疑难血型鉴定及临床输血

输血科疑难交叉配血试验标准操作规程1.目的为规范疑难交叉配血试验操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7(2)条款的要求制定本规程。

2.适用范围适用于医疗机构输血科对临床疑难交叉配血受血者，主要是对红细胞ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性及自身免疫性溶血性贫血(AlHA)患者的交叉配血试验。

3.职责医疗机构输血科技术人员负责疑难交叉配血试验。

4.原理本规程中疑难交叉配血是指受血者ABO血型鉴定困难、红细胞不规则抗体筛选阳性或受血者是自身免疫性溶血性贫血患者等情况下的交叉配血试验。

配血前需确定受血者的ABO血型或红细胞不规则抗体的特异性,选择ABO血型相容的红细胞或红细胞不规则抗体对应抗原阴性的红细胞进行交叉配血试验。

5.所需设备和试剂普通离心机，血型血清学专用离心机，水浴震荡仪，普通显微镜等。

6.检测环境条件室温应控制在18-27°C,湿度应保持30%-70%°7.步骤与方法7.1交叉配血前受血者ABO血型鉴定不确定者执行《ABO疑难血型鉴定标准操作规程》，确定ABO血型后，再选择ABO血型相同或相容的献血者血液进行交叉配血试验。

7.2红细胞不规则抗体筛选阳性时7.2.1随机与库存血中多袋血液进行交叉配血试验，选择交叉配血相合的血液输注。

7.2.2我院库存血中无相合的血液时，应立即联系临床医生说明情况：①上述实际情况；②应送市血液中心进行“疑难配血”，会产生费用，存在配血不成功的可能：③详细告知家属，决定是否送市血液中心。

7.2.3家属同意后，由医生填写“免疫学申请单”，并抽取血样EDTA抗凝血5-10ml,送输血科。

7.2.4输血科联系血液中心，并送血样。

7.3冷型自身抗体或冷型AIHA患者交叉配血试验：执行7.2.2-7.2.4程序8.交叉配血结果判定主侧、次侧交叉配血均无溶血、无凝集，表示配血相合。

对于AlHA患者，已经排除同种抗体的存在，而所有交叉配血又都不相和时，可选择凝集强度弱于自身凝集的血液输注。

临床输血检查方法一、引言输血是一种常见的医疗技术，用于治疗各种疾病和病情。

为了确保输血的安全和有效性，临床上需要进行一系列的输血检查。

本文将介绍临床输血检查的方法，包括血液类型鉴定、交叉配血试验、传染病筛查等。

二、血液类型鉴定血液类型鉴定是输血前必须进行的一项重要检查，用于确定受血者的血型和Rh因子。

常用的血型系统有ABO血型系统和Rh血型系统。

血型鉴定可以通过血清试剂法或分子生物学方法进行。

1. ABO血型鉴定ABO血型鉴定是根据人体红细胞表面的抗原差异进行的。

常用的方法有直接血凝法和间接血凝法。

直接血凝法是将被测血液与已知抗血型血清混合，观察凝集情况来确定血型。

间接血凝法是将被测血液与已知抗血型血清的红细胞混合，观察凝集情况来确定血型。

2. Rh血型鉴定Rh血型鉴定是根据人体红细胞表面的Rh抗原差异进行的。

常用的方法有直接抗人球蛋白试验和间接抗人球蛋白试验。

直接抗人球蛋白试验是将被测血液与已知抗Rh血清混合，观察凝集情况来确定Rh血型。

间接抗人球蛋白试验是将被测血液与已知抗Rh抗体的红细胞混合，观察凝集情况来确定Rh血型。

三、交叉配血试验交叉配血试验是为了确保输血的安全性，防止输血反应发生。

该试验通过将供血者的红细胞与受血者的血清混合，观察凝集情况来判断是否存在不相容。

常用的方法有直接交叉试验和间接交叉试验。

1. 直接交叉试验直接交叉试验是将供血者的红细胞与受血者的血清混合，观察凝集情况。

如果出现凝集，则表示存在不相容。

2. 间接交叉试验间接交叉试验是将供血者的血清与受血者的红细胞混合，观察凝集情况。

如果出现凝集，则表示存在不相容。

四、传染病筛查为了防止输血传播传染病，临床输血前需要进行传染病筛查。

常见的传染病筛查项目包括乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、丙肝病毒抗体（HCV抗体）、人免疫缺陷病毒抗体（HIV抗体）等。

传染病筛查一般采用酶联免疫吸附试验（ELISA）或核酸检测方法。

ELISA是通过检测血液中特定抗原或抗体的反应来判断是否感染。

疑难血型鉴定及临床输血血型鉴定在临床输血中扮演着至关重要的角色。

科学准确地确定血型，为临床医生提供宝贵的信息，帮助他们选择合适的血液供应者，保证输血安全有效。

然而，有些血型具有较为罕见或特殊的特征，给血型鉴定带来了挑战。

本文将探讨疑难血型鉴定的困境以及临床输血中的应对措施。

随着科技的进步和诊断方法的不断改进，大多数血型的鉴定已变得相对简单和可靠。

然而，某些疑难血型，如Rh阴性血型、弱D血型、血型变异等，常常导致检验结果不确定或模糊。

其中，Rh阴性血型是最常见的问题之一。

在人群中，约有15%的人是Rh阴性血型，但在Rh阴性产妇和患者中更为常见。

由于Rh阴性个体在输血中对Rh阳性血液会产生免疫反应，因此鉴定确切的血型对于避免输血相关的严重风险至关重要。

一种对付疑难血型的常见策略是使用多种血型鉴定技术，如凝集技术、抗人球蛋白试验和酶联免疫吸附测定等。

这些方法的结合使用可以提供更准确的结果，并帮助确定疑难血型。

此外，在一些特殊情况下，可能需要进行分子生物学分析来确定血型。

这些分析方法可以检测血型基因的具体突变，以确定个体的血型，并排除疑难情况。

在临床输血中，即使血型鉴定结果准确，仍然存在一些血型相关的问题需要解决。

例如，由于供应短缺或罕见血型，寻找合适的供血者可能会变得困难。

对于这些特殊情况，血库通常会建立一种血库管理系统，用于跟踪供应者和患者的血型信息，确保及时可靠地进行输血。

此外，一些国家还通过建立血液仓库和血液交换计划等措施来保证供血的充足性和多样性。

除了血型鉴定和供血问题，临床输血还需要考虑到输血反应的风险。

输血反应可能由于不匹配的血型、血型抗原和抗体引起。

特别是对于疑难血型患者，如Rh阴性或血型变异的患者，更需要谨慎对待，以避免输血相关的并发症。

在这种情况下，临床医生可能会采取全血或成分输血，或者使用特殊的技术（如去除抗原或抗体的方法）来降低输血反应的风险。

总结来说，疑难血型鉴定及临床输血是临床医生面临的重要任务之一。

疑难血型鉴定与临床输血北京红十字血液中心疑难ABO血型鉴定*正反定型不符及其原因* 正反定型不符处理的程序* ABO血型鉴定的特殊技术* ABO定型常见问题的解决方法ABO血型常规定型*正、反定型正反定型结果相符，才能记录血型结果ABO血型常规定型方法* 玻片法、纸片法* 试管法* 微量板法* 微柱凝胶卡正反定型不符及其原因* 实验人员操作错误* 红细胞标本的相关问题* 血清标本的相关问题红细胞标本的相关问题* ABO亚型* 白血病或其它恶性疾病使患者红细胞的A、B抗原减弱。

* 患者近期输入了ABO不同型红细胞，或ABO不同型的骨髓移植。

* 红细胞获得性或遗传性异常，如获得性B抗原、T/Tn多凝集红细胞。

* 某些疾病（如腹腔癌）导致血浆中存在大量的型物质，中和抗-A或抗-B抗体，引起正定型为假阴性或弱阳性。

* 患者血清中的高效价自身冷凝集素使红细胞发生凝集。

血清标本的相关问题* 新生儿抗体阴性或很弱、老年人抗体减弱。

* 白血病、淋巴瘤及使用免疫抑制剂的患者、先天丙种球蛋白缺乏的患者、免疫缺陷的患者抗体减弱。

* ABO不同型骨髓移植患者。

* 使用血浆或凝固不完全的血清会形成很小的纤维蛋白凝集的红细胞凝块。

* 患者血清中有不规则抗体或自身冷凝集素。

* 某些疾病（多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、何杰金淋巴瘤等）导致球蛋白水平增高，引起缗钱状凝集；纤维蛋白原水平增高，会引起缗钱状凝集；血浆增容剂（葡聚糖、PVP）也会引起缗钱状凝集导致假阳性结果。

正反定型不符处理的程序一询问、查阅病历* 患者的年龄* 患者的病史* 患者的近期输血史* 患者的近期用药史* 患者是否进行了骨髓移植* 患者以前的血型正反定型不符处理的程序二使用试管法试管法定型的优点* 可以反复离心看结果。

* 可以随意延长抗原抗体反应时间，可以改变反应温度（4℃、37℃孵育），有利于弱抗原、抗体的检出或排除冷凝集素的干扰。

* 可以观察红细胞混合外观现象。

输血科ABO疑难血型鉴定标准操作规程1.目的为规范ABO疑难血型鉴定操作，保证临床输血安全有效，依据《输血实验室管理程序》4.1.7（1）条款的要求制定本规程。

2.适用范围适用于医疗机构输血科对ABO血型鉴定正反定型不相符，常规方法不能确定ABO血型的进一步确认试验。

3.职责医疗机构输血科技术人员负责ABO疑难血型鉴定。

4.原理ABo血型鉴定正反定型不相符时，通过采用单克隆抗-A、抗-B、抗-Ai、抗-AB、抗-H试剂与受检者红细胞反应监测ABH抗原，A、B、。

型试剂红细胞及自身红细胞与受检者血清（血浆）反应监测血型抗体，红细胞洗后放散试验监测弱A、弱B抗原，凝集抑制试验监测唾液ABH血型物质，血清（血浆）吸收试验排除ABO血型以外的抗体对鉴定的影响，从而获得确定受检者ABO血型的依据，确定ABo血型。

5.检测环境条件室温应控制在18-27βC,湿度应保持30%—70%。

6.步骤与方法6.1收集受检者临床资料当执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》鉴定ABO血型出现正反定型不相符，并已排除试剂及操作因素时，应调查受检者的疾病史、输血史、药物治疗情况、组织或器官移植史、孕产史及以前的血型记录，分析可能影响ABO血型鉴定的临床资料。

6.2根据受检者正反定型的反应结果及临床资料，初步分析引起正反定型不符的可能原因。

6.2.1当正定型红细胞与抗-A和（或）抗-B物凝集，而反定型未检出预期的凝集反应时，应首先确实是否因红细胞表达弱A和（或）弱B,与抗-A和（或）抗-B不凝集。

经吸收放散等试验确认红细胞不表达A和（或）B抗原后，可考虑是否为低免疫球蛋白血症、免疫抑制等致血型抗体异常。

当反定型检出了与正定型不相符的凝集时（如反定型与0型试剂红细胞凝集）6.2.2应考虑血清（血浆）中是否存在红细胞不规则抗体。

6.2.3出生3个月内的婴儿ABO血型鉴定只做正定型，不做反定型，具体执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。

疑难血型鉴定及处理分析摘要：目的：探究ABO疑难血型产生原因和正确血型鉴定方法，意在提高疑难血型鉴定准确性。

方法：把2022年1月到2023年7月本院收集的献血者45例纳入研究，经微孔板法开展ABO血型正反定型检测，选出疑问标本并开展试管法复检，并实行吸收放散试验、不规则抗体筛查、抗球蛋白试验、特异性鉴定工作，鉴别患者血型。

结果：本组45例患者进行血型鉴定后，无标本差错例数35例，10例ABO血型正反定型不相符样本，包括4例（40.00%）抗体减弱，2例（20.00%）抗原减弱，2例（20.00%）冷自身抗体，1例（10.00%）同种抗体，1例（10.00%）亚型。

结论：ABO疑难血型正反定型不相符的原因比较复杂，结合患者基本资料，开展科学检验和分析，可保证疑难血型鉴定准确性，提高患者输血安全。

关键词：疑难血型；鉴定；原因临床输血是抢救危重疾病患者的重要手段，但人体血型类型多样，只有选择合适的血型输血，才可保证患者安全，鉴于此，血型准确鉴定至关重要[1]。

然而实际血型鉴定过程中，正反定型不相符现象时常出现，导致血型鉴定难度变大。

为分析疑难血型的鉴定方法，提高实际鉴定结果准确性，本文以2022年1月到2023年7月收治的献血者为研究对象，现报道如下。

1资料和方法1.1一般资料2022年1月到2023年7月期间，在本院收集的献血者45例均为研究对象，其中男性患者25例，女性患者20例，年龄分布在24~67岁间，均数（44.27±4.58）岁。

医院伦理委员会批准，患者或家属签署同意书。

1.2研究方式本组患者分别完成相关检测工作，包括：（1）ABO血型初筛：微孔板法正反定型，如果血型正反定型不相符，盐水介质试管法二次检测，如果O细胞阴性，正定型抗-A、抗-B反应强度<4+，反定型A型或B型红细胞<2+，亦或者抗原抗体不对应，增加开展试管法抗-AB、抗-H、抗-A1、抗-A1c和抗-A2c血清检验，完成血型正反定型试验工作。

临床输血检查方法输血是指将血液或血液制品输送给患者以治疗或预防疾病的一种医疗过程。

为了确保输血的安全性和有效性，临床上常常需要进行一系列的输血检查。

本文将详细介绍临床输血检查的方法及其相关内容。

一、血型鉴定血型鉴定是临床输血前必须进行的重要检查之一。

它可以确定受血者和供血者之间的血型是否匹配，以避免发生输血不相容反应。

常用的血型分类包括ABO血型系统和Rh血型系统。

血型鉴定通常通过血清试验或基因检测来进行。

血清试验是一种常用的血型鉴定方法，它基于抗原与抗体的特异性反应原理。

通过将受血者的血清与已知血型的抗体混合，观察是否出现凝集反应或溶解反应，从而确定受血者的血型。

常用的血型鉴定试剂包括抗A血清、抗B血清和抗Rh血清等。

基因检测是一种更加准确和精确的血型鉴定方法，它可以直接检测受血者和供血者的基因型。

通过PCR扩增和测序等技术，可以确定受血者的基因型，从而确定其血型。

基因检测具有高度的特异性和灵敏性，可以有效避免血型不匹配的风险。

二、免疫筛查免疫筛查是指通过检测受血者的血清中是否存在特定的抗体，以判断是否存在免疫相关的问题。

在输血前，常常需要进行抗体筛查，以排除受血者体内存在的特异性抗体。

这些抗体可能是由于既往的输血、妊娠、移植等原因引起的。

抗体筛查通常使用间接抗人球蛋白试验（IAT）进行。

该试验通过将受血者的血清与已知抗人球蛋白血清混合，观察是否出现凝集反应，以判断是否存在特异性抗体。

如果出现凝集反应，则需要进一步进行抗体鉴定，确定抗体的种类和特异性。

三、交叉配血交叉配血是一种重要的输血前检查方法，用于评估受血者的血清与供血者的红细胞之间是否存在相互作用。

它可以预测输血不相容反应的风险，为选择合适的供血者提供依据。

交叉配血通常包括直接交叉配血和间接交叉配血两种方法。

直接交叉配血是指将受血者的血清与供血者的红细胞直接混合，观察是否出现凝集反应或溶解反应。

如果出现凝集反应，则表示存在输血不相容的风险。

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亚型㊂根据测序结果和基因分型推测该患者基因型为A 1.02/B w .03㊂结论 α-1,3半乳糖基转移酶基因(B 基因)第7个外显子中n t 721处的C >T 变异可导致241位氨基酸由精氨酸变成色氨酸,在该患者的红细胞上检测到A 抗原和弱B 抗原,血清中存在弱抗B 抗体,血清学表型为A B x ㊂A B x 亚型是A B O 血型亚型中的一类,人群中极其罕见,由罕见的等位基因产生㊂对于正反定型不符的异常血型结果应采用多种方法进行鉴定,提高亚型检出率和疑难血型鉴定的准确率㊂关键词:疑难血型; A B O 亚型; 输血; A 102/B w 03中图法分类号:R 457.1+1文献标志码:A文章编号:1672-9455(2024)03-0426-04输血是现代医疗中不可缺少的一部分,但输血之前也存在诸多的问题与挑战,其中血型鉴定对于临床㊃624㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第3期 L a b M e d C l i n ,F e b r u a r y 2024,V o l .21,N o .3输血至关重要,正确的血型鉴定才能保证临床用血的安全[1]㊂由于基因突变㊁糖基转移酶数量与活性改变等导致多种正反定型不符的亚型疑难血型出现,导致血清学鉴定难度大,交叉配血困难[2],对检验人员的能力和临床选用合适的血液制品提出了更高的要求㊂通过标准血清学方法进行A B O血型㊁不规则抗体筛查㊁交叉配血试验㊁吸收放散试验和基因测序分型等实验,可进一步提高A B O血型疑难血型鉴定的准确性,以此提高临床用血的安全性和有效性㊂笔者在临床住院患者日常血清抗筛检测样本中发现1例正反定型不符的情况,最终鉴定为A B亚型㊂虽然该例内科患者并未要求输血,但考虑亚型病例较为罕见,故通过分析该例患者的鉴定,进一步探讨了临床输血难点和策略,进而为临床疑难血型鉴定提供案例参考㊂现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料患者,女,70岁,临床诊断为心绞痛,无输血史,有妊娠史,于2020年9月3日在武汉亚洲心脏病医院进行常规血型及不规则抗体筛查,血型检测发现正反定型不符,正定型B抗原凝集强度减弱,疑似亚型,遂进一步展开深入研究㊂1.2试剂与仪器单克隆抗-A(上海血液生物医药有限责任公司,生产批号:20200201,效价1ʒ256);单克隆抗-B(上海血液生物医药有限责任公司,生产批号:20200201,效价1ʒ128);抗-H(江苏力博医药生物技术股份有限公司,生产批号:20160707,效价1ʒ64);抗-A1(江苏力博医药生物技术股份有限公司,生产批号:20180830,效价1ʒ128);A B O红细胞(江苏力博医药生物技术股份有限公司,生产批号: 202008008);3%不规则抗体筛选红细胞(江苏力博医药生物技术股份有限公司,生产批号:20200922); K A-2200日本久保田小型台式专用离心机;O r t h o B i o V u e专用卡式离心机;O r t h o v i s i o n M a x奥森多全自动血型及配血分析仪㊂1.3方法1.3.1血型血清学试验采用试管法和微柱凝胶法检测患者A B O血型㊁R h血型及进行不规则抗体筛查和鉴定[3-4],此外还进行行吸收放散试验㊂所有试验方法均严格按照‘全国临床检验操作规程“[5]或者试剂说明书进行操作㊂1.3.2洗涤红细胞的制取取4支试管,分别加入50μL的健康人A㊁O㊁A B以及本例患者离心后红细胞,然后加入生理盐水至试管2/3~3/4处,充分振荡㊁混匀㊁洗涤后放入久保田离心机1000r/m i n离心1m i n,然后弃去上清生理盐水,重复操作3~5次,最后留下的离心后红细胞即为洗涤红细胞,用于与抗-A1㊁抗-H反应㊂1.3.3 P C R法基因测序分型全血提取D N A采用P C R法对A B O基因的7个外显子进行扩增[6-7],对7个外显子全编码区进行直接测序[8-9],并检索血型抗原基因突变数据库(B GMU T)[10]进行对比㊂2结果2.1本例患者A B O血型正反定型结果试管法显示正定型有A㊁B抗原,反定型B c端有弱反应,见表1㊂表1卡式法与试管法A B O血型正反定型结果方法正定型-A-B-D反定型C t r l/O c A1c B c S e l f 微粒凝胶法4+2+m f4+00W+/试管法4+2+4+001+m f0注:1+m f㊁2+m f分别为凝集强度为1+㊁2+的混合外观凝集;+为凝集;W+为弱;0为不凝集;C t r l/s e l f为自身对照㊂2.2健康人A㊁O㊁A B型洗涤红细胞及本例患者洗涤红细胞(P c)分别与抗-A1㊁-H血清试剂的反应 O 型红细胞表面存在大量前体抗原H㊂P c㊁A c与抗-A1反应强度相同,与抗-H反应强度则是P c更高㊂见表2㊂表2健康人A㊁A B㊁O型标准红细胞及本例患者红细胞与抗-A1与抗-H抗体反应洗涤红细胞-A1-HA c4+W+O c04+A B c3+1+wP c4+1+w注:1+w为反应程度为弱1+;+为凝集;W+为弱;0为不凝集㊂2.3不规则抗体筛查结果患者血清与抗筛细胞Ⅰ㊁Ⅱ㊁Ⅲ号细胞反应均呈阴性,排除不规则抗体存在的可能性㊂见表3㊂表3本例患者血清与筛查细胞反应结果方法筛选细胞Ⅰ筛选细胞Ⅱ筛选细胞Ⅲ结果微粒凝胶法0000试管法0000注:0为不凝集㊂2.4本例患者吸收放散试验结果放散液与标准B 型红细胞反应,与标准O型红细胞不反应,本例患者红细胞表面存在弱B抗原㊂见表4㊂表4患者红细胞吸收放散试验结果项目B c O c患者红细胞放散液2+0对照O细胞放散液00注:+为凝集,0为不凝集㊂2.5基因测序分型结果本例患者A B O基因第1~ 7外显子测序显示A B O基因的第6㊁第7个外显子上存在297A/G㊁467C/T㊁526C/G㊁657C/T㊁703A/ G㊁721C/T㊁796A/C㊁803C/G㊁930A/G杂合,见表㊃724㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第3期 L a b M e d C l i n,F e b r u a r y2024,V o l.21,N o.35;第7外显子存在碱基467C>T ;721C>T 变异,此突变引起多肽链氨基酸P 156L ;R 241W 替换,见表6㊂经检索B GMU T ,此患者2个等位基因分别为A 1.02和B w.03,确认该患者A B O 血型的基因型为A B O*A 1.02/B w.03㊂表5 患者血型的基因测序结果核苷酸位置第4外显子188189第6外显子261297第7外显子467526646657681703721771796803829930患者G G C C G G A G C T C G T T C T G G A G C T C C A C C G G G A G 参考序列 A 1.01G C G A C C T C G G C C C G G G A 1.02G C G A T C T C G G C C C G G G B 1.01G C GG C G T T G AC C A CG AO.01G C D e l AC C T C G G C C C G G G O.02AT D e l G C CA C AG C T C G AG B w.03G CGG CG TTG A TCAC G A表6 单核苷酸及氨基酸替换结果等位基因参考基因碱基替换氨基酸替换表现型A 1.02A 1.01467C >T P 156LA 1B w.03B 1.01721C >TR 241W B x3 讨 论A B O 等位基因位于染色体9q34.1~q 34.2,全长19.5k b ,编码区由7个外显子组成,长1062b p㊂第6㊁7号外显子约占编码区长度的77%[11],编码酶的催化活性区同时也是A B O 亚型基因突变的主要区域㊂糖基转移酶A 和B 均由354个氨基酸组成,且具有高度的同源性,二者一级结构仅有4个氨基酸残基的差异㊂A B O 血型系统具有一定的血清学特点,但分子机制各不相同,B 亚型较A 亚型少见,B x 则更是罕见[12],本研究患者鉴定为A B x 亚型,同时血清中检出不规则的弱抗B 抗体㊂A B O 血型基因多态性决定了A B O 血型抗原多态性[13-16],但迄今为止关于A B O 基因完全缺失导致O 表现型的案例较少报道,也未发现A B O 基因碱基连续缺失的现象,提示单核苷酸多态性(S N P s)是形成A B O 基因多态性的重要因素㊂本例患者有2处单个核苷酸的改变导致氨基酸置换,467C>T 导致156位氨基酸由脯氨酸替换为亮氨酸;721C>T 使241位氨基酸由精氨酸替换为色氨酸,但第156位氨基酸不位于酶的催化活性中心,故而此处虽为氨基酸突变但并不影响糖基转移酶的活性与生物学功能㊂但第241位氨基酸则处于糖基转移酶的催化活性区,此处突变后蛋白质一级结构改变导致构象发生改变,使糖基转移酶的特异性㊁活性改变,从而造成A B O 血型中B 抗原表达数目减少,与抗-B 反应凝集强度减弱,形成亚型㊂3.1 疑难输血的原则与方案策略 血型的准确鉴定是临床输血的根本,即便是亚型的疑难临床输血,也需要精确分型,亚型鉴定的意义在于为受血者选择最合适的血液保障输血安全与有效㊂针对上述A B x 亚型的临床输血,同型供血者是最佳选择,按现有的血清学特点来看,最理想的血源应该是相同A B x 亚型血液,但是在现实情况下较难以实现[17]㊂由于患者血清中存在弱B 抗体,虽然强度不高,但在输血的时候不可忽略其作用,临床输血首先就是要保证输注的红细胞不被破坏,故而不能选用B 型血和A B 型血,由于患者血清中存在抗-B ,所以输注A B 型血同样会出现凝集反应,对于A 型血,虽然血清中存在抗-B ,但并不会发生强烈的凝集反应,因为B 亚型抗原的表达不仅有量变而且还有质变;况且随着血液的输入,其中的抗体进入人体循环血液后,也会被稀释而效价降低,因此,A 型血可作为一种输入血型,在患者有输血需求指征的时候,可以选用A 型洗涤红细胞进行输注㊂O 型红细胞被称为 万能输血型 ,在紧急情况下,为挽救生命,避免同种抗体的产生,可以在交叉配血试验满足主侧不凝集的情况下,少量缓慢输入O 型洗涤红细胞㊂总之,绝对安全的输血是没有的,亚型的疑难输血要严防血型的漏判㊁误判,尽可能制订准确㊁有效的输血策略,才能提高安全输血水平[18-19]㊂3.2 基因测序分型对临床罕见亚型的作用 与本例患者血清学相似的另外一种罕见亚型c i s A B 也是红细胞表面存在B 抗原弱表达,同时血浆中有1+~3+的抗-B ㊂2种亚型红细胞表面的A ㊁B ㊁A B 抗原的表达强度类似,仅凭血清学格局难以肯定地区分㊂检索B GMU T A B w 03与c i s A B 基因序列,c i s A B特有的碱基突变在700C >T ,引起第234位氨基酸由脯氨酸替换为丝氨酸(P 234S )[1];本例患者A B w 03在721C >T 发生了特有的点突变,引起241位氨基酸由精氨酸替换为色氨酸(R 241W )㊂二者相比仅存在单㊃824㊃检验医学与临床2024年2月第21卷第3期 L a b M e d C l i n ,F e b r u a r y 2024,V o l .21,N o .3个氨基酸的差异,但-A1和-H反应格局有明显差别㊂不过肉眼观察凝集强度存在主观差别,同时血清学反应也受多种其他因素的干扰,准确度不够高,还是存在无法完全肯定的情况㊂A B O亚型无论是抗原的量变还是质变,其血清学试验外在形式都一样,都仅表现为凝集强弱的变化,这才导致血清学鉴定困难,因此开展基因检测分型技术十分有必要[20],可作为血清学鉴定的重要补充,帮助顺利解决疑难血型鉴定困难的问题,具有重要的临床意义㊂3.3 A B O亚型鉴定基本方法思路一般情况下进行A B O血型正反定型鉴定时,发现正反定型不一致,通常根据是否正定型抗原凝集强度减弱呈双群现象(混合视野M F)㊁红细胞表面H抗原强度以及是否可以通过吸收放散试验检测到弱抗原等进行A B O亚型的鉴定[21]㊂但在鉴定这种疑难血型时,既有技术问题也有患者血型的问题,故而在遇到血型鉴定正反定型不一致的情况下,除常规试验外,正定型试验增加抗-H㊁抗-A1㊁抗-A B血清抗体;反定型增加O型标准红细胞㊁A1型红细胞㊁A2型红细胞等(反定型对于亚型筛检尤为重要,正定型弱抗原不发生凝集反应的时候,反定型的弱抗体可有提示性作用,防止漏检),再进行直接抗人球蛋白试验㊁吸收放散试验㊁基因测序检测等最终准确分型[22]㊂由于实验条件有限并未对本例患者进行家系调查和糖基转移酶活性的测试,缺乏A B O等位基因的遗传方式及该例A B O复合亚型出现的具体机制等信息㊂总之,更全面的基因序列测序和更加完整的家系调查有助于丰富A B O血型的基因多态性㊁A B O亚型形成的关系及其可能的遗传方式㊂参考文献[1]武文,张志波,杨娜,等.一例A B w03亚型的全编码区测序及家系分析[J].中华医学遗传学杂志,2019,36(7): 734-736.[2]雷航,蔡晓红,王钰箐,等.A B_x亚型相关的B型糖基转移酶突变p.R180C的酶动力学研究[J].中国输血杂志, 2020,33(11):1140-1143.[3]尹志柱,田丰,孙国栋,等.2个新的A B 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