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半制备型液相色谱法分离纯化茶叶鲜叶中7种儿茶素类化合物龚智宏;陈思;高江涛;李梅红;汪厦霞;林军;俞晓敏【摘要】建立了从茶叶鲜叶中分离纯化7种儿茶素类化合物(没食子儿茶素(GC)、表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(C)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素3-O-(3-O-甲基)没食子酸酯(EGCG3"Me)和表儿茶素没食子酸酯(ECG))的半制备色谱法.铁观音鲜叶经甲醇超声浸提、浓缩、氯仿萃取后,向水相中加入碱式醋酸铅沉淀,得到茶多酚粗品.分别以甲醇-水、乙腈-水作为流动相,采用半制备色谱法纯化7种儿茶素类化合物,纯度均达到90%.此外,利用同样的方法分离纯化另外两种茶叶鲜叶中的7种儿茶素类化合物,得到相似的结果.该方法以溶剂提取、离子沉淀结合半制备色谱,适于简单、高效地同时分离制备多种儿茶素类化合物.%An effective and simple method was established to simultaneously purify seven tea catechins ( gallocatechin ( GC) , epigallocatechin ( EGC) , catechin ( C) , epigallocatechin-3-O-gallate( EGCG ) , epicatechin ( EC ) , epigallocatechin-3-O-( 3-O-methyl )-gallate ( EGCG3"Me ) and epicatechin-3-O-gallate ( ECG ) ) from fresh tea leaves by semi-preparative high perform-ance liquid chromatography ( HPLC) . Fresh leaves of Tieguanyin tea were successively extrac-ted with methanol and chloroform. Then crude catechins were precipitated from the aqueous fraction of chloroform extraction by adding lead subacetate. Crude catechins were used for the isolation of the seven target catechin compounds by semi-preparative HPLC. Methanol-water and acetonitrile-water were sequentially used as mobile phases. After two rounds of semi-preparative HPLC, all target compounds were achieved with high purities (>90%) . The pro-posed method was tested on two additional tea cultivars and showed similar results. This method demonstrated a simple and efficient strategy based on solvent extraction, ion precipitation and semi-preparative HPLC for the preparation of multiple catechins from tea leaves.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2017(035)011【总页数】6页(P1192-1197)【关键词】半制备色谱;离子沉淀;分离纯化;儿茶素类化合物;茶叶【作者】龚智宏;陈思;高江涛;李梅红;汪厦霞;林军;俞晓敏【作者单位】福建农林大学海峡联合研究院园艺植物生物学及代谢组学研究中心,福建福州350002;福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室,福建福州350002;福建农林大学海峡联合研究院园艺植物生物学及代谢组学研究中心,福建福州350002;福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室,福建福州350002;福建农林大学园艺学院,福建福州350002;福建农林大学生命科学学院,福建福州350002;福建农林大学海峡联合研究院园艺植物生物学及代谢组学研究中心,福建福州350002;福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室,福建福州350002;福建农林大学园艺学院,福建福州350002;福建农林大学海峡联合研究院园艺植物生物学及代谢组学研究中心,福建福州350002;福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室,福建福州350002;福建农林大学海峡联合研究院园艺植物生物学及代谢组学研究中心,福建福州350002;福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室,福建福州350002;福建农林大学海峡联合研究院园艺植物生物学及代谢组学研究中心,福建福州350002;福建省海峡植物应用系统生物学重点实验室,福建福州350002;福建农林大学园艺学院,福建福州350002【正文语种】中文【中图分类】O658茶树中的化合物具有多种生理活性,如抗氧化、抗肿瘤、抑菌、增强免疫力、保护心血管系统等,其中起主要作用的是茶多酚[1-3]。
绿茶提取物egcg的检测方法
绿茶提取物EGCG的检测方法可以通过以下几种常用技术来实现。
1. 高效液相色谱法（HPLC）：HPLC是一种常见且可靠的方法，可用于分析
和测定绿茶提取物中的EGCG含量。
该方法基于物质在液相中的分配行为，使用
特定的色谱柱和溶剂组合来分离和定量目标物质。
通过检测和比较样品与标准品的峰面积或峰高度，可以定量测定绿茶提取物中EGCG的含量。
2. 质谱法（MS）：质谱法广泛应用于绿茶提取物中EGCG的定性和定量分析。
质谱技术能够识别和测定化合物的分子结构和相对分子质量，并对复杂样品进行分析。
质谱法可以与其他分析方法如HPLC结合，提高检测的精确度和准确性。
3. 紫外-可见光谱法（UV-Vis）：紫外-可见光谱是一种常用的检测方法，可以
用于测定绿茶提取物中EGCG的含量。
该方法基于物质对特定波长的光的吸收特性。
通过测量样品溶液在特定波长下的吸光度，可以推断出其中的EGCG含量。
4. 固相微萃取（SPME）：SPME是一种无损提取技术，可以用于测定绿茶提
取物中EGCG的含量。
该方法在无机溶剂的条件下，使用固定在针尖上的吸附剂
来吸附和富集目标化合物。
然后，经过热解吸，目标化合物被释放出来，并通过其他分析方法如HPLC或GC进行检测和定量。
上述是一些常见的绿茶提取物EGCG的检测方法。
根据实际情况和需求，选择适合的检测方法可以有效地确定绿茶提取物中EGCG的含量。
中压制备液相色谱快速分离制备儿茶素单体林丹;李春苗;鲜殊;王玺;宛晓春;凌铁军;李大祥【摘要】以反相中压制备液相色谱为工具,甲醇-水作为洗脱溶剂,通过C18 (ODS-AQ)填料从茶多酚中一步分离出表没食子儿茶素(EGC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素(EC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)等四种儿茶素单体.1.0g纯度为92.6％的茶多酚经过中压色谱,制备得到了90 mg EGC、355 mg EGCG、23 mgEC和92mg ECG,它们的纯度分别为91.8％、97.6％、97.7％、99.3％,纯品得率56.0％,四种单体总回收率达到68.2％.四种儿茶素单体的结构经核磁共振氢谱、碳谱以及高分辨质谱加以确证.%With advances in columnparticles,preparative medium pressure Liquid chromatography (MPLC) isan potential alternative to preparative HPLC for purifying active botanical compounds on reverse phase. To obtain high-purity cat-echin monomers,a MPLC system with online real-time operation software (DR FLASH Ⅱ)was introduced to separate catechin monomers from tea polyphenols with the methanol-water elution on two serial connected C18 (ODS-AQ) columns (125 mm × 26 mm, 30-50 μm,40 g) at 120-150 psi. With loadingof 1. 0 g of tea polyphenols with the purity of 92. 6% , the four catechin monomers as epigallocatechin ( EGC), epigallocatechin gallate ( EGCG), epicatechin (EC) and epicatechin gallate (ECG) were separated and purified at only one step in one time. 90 mg of EGC,355 mg of EGCG,23 mg ofEC ,92 mg of ECG were harvested and their purities were 91.8% ,97.6% ,97.7% and 99.3% respectively. The yields and recovery of total four catechins monomers were up to 56.0% and 68.2% respectively. Thestructures of the four catechins were subsequently confirmed by analysis of their H NMR,13C NMR and HRESI-MS. Those indicate that MPLC could be helpful to the rapid and efficient preparation of catechin monomers from tea polyphenols.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2013(025)001【总页数】5页(P92-95,100)【关键词】儿茶素单体;中压制备液相色谱;核磁共振谱;高分辨质谱【作者】林丹;李春苗;鲜殊;王玺;宛晓春;凌铁军;李大祥【作者单位】安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室,合肥230036【正文语种】中文【中图分类】O629.9茶叶中的多酚类物质占茶叶干重的18%～36%。
Ca 2+沉淀法从绿茶中提取茶多酚化学与材料学院应用化学专业摘要摘要：：国内外提取制备TP的方法主要有有机溶剂萃取法、金属盐沉淀法、吸附树脂层析法、超临界萃取法；绿茶中的茶多酚主要成分的化学结构式为EC 、ECG 、EGC 、EGCG 四种。
本文研究了Ca 2+沉淀法提取茶多酚(TP)的工艺，确定Ca 2+沉淀茶多酚的最佳PH 为7.5，钙盐加入量与茶叶质量之比约为1:2，钙盐的最佳转溶条件为用2mol/L 的硫酸溶液，以料酸比1:2(V/V)于20℃下转溶15min 。
结果表明，该提取工艺简单，无毒性，产品得率较高(18.5％)，纯度好。
关键词：Ca 2+；沉淀法；绿茶；茶多酚1前言1.1茶多酚及其提取方法茶叶中富含一类多羟基的酚性物质荼多酚(Tea—Polyphenols，简称TP)，它约占茶叶干物质的1/3茶多酚是一类以儿茶素类为主体的多酚类化合物，除儿茶素类外，还有黄烷酵类、黄烷酮类、酚酸类和花色苷及其苷元．TP是一种新型的天然抗氧化剂[1]，具有高效的抗氧化、解毒、保鲜除臭、抗射线、调整脂糖代谢、调整肠机能、降压等生理活性作用[2，3]，在油脂、食品、医药、日化等领域具有广阔的应用前景。
国内外提取制备TP的方法主要有：有机溶剂萃取法[4，5]、金属盐沉淀法[6]、吸附树脂层析法[7]、超临界萃取法[8]。
其中，超临界萃取法需昂贵的设备，吸附树脂层析法也需要超滤、减压浓缩、真空干燥等多种设备，且制得的产物中TP含量只有80%。
有机溶剂萃取的原理是利用TP易溶于水和C 2H 5OH，CH 3COCH，C 2H 5OC 2H 5，CH 3OH等有机溶剂，将之从茶叶中提取出来，或用CH 3COOC 2H 5等有机溶剂将之从水提物中分离出来．该法虽比较简单，但所提取出的粗品实质上是茶叶的水或乙醇等的浸出物，其中含有大量的植物多糖、色素、咖啡碱、树脂、氨基酸等，TP的含量仅为30％～40％，还需通过进一步精制、纯化、去杂才有实际意义、同时，该法还存在以下缺点：1)使用多种有机溶剂，且有机溶剂用量大；2)工序多，就萃取一步需经三级错流萃取，工艺繁琐复杂；3)需多次蒸馏，加热时间长；4)有效成分含量和提取率较低，若需制得较高纯度的茶多酚，还需经过色谱柱精制，因而不适于工业化生产；5)使用氯仿等有毒的有机溶剂，使产品和操作不够安全；6)生产的成本较高。
第27卷第2期2007年4月林 产 化 学 与 工 业Che m istry and I ndustry of Forest Pr oductsVol.27No.2Ap r.2007中压硅胶柱层析连续纯化茶叶中EGCG及ECG的研究 收稿日期:2005-11-17 作者简介:杨磊(1964-),男,黑龙江哈尔滨人,副教授,博士,主要从事天然产物的提取分离和应用的研究工作 3通讯作者:祖元刚,博士生导师,从事植物化学和植物药研发;E2ma il:zygorl@vi 。
Y ANG Lei 杨磊1,高彦华1,祖元刚13,祖述冲2(1.东北林业大学植物药工程研究中心,黑龙江哈尔滨150040;2.东北林业大学职业技术学院,黑龙江哈尔滨150040)摘 要: 采用一种连续中压硅胶柱层析分离高纯度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)及表儿茶素没食子酸酯(ECG),原料为含量高于98%的茶多酚。
连续中压柱层析分离工艺条件为:160～280μm硅胶为填充料,1200mm×80mm的自制不锈钢中压层析柱,洗脱液为乙酸乙酯-石油醚-甲酸(体积比6∶4∶1),洗脱流速为30mL/m in,负载量为35g/kg(以硅胶计,下同),可以得到纯度大于98%的EGCG产品(平均回收率为85.5%)和98%的ECG产品(平均回收率均为80.3%)。
回收的洗脱剂先校正pH值,再经薄层层析校正后可重复使用。
使用后的层析柱用乙酸乙酯再生,石油醚为平衡剂平衡,平衡后的层析柱可重复使用。
关键词: 表没食子儿茶素没食子酸酯;表儿茶素没食子酸酯;硅胶;连续中压柱层析中图分类号:T Q91;Q949.744 文献标识码:A 文章编号:0253-2417(2007)02-0100-05Study on Successive Purificati on of Epigall ocatechin Gallate andEpicatechin Gallate by Colu mn Chr o mat ographyY ANG Lei1,G AO Yan2hua1,Z U Yuan2gang1,Z U Shu2chong2(1.Engineering Research Center of PlantM edical,Northeast Forestry University,Harbin150040,China;2.Vocati onal and Technical College,Northeast Forestry University,Harbin150040,China)Abstract:A method is described f or successive purificati on of ep igall ocatechin gallate(EGCG)and ep icatechin gallate(ECG) by mediu m2p ressure silica gel colu mn chr omat ography.The ra w material was98%tea polyphenols.The operating conditi ons of the chr omat ographic step s were investigated and op ti m ized,using1200mm×80mm stainless steel colu mn as chr omat ographic colu mn.The op ti m u m conditi on was as foll owed:160-280μm silica gel as filling material,ethyl acetate2petr oleu m ether2for m ic acid6∶4∶1as eluting s olvent,fl owing rate30mL/m in,l oading amount35g/kg silica gel.The average yields of98%EGCG and98%ECG were85.5%and80.3%,res pectively.A reclai m ed eluting s olvent can be used repeatedly,it′s pH value is first adjusted,and concentrati on rati o is then adjusted by T LC method.The chr omat ographic colu mn which was regenerated by ethyl acetate,and equilibrated with petr oleu m,can be used repeatedly.Key words:ep igall ocatechin gallate;ep icatechin gallate;silica gel;successive mediu m2p ressure colu mn chr omat ography 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)及表儿茶素没食子酸酯(ECG)是茶叶中的一类主要生物活性成分[1]。
不同pH条件下五倍子中EGCG，EGC，ECG含量测定及分析五倍子是瘿绵蚜科（Pemphigidae）五节根蚜亚科（Fordinae）某些蚜虫寄虫瘿。
五倍子别名文蛤，百虫仓，木附子等，是生在漆树科（Anacadiaceae）盐肤木属（Rhus L）几种树的复叶上形成的一类商品，五倍子有角倍类，肚倍类，花倍类。
始载于《开宝本草》，具有敛肺降火，涩肠止泻，固精缩尿，止汗，止血，解毒，敛疮等多种临床功效，以它为原料的各种产品广泛应用于医药，冶金，食品航天等领域[1-3]。
五倍子主要有效成分为鞣质，又称鞣酸。
因五倍子盛产于我国，国际上又将五倍子鞣质称为中国鞣质，它是倍酰葡萄糖的混合物，即葡萄糖上的羟基与没食子酸所形成的酯类化台物的混合物，属可水解鞣质。
五倍子的鞣质含量很高，最高可达70%以上。
1994年林余霖等测定了7种五倍子中单宁酸的含量，角倍为4901%，肚倍为6475%圆角倍为6075%，其他几种均在40%左右。
没食子酸也是五倍子中主要成分之一，在制药等工业上应用广泛，也是药物中间体，它的含量约占五倍子2%一4%。
由于含量小，工业上从五倍子获取的没食子酸主要通过五倍子鞣质的水解获得，它是我国的出口产品之一。
五倍子中还含有五倍子油。
五倍子油的主要化学成分为癸酸、月桂酸、内豆蔻酸、棕榈酸、硬腰酸、油酸、亚油酸、亚麻酸等8种；五倍子中含有多种微量元素，包括铜、锌、铁、镁、钠、钙等的化合物；此外，五倍子中还有树脂、脂肪物质、淀粉、蜡质、蛋白质等其他成分。
五倍子中化学成分现已成为研究热点，李春远等对五倍子的石油醚和氯仿提取物做了分离，一共获得10个化合物，分别为2-羟基-6-十五烷基苯甲酸、白果酚、棕榈酸-1，3-二甘油酯、β-谷甾醇、正二十五烷、3-甲氧基-4-羟基-苯甲酸、棕榈酸、月桂酸、肉豆蔻酸、没食子酸。
而五倍子中EGCG，EGC，ECG报道较少。
EGCG（表没食子儿茶素没食子酸酯），是从茶叶中分离得到的儿茶素类单体，是茶多酚生物活性的主要成份。
HPLC法同时检测茶叶中八种儿茶素黑龙江医药HeilongjiangMedicineJournalV o1.24No.52011?681?药品检验?HPLC法同时检测茶叶中八种儿茶素张戎睿,王舒雅,王富济,杨磊,祖元刚,张宝友东北林业大学森林植物生态学教育部重点实验室(哈尔滨150040)摘要建立一种茶叶中多组分儿茶素的HPLC测定方法.将茶叶用80℃热水超声提取20min,提取液离心分离后,采用KromasilCI8(250mmx4.6mm,5m)色谱柱分离,以水一乙腈一磷酸(49.95:50:0.05,V:V)为流动相A,水一乙腈一磷酸(95.45:4.5:0.05,V:V)为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.5mL/min,柱温25℃,紫外检测波长231nm.在给定的浓度范围内,各儿茶素组分的峰面积与其相应浓度呈现良好的线性相关,R>0.9950.添加已知儿茶素含量的回收试验结果显示,各组分儿茶素的平均回收率为94.8%一110.8%,相对标准偏差≤2%.关键词:儿茶素;茶叶;HPLC.中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1006—2882(2011)05—681—03 SimultaneousDeterminationofEightCatechinsinChinese TeabyHighPerformanceLiquidChromatographyZhangRongrui,etalKeyLabm~toryofForestPlantEcology,MinistryofEducation,NortheastForestryUniversit y(Harbin150040,China)Abstract:Ahishperformanceliquidchromatographymethodwasdevelopedforthedetermin ationofmulticomponentcat—eclfinsinChinesetea.Catechinsintheteawereextractedwith80℃hotwaterbysonicationfor20rain.Theextractionsolu? tionwascentrifugedandfiltratedforHPLCanalysis.ItwascarriedonaKromasilC18(250m m×4.6mnl,5Ixm)Columnatthetemperatureof25cCunderUVdetectorwith231nm.Chromatographicseparationwaspe rformedbydeliveringthemobilephase,A:water—acetonitrile—phosphoricacid(49.95:50:0.05,v:v)andB:water—acetonitfile—phosphoricacid(95.45:4.5:O.05,v:v)ataflowrateof0.5mL/min.Therestfltsshowedthattheconcentrationofthecate chinsandtheirpeakareasachievedgoodlinearrelation,R2>O.9950.Therecoverieswerebetween94.8%一110.8%,andtheRSDswerebelow2%.Keywords:catechins;Chinesetea;highperformanceliquidchromatography茶多酚是从茶叶中提取的混合型抗氧化剂,是茶叶中儿茶索类物质的总称,具有明显的抗衰老,消除人体过剩的自由基…,去脂减肥,降低血糖,血脂和胆固醇],预防心血管疾病】,抑制肿瘤等药理功能】,在食品加工,医药,日用化工等领域具有重要的应用』.茶多酚的分离和应用受到国内外广泛关注引,开拓了以农副产物为原料的"绿色技术"和"绿色工程"新领域.本实验建立一种同时测定茶叶中的8种儿茶素的HPLC方法,结果表明,8种儿茶素在同一色谱条件下均得到较好分离,并可进行含量测定,为该商品的质量控制提供依据.1试剂与仪器1.1材料及试剂8种儿茶素单体化合物:儿茶素(catechin,C),表儿茶素(epicatechin,EC),没食子儿茶素(gallocateehin,GC),表没食子儿茶素(epigallocatechin,EGC),儿茶素没食子酸酯(cat—ecltingallate,CG),表儿茶索没食子酸酯(epicatechingallate,ECG),没食子儿茶索没食子酸酯(gaUoeatechingallate,GCG)和表没食子儿茶素没食子酸酯(epigaHocatechingal-late,EGCG),结构式如图1所示,其标准品均购自Sigma公司,纯度98%;乙腈,甲醇,磷酸为色谱纯,购自美国DimaTechndogyInc.公司,去离子水采用Millipore超纯水仪自制;其余试剂均为国产分析纯.龙井产地为杭州龙顶山,碧螺春产地江苏苏州,Ytl~f-J红茶产地为安徽黄山,铁观音产地为福建安溪,普洱茶产地为云南大理,购于哈尔滨茶城.第一作者:张戎睿(1986一),女,黑龙江哈尔滨人,硕士研究生,生药学及健康食品研究工作.王舒雅(1985一),女,内蒙古呼伦贝尔人,硕士研究生,生药学及健康食品研究工作. 通讯作者:祖元刚(1954一)男,教授,博士,博士生导师,植物化学和植物药研发.基金项目:"十一五"国家科技支撑计划(2006BADI8B04)资助682?黑龙江医药HeilongjiangMedicineJournalV oL24No.52011n∞碳t?"删忡∞}舯(EqIJ曲|硇Kx{p嘲时帅?}棚'叼"{氍r幅Gr.1期∞蝴口钟I蜘蹄"唰瞄0ca'g~a蕊∞'图1儿茶素分子结构1.2仪器日本Jasco高效液相色谱仪;Jasco1575型紫外检测器;Ja8eo1580型二元泵;JascoVersion6.1色谱工作站;岛津uV一260紫外分光光度计;KQ一250DB型超声波清洗器(昆山市超声波仪器有限责任公司);3K一30超速离心机(Sigma公司产品);Milli～Q超纯水仪(美国Millipore公司).2色谱条件色谱条件:色谱柱为KromasilCl8(250mill×4.6mm,5txm);检测波长:=231rim;流动相:A为水一?乙腈一磷酸(49.95:50:0.05,V:V),B为水一乙腈一磷酸(95.45:4.5:0.05,V:V),梯度洗脱程序如表1所示;柱温为25cC;流速为0.5mL/min;进样量为10p.L.儿茶素得到较好分离,如图2所示.L上n盛止土LL止L图2儿茶素标准品和茶叶提取物的色谱表l梯度洗脱流程Time(rain)010153050606580流动相A(%)1O102O2O5O5O9O90流动相B(%)9O9O8O8O5O50l01O3方法与结果3.1样品的制备取市售商品茶叶于研钵中研磨粉碎,精密称取0.5g茶叶粉末,用温度为80℃热水超声提取2Omin,取适量上清液以12,000r/min离心10min,然后取上清,用0.45/xm滤膜过滤,待测.3.2标准曲线的绘制精密称取EGCG标准品25mg用色谱甲醇定容至25 mL,制成浓度为1mg/mL标准品储备液.分别精密量取储备液0.5,1.0,2.0,4.0和8.0mL分置10mL容量瓶中,加色谱甲醇稀释至刻度,摇匀,作为标准溶液.以峰面积x对浓度Y(p,g/mL)进行线性回归,回归方程为:Y=0.0654x+ 0.O2o7,R2=0.9989.结果表明,进样浓度在68.8至689.8~.g/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系.用同样的方法得到,其他7种儿茶素的标准曲线和线性范围,如表2所示. 表2儿茶素标准曲线方程和线性范围3.3检测限LOD和定量限LOQ将浓度为0.5p.g/mL的EGCG标准品溶液用色谱甲醇稀释后进样,按信噪比3:1计,EGCG的最低检测限为o.4ng/mL,按信噪比10:1计其最低定量限为3.5ng/mL.同样的方法得到其他7种儿茶素的检测限和定量限,C,EC,GC, EGC,CG,ECG和GCG的最低检测限分别为0.5,1.8,0.5,0.7,2.1,4.6和0.7ng/mL,定量限分别为5.2,12.1,4.9,9.1,23.2,32.7和l2.4ng/mL.3.4精密度试验取标准曲线中线性范围内的低浓度90g/mI和高浓度500trg/mL的标准溶液,在上述色谱条件下,分别连续进样6次,所得到的峰面积的RSD值如表3所示.表3精密度试验及其重复性试验结果3.5回收率试验'以杭州龙井为空白基质,添加已知几茶索含量的标准品,按所述方法进行回收试验,以平均回收率表示方法的准确度,分别平行测定6份,结果如表4所示.表4回收率实验结果C5O.094.81.9100.096.72.0EC5O.O1o6.91.8100.0104.01.3黑龙江医药HeilongiiangMedicineJournalV ok24No.52011?683? EGCG50.0107.2l|2100.0110.81.63.6样品测定取不同产地的市售茶叶按3.1中的方法制备样品,用所建立的方法测定其儿茶索的含量,每个样品重复测定3次,经测定后各样品中儿茶素成份含量结果如表5所示.表5五种茶叶中的儿茶索含量注:ND一未检出4讨论由于茶叶提取液中与儿茶素保留时间相近的物质较多,为了达到基线分离的目的,必须延长保留时间,减小流动相中甲醇的量,最后选用水和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,8种几茶索均得到较好分离,成分互不干扰而且茶叶中的其他成分对儿茶索的测定基本不形成干扰J.将各种对照品溶液及供试品溶液用色谱甲醇适当稀释后,以色谱甲醇为空白,在200～400nm波长范围内扫描,供试I铺溶液及对照品溶液扫描峰形基本一致,在200—250nm 和250—3o0nm波长段有最大吸收.在波长段200—250rml内,色谱峰较多,但是色谱峰较为杂乱,分离度极差;而在波长段250～300nnl内,色谱峰峰数较多,分离度较好,并且大部分酚类组分都有较大的响应值.所以应该在波长段200—250nm内筛选检测波长.通过细致的比较分析后发现,在231nm处检测的色谱图,色谱峰数目较多,各色谱峰响应值较大,并且分离度良好,故选择231rim为检测波长[9.10].对不同品种的茶叶进行了考察,结果表明,不同品种的茶叶中儿茶素含量差别很大,其中杭州龙井中儿茶素含量最高,祁门红茶含量最低.这可能是因为茶叶受生长环境,生长时间及加工条件等因素影响的缘故In].建立了茶叶中儿茶素多组分含量测定的HPLC分析方法.通过线性试验,回收试验,精密度试验以及样品的测定,验证了方法的可行性,本方法灵敏度高,分离度好,测定结果准确可靠,为茶叶及茶饮料质量控制提供科学,有效的检测手段.参考文献[1]CaturlaN,V era—SamperE,VillalainJ,eta1.Therelationshipbe? tw~:ntheantioxidantandtheantibacterialpropertiesofgalloylated catechinsandtheslrnctureofphospholipidmodelmembranes[J].FreeRadicalBiologyangMedicine,2003,34(6):648-662.[2]WangX,SongKs,GuoQX,et以Thegalloylmoietyofgreenteacatechinsisthecriticalstructuralfeaturetoinhibitfatty—acid synthase[j].BiochemicalPharmacology,2003,66:2039—2047.[3]张冬英.邵宛芳.刘仲华,等.普洱茶功能成分单体降糖降脂作用研究[J].茶叶科学,2009,29(1):41-46.[4]ChanD,WangCY,LambertJD,etaLInhibitionofhumanliver catechol-O—-methyltransferasebyteacatechinsandtheirmetab—olites:stn~cture—activityrelationshipandmolecular—modeling studies[J].Bioct~raicalPharmacology,2005,69:1523—1531. 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2008年第27卷第5期CHEMICAL INDUSTRY AND ENGINEERING PROGRESS ·749·化工进展不同茶多酚中儿茶素的测定及柱层析法提取EGCG的比较卢涛1，兰先秋1，朱斌1，罗安林2，宋航1（1 四川大学制药与生物工程系，四川成都610065；2 四川航嘉生物科技有限责任公司，四川成都611430）摘要：应用高效液相色谱法对不同产地和不同纯度茶多酚中儿茶素的组成进行了研究，并考察了硅胶柱层析法对不同规格茶多酚中EGCG的分离纯化效果。
实验表明，茶多酚中各儿茶素单体的含量不随茶多酚纯度的升高而增加，茶多酚中各儿茶素单体的相对含量与茶多酚的产地和生产工艺有着密切的关系。
并且，针对茶多酚中不同儿茶素单体的分离纯化，应选择适当的茶多酚为原料。
关键词：茶多酚；儿茶素；EGCG；柱层析；HPLC中图分类号：O 658.1 文献标识码：A 文章编号：1000–6613（2008）05–0749–04Determination of catechins in different tea polyphenols and comparison of EGCG isolation by column chromatographyLU Tao1，LAN Xianqiu1，ZHU Bin1，LUO Anlin2，SONG Hang1（1Department of Pharmaceutical and Biological Engineering，Sichuan University，Chengdu 610065，Sichuan，China；2Sichuan Hang Jia Biological and Pharmaceutical Technology Company，Limited，Chengdu 611430，Sichuan，China）Abstract：The catechins composition of tea polyphenols with different origin areas and purities was investigated by HPLC, and the effect of silica gel column chromatography on the isolation of Epigallocatechin gallate（EGCG) from different tea polyphenols was compared. This experiment indicated that the mass of catechins in tea polyphenols did not increase with increasing purity of tea polyphenols. It was related to the origin area and techniques of tea polyphenols extraction. The right tea polyphenols must be chosen for the isolation of different catechins.Key words：tea polyphenols；catechins；EGCG；column chromatography；HPLC茶多酚（tea polyenohs，Tp）是茶叶的有效成分之一，主要由儿茶素、黄酮、酚酸、花色素4大类物质组成[1]。
