合成dna的原料
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dna合成方法DNA合成方法DNA合成是一种重要的生物技术方法,它可以合成具有特定序列的DNA分子。
DNA合成技术的发展为基因工程、合成生物学以及其他生物学研究提供了强有力的工具。
本文将介绍几种常见的DNA 合成方法。
一、化学合成法化学合成法是最常用的DNA合成方法之一。
它基于化学合成原理,通过逐个添加核苷酸单元来构建目标序列的DNA分子。
合成时,先将核苷酸单元与保护基团连接,然后通过去保护反应去除保护基团,再与下一个核苷酸单元连接。
重复这一过程直至合成目标序列。
最后,通过脱保护反应去除所有保护基团,得到纯净的DNA产物。
化学合成法的优点是合成速度快、效率高,适用于合成短序列的DNA分子。
然而,该方法对于长序列的DNA合成存在困难,因为长序列的合成过程中易产生错误和杂质。
二、酶法合成酶法合成是另一种常见的DNA合成方法。
该方法利用DNA聚合酶酶活性,在模板DNA的引导下,逐个加入适配体和核苷酸单元,最终合成目标序列的DNA。
酶法合成具有高度特异性和准确性,可以合成长序列的DNA分子。
酶法合成的关键是选择适当的DNA聚合酶和引物。
DNA聚合酶的选择应根据合成的DNA序列和要求来确定,以确保合成的准确性和效率。
引物的设计也是酶法合成的关键步骤,它应与目标序列的两端互补,以确保合成的DNA分子的准确性和完整性。
三、聚合酶链反应法聚合酶链反应(PCR)是一种常用的DNA合成方法,它能够在体外扩增目标DNA序列。
PCR利用DNA聚合酶的酶活性,在不断循环的高温和低温条件下,逐渐扩增目标序列的DNA。
PCR的原理是通过引物的选择,将DNA模板的两端限定在目标序列之间。
在PCR循环的高温条件下,DNA双链被解旋成两条单链。
然后,在低温条件下,引物与目标序列的两端互补结合,DNA聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链。
重复这一循环可以扩增目标序列的DNA。
PCR具有高度特异性和高效性,可以在短时间内扩增大量的目标DNA。
第一部分:各章要点第一章:蛋白质的结构与功能一、蛋白质元素组成特点,氨基酸的结构通式、分类与结构特点。
二、蛋白质一级结构和空间结构的概念,作用力,主要形式和基本特点,特别是二级结构α-螺旋和β-折叠的特点。
三、熟悉蛋白质重要的理化特性及其与医学的关系,了解蛋白质分离的纯化及测定的基本方法。
第二章:核酸的结构与功能一、核酸的分类、分布,掌握种类核酸的功能。
二、核酸的元素组成特点,熟悉核苷酸的分类和结构特点。
掌握DNA和RNA分子组成的异同,了解体内重要的二磷酸核苷、三磷酸核苷以及环化核苷酸的结构和意义。
三、熟悉单核苷酸之间的联结方式、作用力。
掌握DNA的一级结构,了解其表示方法,掌握DNA双螺旋结构的要点和意义,了解其高级结构;熟悉三种RNA的基本特点,掌握mRNA的一级结构特点和意义,掌握tRNA 的二级结构特点和意义。
四、熟悉核酸的性质及相关的重要概念,掌握DNA的此外吸收特性和DNA变性、复性及分子杂交的原理和应用。
第三章:酶一、酶的概念、本质及酶促反应的特点。
二、酶原的概念和酶原激活的化学本质。
掌握同工酶的概念及意义,掌握变构酶的概念,了解变构调节的酶促反应动力学特点及意义。
第四章:糖代谢一、糖酵解途经的反应过程、掌握反应部位、重要的酶的ATP的变化;掌握糖解和有氧氧化的概念、过程、特点和意义,熟悉他们的调节方式;了解磷酸戊糖途径概念,过程。
掌握其关键酶和意义。
二、糖异生的概念,器官,原料和基本过程,熟悉关键酶、调节及生理意义。
三、掌握血糖的概念,正常值,血糖的来源与去路,激素对血糖浓度的调节;熟悉血糖测定,糖耐量试验及其临床意义,了解糖尿病患者糖代谢紊乱发生的机制。
第五章:脂类代谢一、甘油的氧化分解,糖异生以及合成脂类的过程、特点和意义。
二、脂肪酸β-氧化的过程和意义,了解其他氧化方式;初步掌握酮体的概念,代谢,生理意义。
三、掌握必须脂肪酸的概念,了解多不饱合酸重要的衍生物及功能。
四、磷脂的概念,分类和结构,了解其合成部位,原料,过程及CTP在其中的作用,熟悉甘油磷脂分解代谢有关的酶及作用。
PCR培训班考试试题一、选择题(共20题,每题2分)1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是( A )①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA ⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为( D )A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为( D)A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为( B)A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增( C )A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是(A )A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在( A )保存。
A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于( D )。
A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的基本反应过程包括(A )A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中,基因扩增实验室污染类型包括( D )A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明( A )A、1983B、1971C、 1987D、199312、Taq DNA聚合酶酶促反应最快最适温度为(C )A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要( D )A、Taq DNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中,经过n个循环的扩增,拷贝数将增加( C )A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是( A )A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则( A )A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括( D )A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利,而且改进了检测细菌和病毒的方法。
人工合成dna的方法
DNA合成是将核苷酸单元连接起来形成人工DNA的过程。
它可以通过化学合成的方法来完成。
人工合成DNA的方法通常涉及到在化学合成中使用保护基,使得核苷酸单元可以在不影响其他部分的情况下进行连接。
以下是人工合成DNA的步骤:
## 步骤1:设计DNA序列
在开始合成之前,需要设计人工DNA的序列。
这通常是通过计算机算法或基因编辑技术完成的。
设计后,需要将序列上传到DNA合成公司的在线平台。
## 步骤2:化学合成
在合成过程中,核苷酸单元会逐个地添加到保护基上,形成DNA链。
这个过程需要在合成器中进行,这些合成器可以在DNA合成公司中找到。
在这个过程中,需要保证每个核苷酸单元都正确地添加到DNA 链中。
## 步骤3:去除保护基
完成DNA链的合成后,需要去除保护基,以便进行下一步。
这个过
程需要在化学反应中进行。
在去除保护基的过程中,需要注意避免DNA链的断裂。
## 步骤4:纯化
完成去除保护基后,需要对人工DNA进行纯化。
这个过程可以通过柱层析、电泳或其他纯化技术来完成。
纯化后的DNA可以在后续实验中使用。
## 步骤5:质量检测
最后,需要对人工DNA进行质量检测,以确定其是否符合预期。
这个过程通常涉及到PCR、测序或其他分子生物学技术。
人工合成DNA的方法是一个复杂的过程,需要高度的技术和专业知识。
但是,它已经成为了现代生命科学中不可或缺的工具,可以用于研究基因功能、开发新药物和设计生物工程系统。
1.DNA分子由两条脱氧多核苷酸链组成,两条链通过碱基之间的相连,碱基配对原则是和间有三个氢键,和有两个氢键。
2.核酸是由许多通过键连接起来的多核苷酸链,核酸分子完全水解可得到, , 。
DNA中的碱基是RNA中的是。
DNA中的戊糖是RNA中的戊糖是。
3.RNA链可局部盘曲成结构,tRNA的二级结构为型结构,由, , , 和。
tRNA的氨基酸臂3′-末端最后三个碱基是tRNA反密码环中有三个相连的单核苷酸组成。
氨基酸臂的功能是,反密码环的功能是。
tRNA 的三级结构为型结构。
4.组成DNA的基本单位是, , , 。
5.组成RNA的基本单位是, , , 。
6.核酸分子中含有和,所以对波长有强烈吸收。
7.DNA双螺旋结构的稳定性横向靠维系,纵向则靠维系。
8.DNA变性时断裂。
在260nm处的吸光度,出现。
9.生物细胞中主要含有三种RNA,其中含量最多的是、种类最多的是、含有稀有碱基最多的是。
半衰期最短的RNA 是,既含外显子又含内含子的RNA是含量最少的RNA是。
10.rRNA在蛋白质生物合成中起的作用。
11.嘌呤核苷的糖苷健是12.嘧啶核苷的糖苷键是13.核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分是14.成熟的mRNA由经剪接后形成,其上有和序列,5′-末端有结构,3′-末端有。
15.可作为第二信使的核苷酸是和。
16.DNA解链温度(Tm)是指。
DNA的Tm值的大小与其分子中所含的的种类、数量及比例关系有关。
若含有A-T配对较多则Tm 、含有G-C配对较多则Tm 、分子越大则Tm 。
17.作为蛋白质的氨基酸序列合成模板的是,负责转运氨基酸的是需与蛋白质共同构成核糖体的RNA是。
18.嘌呤核苷酸合成的原料和、、提供其分子中全部N和C原子合成嘌呤环的氨基酸是,嘌呤核甘酸从头合成时首先生成的是,嘧啶核苷酸合成的原料、和。
共同原料是、和。
脱氧核糖核苷酸生成方式主要是。
19. 尿嘧啶和胞嘧啶分解代谢的产物是、和;胸腺嘧啶分解代谢的产物是、和。
DNA复制复习题DNA的复制一级要求单选题1. 1958年Meselson和Stahl利用15N及14N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制?ADNA能被复制BDNA基因可转录为mRNACDNA基因可表达为蛋白质DDNA 的半保留复制机制EDNA的全保留复制机制D2. DNA以半保留方式进行复制,若一完全被标记的DNA分子,置于无放射标记的溶液中复制两代,所产生的四个DNA分子的放射性状况如何?A两个分子有放射性,两个分子无放射性B均有放射性C两条链中的半条具有放射性D两条链中的一条具有放射性E均无放射性A3.如果缺乏下列酶之一,复制叉上一个核苷酸也加不上去。
这是哪一种酶?A DNA酶合酶Ⅰ(聚合活性)B DNA聚合酶Ⅰ(5’→3“核酸外切酶活性)C DNA聚合酶ⅢD DNA连接酶E DNA聚合酶ⅡC4.出现在DNA中的胸腺嘧啶二聚体作为一种突变结果能产生下列哪种作用?A并不终止复制B由一组包括连接酶在内的酶系所修复C按移码突变阅读D 由胸腺嘧啶二聚酶所催化E两股互补核苷酸链上胸腺嘧啶之间形成共价键B5. DNA复制时下列哪一种酶是不需要的?ADNA指导的DNA聚合酶BDNA指导的RNA聚合酶C连接酶DRNA指导的DNA聚合酶E螺旋酶(heliease)、拓朴异构酶(topoisomerase)及回旋酶(gyrase)D6.下列关于DNA的复制的叙述哪一项论述是错误的?A有DNA指导的RNA聚合酶参加B有RNA指导的DNA聚合酶参加C为半保留复制D以四种dNTP为原料E有DNA指导的DNA聚合酶参加B7. DNA复制时,序列5“-TpApGpAp-3“将合成下列哪种互补结构?A5“-TpCpTpAp--3“B5“-ApTpCpTp--3“C5“-UpCpUpAp--3“D5“-GpCpGpAp--3“E3“-TpCpTpAp--3“A8.合成DNA的原料是AdAMPdGMPdCMPdTMPBdATPdGTPdCTPdTTPCdADPdGDP dCDPdTGPDATPGTP CTPUTPEAMPGMPCMPUMPB9.下列关于大肠杆菌DNA聚合酶I的叙述哪一项是正确的?A具有3“→5“核酸外切酶活性B具有5“→3“核酸内切酶活性C是唯一参与大肠杆菌DNA复制的聚合酶DdUTP是它的一种作用物E以双股DNA为模板A10.下列哪一项描述对于DNA聚合酶III是错误的?A催化脱氧核糖核苷酸连接到早期DNA的5“羟基末端B催化脱氧核苷酸连接到引物链上C需四种例外的5“-三磷酸脱氧核苷D可以双链DNA为模板E焦磷酸是反应的产物A11.下列关于原核和真核生物DNA复制的描述中哪一项是不正确的?A以复制叉定点复制,通常为双向等速复制B复制方向为5“→3“C 前导链和随从链都是不持续复制D必有冈崎片断,必须切去引物E最后由DNA连接酶连接C12. DNA连接酶A使DNA形成超螺旋结构B使双螺旋DNA链缺口的两个末端连接C合成RNA引物D将双螺旋解链E去除引物,填补空缺B13. DNA连接酶在下列哪一个过程中是不需要的?ADNA复制BDNA修复CDNA断裂和修饰D制备重组DNAEDNA复制、修复及重组C14. DNA中胸腺嘧啶二聚体的切除修复为A经核酸外切酶水解碱基和脱氧核糖之间的糖苷键,从而除去胸腺嘧啶二聚体B经核酸内切酶水解与二聚体相对的DNA链中多个磷酸二酯键C 从两股链中各除去一段DNA,包括二聚体D从有损伤的DNA链上除去一段DNAEDNA聚合酶进入受损链的空隙中对DNA进行修复使之连接D15.生物体系下列信息传递方式中哪一种还没有确实证据?ADNA→RNABRNA→蛋白质C蛋白质→RNADRNA→DNAE以上都不是C16.将DNA核苷酸顺序的信息转变成为氨基酸顺序的过程包括A 复制B转录C反转录D翻译E转录及翻译E17.需要以RNA为引物的体内代谢过程是A体内DNA复制B转录CRNA复制D翻译E反转录A18. DNA复制时,以序列5“-TpApGpAp-3“为模板合成的互补结构是A 5’-pTpCpTpA-3’B 5’-pApTpCpT-3’C 5’-pUpCpUpA-3’D 5’-pGpCpGpA-3’E 3’-pTpCpTpA-5’A19.与xx的生成有关的代谢是A半保留复制B半不持续复制C不对称转录D RNA的剪接E蛋白质的修饰B20.在DNA复制xxRNA引物的作用是A使DNA聚合酶Ⅲ活化B使DNA双链解开C提供5’末端作合成新DNA链起点D提供3’OH作合成新DNA链起点E提供3’OH作合成新RNA链起点C21. DNA复制起始时,参与从超螺旋结构解开双股链的酶或因子是A解链酶B拓扑异构酶IC DNA结合蛋白D引发前体E拓扑异构酶ⅡA22.端粒酶的性质是一种A DNA聚合酶B RNA聚合酶C DNA水解酶D反转录酶E连接酶D23.关于DNA复制中DNA聚合酶的作用,错误的是A底物是dNTP B必须有DNA模板C合成方向只能是5“→3“D需要ATP和Mg+参与E使DNA双链解开24.关于大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的说法,错误的是A催化dNTP连接到DNA片段的5“羟基末端B催化dNTP连接到引物链上C需要四种例外的dNTP为作用物D是由多种亚基组成的不对称二聚体E在DNA复制中链的延长起主要作用25.下列对大肠杆菌DNA聚合酶的叙述,不正确的是A DNApol I可分为大小两个片段B DNApolⅡ具有3’→5’的外切酶活性C DNApolⅢ在复制链延长中起主要作用D DNApolⅢ由四个亚基组成E以四种脱氧核苷作为作用物26. DNA复制引发过程的叙述,错误的是A引发过程有引发酶及引发前体参与B引发酶是一种分外的RNA聚合酶C随从链的引发较前导链的引发要简单D引发前体含有多种蛋白质因子E引发前体与引发酶可联合装配成引发体并解离27.原核生物DNA复制错误率低的原因中,解释错误的是A DNApol I具有3’→5’外切酶活性B DNApol I具有5’→3’外切酶活性,C DNApol I及Ⅲ均具有内切酶活性D DNApolⅢ具有3’→5’外切酶活性E DNApol I及Ⅲ均具有3’→5’外切酶活性28.关于DNA复制中连接酶的叙述,错误的是A催化相邻的DNA片段以5’, 3’-磷酸二酯键相连B连接反应需要ATP或NAD+参与C催化相邻的DNA片段以3’,5’—磷酸二酯键相连D参与随从链的生成E催化反应中首先与ATP生成中间体29.xx是指A DNA模板上的DNA片段EADCCAB随从链上合成的DNA片段C前导链上合成的DNA片段D引物酶催化合成的RNA片段E由DNA连接酶合成的DNA B30.下列过程中需要DNA连接酶的是A DNA复制B RNA转录C DNA断裂和修饰D DNA的甲基化E DNA的乙酰化A31. DNA复制时,不需要下列何种酶的参与A DNA指导的DNA聚合酶B DNA连接酶C拓扑异构酶D解链酶E限制性内切酶E32. DNA复制时,子代DNA的合成方式是A两条链均为不持续合成B两条链均为持续合成C两条链均为不对称转录合成D两条链均为3’→5’合成E一条链5’→3’,另一条链3’→5’合成D33.辨认DNA复制起始点主要依靠的酶是A DNA聚合酶B DNA连接酶C引物酶D拓扑异构酶E解链酶C34.关于DNA的半不持续合成,错误的说法是A前导链是持续合成的B随从链是不持续合成的C不持续合成的片段是冈崎片段D前导链和随从链合成中有一半是不持续合成的E随从链的合成迟于前导链的合成D35.前导链为持续合成,随从链为不持续合成,生命科学家习惯称这种DNA 复制方式为A全不持续复制B全持续复制C全保留复制D半不持续复制E以上都不是D36.比较真核生物与原核生物的DNA复制,二者的相同之处是A 引物长度较短B合成方向是5’→3’C冈崎片段长度短D有多个复制起始点E DNA复制的速度较慢(50nt/s)B37.参与原核DNA复制的酶是A DNAPolαB DNAPol IC DNAPolγD DNAP olδE DNAPolⅢE38.参与原核DNA修复合成的酶是A DNAPolαB DNAPol IC DNAPolγD DNAPolδE DNAPolⅢB39.大肠杆菌对紫外照射形成的损伤所进行的修复是A重组修复B UvrABCC SOS修复D DNA甲基化修饰E端粒酶B40.减少染色体DNA端区降解和缩短的方式是A重组修复B UvrABCC SOS修复D DNA甲基化修饰E端粒酶E41.真核生物染色体中具反转录作用的是A反转录酶B端粒酶C末端转移酶D反转录病毒E噬菌体病毒B42.在DNA复制中,催化去除引物,补充空隙的酶是A甲基转移酶B连接酶C引物酶D DNA Pol IE末端转移酶D43.催化DNA中相邻的5’磷酸基和3’羟基形成磷酸二酯键的酶是A甲基转移酶B连接酶C引物酶D DNA Pol IE末端转移酶B44.在DNA复制中,催化合成引物的酶是A甲基转移酶B连接酶C引物酶D DNA Pol IE末端转移酶C二级要求45.着色性干皮病是人类的一种遣传性皮肤病,该病的分子基础是A 细胞膜通透性缺陷引起迅速失水B在阳光下使温度敏感性转移酶类失活C受紫外线照射诱导了有毒力的前病毒D细胞不能合成类胡萝卜素型化合物EDNA上胸腺嘧啶二聚体的切除修复系统有缺陷E46.与DNA修复过程缺陷有关的疾病是A着色性干皮病B卟啉病C黄疸D黄嘌呤尿症E痛风A47.下列关于哺乳动物DNA复制特点的描述哪一项是错误的?ARNA引物较小B冈崎片断较小CDNA聚合酶α、β、γ参与D仅有一个复制起点E片断连接时,由ATP供给能量D48.下列关于限制性内切酶的叙述哪一项是错误的?A它能识别DAN特定的碱基顺序,并在特定的位点切断DNAB切割点附近的碱基顺序大凡呈回纹结构C它能专一降解经甲基化修饰的DNAD是重组DNA的严重工具酶E主要从细菌中获得C49. DNA复制需要:(1)DNA聚合酶III,(2)解链酶(3)DNA聚合酶I,(4)DNA指导的RNA聚合酶,(5)DNA连接酶参加,其作用的顺序是:A4,3,1,2,5B2,3,4,1,5C4,2,1,5,3D4,2,1,3,5E2,4,1,3,5E50.关于真核生物DNA聚合酶的说法错误的是A D NApolα与引发酶共同参与引发作用B DNApolδ催化链的生成C DNApolpβ催化线粒体DNA的生成D PCNA参与DNApolδ的催化作用E真核生物DNApol有α、β、γ、δ和ε5种C51.DNA复制需要①解链酶②引物酶③DNA聚合酶④拓扑异构酶⑤DNA 连接酶。
一分子磷酸,一分子脱氧核糖(戊糖),一分子碱基合成一分子脱氧核糖核苷酸,然后再合成许多脱氧核糖核苷酸以合成DNA。
1.物理性质:DNA是高聚物,DNA溶液是高粘度的聚合物溶液,可以被甲基绿染成绿色。
DNA可以吸收紫外线(260nm),可用于确定DNA的含量。
当核酸变性时,吸光度增加,这称为增色效应。
变性的核酸复性后,吸光度将恢复到原始水平。
高温,有机溶剂,酸碱试剂,尿素,酰胺等可能导致DNA分子变性,即DNA双链碱基与双螺旋结构解开之间的氢键断裂-也称为DNA de helix。
2.分子结构:DNA是由许多脱氧核苷酸组成的长链,这些脱氧核苷酸在一定碱基序列中通过3',5'-磷酸二酯键相互连接。
大多数DNA包含两条这样的长链,其中一些是单链的,例如大肠杆菌噬菌体φX174,G4,M13等。
DNA可以分为环状DNA和链DNA。
在某些类型的DNA中,5-甲基胞嘧啶可以在一定程度上替代胞嘧啶,尤其是在小麦胚芽DNA中。
在某些噬菌体中,5-羟甲基胞嘧啶取代了胞嘧啶。
在1940年代后期,Chargaff发现不同物种的DNA的碱基组成比不同,但腺嘌呤的数量等于胸腺嘧啶的数量(a = t),鸟嘌呤的数量等于胞嘧啶的数量(g = C)。
因此,嘌呤数之和等于嘧啶数之和。
通常,使用几种水平来描述DNA的结构。
3.分布功能:原核细胞的染色体是长的DNA分子,但原核细胞没有真正的细胞核。
真核中有一个以上的染色体,每个染色体仅包含一个DNA分子。
但它们通常比原核生物中的DNA分子大,并与蛋白质结合。
DNA分子的功能是存储决定一个物种所有蛋白质和RNA结构的所有遗传信息。
计划时间和空间,以有序地合成细胞和组织成分;确定从生物生命周期开始到结束的活动并确定生物个性。
除了染色体DNA,真核细胞的线粒体和叶绿体中还存在少量具有不同结构的DNA。
DNA病毒的遗传物质也是DNA。
第二章核酸化学.三、典型试题分析1. 下列几种DNA分子的碱基组成比例不同,哪一种DNA的Tm值最低(1999年生化试题)A. DNA中A-T占15%B.DNA中G-C占25%C. DNA中G-C占40%D.DNA中A-T占80%E. DNA中G-C占55%[答案] D2. 核酸的各基本单位之间的主要连接键是(2000年生化试题)A.二硫键B.糖苷键C.磷酸二酯键D.肽键E,氢键[答案) C3.DNA的二级结构是:A.α—螺旋B.β-片层C.β—转角D.超螺旋结构E,双螺旋结构[答案) E4. DNA的热变性特征是A. 碱基间的磷酸二酯键断裂B.一种三股螺旋的形成C.黏度增高D.融解温度因G-C对的含量而异E.在260nm处的光吸收降低[答案] D5. 下列关于DNA碱基组成的叙述,正确的是A. 不同生物来源的DNA碱基组成不同B,同一生物不同组织的DNA碱基组成不同C. 生物体碱基组成随着年龄变化而改变D.A和C含量相等E.A+T=G+C[答案] A6,DNA受热变性时(士998年硕士研究生入学考试题)A. 在260nm波长处的吸光度下降B,多核苷酸链断裂成寡核苷酸链 C. 碱基对可形成氢键D,加入互补RNA链,再冷却,可形成DNA/RNA杂交分子E. 溶液黏度增加[答案] D7,在核酸中占9%"-11%,且可用之计算核酸含量的元素是(1997年硕士研究生入学考试题)A. 碳B,氧C.氮D.氢E.磷[答案] E8,下列关于B-DNA双螺旋结构模型的叙述中哪一项是错误的?A. 两条链方向相反B,两股链通过碱基之间的氢键相连C.为右手螺旋,每个螺旋为10个碱基对D.嘌呤碱和嘧啶碱位于螺旋外侧E.螺旋的直径为20A[答案) D四、测试题(一)A型题1.从小鼠的一种有荚膜的致病性肺炎球菌中提取出的DNA,可使另种无荚膜、不具有致病性的肺炎球菌转变为有荚膜并具致病性的肺炎球菌A.DNA是遗传物质,蛋白质是遗传信息的体现者B,DNA是遗传信息的体现者,蛋白质是遗传物质C.DNA与蛋白质均是遗传物质D.RNA是遗传物质,DNA和蛋白质是遗传信息的体现者E.DNA和蛋白质是遗传物质,RNA是遗传信息的体现者2.核酸中一般不含有的元素是A.C B.H C.O D.P E,S3,在核酸中占9%'--11%且可用之计算核酸含量的元素是A.C B.H C.O D.P E.S4.A(腺嘌呤)与G(鸟嘌呤)在结构上的差别是A,A的C6上布羟基,G的C6上有氨基B.A的C6上有羟基,G的C2上有甲基C,A的C6上有甲基,G的C6上有羰基D.A的C2上有氨基,G的C2上有羟基E.A的C6上有氨基,G的C2上有氨基5,T(胸腺嘧啶)与U(尿嘧啶)在结构上的差别是A.T的C2上有氨基,U的C2上有O ·B.T的C5上有甲基,U的C5上无甲基C.T的C4上有氨基,U的C4上有OD.T的Cl上有羟基,U的C1上无羟基E.T的C5上有羟甲基,U的C5上无羟甲基6,通常既不见于DNA又不见于RNA的碱基是A. 腺嘌呤B.黄嘌呤巳鸟嘌呤D,胸腺嘧啶E,尿嘧啶7,自然界游离核苷酸中的磷酸最常位于A. 戊糖的C-2’上B.戊糖的C-3’上C.戊糖的C-5’上D.戊糖的C-2’及C-3’ E. 戊糖的C-2’及C-5’上8,假尿嘧啶核苷的糖苷键是·A.C-C键B.C-N键C.N-N键D.C-H键E.N-H键9,核苷酸中碱基(N)、戊糖(R)和磷酸(P)之间的连接关系是A. N-R-PB. N-P-RC. R-N-PD.P-N-R E.R-P-P-N10,脱氧胸苷的英文简写符号为A.AdR B,CdR C.UdR D. TdR E. CdR11,CR表示A. 脱氧胞苷B.胞苷 C. 腺苷D.脱氧腺苷E,脱氧核糖12,含有稀有碱基较多的核酸是A.rRNA B.tRNA C.mRNA D.hnRNA E。
生物化学复习资料一、单项选择题1.样品中氮的含量是4g,此样品中蛋白质的含量是(25g)2.关于肽键的叙述,错误的是(肽键旋转而形成了β—折叠)3.下列有关蛋白质一级结构的叙述,错误的是(包括各原子的空间位置)4.维系蛋白质二级结构稳定的化学键是(氢键)5.蛋白质α—螺旋的特点是(氨基酸侧链伸向螺旋外侧)6.关于蛋白质二级结构错误的是(整条多肽链中全部氨基酸的空间位置)7.关于蛋白质三级结构的描述错误的是(具有三级结构的多肽链都有生物学活性)8.每种完整蛋白质分子必定具有(三级结构)9.关于蛋白质四级结构叙述正确的是(蛋白质亚基间通过共价键聚合)10.蛋白质溶液的稳定因素是(蛋白质表面带有水化膜和电荷层)11.蛋白质变性伴随的结构改变是(次级键断裂)12.白蛋白【PI为4.7】在(PH4.0)的溶液中带正电荷13.核酸中核苷酸之间的连接方式是(3’,5’—磷酸二酯键)14.DNA双螺旋结构模型的叙述正确的是(A+G与C+T的比值为1)15.关于RNA的说法错误的是(细胞质中只有一种RNA,即mRNA)16.真核生物的mRNA(有帽子结构和多聚A尾巴)17.DNA的T是指(50%DNA变性时的温度)18.tRNA的结构特点不包括(5’末端具有特殊的帽子结构)19.有关tRNA分子正确的描述是(tRNA3’末端有氨基酸臂)20.DNA变性是指(互补碱基之间的氢键断裂)21.关于辅助因子叙述错误的是(决定酶促反应的特异性)22.决定酶促反应的特异性的是(酶蛋白)23.有关酶活性中心不正确的是(活性中心这是必需基团起作用而与整个酶分子无关)24.有关酶活性中心正确的是(所有酶都要有活性中心)25.酶具有催化活性的结构基础是(有空间构象)26.酶与一般催化剂的相同点(降低反应的活化能)27.酶催化反应的机制是(降低反应的活化能)28.酶的特异性是指(对催化底物的选择性)29.关于KM的叙述错误的是(与酶催化的底物无关)30.关于温度与酶促反应速度关系的叙述错误的是(最适温度是酶的特征性常数)31.关于温度与酶促反应速度关系的叙述正确的是(最适温度不是酶的特征性常数,延长反应时间,其最适温度降低)32.有关酶与温度的关系,错误论述是(酶是蛋白质,即使反应的时间很短,也不能提高反应温度)33.关于酶的抑制剂叙述正确的抑制剂的论述,错误的是(除去抑制剂后,酶活性可恢复)34.有关竞争性抑制剂的论述,错误的是(抑制程度至于抑制剂的浓度有关)35.竞争性抑制剂存在时,酶促反应动力学的特点是(Km↑,Vmax不变)36.磺胺类药物的类似物是(对氨基苯甲酸)37.关于酶原及其激活的叙述错误的是(体内所有的酶均有酶原形式)38.酶原没有酶活性的原因是(活性中心未形成或未暴露)39.引起酶原的激活方式是(由部分肽键断裂,酶分子空间构象)40.关于糖酵解的正确描述是(在胞浆中进行)41.缺氧时为机体提供能量的是(糖酵解途径)42.丙酮酸脱氧复合体中不包括(生物素)43.肌糖原分解不能直接补充血糖的原因(肌肉组织缺乏葡萄糖-6-磷酸酶)44.(胰岛素)是血糖浓度下降45.氧化物和CO中毒时被抑制的细胞色素【CYT】是(Cytoa3)46.呼吸链位于(线粒体内膜)47.关于氧化呼吸链的叙述,错误的是(递电子体必然也是递氢体)48.ATP生成的主要方式是(氧化磷酸化)49.有琥珀酸脱下的一对氢,经呼吸链氧化可产生(1.5分子ATP和1分子水)50.心肌细胞液的NDAH进入线粒体主要通过(苹果酸—天冬氨酸穿梭)51.肌肉组织中能量贮藏的主要形式是(磷酸肌酸)52.胞液NADH经苹果酸—天冬氨酸穿梭进入线粒体发生氧化磷酸化,生成ATP数量是(2,5分子ATP)53.在调节氧化磷酸化作用中,最主要的因素([ATP]/[ADP])54.长期饥饿后血液中(酮的含量增加)55.脂肪大量动员时肝内生成的乙酰辅酶A主要转变为(酮体)56.脂肪动员的限速酶是(激素性敏感性限速酶)57.脂肪酸分解的限速酶(肉碱限制酶转移酶Ι)58.脂肪酸β—氧化过程(脱氢、加水、在脱氢、硫解)59.关于1分子软脂酸【16C】彻底氧化的叙述正确的是(可产生8分子乙酰COA)60.关于酮体的叙述错误的是(肝脏生成酮体,也可利用酮体)61.酮体叙述错误的是(酮体生成过多可导致酸中毒,因此是异常代谢)62.肝脏生成乙酰乙酸的直接前体是(HMGCOA)63.(肉碱)不参与脂肪酸的合成64.肉碱的作用(转运酯酰COA)65.甘油三酯合成时,脂肪酸的活化形式是(酯酰COA)66.胆固醇甾体类的主要去路是(转变胆汁酸)67.胆固醇合成的原料是(乙酰COA)68.胆固醇是(维生素D3)的前体69.胆固醇生物合成的限速酶(HMGCOA)70.密度最低的血浆脂蛋白(CM)71.(HDL)脂蛋白具有抗动脉粥样硬化的作用72.内源性甘油三酯主要由(VLDL)血浆脂蛋白运输73.在胆固醇逆向运转中起主要作用的血浆脂蛋白的是(HDL)74.严重饥饿时,脑组织的能量主要来自于(酮体氧化)75.鸟苷酸循环的作用是(合成尿素)76.与运载一碳单位有关的维生素是(叶酸)77.VB12缺乏,N-甲基四氢叶酸的甲基不能转交给(同型半胱氨酸)78.人体的营养非必氨基酸是(谷氨酸)79.食物蛋白的互补作用是指(几种蛋白质混合食用,提高营养价值)80.营养充足的婴儿、孕妇、恢复期的病人常保持(氮的正平衡)81.生物体内氨基酸脱氨的主要方式是(联合脱氨)82.肌肉中氨基酸脱氨的主要方式是(嘌呤核苷酸循环)83.哺乳类动物体内氨的主要去路是(在肝中合成尿素)84.体内氨的贮存以及运输的主要形式之一是(谷氨酰胺)85.由肌肉组织通过血液向肝进行转运的过程是(丙氨酸-葡萄糖循环)86.鸟氨酸循环中,合成尿素的第二分子氨来源于(天冬氨酸)87.(CO2)不属于一碳单位88.体内一碳单位的载体是(四氢叶酸)89.嘌呤核苷酸从头合成途径首先合成的是(IMP)90.嘌呤核苷酸合成的特点(在磷酸核糖焦磷酸的基础上逐步合成嘌呤核苷酸)91.嘧啶核苷酸从头合成途径首先的核苷酸为(UMP)92.痛风症是因为血液中某种物质在关节、软组织处沉淀,其成分是(尿酸)93.5-FU是(C)剪辑的结构类似物。
一、单项选择题(共30 道试题,共60 分。
)1. 真核基因表达调控的意义是A. 调节代谢,适应环境B. 调节代谢,维持生长C. 调节代谢,维持发育与分化D. 调节代谢,维持生长发育与分化E. 调节代谢,适应环境,维持生长、发育与分化2. 对tRNA的正确叙述是A. 含有较少稀有碱基B. 二级结构呈灯草结构C. 含有反密码环,环上有反密码子D. 5'-端有-C-C-A-OH E 存在细胞核,携带氨基酸参与蛋白质合成3. RNA逆转录时碱基的配对原则是A. A-CB. U-AC. C-UD. G-AE. U-T4. 真核生物遗传密码AUG代表A. 启动密码B. 终止密码C. 色氨酸密码D. 羟酪氨酸密码E. 羟蛋氨酸密码5. 大多数基因表达调控基本环节是A. 发生在复制水平B. 发生在转录水平C. 发生在转录起始D. 发生在翻译水平E. 发生在翻译后水平6. 蛋白质生物合成后加工的方式有A. 切除多肽链N端的羟蛋氨酸B. 甲硫键的形成C. 氨基残基侧链的修饰D. 改变空间结构E. 切掉部分多肽7. 一个操纵子通常含有A. 一个启动序列和一个编码基因B. 一个启动序列和数个编码基因C. 数个启动序列和一个编码基因D. 数个启动序列和数个编码基因E. 一个启动序列和数个调节基因8. 参与损伤DNA切除修复的酶有A. 核酸酶B. DNA聚合酶C. RNA指导的核酸酶D. DNA解链酶E. 拓扑异构酶9. 基因工程中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是A. DNA聚合酶B. RNA聚合酶C. DNA连接酶D. RNA连接酶E. 限制性核酸内切酶10. 肽链合成后加工形成的氨基酸是A. 色氨酸B. 蛋氨酸C. 谷氨酰胺D. 脯氨酸E. 羟赖氨酸11. 基本的基因表达()。
A. 有诱导剂存在时表达水平增高B. 有诱导剂存在时表达水平降低C. 有阻遏剂存在时表达水平增高D. 有阻遏剂存在时表达水平降低E. 极少受诱导剂或阻遏剂影响12. 现有一DNA片段,它的顺序是3'……ATTCAG……5' 5'……TAAGTA……3'转录从左向右进行,生成的RNA顺序应是A. 5'……GACUU……3'B. 5'……AUUCAG……3'C. 5'……UAAGUA……3'D. 5'……CTGAAT……3'E. 5'……ATTCAG……3'13. 紫外线照射引起DNA损伤时,细菌DNA修复酶基因表达反应性增强,此现象称为A. 诱导B. 阻遏C. 基本的基因表达D. 正反馈E. 负反馈14. 参加DNA复制的是A. RNA模板B. 四种核糖核苷酸C. 异构酶D. DNA指导的DNA聚合酶E. 结合蛋白酶15. 关于RNA转录,不正确的叙述是A. 模板DNA两条链均有转录功能B. 不需要引物C. 是不对称转录D. 链识别转录起始点E. 因子识别转录起始点16. 关于密码子,正确的叙述是A. 一种氨基酸只有一种密码子B. 三个相邻核苷酸决定一种密码子C. 密码子的阅读方向为3'?5'D. 有三种起始密码子E. 有一种终止密码子17. 根据目前认识,基因表达调控可以发生在A. 复制水平B. 磷酸化水平C. 转录后水平D. 内含子水平E. 翻译后水平18. 基本的基因表达A. 有诱导剂存在时表达水平增高B. 有诱导剂存在时表达水平降低C. 有阻遏剂存在时表达水平增高D. 有阻遏剂存在时表达水平降低E. 极少受诱导剂或阻遏剂影响19. DNA聚合酶的作用是A. 与DNA的聚合有关B. 催化DNA复制过程中链的延长C. 填补有意义链片段间的空隙D. 将DNA片断连接起来E. 催化逆转录过程中无意义链的延长20. 转录的终止涉及A. 因子识别DNA上的终止信号B. RNA聚合酶识别DNA上的终止信号C. 在DNA模板上终止部位有特殊碱基序列D. 因子识别DNA的终止信号E. 核酸酶参与终止21. 基因表达产物是A. DNAB. RNAC. 蛋白质D. 酶和DNAE. 大部分是蛋白质和某些产物,表达为RNA22. DNA复制的特点是A. 半保留复制B. 连续复制C. 在一个起始点开始,复制向两边等速进行D. B C D 复制的方向是沿模板链3'?5'E. 消耗四种NTP23. RNA聚合酶的抑制剂是A. 青霉素B. 红霉素C. 放线菌素D. 链霉素E. 利福霉素24. 一个操纵子通常含有()。
pcr需要的酶和原料
PCR需要的酶主要包括DNA聚合酶和耐高温的DNA聚合酶(Taq 酶)。
此外,还需要一些其他的酶类,例如脱氧尿嘧啶核苷三磷酸(dUTP)酶等。
这些酶的作用是促进DNA的合成和降解,以确保PCR反应的正常进行。
PCR所需的原料主要包括DNA模板、引物、脱氧核糖核酸(dNTP)等。
其中,DNA模板是PCR反应的基础,它包含目标基因的遗传信息。
引物是为了在DNA模板序列的两端特异性地结合,提供了一个新的起始点,以开始DNA的复制过程。
而dNTP则是DNA的基本组成部分,它们在DNA聚合酶的作用下逐个添加到新链中,最终形成完整的DNA 双链。
此外,PCR反应体系中还需要加入缓冲液、离子等辅助成分,以确保PCR反应的正常进行。
这些成分的作用是维持反应体系的pH值和离子浓度,为DNA的合成和降解提供适宜的环境。
总之,PCR所需的酶和原料是经过精心设计的,以确保反应的高效性和特异性。
通过这些酶和原料的作用,我们可以快速、准确地扩增特定的DNA片段,广泛应用于生物学、医学等领域。
dna酶促合成法DNA酶促合成法,也称为DNA合成酶法,是一种通过酶促反应合成DNA的方法。
该方法是通过DNA合成酶(DNA polymerase)催化DNA链的合成,经历DNA复制、转录和修复等过程,以实现DNA的合成。
DNA合成酶法通常包括以下步骤:DNA模板的制备、DNA酶的选择与准备、DNA合成反应条件的优化以及DNA合成产物的检测和应用等。
在DNA合成酶法中,首先需要准备优质的DNA模板。
DNA模板可以是从细菌、动植物等生物来源中提取的基因组DNA,也可以是经过PCR扩增得到的特定DNA片段。
DNA模板的制备需要保证其纯度和完整性,常用的方法有有机提取、酶切和凝胶电泳等。
选择合适的DNA酶对于成功进行DNA合成酶法至关重要。
DNA polymerase是一种能够催化DNA链的合成的酶,根据其来源、产地以及功能等方面的不同,可分为多个家族和亚型。
在DNA合成酶法中常用的DNA polymerase有Taq DNA polymerase、Pfu DNA polymerase和Klenow fragment等,每一种DNA polymerase都有其独特的优点和适用范围。
DNA合成反应条件的优化是确保DNA合成效率和特异性的关键。
反应体系中的缓冲液、镁离子和dNTPs等组分需要根据所用的DNA polymerase的要求进行优化。
缓冲液可以提供适宜的pH和离子强度,镁离子可以作为DNA合成酶的辅因子,而dNTPs是DNA链的合成基本单元。
DNA合成反应的温度和时间等条件也需要根据所使用的DNA polymerase进行调整。
一般而言,DNA聚合酶反应的工作温度在37至72摄氏度之间,通常在50-70摄氏度之间能够获得较好的DNA合成效果。
此外,反应时间的长短与所需合成的DNA片段长度和目标浓度等因素有关。
检测和应用DNA合成产物是DNA合成酶法的重要环节。
常用的方法包括凝胶电泳、限制酶切和测序等。
合成DNA的原料是
A.A MP、GMP、CMP、TMP
B.dADP、dGDP、dCDP、dTDP
C.d ATP、dGTP、dCTP、dTTP
D.dAMP、dGMP、dCMP、dTMP
E.ADP、GDP、CDP、TDP
正确答案:C
解析:合成DNA的原料为四种脱氧核苷酸:腺嘌呤脱氧核苷酸(dATP)、鸟嘌呤脱氧核苷酸(dGTP)、胞嘧啶脱氧核苷酸(dCTP)、胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTTP) 。
答案选C 。
脱氧核糖核酸是分子结构复杂的有机化合物。
作为染色体的一个成分而存在于细胞核内。
功能为储藏遗传信息。
DNA 分子巨大,由核苷酸组成。
核苷酸的含氮碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶及胸腺嘧啶;戊糖为脱氧核糖。
1953 年美国的沃森(James Dewey Watson)、英国的克里克与韦尔金斯描述了DNA 的结构:由一对多核苷酸链围绕一个共同的中心轴盘绕构成。
糖-磷酸链在螺旋形结构的外面,碱基朝向里面。
两条多核苷酸链通过碱基间的氢键相连,形成相当稳定的组合。
分子编码中使用的遗传指令所有已知生物的发展和运作。