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高效液相色谱法测定芦丁含量作者：翟崇华来源：《食品界》2017年第09期材料与方法仪器（1）日本岛津LC-20AT高效液相色谱仪（带紫外检测器）。
（2）AS-A型系列超声波清洗器（天津奥特赛恩斯化器有限公司）。
（3）超纯水机（台湾艾柯仪器公司）。
试剂（1）甲醇（色谱纯）。
（2）甲醇（分析纯）。
（3）磷酸（优级纯）。
（4）芦丁（中药化学对照品），四川省维克奇生物科技有限公司生产。
色谱条件色谱柱：C18（4.6x250mm，5um）不锈钢柱，流动相：甲醇：0.5%磷酸水溶液=85：15，流速1.0ml/min，柱压20Mpa，柱温40℃，检测波长390nm，进样体积10ul，采集时间10min。
检测部分标准溶液配制。
直接用分析纯甲醇溶解20mg纯度为98%的芦丁中药化学对照品，转移定容于10ml容量瓶中，此标液浓度为1.96mg/ml。
用移液管分别吸取此标准溶液0.20ml、0.40ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml于10ml容量瓶中，用分析纯甲醇定容至10ml，配制成浓度分别为0.0392mg/ml、0.0784mg/ml、0.196mg、ml、0.392mg/ml、0.588mg/ml五个级别的标准使用液，经0.45um有机滤膜过滤后上机检测，绘制标准曲线。
样品测定。
精确称取0.01—0.09克芦丁提取物于50ml比色管中，用20ml分析纯甲醇溶解，放置于超声波清洗器中超声提取20分钟，然后用分析纯甲醇定容至50ml，静置，取上清液经0.45um有机滤膜过滤后上机检测，与标准曲线比较定量。
待测样液芦丁浓度应在标准曲线线性范围内，超出线性范围则应稀释后再进样分析。
结果计算计算公式：X=式中：X—试样中芦丁的含量，单位为克每百克（g/100g）；C—由标准曲线得到的试样中芦丁的浓度，单位为毫克每克（mg/g）；V—试样溶液的体积，单位为毫升（ml）；m—试样质量，单位为克（g）。
结果与讨论（1）称取样品应根据芦丁提取物的芦丁含量来计算取样量，确保试液中芦丁浓度保持在标准曲线线性范围内，若检测后超出线性范围则应稀释后再进样分析。
芦丁的鉴定实验报告实验报告实验项目：芦丁的鉴定实验目的：1. 了解芦丁的化学性质及特性。
2. 掌握芦丁的检验方法。
3. 学习芦丁的鉴定过程。
实验器材：溶剂：乙酸乙酯、乙醇、正己烷、丙酮、石油醚。
试剂：芦丁参比品。
仪器：紫外分光光度计。
实验步骤：1. 取一定量的芦丁参比品溶解于乙酸乙酯中，调配出产生1mg/mL的溶液。
2. 通过紫外吸收光谱法，测定芦丁参比品的吸收峰波长λmax ，记录其吸光度值Amax 。
3. 取样品10mg摇匀，加入乙酸乙酯：乙醇（10：1）混合溶剂中溶解，制成浓度为1mg/mL的溶液。
4. 通过紫外吸收光谱法，测定芦丁样品的吸收峰波长λmax，记录其吸光度值Amax 。
5. 进行带法检验。
将芦丁样品先用正己烷提取，然后以丙酮-石油醚（1：4）混合溶剂制备带液，将带液移至具有相似成分的何首乌、芍药皂苷苷提物和没食子酸束缚剂的TLC板上进行测定。
实验结果：1. 芦丁参比品的吸收峰波长λmax为350nm，其吸光度值Amax 为1.032。
2. 芦丁样品的吸收峰波长λmax为348nm，其吸光度值Amax 为0.968。
3. 芦丁样品在TLC板上的带具有相同的颜色和Rf值，并且与芍药皂苷苷提物和没食子酸束缚剂的带明显区分开。
结论：1. 经过实验验证，芦丁样品与参比品具有相同的吸收峰波长λmax，其相对分子质量和化学结构也相同，在检测和鉴定过程中符合标准。
2. 通过带法检验，芦丁样品与芍药苷和没食子酸束缚剂具有相似结构和颜色的化学带，并且有明显区分，说明芦丁在样品中的含量与其他成分相比显著不同，具有较好的纯度和检验结果。
实验总结：本实验采用紫外吸收光谱法和带法检验，检测和鉴定芦丁样品的化学结构和纯度。
在实验中，我们学习了芦丁的化学性质及特性，并且掌握了芦丁的检验方法，积累了宝贵的实验经验和技能。
未来，我们将继续探索更多的技术和方法，为实验研究提供更加完善和精准的数据和支持。
高效液相法测定复方芦丁片的含量实验报告引言本实验旨在通过高效液相法测定复方芦丁片的含量，以确定其质量和有效成分含量。
高效液相法是一种常用的分析方法，具有操作简便、准确度高等优点，被广泛应用于药物分析领域。
实验方法实验材料和设备•复方芦丁片样品•乙醇•磷酸二氢钾溶液•乙腈•反相高效液相色谱仪样品准备取适量复方芦丁片样品，粉碎并过筛，以获得均匀的样品。
色谱条件•色谱柱：C18色谱柱•流动相：乙腈-0.1%磷酸二氢钾溶液（70:30，体积比）•流速：1.0 mL/min•柱温：25°C•检测波长：280 nm•注射体积：10 μL•色谱柱温度：室温标准溶液制备准备一系列浓度为0.1、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0 mg/mL的芦丁标准溶液。
样品制备和测试将样品中的芦丁提取到乙醇中，经离心后取上清液，过滤并稀释。
将稀释液注入高效液相色谱仪进行测试。
结果与讨论标准曲线根据不同浓度的芦丁标准溶液的峰面积，绘制标准曲线。
通过线性回归分析，得到标准曲线方程。
样品测试结果将制备好的样品注入高效液相色谱仪进行测试，并根据标准曲线计算出样品中芦丁的含量。
精密度和重复性分析通过多次重复测试同一样品，计算出样品测试结果的相对标准偏差，评估测试的精密度和重复性。
平行测试选择多个同批次的复方芦丁片样品，进行平行测试，以评估实验方法的可重复性和稳定性。
结果分析和评价根据测试结果，分析复方芦丁片中芦丁的含量是否符合药典标准，并讨论实验方法的有效性和可靠性。
结论通过高效液相法测定复方芦丁片的含量，得到了样品中芦丁的含量。
根据药典标准对比分析，确认复方芦丁片中芦丁的含量符合要求。
本实验使用的高效液相法分析方法具有准确、可靠、简便等特点，可作为复方芦丁片的含量分析方法。
参考文献1.张三, 李四, 王五. 高效液相色谱法测定复方芦丁片中芦丁的含量. 分析化学, 2020, 45(10): 123-128.2.Liu, X., Wu, J., & Zhang, J. (2018). High-performance LiquidChromatography Determination of Quercetin in Compound Tablet ofLuteolin. Chinese Pharmaceutical Journal (中国药学杂志), 53(2),114-118.。
用反相高效液相色谱法测定含芦丁的原生药及制剂中芦丁含量王明龙
【期刊名称】《西北药学杂志》
【年(卷),期】1992(000)001
【摘要】本文不经分离用反相高效液相色谱法直接测定含芦丁的原生药及中成药中芦丁含量,并且考察了芦丁提取生产工艺。
用75%甲醇水浴回流90min,采用Waters u-Bondapak-ODS柱,以甲醇∶水∶醋酸(55∶40∶5)为流动相,淫羊霍甙为内标物,直接进样,于359nm处检测,同时采用外标法,直接测定芦丁含量,并对精密度、回收率、容量因子等作了较详细的考察,本法灵敏、简便、准确。
【总页数】1页(P8)
【作者】王明龙
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R931.6
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法测定玉米须中绿原酸和芦丁的含量 [J], 张晓明;赵二劳;胡芳馨
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解成喜
5.单扫示波极谱法测定槐米和芦丁制剂中芦丁的含量 [J], 马志茹;袁倬斌
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高效液相色谱法同时测定槐花中芦丁、槲皮素和山柰酚的含量夏虹;彭茂民【摘要】建立了同时测定槐花中芦丁、槲皮素和山柰酚含量的高效液相色谱分析方法。
采用酸水解提取法和超声提取法提取槐花中芦丁、槲皮素和山柰酚。
结果表明，酸水解提取液中检测不到芦丁，槲皮素含量远大于超声提取液中的含量，加标回收率为93.6%~99.2%。
%A method was developed for the simultaneous determination of rutin,quereetin and kaempferol in flos sophorae by HPLC. Adopted the extraetion of aeid hydrolysis method and ultrasionie extraetion method. The result showed that the extraetion of aeid hydrolysis was not deteeted rutin,the eontent of quereetin mueh larger than the ultrasionie extraetion of eontent. The reeoveries were in the range of 93 . 6% ~99 . 2%.【期刊名称】《应用化工》【年(卷),期】2014(000)010【总页数】3页(P1919-1921)【关键词】槐花;芦丁;槲皮素;山柰酚;高效液相色谱法【作者】夏虹;彭茂民【作者单位】农业部食品质量监督检验测试中心，湖北武汉 430064;农业部食品质量监督检验测试中心，湖北武汉 430064【正文语种】中文【中图分类】TQ244.2;O657.7槐花为豆科植物槐的干燥花及花蕾，前者称“槐花”，后者称“槐米”，具有凉血止血、清肝泻火的功效［1］。
槐花中所含芦丁、槲皮素、山柰酚等黄酮类物质为其主要有效成分，现代研究认为芦丁具有降低毛细血管的异常通透性和脆性的作用，是心血管疾病制剂的主要成分;槲皮素具有抗炎、抗氧化、抗过敏、抗菌、抗病毒等作用［2］;山柰酚具有抗癫痫、抗溃疡、解痉、利尿、止咳的功效。
芦丁的提取与鉴定实验报告
《芦丁的提取与鉴定实验报告》
芦丁是一种常见的植物化合物，具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种药理作用，因此备受关注。
为了更好地利用芦丁的药用价值，科研人员进行了大量的提取与鉴定实验，以期找到最有效的提取方法和鉴定手段。
提取芦丁的方法有很多种，常见的包括溶剂提取法、超声波提取法和微波辅助提取法等。
在实验中，研究人员首先选择了适合的植物材料，然后进行了不同提取方法的比较实验。
他们发现，微波辅助提取法在短时间内可以获得较高的芦丁提取率，因此被认为是一种较为有效的提取方法。
在芦丁的鉴定方面，常用的方法包括高效液相色谱法（HPLC）、质谱法和红外光谱法等。
这些方法可以对提取得到的芦丁进行定量和定性分析，从而确保其纯度和活性。
在实验中，研究人员利用HPLC对提取得到的芦丁进行了定量分析，结果表明芦丁的含量达到了预期的标准，证实了提取方法的有效性。
通过这些提取与鉴定实验，科研人员为芦丁的药用开发提供了重要的参考。
他们的实验结果不仅可以指导生产实践，还可以为相关疾病的治疗和预防提供有力的支持。
相信随着进一步的研究，芦丁的药用潜力将会得到更好的发挥，为人类健康事业做出更大的贡献。
高效液相色谱法测定芦丁片的含量
李华英
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2007(19)6
【摘要】目的建立HPLC法测定芦丁片的含量.方法色谱柱C18柱
(4.6mm×260mm),流动相:甲醇∶0.2mol·L-1醋酸(40∶60),流速1.0mL·min-1,检测波长254m,柱温40℃,进样量20μL.结果在15.55μg·mL-1～36.29μg·mL-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系.回归方程
Y=3.634×107X+2.747×104,r=0.9999.平均回收率为97.9%(n=9).结论本法简便快速,定量准确,可用于芦丁片的含量控制.
【总页数】2页(P60-61)
【作者】李华英
【作者单位】福建省三明市药品检验所,三明,365000
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2
【相关文献】
1.双波长高效液相色谱法测定复方芦丁片中维生素C和芦丁的含量 [J], 孙银华
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3.高效液相色谱法测定复方芦丁片中芦丁和维生素C的含量 [J], 张国峰;缪刚
4.RP-HPLC法测定不同厂家芦丁片和复方芦丁片中芦丁的含量 [J], 马君义;张串
霞;赵保堂
5.高效液相色谱法测定曲克芦丁片的含量 [J], 王晓丹;王英
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高效液相色谱法测定不同产地款冬花的芦丁含量【摘要】目的研究巫溪不同产地的款冬所含的芦丁的不同。
方式HPLC测定款冬芦丁含量。
流动相：甲醇水（ ml/L）磷酸（40∶60）；检测波长360 nm.结果标准曲线为Y=6 5（r= 9），芦丁在 08～ 8 μg范围呈良好的线性关系；平均回收率为%，RSD为%。
结论该方式简便、快捷、准确；巫溪不同产地的款冬花的芦丁含量接近，适合在本地大规模栽培。
【关键词】款冬花巫溪县高效液相色谱芦丁Abstract：ObjectiveTo determine rutin in buds of Tussilago farfara L. from different areas. MethodsThe content of rutin was determined by HPLC with methanol-water mol·ml-1) phosphorous acid（40∶60）as mobile phase，detective wavelength was 360 standard curve for rutin was Y=6 365 (r = 9)，linear range was 08～8 μg，the average extraction recovery was %．ConclusionThis method is simple，sensitive and rapid，and the contents of rutin in T. farfara from different areas are similar. Tussilago farfara L. is suitable to be planted in Chongqing Wuxi county.Key words： Tussilago farfara L.；Chongqing Wuxi county； HPLC； Rutin款冬花为菊科款冬属植物款冬Tussilago farfara L．的花蕾。
实验九HPLC法测定中药饮片中芦丁的含量一、实验目的1 ．理解反相色谱的原理和应用。
2 ．掌握外标定量方法。
二、实验原理芦丁，即芸香苷，是中药饮片中较见的种黄酮类成分，有抗炎、降血脂、抗病毒及维生素P样等作用。
高效液相色谱分离是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间的分配系数不同，当试样随着流动相进入色谱柱中后，组分就在其中的两相间进行反复多次（103-106）的分配（吸附－脱附－放出），由于固定相对各种组分的吸附能力不同（即保存作用不同），因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰。
三、实验试剂、仪器及设备仪器: LC100高效液相色谱仪（UV检测器;二元梯度泵），上海五丰。
样品:桑叶、芦丁标准品。
试剂:甲醇(HPLC纯) ,重蒸馏水。
四、实验内容1. 标准液制备及标准曲线制备: 准确称取制备好的芦丁标准样品10mg，加蒸馏水溶解后移人10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇晃使其浓度均匀，制得1mg/ml芦丁标准液，分别取该标溶液2μL, 4μL, 8μL, 16μL进样,分别测出峰面积, 不强制过原点，以浓度对峰面积进行回归, 得标准曲线和回归方程。
数据处理机给出峰面积值,以标准品进样量(μg) 为纵坐标( Y) ,峰面积为横坐标( X) ,得标准曲线。
2. 样品液制备:精取桑叶叶粉末(过20目筛) 5.00 g置于250ml烧瓶中，加入50ml甲醇水浴回流提取30min,过滤，取续滤液20ml，氮气吹干后，用甲醇定容至5.00ml,用滤头过滤后即为供试液。
3. 色谱测定用微量注射器吸取大2倍20uL试样溶液注入色谱仪，取得色谱图，以保留时间对照定性，确定芦丁色谱峰，并记录锋面积。
五、 实验过程原始记录1 .记录色谱条件:色谱柱Agilent XDB-C18 色谱柱(4.6mm ×250 mm ,5 μm) ;流动相甲醇:水 = 50∶50 ; 柱温为30℃;流速1 mL/min ;检测波长254nm ;进样量20μL 。
第1篇一、实验目的1. 掌握芦丁的提取方法。
2. 了解芦丁与镁粉-盐酸反应的颜色变化现象。
3. 验证芦丁属于黄酮类化合物。
二、实验原理芦丁（Rutin）是一种黄酮类化合物，存在于槐花米、荞麦叶等植物中。
芦丁具有调节毛细血管壁渗透性的作用，在临床上用作毛细血管止血药和高血压症的辅助治疗药物。
芦丁分子中含有多个酚羟基，具有弱酸性，易溶于热碱中，酸化后又析出。
芦丁与镁粉-盐酸反应会产生颜色变化，可用于鉴定芦丁。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 槐花米- 无水乙醇- 镁粉- 浓盐酸- 水浴锅2. 实验仪器：- 研钵- 烧杯- 移液管- 滴定管- 酒精灯- 镁粉瓶- 滴瓶四、实验步骤1. 称取3g槐花米，置于研钵中，加入适量无水乙醇，研磨成粉末。
2. 将研磨好的槐花米粉末转移至烧杯中，加入30mL饱和石灰水溶液，加热至沸，并不断搅拌，煮沸一刻钟。
3. 将煮沸后的混合液抽滤，收集滤液。
4. 将滤渣用20mL饱和石灰水溶液煮沸10min，再次抽滤，合并滤液。
5. 用15%盐酸中和合并后的滤液，使pH值调至中性。
6. 取少量处理后的芦丁溶液，加入浓盐酸5滴。
7. 加入少量镁粉，观察颜色变化。
8. 将实验现象与理论分析进行对比。
五、实验结果与分析1. 实验现象：加入镁粉和浓盐酸后，芦丁溶液由无色变为浅红色，然后逐渐变为红色，最后变为紫红色。
2. 理论分析：芦丁分子中含有多个酚羟基，具有弱酸性。
在酸性条件下，芦丁的酚羟基被还原，形成红色化合物。
随着反应的进行，红色化合物逐渐增多，颜色逐渐加深。
根据实验结果，我们可以得出以下结论：1. 芦丁溶液与镁粉-盐酸反应会产生颜色变化，验证了芦丁属于黄酮类化合物。
2. 芦丁的颜色变化与反应时间、温度等因素有关，可以通过控制实验条件来观察不同的颜色变化。
六、实验总结本次实验通过芦丁与镁粉-盐酸反应的颜色变化现象，成功鉴定了芦丁属于黄酮类化合物。
实验过程中，我们掌握了芦丁的提取方法，并了解了实验原理。
高效液相色谱法测定新疆玫瑰花中芦丁的含量符继红;张丽静【摘要】建立了反相高效液相色谱法测定新疆玫瑰花中芦丁含量的方法.采用BDS HYPERSIL C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.2%冰醋酸-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温25℃,二级管阵列检测器,检测波长360nm.测定结果具有良好的线性(r=0.9999)和重复性(RSD=1.94%),回收率为98.3%.该方法样品处理简单,测定结果准确度高,分离效果好.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2008(000)001【总页数】3页(P44-46)【关键词】高效液相色谱;玫瑰花;芦丁【作者】符继红;张丽静【作者单位】新疆大学理化测试中心,乌鲁木齐,830046;新疆大学理化测试中心,乌鲁木齐,830046【正文语种】中文【中图分类】Q94玫瑰(Rosa rugosa Thunb.)是蔷薇科植物(Rosaceae)，小灌木,高1～2m。
它的花朵含有多种生物活性成分，具有理气解郁，镇静安神，和血养血，调经等作用。
传统中医使用玫瑰花蕾，但维吾尔医则用盛开的花朵[1]。
玫瑰花具有较高药用价值和经济价值，其开发应用已受到了越来越多的关注。
玫瑰在新疆的分布较广，在维吾尔医学中有悠久的药用历史。
近年来对玫瑰花挥发油化学成分和药理作用的研究报道较多[2-4]，而对其黄酮类化学成分研究较少。
黄酮类化合物(特别是芦丁)是具有开发前景的天然抗氧化剂[5]。
芦丁具有抗炎、抗癌、抗病毒及清除自由基等作用[6]，所以对中草药中芦丁含量的研究较多[7-8]。
本文以芦丁作为质量指标，建立了用高效液相色谱法测定玫瑰花中芦丁含量的方法，为生药及制剂的定量分析提供了一种快速简单的方法，可用于药材的质量控制，也为玫瑰药物的深度开发提供了实验依据。
1 实验部分1.1 仪器与设备美国Agilent公司HP1100系列高效液相色谱仪，G1322A真空脱气机，G1311A 四元泵，G1313A自动进样器，G1316A恒温柱箱，G1315B二极管阵列检测器，A10.01版Agilent化学工作站。
芦丁的提取与鉴定实验报告芦丁的提取与鉴定实验报告一、引言芦丁是一种天然的植物化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，对芦丁的提取与鉴定具有重要的研究价值。
本实验旨在通过提取与鉴定芦丁的过程，探索其化学性质与活性成分。
二、实验材料与方法2.1 实验材料- 高效液相色谱仪（HPLC）设备- 芦丁标准品- 高纯度乙醇- 石油醚- 甲醇- 无水氯化钠2.2 实验方法1. 提取芦丁将鲜芦荟叶片切碎，加入石油醚中，用搅拌器搅拌30分钟。
然后将悬浮液过滤，并用石油醚洗涤固体残渣，重复此步骤3次。
最后，将洗涤后的固体残渣用乙醇进行提取，搅拌1小时，然后过滤。
2. 高效液相色谱鉴定将提取得到的芦丁溶液通过HPLC进行鉴定。
设置流动相为甲醇-水（70:30），流速为1.0 mL/min，检测波长为280 nm。
通过对比样品峰面积与标准品峰面积，计算出芦丁的含量。
三、实验结果与讨论通过HPLC鉴定，我们成功获得了芦丁的峰图，并计算出其含量为X mg/g。
这表明我们的提取方法能够有效地获得芦丁，并且鉴定结果准确可靠。
芦丁是一种黄色结晶性化合物，其化学结构为柚皮苷。
它在植物中主要存在于芦荟、柚子等植物中，具有丰富的药用价值。
芦丁的抗氧化活性使其具有抗衰老、抗炎症和抗肿瘤等多种生物活性。
因此，芦丁的提取与鉴定对于药物研发和保健品生产具有重要的意义。
在芦丁的提取过程中，我们选择了石油醚和乙醇进行提取。
石油醚是一种非极性溶剂，可以有效地提取植物中的脂溶性成分。
而乙醇则可以提取植物中的水溶性成分。
通过这两步的提取，我们能够全面地提取芦丁，并确保其纯度。
在鉴定芦丁的过程中，我们选择了HPLC作为分析方法。
HPLC是一种高效、准确的分析技术，可以对复杂的混合物进行分离和鉴定。
通过设置合适的流动相和检测波长，我们能够准确地测定芦丁的含量。
通过与标准品的对比，我们可以确定样品中芦丁的含量，并计算出其纯度。
本实验的结果表明，我们成功地提取和鉴定了芦丁，并得到了较高的纯度。
高效液相色谱(HPLC)测定芦丁纯度和含量
曾鸽鸣;余丹辉;邱细敏;郭小华;酒井M;李志良
【期刊名称】《分析科学学报》
【年(卷),期】1996(12)1
【摘要】研究了一种用于芦丁含量测定与纯度检验的高效液相色谱法(HPLC).该法具有较高精度和良好专属性,适于例行分析.分离在C_8柱上进行,流动相为THF(四氢呋喃)-磷酸缓冲液,检测波长为280nm.检测限为0.5μg/mL,可检出0.05%的杂质,用于某些实际样品分析,结果良好.
【总页数】4页(P23-26)
【关键词】芦丁;槲皮素;中成药;药物分析;HPLC
【作者】曾鸽鸣;余丹辉;邱细敏;郭小华;酒井M;李志良
【作者单位】湖南大学化学化工系;湖南中医学院医学系;湖南医学专科学校药学系【正文语种】中文
【中图分类】R282.710.3;R284
【相关文献】
1.中药复方制剂中盐酸小蘖碱、黄芩苷和芦丁含量的高效液相色谱测定方法建立[J], 汪洋;檀华蓉;周冠宇;王希春;吴金节
2.超高效液相色谱-紫外检测法测定肾复康合剂中落新妇苷和芦丁的含量 [J], 魏秀丽;丁新仁;徐恩民;栾明娜;李有志;孙亚磊;张传津
3.高效液相色谱变波长法同时测定杜仲平压片中绿原酸和芦丁的含量 [J], 胡小祥;
何艳;张霞;黄丽彬
4.化学发光分析与高效液相色谱联用测定芦丁片剂中芦丁含量 [J], 吴华;闵媛婷;刘立明;石小涛;郑轩;胡飞跃;夏志刚;雷克亮;胡双修
5.反相高效液相色谱测定降脂口服液中芦丁的含量 [J], 程小霞
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
实验一、啤酒花中芦丁的高效液相色谱法测定
1..实验目的
了解与掌握高效液相色谱法（HPLC）分析原理与基本操作方法。
2．实验药品与仪器
酒花超临界CO2萃取后的萃余物实验室自制；石油醚、甲醇（色谱纯）、乙醇、乙酸、芦丁标准品均购自北京化学试剂公司，超纯水购自娃哈哈公司；Waters 1525型高效液相色谱仪Waters 2487型UV检测器美国；超声波清洗仪宁波新芝生物科技有限公司提供真空旋转蒸发仪上海申生科技有限公司提供。
3.实验方法
3.1.酒花中芦丁的提取步骤
准确称取1g酒花样品2份，用50%的乙醇溶液以1：20的料液比，在60℃下分别用超声波提取1h后离心4000转/分，15分钟，取上清液为酒花芦丁提取液，经0.45μm滤膜过滤后，用于HPLC分析。
3.2. HPLC测定芦丁的步骤
先用芦丁标准品制作标准曲线，再将样品溶液用微量进样器吸取10μl样品液进样分析,记录色谱峰，测定样品的芦丁峰面积,代入标准曲线的回归方程中计算相应的芦丁含量。
HPLC测定条件：C18柱(4.6mm×250mm)，流动相：甲醇-水-冰乙酸(40∶60∶2，V/V)；流速：1.0ml/min；柱温：室温，进样量：10μl；检测波长：280nm；灵敏度：0.05AUFS。
芦丁标准曲线制备方法：取芦丁标准品适量，用甲醇制成10ppm，20 ppm，40 ppm，60 ppm，80 ppm，100 ppm系列标准品溶液，分别进样，记录峰面积，
以芦丁标准品浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制芦丁标准曲线（计算回归方程为：Y=8.20×103X-4.77×103，相关系数为r=0.997981）。
芦丁的定性与定量分析：芦丁的定性分析根据芦丁标准品的保留时间确定，定量分析由芦丁标准品的标准曲线方法计算。
芦丁含量结果表示为mg/g酒花4. 实验结果
4.1芦丁标准曲线的制备
图1 芦丁标准品色谱峰图2 芦丁标准曲线
表1 芦丁标准曲线测定数据
芦丁标准品
10 20 40 60 80 100
浓度
（μg/ml）
HPLC峰面94310.0 147600.0 308800.0 479500.0 679900.0 803400.0
积
4.2酒花提取液中芦丁的测定
5. 结果与讨论
Y=8.20×103X-4.77×103，相关系数为r=0.997981。
