可见分光光度法测定紫甘薯总花青素含量

参考教案：紫甘薯花青素提取、纯化及鉴定食品都有一定的颜色特征,色泽的好坏直接影着消费者对食品的可接受性以及对其品质的评在食品加工业中常用的食用色素有合成色素和然色素两大类。

合成色素是由人工合成方法所制的有机色素,具有较好的稳定性,着色强度高、经使用方便等优点。

然而,随着医学毒理学和生物究的不断深人,发现曾允许使用的人工合成食用素中,大多数对人体都有不同程度的伤害,有的甚有致畸致癌致突变作用,在使用上逐渐受到限制。

天然食用色素即是源于天然资源的食用色素是从果蔬、动物及矿物质中提取得到或天然存在色素的合成复制品。

如：类胡萝卜素、花青素、醌类色素、藻蓝素等，大多数天然色素对人体无毒无害,具有维生素活性,富含人体所需的营养物质,有些还对人体有医疗保健的作用。

同时,绝大部分的天然色素着色自然,能更好地模仿天然物颜色,并具有特殊的芳香气味,添加到食品中会带来愉快的感觉,更能引起消费者的注意。

因此,研究与开发无毒的天然食用色素已成为食用色素发展的总、趋势。

花青素(Anthocyanidins)属酚类化合物中的类黄酮类，是一种水溶性色素，一般存在于植物花瓣、果实的组织中及茎叶的表面细胞与下表皮层。

其色泽随 pH不同而改变，由此赋予了自然界许多植物明亮而鲜艳的颜色。

在自然状态下，花青素在植物体内常与一个或多个葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖等形成糖苷，称为花色苷(Anthocyanin )。

现有资料表明花青素有二十余种，在植物中常见的有六种，即天竺葵色素(Pg)、矢车菊色素(Cy)、飞燕草色素(Dp)、芍药色素(Pn)、牵牛花色素(Pt)和锦葵色素(My)。

它是由一定数量的儿茶素、表儿茶素缩合而成的聚合体，其分子结构中由于含有不对称碳原子(2位或 2，3位)，因此具有旋光性。

花青素具有很强的极性，可溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮，但不溶于乙醚、氯仿、苯等。

另外，由于分子中有大量的酚羟基存在，因此具有弱酸性，可溶于碱性水溶液。

可见分光光度法测定紫甘薯总花青素含量花青素的作用：花青素是一类在自然界广泛存在的水溶性天然色素，不但可作为食用色素，还具有多种保健和医药功能.紫甘薯色素具有清除自由基、抗氧化、抗突变、降血压，改善肝机能等多种生理功能，在食品、化妆品及医药等行业有着广阔的应用前景
花青素的结构式：
常见的花青素：
目前紫薯花青素的检测方法大都仅是定性分析，主要有色谱法和紫外可见分光光度法。

花青素的测定---以紫薯中花青素之一矢车菊素为标准品绘制标准曲线
一：材料与试剂：
1，材料：市面上买的紫薯
2，试剂：(按两人做一次计算)
仪器：
操作方法：
1.式样的处理：
紫薯干粉的处理（提前）→称取2g干粉→锥形瓶→加进100ml0.1mol柠檬酸水溶液→超声30min(待定) →取澄清滤液
2.操作步骤：
弱光下称取1.35g矢车菊样品→用0.1mol柠檬酸分次定容到25ml容量瓶→移取
5ml、2ml、0ml标准溶液→在波长518nm处测定吸光值→绘制标准曲线→计算→分析结果。

四种原花青素含量测定方法比较一、本文概述原花青素（Procyanidins）是一类广泛存在于植物中的多酚类化合物，因其强大的抗氧化和生物活性，近年来在营养学、食品科学、医药学等领域受到了广泛关注。

其中，四种主要的原花青素——儿茶素（Catechin）、表儿茶素（Epicatechin）、没食子儿茶素（Gallocatechin）和表没食子儿茶素（Epigallocatechin）的含量测定对于评估食品营养价值、研究药物作用机制以及监控产品质量具有重要意义。

本文旨在比较和分析目前常用的四种原花青素含量测定方法，包括高效液相色谱法（HPLC）、紫外可见分光光度法（UV-Vis）、荧光光谱法（Fluorometry）和质谱法（MS），以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考。

通过比较这些方法的准确性、灵敏度、操作简便性以及成本效益等方面的优劣，我们期望能为科研人员和企业选择最适合的原花青素含量测定方法提供指导。

二、方法概述原花青素（Procyanidins）是一类广泛存在于植物中的多酚类化合物，具有强效的抗氧化性能，对多种疾病具有预防和治疗作用。

由于其生物活性的重要性，对原花青素含量的准确测定显得尤为重要。

目前，常用的原花青素含量测定方法主要包括高效液相色谱法（HPLC）、紫外可见分光光度法、薄层色谱法（TLC）和毛细管电泳法（CE）。

这些方法各有优缺点，适用于不同的样品类型和实验条件。

高效液相色谱法（HPLC）具有高分辨率、高灵敏度、高重现性等优点，可以同时分离和测定多种原花青素。

但是，该方法需要昂贵的仪器设备和专业的操作人员，且样品处理过程繁琐，分析时间较长。

紫外可见分光光度法是一种简便、快速的测定方法，适用于大量样品的初步筛选。

然而，该方法只能测定总原花青素的含量，无法区分不同种类的原花青素，且易受样品中其他色素的干扰。

薄层色谱法（TLC）是一种基于原花青素在薄层板上的分离和显色进行测定的方法。

紫甘薯中花青素的提取及含量的测定山东农业大学化学学院09级材化2班赵林静152********山东农业大学化学学院09级材化2班李新152********摘要用乙醇酸溶液从紫甘薯中提取花青素。

用PH示差法对提取液中花青素含量进行测定。

关键字：紫甘薯花青素PH示差法1前言：花青素又称花色素，是一种广泛存在于植物中的水溶性天然色素。

属黄酮类化合物，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。

花色苷是一种以黄酮核为基础的一类糖苷，天然花色苷配糖体的基本结构为3、5、7-三羟基-2-苯基并呋喃。

最早且最丰富的花青素的花青素是从后葡萄渣中提取的葡萄皮红，花青素作为一种天然食用色素，安全，无毒，资源丰富，而且具有一定的营养和药用价值，在视屏、化妆、医药等方面有着巨大的应用潜力。

有实验证明，花青素是迄今为止所发展的最强效的自由基清除剂。

目前对花青素的定量没有较好的方法，常用的方法是以色价或吸光度表示其相对含量，也有用花青素纯品配置不同浓度梯度制作标准曲线测定色素的含量但由于花青素的标准品很不稳定，限制了这种方法的使用。

本实验用PH示差法对紫甘薯中花青素的提取液中花青素的含量进行测定。

2 实验目的2.1掌握花青素的提取方法及其PH示差法测量花青素含量的原理2.2熟练掌握分离提纯操作方法步骤。

3 实验原理紫甘薯中含有花青素，用乙醇的酸溶液作为提取液在离心机的作用下即可得到粗的花青素提取液。

PH示差法的原理为花青素的色调和色度随PH值的不同而发生改变。

PH为1.0时，花青素以红色的2-苯基并呋喃的形式存在。

结合朗伯比尔定律可得出在两个不同PH值下，花青素溶液的吸光度差值与花青素含量成正比。

4实验仪器及试剂仪器：电子天平；钥匙；精密PH试纸；PH计；表面皿、玻璃棒；烧杯；干燥的带塞子的锥形瓶250ml(4支)；100ml容量瓶（4支）；胶头滴管；500ml试剂瓶（3支）；高速离心机、离心管（6支）；分光光度计；10ml小量筒（3支）；摇床；烧杯3支试剂：粉末状紫甘薯30g(自备)；分析纯的乙醇试剂500 ml 氯化钾20g 醋酸钠30g 去离子水1000ml 分析纯的盐酸50ml5 实验步骤5.1乙醇的酸溶液按85：15的比例将分析纯的乙醇溶液与去离子水混合，再用浓盐酸调节PH至1.0左右。

紫甘薯是甘薯特有品种类型，它不仅营养丰富，而且还富含具有显著生理功能作用的花青素类物质。

花青素，又称花色素，是自然界一类广泛存在于植物中的水溶性天然色素，属多酚类黄酮化合物［１］。

花青素的基本结构单元是２－苯基苯并吡喃型阳离子，即花色基元。

现已知的花青素有２０多种，主要存在于植物中的有：天竺葵色素（Ｐｅｌａｒｇｏｎｉｄｉｎ）、矢车菊色素或芙蓉花色素（Ｃｙａｎｉｄｉｎ）、翠雀素或飞燕草色素（Ｄｅｌｐｈｉｎｄｉｎ）、甲基花青素或芍药色素（Ｐｅｏｎｉｄｉｎ）、牵牛花色素（Ｐｅｔｕｎｉｄｉｎ）及锦葵色素（Ｍａｌｖｉｄｉｎ）。

它具有抗氧化性［２］，清除自由基［３］，抗突变及抗肿瘤［４］，减轻肝机能障碍［５，６］，预防心血管疾病和Ⅱ型糖尿病［７］等功能。

高效液相色谱法分析不同品种紫甘薯中花青素组分及其含量＊刘超，王征，李鑫，贺炜（湖南农业大学生物科学技术学院，长沙４１０１２８）摘要：利用高效液相色谱法分析不同品种紫甘薯中花青素组分及其含量。

结果表明，除川山紫不含Ｃ、Ｅ、Ｆ三种组分外，其它品种紫甘薯均含十种花青素组分；在各个品种紫甘薯中，紫Ａ４，浙紫及京薯６号花青素产率相对较高，川山紫和鄂紫花青素产率较低，紫Ａ１居中。

花青素总含量中，Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ六个组分的含量占８９％以上，对花青素总含量起主导作用。

关键词：紫甘薯；花青素；高效液相色谱＊项目资助：湖南省教育厅青年基金（０７Ｂ０３５）和湖南农业大学稳定人才基金（０５ＷＤ１１）资助课题。

作者简介：刘超（１９８２～），男，湖南长沙人，在校硕士研究生，研究方向为天然产物开发与应用。

通讯作者：王征中国食物与营养Food and Nutrition in ChinaＮｏ．８，２００８２００８年第８期法进行油脂氧化的评价是不全面和不可靠的。

因此，常常采用多种方法检测、分析，从不同的角度进行油脂氧化程度的评价。

◇参考文献［１］姚妙爱．油脂的饲用价值及其氧化酸败的防止措施．粮食加工，２００４，１：　６８－７１．［２］王宪青，余善鸣，刘妍妍．油脂的氧化稳定性与抗氧化剂．肉类研究，２００３，３：１８－２１．［３］中华人民共和国国家标准，ＧＢ２７１６－８８，ＧＢ９８４８－８８，ＧＢ９８４９－８８，ＧＢ９８５０—８８，ＧＢ８９３７－８８．［４］刘一军，俞晔．进口油脂游离脂肪酸产生及影响测定因素分析．粮食与油脂，２００１，１２：４３－４１５．［５］孙丽芹，董新伟，刘玉鹏．脂类自动氧化机理．中国油脂，１９９８，２３（５）：５６－５７．［６］谢守华．油脂的自动氧化和氧化稳定性及检测方法．四川粮油科技，１９９８，４：５３－５５．［７］周华龙，等．不饱和油脂氧化机理的研究与技术开发（ＩＩ）．中国皮革，２００３，３２（１３）：４－８．［８］韩玉莲．油脂氧化常用检测方法及其评价．中国食品卫生杂志，１９９４，６（１）：５７－６０．［９］Ｉｓｂｅｌｌ　ＴＡ．Ｏｘｉｄａｔｉｅ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ　ｉｎｄｅｘ　ｏｆ　ｖｅｇｅｔａｂｌｅ　ｏｉｌｓｉｎ　ｂｉｎａｒｙ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｗｉｔｈ　ｍｅａｄｏｗ　ｆｏａｍｏｉｌ．Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌｃｒｏｐｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ，１９９９，９：１１５－１２３．［１０］王新芳，朱沛华，孙同山，等．差示扫描量热法测定食用油脂的热氧化稳定性及氧化寿命．化学分析与计量，２００１，１０（４）：１７－１９．［１１］李久盛，王大璞，杜上鉴．油脂氧化安定性几种分析方法的比较．分析测试学报，１９９９，１８（５）：２４－２７．目前对Ⅱ型糖尿病的治疗研究也引起了世界各国的广泛关注。

花青素检测内容和方法花青素是一类具有强烈吸收红外光的化合物，广泛存在于植物中。

它们赋予了许多植物花朵、水果和蔬菜明亮的颜色。

花青素不仅可以提供视觉上的吸引力，还具有抗氧化和抗炎症等生物活性。

因此，检测花青素的含量和质量对食品、药物和其他相关领域的研究非常重要。

花青素含量的检测方法有许多种，下面将介绍一些常用的方法：1. 分光光度法：分光光度法是一种常见且简便的检测花青素含量的方法。

它基于花青素对特定波长的光有很强的吸收能力。

通过将样品溶解在适合的溶剂中，使用紫外-可见光谱仪测量吸光度，然后根据不同波长下的吸光度值来计算花青素的含量。

这种方法可以测量花青素的总含量。

2. 高效液相色谱法：高效液相色谱法（HPLC）是一种准确测定花青素含量的常用方法。

它基于为花青素分离和检测提供了高分辨能力的高效液相色谱仪。

首先，样品中的花青素会被分离出来，然后通过波长选择性检测器进行定量分析。

这种方法可以同时测量多种不同类型的花青素，并且具有高灵敏度和高选择性。

3. 液相色谱质谱联用法：液相色谱质谱联用法（LC-MS）是一种更为精确的花青素检测方法。

它将高效液相色谱与质谱技术结合起来，可以通过质谱仪的高分辨率和灵敏度来确定花青素的结构和含量。

这种方法对于复杂的样品和低浓度的花青素分析非常有用。

4. 薄层色谱法：薄层色谱法是一种简单快速的花青素分析方法。

它基于花青素在薄层色谱板上迁移的性质，并通过与特定试剂反应形成具有色素的斑点来检测花青素。

该方法不需要复杂的仪器设备，适用于初步评估样品的花青素含量。

5. 酶联免疫吸附测定法：酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种基于抗体-抗原反应的花青素检测方法。

通过使用特异性的抗体来检测花青素，可以实现高灵敏度和高选择性的分析。

这种方法对于复杂样品和低浓度花青素的检测非常有效。

总之，准确测定花青素含量对于食品、药物和化妆品等行业至关重要。

上述介绍的不同方法可以根据实际需要选择合适的进行花青素的检测。

紫甘薯花青素分析测定方法概述李乾坤;韦璐阳;梁立娟;邓友展【摘要】紫甘薯花青素具有抗氧化、抗突变、预防心脑血管疾病、抑制肿瘤细胞生长等生理功能,因此,紫甘薯花青素的分析测定成了品种选育、原材料质量控制及产品评价的必要手段.文章阐述了紫甘薯花青素的性质、分析方法,重点对样品的前处理、仪器手段进行综述.【期刊名称】《农业研究与应用》【年(卷),期】2013(000)006【总页数】5页(P47-51)【关键词】紫甘薯;花青素;分析;测定【作者】李乾坤;韦璐阳;梁立娟;邓友展【作者单位】广西壮族自治区亚热带作物研究所,南宁 530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,南宁 530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,南宁 530001;广西壮族自治区亚热带作物研究所,南宁 530001【正文语种】中文花青素类物质包括花青素、花色苷、原花青素，是一类结构相似的化合物，三者在结构上存在显著的差异，但也存在一定的联系。

花青素（anthocyanidins）又称花色素，是构成自然界花草、果实颜色的一类水溶性天然色素，常见的有18种。

花色苷（anthocyanins）又称花青素苷，是一类以花青素为配基，与一个或多个葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖等分子通过糖苷键形成的化合物，即是以花色素为配基的糖苷类化合物。

而原花青素（proanthocyanidins）又称前花青素、原花色素，是自然界中广泛存在的聚多酚类物质，主要由儿茶素的单体、二聚体、三聚体等组合而成［1］。

是以花青素为单体的聚合体的统称。

紫甘薯富含花青素类色素，紫甘薯花青素的主要成分是矢车菊素和芍药素及少量的天竺葵素，以糖苷化后的酰基化衍生物形式存在［2-3］。

也就是说紫甘薯花青素主要为花色苷类型及少量的花青素单体。

研究表明，紫甘薯花青素具有抗氧化、抗突变、预防心脑血管疾病、抑制肿瘤细胞生长等生理功能［4-5］，具有广泛的应用前景。

测定紫甘薯及制品中的花青素成了品种选育、原材料质量控制及产品评价的必要手段。

紫外可见光分光光度法原花青素
一、引言
紫外可见光分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定物质的吸收光谱，其中原花青素是一种常见的天然色素，具有广泛的应用价值。

本文将介绍紫外可见光分光光度法在原花青素分析中的应用。

二、原花青素的特性
原花青素是一种天然色素，广泛存在于植物、水果和蔬菜中。

它具有紫色或蓝色的颜色，是一种强烈的天然色素。

原花青素的分子结构中含有苯环和吡咯环，这些环结构使得原花青素具有吸收紫外和可见光的能力。

三、紫外可见光分光光度法的原理
紫外可见光分光光度法是一种常用的分析方法，它基于物质对紫外和可见光的吸收特性进行分析。

在分析原花青素时，可以使用紫外可见光分光光度法来测定其吸收光谱。

原花青素在紫外和可见光区域都有吸收峰，其中最大吸收峰位于紫外区域，波长为280nm左右。

四、紫外可见光分光光度法在原花青素分析中的应用
紫外可见光分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定原花青
素的含量。

在分析原花青素时，可以使用紫外可见光分光光度法来测定其吸收光谱。

通过测定原花青素在280nm处的吸光度，可以计算出其浓度。

此外，还可以通过比较不同样品的吸光度值来确定原花青素的含量。

五、结论
紫外可见光分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定原花青素的含量。

通过测定原花青素在280nm处的吸光度，可以计算出其浓度。

此外，还可以通过比较不同样品的吸光度值来确定原花青素的含量。

紫外可见光分光光度法在原花青素分析中具有广泛的应用价值，可以为相关领域的研究提供有力的支持。