅｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｆｒｏｍａｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｕｌｔｒａｆｉｔｒａｔｉｏｎｒｅａｔｏｒ．ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍ．３６：２６－－３１［７】Ｃｈｏｂｅｒｔ，ＪＭ．ｅｔａｌ，１９８８．ＳｏｌｕｂｉｌｉｔｙａｎｄｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｃａｓｅｉｎｓａｎｄｗｈｅｙｐｒｏｔｅｉｎｓｍｏｄｉｆｉｅｄｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙｂｙｔｒｙｐｓｉｎＪ．Ａｇｒｉｃ．ＦｏｏｄＣｈｅｍ．３６：８８３·８９２［８】８Ｋｅｓｔｅｒ，Ｊ．Ｊ．，Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ．ｔ１９８４．Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｗｈｅｙｐｒｏｔｅｉｎｓｔｏｉｍｐｒｏｖｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙ．Ｊ．ＤａｉｒｙＳｃｉ．６７：２７５７－－２７７４【９】９汤亚杰，吴思方，酪蛋白磷酸肽的研究进展，食品科学，１９９８１９（５）：３—６【１０】Ｓｈｉｍｉｚｕ，Ｍ．，Ｌｅｅ，Ｓ．Ｗ１９８６．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆ２３ｒｅｓｉｄｕｅｓｐｕｒｉｆｉｅｄｆｒｏｍｔｈｅＩⅪｐｔｉｃｈｙｄｍｌｙｓａｔｅｏｆａ，ｌ—ｃａｓｅｉｎ：ｃｈａｎｇｅｓｉｎｔｈｅｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｄｕｒｉｎｇｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐｅｐｔｉｄｅ．Ｊ．ＦｏｏｄＳｃｉ．５１（５）：１２４８—１２５２【１１］刘杰，蒲萍萍，全蛋儿童食品新技术，食品研究与开发，１９９６１７（３）：３０－－３１【１２】黄毅，鸡蛋奶饲料的研制，食品工业，１９９６（２）：３７【１３】Ｌａｈｌ，ＷＪ．，Ｂｒａｕｎ，Ｓ．Ｄ．１９９４．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｆｏｒｆｏｏｄｕ∞．４６（１０、：６８—７１【１４］Ｍａｈｍｏｕｄ，Ｍ．Ｉ．１９９４．ＰｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｉｎｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌｐｒｏｄｕｃｔＳ，ＦｏｏｄＴｅｃｉ＇ｍ０１．４８（１０）：８９．９５ｆ１５】Ｃｈｏｂｅｎ，Ｊ．Ｍ．ｅｔａｌ，１９８８．ＳｏｌｕｂｉｌｉｔｙａｎｄｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｃａｓｅｉｎｓａｎｄｗｈｅｙｐｒｏｔｅｉｎｓｍｏｄｉｆｉｅｄｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙｂｙｔｒｙｐｓｉｎＪＡｇｒｉｃ．ＦｏｏｄＣｈｅｍ．３６：８８３—８９２【１６】Ｃｈｏｂｅｒｔ，ｊ．Ｍ．１９８８ＳｏｌｕｂｉｌｉｔｙａｎｄｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｃａｓｅｉｎｓｍｏｄｉｆｉｅｄｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙｂｙＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｕｓａｕｒｅｕｓＶ８ｐｒｏｔｅｉｎ．．Ｊ．Ａｇｒｉｃ．ＦｏｏｄＣｈｅｍ．３６：２２０．２２４［１７】Ｃｈｏｂｅｒｔ，Ｊ．Ｍ．１９８９．Ｓｌｕｂｉｌｉｔｙａｎｄｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｂｅｔａ·ｃａｓｅｉｎｍｏｄｉｆｉｅｄｅｎｚｙｍａｔｉｃａｌｌｙｂｙｔｒｙｐｓｉｎ．Ｊ．ＦｏｏｄＢｉｃｃｈｅｍ．１３：３３５—３５２【１８】Ｋｕｅｈｌｅｒ，ＺＡ．ａｎｄＳｆｉｎｅ，ＣＭ．１９７４ＥｆｆｅｃｔｏｆｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｎｓｏｍｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｗｈｅｙｐｒｏｔｅｉｎｊＦｏｏｄＳｃｉ．５０：１４０３－－１４０５【１９】Ｍｏｎｔｉ，Ｊ．Ｃ．ＡｎｄＪｏｓｔ．Ｒ，１９７８．ＥｍｚｙｍａｔｉｃＳｏｌｕｂｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｈｅａｔ－ｄｅｎａｔｕｒｅｄｃｈｅｅｓｅｗｈｅｙｐｒｏｔｅｉｎ．Ｊ．ＤａｉｒｙＳｃｉ．６１：１２３３－１２３７【２０】ＢＪ中ＲＧＥＧＥＬ＾ＮＤＳＤＡＬ１９８０Ｈｅａｔ—ｉｎｄｕｃｅｄＧｅｌｌｉｎｇｉｎｓｏｌｕｔｉｏｎｓｏｆＯｖａｌｂｕｍｉｎ．Ｊ．ｏｆＦｏｏｄＳｃｉ．４５：５７ｖ－ｚ５７３－４５－【２１】Ｋｕａｎ—ＪｕＬｉｕ；Ｓｈｅｎｇ－ＣｈｉｎＹａｎｇ１９９２ＳｔｕｄｉｅｓｏｎｈｅａｔｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｏｆｌｉｍｉｔｅｄｅｎｚｙｍｅｈｙｄｒｏｌｙｓｅｄＣｈｉｃｋｅｎｅｇｇｗｈｉｔｅ，ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ３０（４）：５８２—５９２【２２】Ｈｉｄａｌｇｏ，Ｊ．ａｎｄＧｒａｐｅｒ，Ｅ．１９９７Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙａｎｄｈｅａｔｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｗｈｅｙｐｒｏｔｅｉｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓ．Ｊ．ＤａｒｉｒｙＳｃｉ：６０：１５１５—１５１８［２３】Ｊｏｏｔ，Ｒ．ａｎｄＮｏｎｔｉ，Ｊ．Ｃ．１９７７．Ｐａｒｔｉａｌｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｆｗｈｅｙｐｒｏｔｅｉｎｂｙｔｒｙｐｓｉｎ．Ｊ．ＤａｉｒｙＳｃｉ．６０：１３８７－１３９３【２４】Ｄｕｒｇｅｏｎ，Ｓ．Ｌ．ｅｔａ１．１９９２．Ｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｗｈｅｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒａｃｔｉｏｎａｓａｆｕｎｃｔｉｏｎｏｆａｎｄｉｏｎｉｃｓｔｒｅｎｇｔｈ．Ｊ．ＦｏｏｄＳｃｉ．５７（３）：６０１－６０４［２５】ＭｉｔｃｈｅｌｌＪ．ＲａｎｄＳ．Ｅ．Ｈｉｌｌ１９９５．Ｔｈｅｕｓｅａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｏｆｃｈｅｍｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎｓｔｏｅｎｈａｎｃｅｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙｏｆｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓｉｎｈｅａｔ－ｐｒｏｃｅｓｓｅｄｆｏｏｄｓ．ＴｒｅｎｄｓｉｎＦｏｏｄｓｃｉ．＆＂ｒｅｃｈ．６（５）：２１９－２２４【２６】ＭａｒｙＫ．Ｓｃｈｍｉｄｌ１９９３．Ｆｏｏｄｐｒｏｄｕｃｔｓｆｏｒｍｅｄｉｃａｌｐｕｒｐｏｓｅｓ．ＴｒｅｎｄｓｉｎＦｏｏｄｓｃｉ．＆Ｔｅｃｈ４（６）：１６４－１６８ｆ２７】Ｔｕｒｇｅｏｎ，Ｓ．Ｌ，ｅｔａｌ，１９９２，ＩｎｔｅｒｒａｃｉａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｔｒｙｐｔｉｃｐｅｐｔｉｄｅｓｏｆＬａｃｔｏｇｌｏｂｕｌｉｎ．Ｊ．Ａｇｒｉｃ．ＦｏｏｄＣｈｅｍ１０：６６９·６７５【２８】Ｂｅｈｎｋｅ，Ｕ．ｅｔａ１．１９８６．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｅｇｇｗｈｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｓｏｍｅｏｆｉｔｓｉｔｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｎａｈｒｕｎｇ３０（３／４）：３１９－一３２６【２９］Ｍａｈｎｏｕｄ，Ｍ．Ｊ．ｅｔａ１．１９９２．Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｆｃａｓｅｉｎ：ｅｆｆｅｃｔｏｆｄｅｇｒｅｅｏｆｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｏｎａａｔｉｇｅｎｉｃｉｔｙａｎｄｐｈｙｓｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．ＪＦｏｏｄＳｃｉ．５７（５）：１２２３，１２２９［３０１Ｇｒｉｍｂｌｅ，Ｇ．Ｋ．１９９４．Ｔｈｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｐｅｐｔｉｄｅｓｉｎｃｌｉｎｉｃａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎ．Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｕｔｒ，１４：４１９－４４７【３１】Ｇｒｉｍｂｌｅ，Ｒ．Ｆ．１９９４．Ｃｙｓｔｒｉｎｅａｎｄｇｌｙｃｉｎｅｓｕｐｐｌｅ—ｍｅｎｔａｔｉｏｎｍｏｄｕｌａｔｅｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｔｕｎｌｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒａｌｐｈａｉｎｒａｔｓｆｅｄａｌｏｗｐｒｏｔｅｉｎｄｉｅｔ．ＪＮｕｔｒ．１２２：２０６６－２０７３【３２］Ｌｅｍｏｎ，Ｐ．ｗＲ．１９８７．Ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｅｘｅｒｃｉｓｅ：Ｕｐｄｅｔｅ１９８７．ＭｅｄＳｃｉ．ＳｐｏｒｔｓＥｘｅｒｃ．１９：１７９．１９０【３３］Ｌｅｍｏｎ，ＥｗＲ·ｅｔａｌ１９８４．Ｅｆｆｅｃｔｏｆｉｎｔｅｎｓｉｔｙｏｎｐｒｏｔｅｉｎｕｔｉｌｉｚｉｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｐｒｏｌｏｎｇｅｄｅｘｅｒｃｉｓｅ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．ＳｐｏｒｔｓＥｘｅｒｃ１６：１５１【３４】Ｅｖｅｎｓ，ｗＪ．１９８３Ｐｒｏｔｅｉｎｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｅｎｄｕｒａｔｉｏｎａｎｄｅｎｄｕｒａｔｉｏｎｅｘｅｒｃｉｓｅ．ＰｈｙｓｉｃｉａｎＳｐｏｒｔｓＭｅｄ．１１：６３—７１ｆ３５】Ｆｒｋｊａｅｒ，Ｓ．１９９４．Ｕｓｅｏｆｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｆｏｒｐｒｏｔｅｉｎｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎ．ＦｏｏｄＴｅｃｈｎ０１．４８（１０）：８６’８８【３６】ＭａｒｙＫ．Ｓｃｈｍｉｄｌ１９９３．Ｆｏｏｄｐｒｏｄｕｃｔｓｆｏｒｍｅｄｉｃａｌｐｕｒｐｏｓｅｓ．ＴｒｅｎｄｓｉｎＦｏｏｄｓｃｉ．＆Ｔｅｃｈ．４（６）：１６４－１６８６３７］Ｓｔｅｈｌｅ，Ｐ．ｅｔａ１．１９８２．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｏｆｔｙｒｏｓｉｎｅａｎｄｇｌｕｔａｍｉｎｅｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｐｅｐｔｉｄａｓ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４：２８０－２８６【３８］Ｇｒｉｍｂｌｅ，ｇ·ｋ·ｅｔａｌ·１９８７Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｐｅｐｔｉｄｅｃｈａｉｎ－ｌｅｎｇｔｈｏｎａｂｓｏｒｐｔｉｏｎｏｆｅｇｇ－ｐｒｏｔｅｉｎｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓｉｎｔｈｅｎｏｒｍａｌｈｕｍａｎｊｅｊｕｎｕｍＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ９２：１２６．１４２【３９】Ｓｈａｒｐ，ｗＲ．，Ｅｖａｎｓ，Ｄ．Ａ．ａｎｄＡｎｎｉｒａｔｏ，ＰｍＶ．１９８４．ＦｏｏｄＴｅｃｈｎ０１．３８位）：１１２－－１１９—４６—硕士学位论文鸡蛋清蛋白酶水解物的制各及其功能性质的研究东北农业大学【４０】ＣｏｎｏｒＲｅｉｌｌｙ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｆｏｏｄｓ－－ａｃｈａｌｌｅｎｇｅｆｏｒｃｏｎｓｕｍｅｎ１９９４．ＴｒｅｎｓｉｎＦｏｏｄＳｃｉ．＆Ｔｅｃｈｎ０１．５（４）：１２１——１２３ｆ４１】Ｋｒｉｔｃｈｅｖｓｋｙ，Ｄ．ｅｔａｌｌ９８７．ＤｉｅｔａｒｙｐｒｏｔｅｉｎａｎｄａｔｈｒｏｓｅｌｅｒｏｓｉｓＪＡＯＣＳ．６４（８）：１１６７一“７ｌ【４２】Ｂｅｙｎｅｎ，Ａ．Ｃ．，Ｗｅｓｔ，Ｃ．Ｅ．１９８７．ＣｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎＳｗｉｎｅｆｅｄｄｉｅｔｓｃｏｎｔａｉｎｉｎｇｅｉｔｈｅｒｃａｓｅｉｎｏｒｓｏｙｂｅａｎｐｒｏｔｅｉｎＪＡＯＣＳ．６４（８）：１１７８—１１８２【４３】ＭｅｅＬＵ．Ｅ．１９８７．Ｓｐｅｃｉｅｓ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓｏｆＳｕｒｕｍＣｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌｔｏｄｉｅｔａｒｙｐｒｏｔｅｉｎｓ．ＪＡＯＣＳ．６４（８）：１１７２—１１７７【４４】陈历俊，东北农业大学博士论文，１９９８【４５】于国平，马力编，食品生物化学实验指导，东北农业大学实验教材，１９９６［４６１马成林等编著，动物性食品理化检验学，中国人民解放军兽医大学出版社，１９８２【４７］ＪＩＮＱＵＡＮＸＵ，ＭＡＫＯＴＯＳＨＩＭＯＹＡＭＡＤＡ，ａｎｄＫＥＮＪＩＷＡＴＡＮＡＢＥ．１９９７．ＧｅｌａｔｉｏｎｏｆｅｇｇｗｈｉｔｅｐｒｏｔｅｉｎｓａｓａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｃｏｍｂｉｎｅｄＨｅａｔｉｎｇａｎｄＦｒｅｅｚｉｎｇ．Ｊ．ｏｆＦｏｏｄＳｃｉ．６２（１）：９６３－－－－９６６．【４８】ＫＥＮＪＩＷ６Ｔ６ＮＡ，ｅｔａｌ１９８５．Ｈｅａｔ－ｉｎｄｕｃｅｄＡｇｇｒｅｇａｔｉｏｎａｎｄＰｅｎａｔｕｒａｔｉｏｎｏｆＥｇｇＷｈｉｔｅＰｒｏｔｅｉｎｓｉｎＡｃｉｄＭｅｄｉａ．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ．５０：５０７—５１０【４９】ＡＯＡＣ．ＯｆｆｉｃａｌＭｅｔｈｏｄｓｏｆｔｈｅＡｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＯｆｆｉｃｉａｌＡｎａｌｙｔｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｓＳｉｄｎｅｙＷｉｌｌｉａｍｓ（ｅｄ）．１４ｔｈｅｄ，ＵＳＡ１９８４：８７７ｆ５０ｊ汤巫杰，吴思方，酪蛋向磷酸肽的研究进展，１９９８，１９ｆ５）：３－６【５１】李书国等，中空纤维超滤器生产人豆分离蛋白的工艺研究，中国粮油学报，１９９４１４（４）：２１—２４【５２】王学松编著，膜分离技术及应用，科学出版杜，１９９４【５３】刘茉娥，陈欢林，新型分离技术基础，杭州：浙江大学出版社，１９９３【５４】徐仲儒编著，农业试验最优回归设计，黑龙江科技出版社，１９９８【５５】郭铁城等，旋转设计试验专用程序包，东北农学院学报，１９８６，４：４１３［５６】ＤｉｎａｋａｒＰａｎｙａｍａｎｄＡｒｕｍＫｉｌａｒａ，ｌ９９６．Ｅｎｈａｎｃｉｎｇｔｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｒｙｏｆｆｏｏｄｐｒｏｔｅｉｎｓｂｙｅｎｚｙｍａｔｉｃｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ．ＴｒｅｎｄｓｉｎＦｏｏｄＳｃｉ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ４（７）：１４２－１４８【５７】ＮａｏｆｕｍｉＫＩＴＡＢＡＴＡＫＥ．１９８５Ｈｅａｔ—ＴｒｅａｔｅｄＯｖａｌｂｕｍｉｎａｎｄＥｇｇＷｈｉｔｅ．Ａｇｒｉｃ．Ｂｉ０１．Ｃｈｅｍ４９（８）：２４５７—２４５８【５８】Ｆｒｅｅｎｅｙ，Ｒ．Ｅ１９８０．ＣｈｅｍｉｃａｌＤｅｔｅｒｉｏｒａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎｓ．ＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ．１：４７［５９】许永红，蛋白质酶法水解物苦昧的控制，食品工业科技，１９９７（３）：ｌ一４－４７－。

酶解法制取蚕蛹多肽王玉海;孙卫东;秦志喧;邱英华;陆海勤;李凯【期刊名称】《大众科技》【年(卷),期】2012(014)005【摘要】以蚕蛹为原料,经脱脂后,采用碱法提取蚕蛹蛋白,以双酶水解的方法制取可溶性蚕蛹多肽,最佳制取条件为固液比1：10,水解温度45℃,酶用量3%（木瓜蛋白酶：胰蛋白酶=1：1）,水解时间6h,在此条件下制备的蚕蛹多肽得率为62.5%。

使用胃蛋白酶和胰蛋白酶分别水解时,多肽得率为58.7%。

%The peptides were prepared from silkworm pupa protein by hydrolysis with compound enzyme.The favorable method of hydrolysis is：enzyme（papain：trypsin=1：1）2%,Temp.45℃,hydrolysis time 6 hours,and the ratio of solid to liquid 1：10.The yield of pupa peptide can reach 62.5%.When the pupa protein is hydrolyzed by pepsin and tripsin separately,the yield of pupa peptide is 58.7%.【总页数】2页(P97-98)【作者】王玉海;孙卫东;秦志喧;邱英华;陆海勤;李凯【作者单位】南宁创新科技医药技术有限公司,广西南宁530007;广西大学轻工与食品工程学院,广西南宁530004;南宁创新科技医药技术有限公司,广西南宁530007;南宁创新科技医药技术有限公司,广西南宁530007;广西大学轻工与食品工程学院,广西南宁530004;广西大学轻工与食品工程学院,广西南宁530004【正文语种】中文【中图分类】TS201.1【相关文献】1.酶解法提取柞蚕蛹油的工艺研究 [J], 刘颖;刘爱莲;宫淑兰;邹瑞;高岩2.酶解法制茶渣多肽及其抗氧化性能研究 [J], 黄晓辉;王颖;林辉3.复合酶解法制备山楂绞股蓝乳清多肽复合饮料的工艺优化 [J], 蒋莹;沈荷玉;周可强;李诚;姜荣杰;唐婉婷;李辰凤4.半固态酶解法制备全谷物多肽及其抗氧化、ACE抑制活性的研究 [J], 曹梦笛;周浩纯;李赫;张健;章期博;刘新旗;刘宇5.两步酶解法制备小龙虾副产物多肽及其抗氧化性研究 [J], 徐文思;杨祺福;张梦媛;李柏花;莫亚琼;邵立业;杨品红;韩庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

虫草学名蛹虫草『ＣｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉＬｉｔａｒｉｓ （Ｌ．Ｆｒ．）ｌｉｎｋ】，又称北冬虫夏草，是集多种 药物成分于一身的虫生真菌。小分子肽 是一类来源于细菌、真菌、动植物等具 有重要生物活性的寡肽，是沟通细胞间 和器官间信息的一类重要的化学信使， 通过内分泌和神经分泌等方式行使微妙 的信息传递功能，是机体生长、发育、 繁殖和代谢的重要调节剂。它能在细胞 膜的渗透作用下以原型直接进入细胞内 部，无需再次消化，因此其吸收转化高 效彻底。同时它还具有抗氧化，抗衰防 皱等作用，将其应用到面膜上可以更有 效的被皮肤吸收利用，效果更为显著。 本课题以我国东北独特的功能性虫草资 源为材料，测定了在酶工程和现代生物 分离技术共同作用下获得多肽活性物质 的检测比较，旨在筛选出更适用于面膜 的虫草。 一、材料与方法 （一）实验材料 还原型谷胱甘肽、４２６ＬＬＬ蛹、开原 米基、开原功能草和圣春北冬虫夏草粉 四种虫草原材料。还原型谷胱甘肽代号
ＧＳＨ
铁氰化钾、０．１％三氯化铁、１０％三氯乙 酸、ＦｏＬｉｎ一酚试剂甲以及ＦｏＬｉｎ一酚试剂 ２．仪器 ＺＰＰ—Ａ２０８０型电热恒温箱（上海智 城分析器制造有限公司）、ＭＹ一５０型粉 碎机（广州市鹰扬医疗器械有限公司）、 ７２２Ｓ型分光光度计（上海光学仪器厂）、 ＺＦ一３０Ｌ型实验室真空抽滤机（上海科升 仪器有限公司）、ＳＣ一３６１０型低速离心 机（科大创新股份公司产品）和ＡＢＢ５一Ｓ 型电子分析天平（上海舜宇恒平科学仪 器有限公司）。 （三）试验方法 由于现有科学还原型谷胱甘肽成分 及性质数据最具科学性和全面性，本研 究以其作为对照，经处理获得数据绘制 标准曲线研究四种待测虫草。经实验发 现实验材料提取出小分子肽成分有多肽、 多糖，部分材料小分子肽具有还原能力 或羟自由基清除能力。将五种被处理药 品按待测指标分成４组，小分子肽多肽 含量测定组；小分子肽多糖含量测定组； 小分子肽多肽还原力测定组；小分子肽

第4期
周翔宇等:复合酶法提取蛹虫草类胡萝卜素工艺优化及其抗氧化能力测定
Байду номын сангаас
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is 4.096 U/mg. In other words, the antioxidant activities of cordyceps militaris carotenoids obtained by the two extraction methods were not significantly different in vitro.
样品制备的方法参照邵颖等[21] 的方法并进行 改进。新鲜蛹虫草子实体于 60 ℃ 下烘干至恒重， 粉碎过 60 目筛，低温干燥避光条件下密封保存备用。 1.3.2 提取溶剂的确定
为使得样品定量测定时溶剂体系与标准品保 持一致，以便用酶标仪直接测定样品提取液吸光度 时直接定量。本实验以溶解度为表征，参照 Dong 等[9] 的方法用乙醇溶液对色素粗提物进行溶 解度试验，结果显示其在体积分数为 60% 以下的 乙醇溶液中具有良好的溶解性。再选择丙酮、乙 醇、甲醇、二甲亚砜（DMSO）、乙腈、60% 乙醇溶 液和丙酮与 60% 体积分数的乙醇混合溶液（2∶1） 作为研究对象，将蛹虫草子实体色素粗提物分别溶 解于上述 7 种溶剂中，最终通过颜色辨别判断其溶 解性从而确定最佳提取溶剂。结果显示丙酮和 60% 体积分数的乙醇混合溶液（2∶1）能够溶解标 准品 β-类胡萝卜素，同时蛹虫草子实体当中的类胡 萝卜素在其中能够很好地提取出来，因而最终确定 本试验开展的提取溶剂为丙酮和 60% 体积分数的 乙醇混合溶液，两者的比例为 2∶1，在此条件下提 取得率最高，为2 256 μg/g。 1.3.3 复合酶的选择以及添加比例的确定
法的原理主要是利用生物酶破坏细胞壁结构从而 将色素较温和且带有选择性地释放出来[14]，生物酶 的专一性保证其不会对底物外物质造成破坏，这一 特性使酶辅助提取法更适合于提取稳定性较差且 含量较低的化学成分[15 − 16]。2019 年国内学者汪建 红[17] 利用木瓜蛋白酶辅助提取荸荠当中的色素， 高效的获得荸荠色素且其稳定性较高。除此之外， 采用酶辅助提取法相对于其他常规溶剂提取法拥 有更多的优点，提取过程对环境十分友好，提取效 率更高，对提取设备及环境的要求更低且能耗低， 开展性较强适应于工业化生产[18]。采用酶辅助提 取法提取色素有许多优势，但单一的酶可能不能满 足要求，所以有的研究者尝试用两种以上的酶采用 复 合 酶 提 取 法 提 取 色 素 。 2019 年 国 外 学 者 Gizem 等[19] 采用纤维素酶和果胶酶共同作用提取 土豆废弃基质中的番茄红素并对其提取工艺进行 了优化。

碱性蛋白酶提取花生水解蛋白摘要：利用碱性蛋白酶从冷榨花生饼中提取花生水解蛋白。

研究了温度、pH 值、加酶量、液固比、水解时间对蛋白质提取率的影响,确定最佳工艺参数为温度55 ℃、pH9.0、加酶量是0.8%、水解时间3 h、液固比7∶1, 在此条件下蛋白质提取率为81.32%。

1、材料与方法（1）实验材料冷榨花生饼(蛋白质48.09%, 脂肪8.74%, 粗纤维 4.71%); 碱性蛋白酶(2.4 AU/g)；主要仪器设备：SC- A型精密恒温水槽, 868 型酸度计, 78- 1 型磁力搅拌器, UV- 2100 紫外可见光分光光度计, 酶反应器。

（2）实验方法花生水解蛋白的提取：一定质量花生饼(粉碎过80 目筛)与蒸馏水按一定比例加入酶反应器中, 恒温搅拌一定时间, 调节pH 值至适宜, 加入一定量酶进行水解, 并维持反应液pH恒定(变化范围±0.01)。

反应结束后, 沸水浴中灭酶5 min, 3000 r/min 离心20min, 收集上清液, 残渣用2 倍体积水洗涤, 合并两次离心所得上清液, 计量体积, Folin- 酚法，测定其中蛋白含量。

蛋白质提取率的计算：花生蛋白提取率(%)=(提取的上清液蛋白质质量/原料中蛋白质质量)×100%2、结果与分析（1）温度对蛋白质提取率的影响在加酶量0.4%,pH8.0, 液固比7∶1, 水解时间 3 h 时, 考察了温度对蛋白提取率的影响, 结果如图 1 所示。

由图1 可知, 随着温度升高, 蛋白质提取率逐渐提高, 当温度达到55 ℃, 蛋白质提取率最高。

当温度>55 ℃时, 随温度升高蛋白质提取率反而降低, 其原因可能是超过酶最适温度, 酶分子空间结构发生改变, 导致酶活性减弱或丧失。

（2）pH 值对蛋白质提取率的影响在温度55 ℃,加酶量0.4%, 液固比7∶1, 时间3 h 时, 考察了pH值对蛋白提取率的影响, 结果如图 2 所示。

凯２
固液 比 １ １ ，水解温度 ４ ￣ 酶 用量 ３ （ ：０ ５ Ｃ， ％ 木瓜 蛋白酶 ： 胰蛋 白酶＝ ： ）水解 时间 ６ ， 此条件 下制备 的蚕蛹 多肽得率为 ６ ． ％ １１ ， ｈ在 ２５。 使 用 胃蛋 白酶和胰蛋 白酶分别水解时 ，多肽得 率为 ５ ．％ ８７ 。 【 关键词 】蚕蛹 多肽 ；蚕蛹蛋 白；酶水解
３ １ ３
３ ３
１ ２ ２
１ ７４ １ ． ４６
１ ８８ １ ４０ ｌ ６３
４． ５２ ５． ２ ４
４． ２ Ｉ ４ ４ ９ ４． ３３
标 ，通过正交试验优 化蚕蛹蛋 白水解 的工艺条件 。正交试验
因 素 水 平 见 表 １ 。
ｓ ｌ ｄｔ ｉｕ ｄ １ １．Ｔ ｅ ｙ ｅ ｄｏ ｕ ａｐ ｐ ｉ ｅｃ ｎｒ ａ ｈ６ ． ％ ｏ ｉ ｏ１ ｑ ｉ ：０ ｈ ｉ ｌ ｆ ｐ ｐ ｅ ｔ ｄ ａ ｅ ｃ ２ ５ ．Ｗ ｅ ｈ ｕ ａ ｐ ｏ ｅ ｎ ｉ ｙ ｒ ｌ ｚ ｄ ｂ ｅ ｓ ｎ ａ ｄ ｈ ｎｔ ｅｐ ｐ ｒ ｔ ｉ ｓｈ ｄ ｏ ｙ ｅ ｙｐ ｐ ｉ ｎ ｔ ｉ ｓｎ ｓ ｐ ｒ ｔ ｌ ｒ ｐ ｉ ｅ ａ ａ ｅ ｙ． ｔ ｅ ｉ ｌ ｆ ｐ ｐ ｅ ｔ ｄ ｉ ５ ． ％ ｈ ｙ ｅ ｄ ｏ ｕ ａ ｐ ｐ ｉ ｅ Ｓ ８ ７ ． Ｋ ｙ ｗ ｒ ｓ： Ｓ ｌ ｗ ｒ ｕ ａ ｐ ｐ ｉ ｅ ： ｅ ｚ ｍ ｙ ｒ ｌ ｓ Ｓ Ｓ ｌ ｗ ｒ ｕ ａ ｐ ｏ ｅ ｎ ｅ ｏ ｄ ｉｋ ｏ ｍ ｐ ｐ ｅ ｔ ｄ ｓ ｎ ｙ ｅ ｈ ｄ ｏ ｙ ｉ ： ｉｋ ｏ ｍ ｐ ｐ ｒ ｔ ｉ
表 ２ 蚕 蛹 蛋 白提 取 正 交试 验 结 果 Ｌ ９３
Ｔ ｂ ２ Ｒ ｓ ｌ ｓ ｏ ｈ ｒ ｈ ｇ ｎ ｌ ｅ ｐ ｒｉ ｅ ｔ ｉ ｉ ｋ ｏ ｍ ｐ ｐ ａ ． ｅ ｕ ｔ ｆ ｔ ｅｏ ｔ ｏ ｏ ａ ｘ ｅ ｍ ｎ ｎ ｓ ｌ ｗ ｒ ｕ ａ

生物技术进展 2023 年 第 13 卷 第 6 期 934 ~ 939Current Biotechnology ISSN 2095‑2341研究论文ArticlespH 渐变条件下多酶分步连续酶解工艺制备鲟鱼硫酸软骨素与胶原蛋白肽王珍瑜1 ， 陆文超1 ， 钟康荣2 ， 关永健2 ， 汪真2 ， 陈超1 *1.清华大学化学系，北京 100084；2.贵州千鲟生物科技有限公司，贵州 黔东南苗族侗族自治州 556300摘要：pH 渐变条件下采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶分步连续酶解鲟鱼软骨，同时制备鲟鱼硫酸软骨素和胶原蛋白肽。

分别通过温度、酶解时间、酶用量3个单因素实验，研究其对连续酶解效果的影响。

综合分析得出最佳条件：碱性蛋白酶酶解温度为45 ℃，酶解时间为2 h ，酶用量为100 U ·g -1底物；木瓜蛋白酶的酶解温度为50 ℃，酶解时间为2 h ，酶用量为50 U ·g -1底物；菠萝蛋白酶的酶解温度为50 ℃，酶解时间为2 h ，酶用量为30 U ·g -1底物。

该工艺条件下制备的鲟鱼硫酸软骨素提取率为85%，纯度93%，胶原蛋白肽的提取率为82%，纯度为90%。

研究建立的pH 渐变条件下多酶分步连续酶解工艺，产率与纯度较国内现有生产方法均有提高，且碱液使用量减少，避免了有机溶剂的引入，从而可以降低生产成本，减轻环境污染负担。

关键词：酶解工艺；硫酸软骨素；胶原蛋白肽DOI ：10.19586/j.2095­2341.2023.0119中图分类号：Q556， TQ925+.2 文献标志码：APreparation of Chondroitin Sulfate and Collagen Peptide of Sturgeon by Multi -enzyme Step -by -step Enzymatic Hydrolysis Under the Condition of pH GradientWANG Zhenyu 1 ， LU Wenchao 1 ， ZHONG Kangrong 2 ， GUAN Yongjian 2 ， WANG Zhen 2 ， CHEN Chao 1 *1.Department of Chemistry ， Tsinghua University ， Beijing 100084， China ；2.Guizhou Qiansturgeon Biotechnology Co.， Ltd ， Guizhou Qiandongnan Miao and Dong Autonomous Prefecture 556300， ChinaAbstract ：Alkaline protease ， papain and bromelain were used to hydrolyze cartilage of sturgeon step by step under pH gradient conditions to prepare sturgeon chondroitin sulfate and collagen peptide simultaneous. The effects of enzymatic hydrolysis tempera­ture ， enzymatic hydrolysis time ， and enzyme dosage on the efficiency of enzymatic hydrolysis were investigated. Based on com­prehensive analysis ， the optimal temperature for alkaline protease hydrolysis was 45 ℃， hydrolysis time was 2 hours ， and enzyme dosage was 100 U ·g -1 cartilage ； the optimal temperature for papain hydrolysis was 50 ℃， hydrolysis time was 2 hours ， and en­zyme dosage was 50 U ·g -1 cartilage ； the optimal temperature for bromelain hydrolysis was 50 ℃， hydrolysis time was 2 hours ， and enzyme dosage was 30 U ·g -1 cartilage. Sturgeon chondroitin sulfate was extracted at a rate of 85% with a purity of 93%， while collagen peptide was extracted at a rate of 82% with a purity of 90%. In comparison to the currently used domestic production techniques ， the multi -enzyme step -by -step enzymatic hydrolysis process established in this study under pH gradient conditions could improve yield and purity ， reduce the amount of alkali ， and avoid the introduction of organic solvents ， thereby lowering the production cost and lessening the burden of environmental pollution.Key words ：enzymatic hydrolysis process ； chondroitin sulfate ； collagen peptide收稿日期：2023­09­25； 接受日期：2023­10­24基金项目：清华大学国强研究院项目。

碱性蛋白酶水解小麦蛋白产物乳化活性研究作者：赵豪斌阙斐冯文婕来源：《现代农业科技》2015年第17期摘要碱性蛋白酶水解小麦蛋白产物乳化活性研究结果表明：3个因素对小麦蛋白粉乳化性的影响由强到弱的顺序为pH值>碱性蛋白酶/小麦蛋白粉质量>温度，最佳酶解条件为pH值7.5、底物浓度2.5%、温度60 ℃，此时的乳化活力指数达到最高，EAI为15.48 m2/g。

研究结果可为利用小麦蛋白粉开发天然乳化剂提供参考。

关键词小麦蛋白粉；碱性蛋白酶；正交试验；乳化活力指数中图分类号 TS201.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）17-0314-03Study on Emulsifying Properties of Wheat Gluten by Alkali Protease TreatmentZHAO Hao-bin QUE Fei * FENG Wen-jie（Department of Applied Engineering，Zhejiang Economic and Trade Polytechnic，Hangzhou Zhejiang 310018）Abstract Through the study on the emulsifying properties of wheat gluten by alkali protease，results showed that the order on the effect of 3 factors on the emulsifying properties of wheat protein from strong to weak was pH value>alkaline protease/wheat flour quality>temperature，the optimal conditions were pH value of 7.5，temperature of 60 ℃，the ratio of proteases and substrate of 2.5%. Under above conditions，emulsifying property index reached 15.48 m2/g. This study could provide reference for the development of natural emulsifier using wheat protein powder.Key words wheat gluten；alkali protease；orthogonal test；emulsifying property index小麦蛋白粉为小麦淀粉生产过程中产生的副产品，其为植物蛋白源，营养丰富，含有人体必需的15种氨基酸，但含有较多的疏水性和不带电的氨基酸含量，难以与加工需求相适应，在应用上受到了一定的限制[1]。

碱性蛋白酶在洗涤剂行业的生产及应用前言碱性蛋白酶（又称丝氨酸蛋白酶）是能使蛋白质水解成肽或氨基酸的酶的总称，包括动物产生的胃蛋白酶和胰蛋白酶、由植物产生的木瓜朊酶和由微生物产生的霉菌蛋白酶。

碱性蛋白酶对去除奶渍、汗渍、血渍及肉汁等蛋白质类污渍很有效果，使不溶性的蛋白质污渍分解成可溶性氨基酸和肽，从而去除这些污渍。

广泛存在与细菌、放线菌和真菌中，研究最为广泛和深入的是芽孢杆菌的丝氨酸蛋白酶。

这种酶在洗涤剂、制革、丝绸等工业上有广泛用途。

1 碱性蛋白酶的性质碱性蛋白酶最早发现于猪胰脏中，1913年Rohm首先将胰蛋白酶作为洗涤浸泡剂使用。

1945年瑞士学者Jaag等发现微生物能产生碱性蛋白酶，如芽孢杆菌属细菌和曲霉属的真菌等，从而使蛋白酶应用拓展到洗涤剂工业。

近20年来，随着新的产碱性蛋白酶菌株的不断分离和发现，碱性蛋白酶的研究有了很大的发展。

迄今，已有多种微生物来源的碱性蛋白酶被纯化和鉴定。

昆虫病原菌产蛋白水解酶的报道很少。

自60年代始，有关耳霉属菌株分泌碱性蛋白酶的报道日渐增多，研究日益深入。

研究表明，耳霉能产生高分子量的碱性蛋白酶A和低分子量的碱性蛋白酶B。

冠状耳霉分泌的碱性蛋白酶B分子量蛋白为6800，是迄今为止报道的分子量最小的碱性蛋白酶。

它的最适pH 9.7，最适反应温度45℃。

该酶经50℃时1小时后完全失活。

该酶具有广泛的底物专一性，能催化水解多种天然蛋白质（如酪蛋白，血红蛋白，卵清蛋白，牛血清白蛋白），其中酪蛋白是最适底物。

此外，碱性蛋白酶B还具有一定的酯酶活性，可专一性水解苯赖氨酸和苯甘氨酸衍生物L－型异构体酯键的羧基，而D－型异构体不受酶处理的影响。

可用于分离氨基的消旋混合物。

可望代替目前工业上用来分离DL－旋光异构体的枯草芽孢杆菌蛋白酶。

与其它产碱性蛋白酶菌株相比，冠状耳霉能分泌高比活力碱性蛋白酶。

如地衣芽孢杆菌株2709碱性蛋白酶比活力为1800u/mg蛋白，枯草芽孢杆菌碱性蛋白酶比活力为880u/mg蛋白，短小芽孢杆菌碱性蛋白酶比活力为3602.4u/mg蛋白，嗜麦芽假单胞菌碱性蛋白酶比活力为1173u/mg蛋白。

蛹虫草虫草素提取工艺的研究作者：殷东林，陈琼，孙伟来源：《湖北农业科学》 2015年第18期殷东林，陈琼，孙伟（信阳农林学院生物技术系，河南信阳４６４０００）摘要：以蛹虫草［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｌｉｎｎ．）Ｌｉｎｋ］子实体为材料，首先通过单因素分析法探索虫草素的最佳提取溶剂，结果表明，７０％乙醇是虫草素的最佳提取溶剂，并通过正交试验考察了微波助提法中微波功率、微波时间、提取次数和料液比４个因素对虫草素提取功率的影响，最终建立了提取虫草素的最佳工艺条件，即微波功率３５０Ｗ，微波处理时间４ｍｉｎ，提取２次，料液比１∶５０（ｇ∶ｍＬ），提取率可达６．８７％。

关键词：蛹虫草［Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｌｉｎｎ．）Ｌｉｎｋ］；虫草素；正交试验；微波助提法中图分类号：Ｓ５６７．３＋３；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：０４３９－８１１４（２０１５）１８－4560-03ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．１８．０42ＳｔｕｄｙｏｎＥｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＣｏｒｄｙｃｅｐｉｎｆｒｏｍＣｏｒｄｙｃｅｐｓ mｉｌｉｔａｒｉｓＹＩＮＤｏｎｇ－ｌｉｎ，ＣＨＥＮＱｉｏｎｇ，ＳＵＮＷｅｉ（ＸｉｎｙａｎｇＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒｙ，Ｘｉｎｙａｎｇ４６４０００，Ｈｅｎａｎ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＵｓｉｎｇｆｒｕｉｔｉｎｇｂｏｄｉｅｓｏｆＣ．ｍｉｌｉｔａｒｉｓａｓｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＣｏｒｄｙｃｅｐｓｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅｂｅｓｔｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｗａｓｅｘｐｌｏｒｅｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒａｎａｌｙｓｉｓ，ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔ７０％ｅｔｈａｎｏｌｗａｓｔｈｅｂｅｓｔｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｓｏｌｖｅｎｔｏｆｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ．Ａｎｄｔｈｒｏｕｇｈｔｈｅｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ，ｔｈｅｍｉｃｒｏｗａｖｅａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｐｒｏｃｅｓｓｏｆｍｉｃｒｏｗａｖｅｐｏｗｅｒ，ｍｉｃｒｏｗａｖｅｔｉｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅｓａｎｄｍａｔｅｒｉａｌｌｉｑｕｉｄｔｈａｎｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆｆｏｕｒｆａｃｔｏｒｓｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｐｏｗｅｒｗａｓｅｘａｍｉｎｅｄ，ｆｉｎａｌｌｙｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｐｒｏｃｅｓｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅ：ｍｉｃｒｏｗａｖｅｐｏｗｅｒ３５０Ｗ，４ｍｉｎｍｉｃｒｏｗａｖｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｔｉｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔ２ｔｉｍｅｓ，ｍａｔｅｒｉａｌｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ１：５０，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｒａｔｅｃｏｕｌｄｒｅａｃｈｍｏｒｅｔｈａｎ６．８７％．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Cｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ；ｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ；ｍｉｃｒｏｗａｖｅａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ收稿日期：２０１５－０１－２７基金项目：河南省科技攻关项目（１３２１０２１１００４７）作者简介：殷东林（１９８３－），男，河南潢川人，讲师，硕士，主要从事生物技术研究，（电话）１５１０３７６４６２５（电子信箱）ｙｄｌ６６９＠１２６．ｃｏｍ。

专利名称：蛹虫草双酶水解提取工艺专利类型：发明专利
发明人：姜建新,姜小红,马一鸣,姜雅申请号：CN200710109343.1
申请日：20070525
公开号：CN101104860A
公开日：
20080116
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明是一种提取蛹虫草的提取方法，涉及生物提取方法，其特征就是利用大米和蚕蛹粉作培养基接入蛹虫草菌种，经一定时间的培养长出虫草子实，把虫草子实体和培养基或培养基进行烘干、粉碎，配水固液蛹虫草粉和水的比例为1∶10－12，加入食品级的淀粉酶和动物蛋白酶，加酶量分别为2％和1％，温度为55－60℃，pH值为6.0－7.5，酶解时间为6－10小时，酶解时，要不断搅拌，然后灭酶、过滤、浓缩、喷雾干燥而制得蛹虫草提取物的干粉。

采用本发明不用任何有机溶剂，完全是利用酶和水提取，不但能把蛹虫草中所有的成份提出来，而且没有任何化学污染，同时也提高了得率，降低了生产成本。

申请人：江苏江南生物科技有限公司
地址：212364 江苏省丹阳市皇塘镇蒋墅
国籍：CN
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ＭｅｔａｂｏｌｏｍｉｃＡｎａｌｙｓｉｓｆｏｒＣｏｍｐｏｎｅｎｔｏｆ ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＣｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ
ＷＡＮＧＳｈｅｎｇｈｏｕ１，ＮＩＵＳｈｉｌｉ２，ＸＵＦａｎｇｘｕ１，ＷＡＮＧＺｅ２，ＬＩＵＹｅｆｅｉ１
（１．ＳｈｅｎｙａｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＴｅａｃｈｉｎｇＣｅｎｔｅｒ，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００３４； ２．ＳｈｅｎｙａｎｇＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００３４）
ｃａｌａｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓｈａｓｃａｒｒｉｅｄｏｎｔｈｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｆｕｎｃ ｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ２２１３ｓｐｅｃｉｅｓ，ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇｆｏｒ７２．６７％ ｏｆｔｈｅｔｏｔａｌ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，４９７ｓｐｅｃｉｅｓ，ｉｔｓｕｎｉｑｕｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｗｉｌｄｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓａｎｄｃｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓ，ｔｕｓｓａｈｐｕｐａｃａｔ ｅｒｐｉｌｌａｒｆｕｎｇｕｓｈａｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｃｏｍｐａｒｅｄａｄｖａｎｔａｇｅ．Ｉｎａｄｄｉｔｉｏｎｔｏｔｈｅａｌｒｅａｄｙｒｅｐｏｒｔｅｄｓｏｍｅｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ，ｃｏｎｔａｉｎｓｒｉｃｈ ｔｈｅｐａｒｔｉｃｕｌａｒｉｔｙｏｆｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ，ｓｕｃｈａｓ：ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ ａｃｉｄ，ｐｏｒｉａｃｏｃｏｓｎｅｗ ａｃｉｄ，ｇｉｎｓｅｎｇｓａｐｏｎｉｎ，ｆａｉｒｙ ＭａｏＺａｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，ｂｉｔｔｅｒｆｉｇｗｏｒｔｒｏｏｔｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，ａｓｔｒａｇａｌｕｓｓａｐｏｎｉｎ，ｐｓａｍｍｏｓｉｌｅｎｅｔｕｎｉｃｏｉｄｅｓｃｙｃｌｉｃｐｅｐｔｉｄｅ，ｃｏｗｈｅｒｂ ｓｅｅｄｃｙｃｌｉｃｐｅｐｔｉｄｅ，ｓｔｅｒｏｌ，Ｄａｎｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓ，ｅｔｃ．Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｓｔｈａｔｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓｆｒｕｉｔｉｎｇｂｏｄｙｏｆｃｏｒｄｙｃｅｐｉｎａｎｄｓｐｒａｙｌｅｖｅｌｓａｒｅｖｅｒｙｈｉｇｈ，ｅｒｇｏｓｔｅｒｏｌ，ＳＯＤｅｎｚｙｍｅｓ，ｖｉ ｔａｍｉｎＥ ｃｏｎｔｅｎｔｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ａ ｌａｒｇｅｎｕｍｂｅｒｏｆｄｒｕｇａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｉｎ ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ｔｈｅｍａｔｅｒｉａｌｂａｓｉｓｆｏｒｒｅｖｅａｌｉｎｇｔｈｅｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ ｈｅａｌｔｈｃａｒｅｖａｌｕｅｏｆｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｃｏｒｄｙｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ；Ｍｅｔａｂｏｎｏｍｉｃｓ；Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ；Ｒｉｃｈｎｅｓｓ

ｌａｒｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎｃｏｎｖｅｒｔｓｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ ｄｅｒｉｖｅｄｆａｃｔｏｒｆｒｏｍａｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃｔｏａｎａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｆａｃｔｏｒ［Ｊ］．Ｂｌｏｏｄ，２００５，１０５（２）：６７０ ６７８．［２２］　ＮＡＴＡＬＥＧ，ＢＯＣＣＩＧ．Ｄｏｅｓｍｅｔｒｏｎｏｍｉｃｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｉｎ ｄｕｃｅｔｕｍｏｒａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｄｏｒｍａｎｃｙ？Ａｒｅｖｉｅｗｏｆａｖａｉｌａｂｌｅｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｄａｔａ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＬｅｔｔ，２０１８，４３２：２８ ３７．［２３］　ＦＡＬＥＲＯ ＰＥＲＥＺＪ，ＰＡＲＫＳＹ，ＳＯＲＥＮＳＯＮＣＭ，ｅｔａｌ．ＰＥＤＦｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｆｆｅｃｔｓｒｅｔｉｎａｌｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｐｒｏａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｔｈｒｏｕｇｈａｌｔｅｒａｔｉｏｎｓｉｎｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｖｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ［Ｊ］．ＡｍＪＰｈｙｓｉｏｌＣｅｌｌＰｈｙｓｉｏｌ，２０１７，３１３（４）：ｃ４０５ ｃ４２０．［２４］　ＨＵＣＺ，ＷＥＮＪＸ，ＧＯＮＧＬＺ，ｅｔａｌ．Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ １ｐｒｏｍｏｔｅｓｃｅｌｌｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｌｕｎｇｍｅｔａｓｔａｓｉｓｏｆｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａｔｈｒｏｕｇｈＦＡＫｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ，２０１７，８（４４）：７５８８１ ７５８９２．［２５］　ＲＯＵＡＮＮＥＭ，ＡＤＡＭＪ，ＧＯＵＢＡＲＡ，ｅｔａｌ．Ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎａｎｄｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ １ｐｌａｙｏｐｐｏｓｉｔｅｒｏｌｅｓｉｎｐｒｏｍｏｔｉｎｇｔｕｍｏｒａｇｇｒｅｓｓｉｖｅｎｅｓｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｒｅｓｅｃｔｅｄｎｏｎ ｓｍａｌｌｃｅｌｌｌｕｎｇｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．ＢＭＣＣａｎｃｅｒ，２０１６，１６：４８３．［２６］　ＡＬＬＥＧＲＩＮＩＧ，ＧＯＵＬＥＴＴＥＦＡ，ＤＡＲＮＯＷＳＫＩＪＷ，ｅｔａｌ．Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ １ｐｌｕｓｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ：ａｎｏｖｅｌａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｔｈａｔｉｎｈｉｂｉｔｓｔｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆａｄｖａｎｃｅｄｈｕｍａｎｃｏｌｏｎｔｕｍｏｒｘｅｎｏｇｒａｆｔｓｉｎｍｉｃｅ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｒＰｈａｒｍａｃｏｌ，２００４，５３（３）：２６１２６６．［２７］　ＧＵＯＮＨ，ＫＲＵＴＺＳＣＨＨＣ，ＩＮＭＡＮＪＫ．Ｔｈｒｏｍ ｂｏｓｐｏｎｄｉｎ１ａｎｄｔｙｐｅⅠｒｅｐｅａｔｐｅｐｔｉｄｅｓｏｆｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ１ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｌｙｉｎｄｕｃｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ，１９９７，５７（９）：１７３５ １７４２．［２８］　ＹＥＥＫＯ，ＣＯＮＮＯＬＬＹＣＭ，ＤＵＱＵＥＴＴＥＭ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎ １ｏｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｍｅｔａｓｔａｓｉｓ［Ｊ］．ＢｒｅａｓｔＣａｎｃｅｒＲｅｓＴｒｅａｔ，２００９，１１４（１）：８５ ９６．［２９］　ＷＯＮＧＳＹ，ＰＵＲＤＩＥＡＴ，ＨＡＮＰ．Ｔｈｒｏｍｂｏｓｐｏｎｄｉｎａｎｄｏｔｈｅｒｐｏｓｓｉｂｌｅｒｅｌａｔｅｄｍａｔｒｉｘｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｍａｌｉｇｎａｎｔａｎｄｂｅｎｉｇｎｂｒｅａｓｔｄｉｓｅａｓｅ［Ｊ］．ＡｍＪＰａｔｈｏｌ，１９９２，１４０（６）：１４７３ １４８２．［３０］　ＴＵＳＺＹＮＳＫＩＧＰ，ＮＩＣＯＳＩＡＲＦ．Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｔｈｒｏｍ ｂｏｓｐｏｎｄｉｎａｎｄｉｔｓｃｙｓｔｅｉｎｅ ｓｅｒｉｎｅ ｖａｌｉｎｅ ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ｃｙｓｔｅｉｎｅ ｇｌｙｃｉｎｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔｃａｒｃｉｎｏｍａ［Ｊ］．ＬａｂＩｎｖｅｓｔ，１９９４，７０（２）：２２８ ２３３．［３１］　ＣＡＳＴＡ ＥＤＡ ＧＩＬＬＪＭ，ＶＩＳＨＷＡＮＡＴＨＡＪＫ．Ａｎｔｉａｎ ｇｉｏｇｅｎｉｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｓａｎｄｆａｃｔｏｒｓｉｎｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．ＪＣａｒｃｉｎｏｇ，２０１６，１５：１．（收稿日期：２０２０ １０ １４）檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽檽 文章编号：１６７３ ２９９５（２０２１）０１ ００４８ ０３·综　述·柞蚕蛹蛋白药用价值的研究进展郑冰姝，李少凡，金书香，李松岩，沈　楠 （吉林医药学院检验学院，吉林吉林　１３２０１３）摘　要：柞蚕蛹蛋白有极大的药用价值，可以更广泛地应用于医疗、药品、食品、饲料等方面。

• 南宁东恒华道生物科技有限责任公司具有极强产品研发及生产应用实 践能力，根据不同的市场需求自主研发酵母抽提专用酶、谷氨酰胺转 氨酶（TG酶）、核酸酶、骨蛋白水解专用酶、动物蛋白水解专用酶、 风味酶、植物蛋白水解专用酶、大豆多肽水解专用酶、胰酶、生物嫩 脆剂系列等多项填补国内空白的生物酶制剂产品，产品技术水平达到 国内领先水平或同期国际先进水平，为广大客户提供高效酶制剂产品 及技术解决方案，满足终端客户的需求。
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碱性蛋白酶的使用条件
• 温度：25-70℃ • PH值：7-10
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碱性蛋白酶厂家南宁东恒华道简介
• 南宁东恒华道生物科技有限责任公司设立在广西首府南宁，借助广西 丰富的植物资源及地理优势，重点研究开发生产木瓜蛋白酶、菠萝蛋 白酶等纯天然植物蛋白酶以及中性蛋白酶、碱性蛋白酶等微生物发酵 酶产品，组建以生产、研发及销售服务为一体的公司模式。公司现已 成为了工业级、食品级、医药级、试剂级等酶制剂的领导者。
谢谢观看！
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碱性蛋白酶的应用
• 碱性蛋白酶在大豆多肽及大豆磷脂功能食 品用的应用
• 将大豆蛋白（大豆分离蛋白或大豆浓缩蛋白等） 水解为大豆多肽，提高大豆蛋白的溶解性及功能 特性，用作饮料、奶制品、老年及婴幼儿食品的 蛋白补充剂和营养补充剂。
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碱性蛋白酶的应用
• 碱性蛋白酶在洗涤行业的应用
• 碱性蛋白酶可加入洗涤剂的配方中，血液和蛋白 质用具去污，辅助除去蛋白质为主的污点，通过 添加碱性蛋白酶的洗涤剂可以大幅度地提高洗涤 去污能力，特别对血渍、汗渍、奶渍、油渍等到 蛋白类污垢，还可达到护理织物、增白增艳的独 特功效，具有独特的洗涤效果纺织工业中它可以 用于生丝精练。