分子生物学11
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分子生物学习题库与参考答案一、单选题(共49题,每题1分,共49分)1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案:D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案:B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案:D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案:B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案:A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案:A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案:B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案:B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案:A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案:A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案:B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案:B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案:C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案:B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案:B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案:D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案:C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案:D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案:C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案:C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案:C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案:B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案:B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案:D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案:C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案:A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案:C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案:C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案:D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案:D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案:C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案:C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案:C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案:A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案:C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案:B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案:B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案:B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案:D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案:C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案:D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案:D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案:A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案:B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案:A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案:D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案:C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案:D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案:B二、多选题(共35题,每题1分,共35分)1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案:BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案:G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案:BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案:EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案:B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案:G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案:AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案:G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案:G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案:B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案:G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案:CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案:B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案:ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案:G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案:G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案:D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案:AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案:BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案:G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案:G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案:F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案:C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案:CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案:G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案:B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案:E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案:D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案:ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案:ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案:AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案:C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案:F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案:CG三、判断题(共38题,每题1分,共38分)1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
9. 核蛋白体是蛋白质生物合成的场所10. tRNA是氨基酸的运载工具及蛋白质生物合成的适配器11. 蛋白质生物合成需要酶类、蛋白质因子:重要的酶类:1.氨基酰-tRNA合成酶,催化氨基酸的活化;2.转肽酶,催化核蛋白体P位上的肽酰基转移至A位氨基酰-tRNA的氨基上,使酰基与氨基结合形成肽键;并受释放因子的作用后发生变构,表现出酯酶的水解活性,使P位上的肽链与tRNA分离;3.转位酶,催化核蛋白体向mR NA3’-端移动一个密码子的距离,使下一个密码子定位于A位蛋白质因子:起始因子、延长因子、释放因子12.原核生物的肽链合成过程(一)起始:指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物的过程。
1. 核蛋白体大小亚基分离;2. mRNA在小亚基定位结合;3. 起始氨基酰-tRNA的结合;4. 核蛋白体大亚基结合。
(二)延长:指在mRNA模板的指导下,氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。
肽链延长在核蛋白体上连续循环式进行,又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle),包括以下三步:1. 进位(positioning)/注册(registration)是指一个氨基酰-tRNA按照mRNA模板的指令进入并结合到核蛋白体A位的过程。
进位需要延长因子EF-Tu与EF-Ts参与。
2. 成肽(peptide bond formation)是在转肽酶(peptidase)的催化下,核蛋白体P 位上起始氨基酰-tRNA的N-甲酰甲硫氨酰基或肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位并与A位上氨基酰-tRNA的α-氨基结合形成肽键的过程。
3. 转位(translocation) 是在转位酶的催化下,核蛋白体向mRNA的3´-端移动一个密码子的距离,使mRNA序列上的下一个密码子进入核蛋白体的A位、而占据A位的肽酰-tRNA移入P位的过程。
转位需要延长因子EF-G参与每轮循环使多肽链增加一个氨基酸残基。
名词解释:1. 断裂基因:含有内含子的基因。
2. 假基因:DNA序列与有功能的基因相似,但不能表达有功能的基因产物。
3. 沉默突变:突变的密码子编码同样的氨基酸,不会引起产物的组成和结构上的改变。
4. 无义突变:使某氨基酸的密码子变为终止密码子,导致肽链合成中断。
5. 移码突变:又称移框突变,在基因的编码区缺失或插入一个或多个核苷酸,且缺失或插入的核苷酸不是3的倍数,造成了阅读框架的改变。
6. 转座子:发生转座的DNA片段。
7. 流产合成:若δ因子未能脱离核心酶,则新合成的RNA小片段会脱离复合物而重新启动转录。
这种现象称无效合成或流产合成。
8. 启动子:是连接在基因5’端上游的DNA序列,是转录起始时RNA聚合酶识别,结合的特定部位。
9. 操纵子:由操纵基因以及紧接着的若干结构基因共同组成的一个超基因的功能单位。
其中结构基因的转录由操纵基因所控制。
10. 调控基因:通过翻译和转录产生调节蛋白,该蛋白与操纵基因相互作用,控制下游基因转录。
11. 操纵基因:指能被调控蛋白质特异性结合的一段DNA序列,位于启动子和操纵基因之间,常与启动子临近或部分重叠。
12. 阻遏蛋白:在没有调节蛋白存在时,基因是表达的,加入调节蛋白后基因表达被关闭,为负调控,其调节蛋白称为阻遏蛋白。
13. 衰减子:当mRNA开始合成后,除非培养基中完全不含色氨酸,否则转录总是提前终止,产生仅有约140nt的RNA分子。
这个区域称为衰减子或弱化子。
14. 分解物阻遏:在培养基中同时加入葡萄糖时,细菌则优先利用葡萄糖。
只有当葡萄糖耗尽时,乳糖才能诱导基因的表达。
15. 绝缘子:真核生物基因组得调控元件之一,亦为一种边界元件。
16.启动子P:转录起始时RNA聚合酶识别、结合的特定部位。
17.结构基因:编码蛋白质或功能RNA的基因。
18.操纵基因0:能被调控蛋白特异性结合的一段DNA序列。
19.调节基因:编码合成参与基因表达调控的蛋白质(调节蛋白)的特异DNA序列。
分子生物学分子生物学(Molecular Biology)是生物学的一个分支学科,主要研究生物体内分子的结构、功能、相互作用和调控机制。
分子生物学的发展推动了对于基因和蛋白质的研究,为我们对生物体内的生命活动以及人类疾病的认识提供了重要的基础。
分子生物学的研究主要是从分子层面探究生物体的组成和功能。
在分子生物学的视角下,生物体被看作是由各种复杂的分子组成的。
这些分子包括核酸(DNA和RNA)、蛋白质、细胞膜和其他生物分子。
通过研究这些分子的结构和功能,我们可以深入了解生物体内的一系列生物过程,如DNA复制、基因表达、蛋白质合成等。
在分子生物学的研究中,DNA是一个重要的研究对象。
DNA是三个硝基酸组成的核酸分子,它携带着生物体的遗传信息。
在细胞分裂过程中,DNA会通过复制过程产生两个完全相同的分子。
这种DNA的复制是生物体生长和繁殖的基础。
通过研究DNA的结构和复制机制,分子生物学家可以理解细胞遗传信息的传递和维持。
分子生物学的另一个重要研究对象是蛋白质。
蛋白质是生物体最重要的功能分子之一,它在细胞的结构、功能和代谢过程中起到了关键作用。
分子生物学研究了蛋白质的合成和调控机制,以及蛋白质在细胞内的运输、定位和降解过程。
通过研究蛋白质的结构和功能,分子生物学家可以揭示蛋白质如何参与细胞和组织的功能调节,进而理解生物体的正常生理活动和疾病的发生机制。
除了DNA和蛋白质,分子生物学还研究其他类型的分子。
例如,分子生物学研究了细胞膜的组成和运输机制,了解了细胞如何通过细胞膜与外界进行交流和物质交换。
此外,分子生物学还研究了一些小分子信号物质,如激素和信号分子,它们在细胞间的通讯和调节中扮演重要角色。
分子生物学的技术和方法也得到了快速发展。
例如,PCR(聚合酶链反应)技术可以快速复制DNA,并且已经成为了基因工程和基因诊断的关键技术。
基因测序技术则使得我们能够快速高效地获取DNA的序列信息,进一步推动了基因组学和遗传学的发展。
1、半保留复制(semiconservative replication):DNA复制时,以亲代DNA的每一股做模板,以碱基互补配对原则,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为半保留复制。
2、复制子replicon:由一个复制起始点构成的DNA复制单位。
57、复制起始点(Ori C)DNA在复制时,需在特定的位点起始,这就是一些具有特定核苷酸序列顺序的片段,即复制起始点。
24、(35)复制叉(replication fork)就是DNA复制时在DNA链上通过解旋、解链与SSB蛋白的结合等过程形成的Y字型结构称为复制叉。
3、Klenow 片段klenow fragment:DNApol I(DNA聚合酶I)被酶蛋白切开得到的大片段。
4、外显子exon、extron:真核细胞基因DNA中的编码序列,这部分可转录为RNA,并翻译成蛋白质,也称表达序列。
5、(56) 核心启动子core promoter:指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区。
(Hogness 区)6、转录(transcription):就是在DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下,按照硷基配对的原则,以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。
7、核酶(ribozyme):就是具有催化功能的RNA分子,就是生物催化剂,可降解特异的mRNA序列。
8、(59)信号肽signal peptide:常指新合成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移(定位)的N-末端的氨基酸序列(有时不一定在N端)。
9、顺式作用元件(cis-acting element):真核生物DNA中与转录调控有关的核苷酸序列,包括增强子、沉默子等。
10、错配修复(mismatch repair,MMR):在含有错配碱基的DNA分子中,使正常核苷酸序列恢复的修复方式;主要用来纠正DNA双螺旋上错配的碱基对,还能修复一些因复制打滑而产生的小于4nt的核苷酸插入或缺失。
1. 半保留复制(semiconservative replication):DNA复制时,以亲代DNA的每一股做模板,以碱基互补配对原则,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为半保留复制。
2. 复制子replicon:由一个复制起始点构成的DNA复制单位。
57. 复制起始点(Ori C)DNA在复制时,需在特定的位点起始,这是一些具有特定核苷酸序列顺序的片段,即复制起始点。
24.(35)复制叉(replication fork)是DNA复制时在DNA链上通过解旋、解链和SSB蛋白的结合等过程形成的Y字型结构称为复制叉。
3. Klenow 片段klenow fragment:DNApol I(DNA聚合酶I)被酶蛋白切开得到的大片段。
4. 外显子exon、extron:真核细胞基因DNA中的编码序列,这部分可转录为RNA,并翻译成蛋白质,也称表达序列。
5.(56) 核心启动子core promoter:指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区。
(Hogness区)6. 转录(transcription):是在 DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下,按照硷基配对的原则,以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。
7. 核酶(ribozyme):是具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂,可降解特异的mRNA序列。
8.(59)信号肽signal peptide:常指新合成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移(定位)的N-末端的氨基酸序列(有时不一定在N 端)。
9. 顺式作用元件(cis-acting element):真核生物DNA中与转录调控有关的核苷酸序列,包括增强子、沉默子等。
10.错配修复(mismatch repair,MMR):在含有错配碱基的DNA 分子中,使正常核苷酸序列恢复的修复方式;主要用来纠正DNA双螺旋上错配的碱基对,还能修复一些因复制打滑而产生的小于4nt的核苷酸插入或缺失。
分子生物学-11(总分:100.01,做题时间:90分钟)一、问答题(总题数:20,分数:100.00)1.简述增强子的作用特点。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:①增强子可以发挥远程作用(1~4kb),增强同一条DNA链上基因转录效率;②增强子作用与其序列的正反方向无关,在基因的上游或下游都能起作用;③增强子对启动子没有严格的专一性,同一增强子可以影响不同类型启动子的转录;④增强子一般具有组织或细胞特异性。
2.什么是沉默子,简述其用特点。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:沉默子是一种抑制基因表达的顺式作用元件。
沉默子可以远程调控基因的转录作用,且无位置和方向依赖性,具有组织特异性。
沉默子可能引起染色质弯曲缠绕,产生异染色质结构,导致基因处于失活状态。
3.真核生物mRNA仅是细胞总RNA的一小部分(质量的3%)左右,解释可能的原因。
(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:总RNA中还包含大量的rRNA和tRNA,rRNA是核糖体的重要组成部分,一系列的tRNA是翻译必不可少的分子群。
另外,mRNA半衰期只有1~24小时。
因此mRNA的量比其他RNA的量要少。
4.为什么rRNA和tRNA分子比mRNA更稳定?(分数:5.00)__________________________________________________________________________________________ 正确答案:()解析:mRNA以单链形式存在于细胞中,能被特异的单链RNA酶识别并降解。
一、名词解释:1.顺反子:在反式构型中,不能互补的各个突变体在染色体上所占的一个区域称为顺反子,顺反子是一个必须保存完整才能具备正常生理功能的最小单位。
11.突变子:是指一个顺反子内部发生突变的最小单位,一个突变子可以小到只有一对碱基。
111.重组子:是基因内不能由重组分开的遗传单位,即基因内出现重组的最小区间,重组子的单位可以小到核苷酸对。
2.断裂基因:在真核生物中,基因的编码序列在DNA分子上是不连续排列的,而是被不编码序列所隔开。
3.假基因:具有与功能基因相似的序列,但由于许多涂点以致失去了原来的功能,所以假基因是没有功能的基因。
4.错配修复:在含有错配碱基的DNA中,使正常核苷酸序列恢复的修复方式。
5.转座子:存在于染色体DNA上可以自主复制和位移的一段DNA序列。
6.增强子:增强启动子转录活性的DNA序列。
7.同源重组:两个双螺旋DNA分子间通过配对链断裂和再连接,而产生的片段间交换的过程。
8.启动子:RNA聚合酶特异性识别,结合和开始转录的一段保守的DNA序列。
10.RNA编辑:转录后的RNa为在编码区发生碱基的突变,加入或缺失的现象。
11.摇摆假说:反密码子和密码子配对时前两个碱基严格遵守碱基互补配对原则,但第三个碱基有一定的自由度可以“摆动”。
12.SD序列:在原核生物mRNA起始密码AUG上游,存在4到9个富含嘌呤的一致性序列。
13.操纵子:基因表达和调控的单位,由启动子、操纵基因及其所控制的一组功能上相关的结构基因所组成。
14.weigle效应:紫外线处理的病毒借助于宿主细胞的DNA复制机制进行修复,重新产生活性,此时,如将寄主细胞预先用紫外光照射,则比未经照射的要产生更高的活化效应。
15.弱化子:mRNA合成起始以后,除非培养基中完全没有色氨酸,转录总在这个区域终止,产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子,终止trp基因的转录,则这个区域成为弱化子。
16.正调控:没有调节蛋白存在时,基因是关闭的,加入这种调节蛋白后,基因表达活性被关闭。
分子生物学总结知识点分子生物学总结知识点在日常的学习中,大家都背过各种知识点吧?知识点就是掌握某个问题/知识的学习要点。
掌握知识点是我们提高成绩的关键!下面是店铺精心整理的分子生物学总结知识点,仅供参考,欢迎大家阅读。
分子生物学总结知识点11、生物体生命活动的物质基础是:组成生物体的各种化学元素和化合物。
2、大量元素: C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg微量元素:Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni (生物体必不可少的元素,但需要量很少)基本元素:C (也是生命的核心元素)主要元素:C、H、O、N、P、S (6种,占生物体总量的97%以上)矿质元素:N、P、S、K、Ca、Mg、Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni (14种)(糖类:C、H、O;脂肪:C、H、O;血红蛋白:C、H、O、N、Fe ;叶绿素:C、H、O、N、Mg;甲状腺激素:C、H、O、N、I;核酸:C、H、O、N、P; ATP: C、H、O、N、P;纤维素:C、H、O)3、自然界中含量最多的元素是O;占人体细胞干重最多的元素是C,占细胞鲜重最多的元素是O。
4、C、H、O、N四种元素含量比较:鲜重:O C H N;干重:C O N H5、组成生物体的化学元素的种类大体相同,但含量相差很大。
6、生物界与非生物界具有统一性:组成细胞的元素在无机自然界都可以找到,没有一种是细胞所特有的。
生物界与非生物界具有差异性:细胞与非生物相比,各种元素的含量又大不相同。
7、还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖) + 斐林试剂—→(Cu2O)砖红色沉淀(条件是水浴加热)脂肪 + 苏丹Ⅲ—→橘黄色(或脂肪 + 苏丹Ⅳ—→红色)(使用50%的酒精的作用:洗去浮色)蛋白质 + 双缩脲试剂—→紫色反应(不需加热;若反应后颜色不为紫色,而为蓝色的原因:可能是加入的CuSO4溶液过多,生成大量的Cu(OH)2遮盖所产生的紫色)8、斐林试剂要现配现用,必须将甲液(0、1g/ml的NaOH)和乙液(0、05g/ml的CuSO4)先等量混匀后使用;双缩脲试剂使用时应先向蛋白质中加甲液(0、1g/ml的NaOH),混匀后再加乙液(0、01g/ml的CuSO4)9、在可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定中要用显微镜的是:脂肪的鉴定;需要加热的是:还原糖的鉴定;不发生化学反应的是:脂肪的鉴定。
核酸一、填空题1. 碱基互变异构是指碱基的酮式与烯醇式或氨基式与亚氨基式异构体发生互变的现象,如果这种现象在DNA 复制的时候发生,则可以导致碱基错配。
然而,在生理pH 下,碱基主要以酮式或氨基式形式存在。
2.DNA 双螺旋中只存在 2 种不同碱基对。
A 总是与_T___配对,G 总是与 C 配对,此规则称为Chargaff 法则。
但在RNA 双螺旋中,还含有第三种碱基配对,它是GU 。
3.X 线衍射证明,核苷中碱基与核糖环平面相互垂直。
4.一个双链RNA 分子与一个双链DNA 分子的差别有分别含U 与T 、核糖与脱氧核糖和A 型与 B 型双螺旋。
5.核酸在260 nm 附近有强吸收,这是由于碱基环上的共轭双键。
6.给动物食用3H 标记的胸苷,可使DNA 带有放射性,而RNA 不带放射性。
如果要让RNA 带有放射性,应该给动物食用3H 标记的尿苷。
7.Tm 是指DNA 热变性时候的熔链温度,双链DNA 中若GC 含量多,则其Tm 值高。
DNA 样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈窄。
DNA 所处溶液的离子强度越低,其熔解过程的温度范围越宽,熔解温度越低,所以DNA 应保存在较高浓度的盐溶液中。
8.双链DNA 热变性曲线通常呈S 形,这种曲线说明DNA 的变性具有协同效应;在DNA 发生热变性后,在pH 2以下,或pH 12 以上时,其A260 增加,同样条件下,单链DNA 的A260 不变。
9.核酸分子中的糖苷键均为β-N-糖苷键型,但假尿苷中的糖苷键为β-C-糖苷键。
核苷酸之间通过3,5-磷酸二酯键连接形成多聚物。
10. 细胞内总含有T 的RNA 是tRNA ,它是通过U 的后加工形成的。
11. DNA 双螺旋的构型可以有三种,它们分别为 B 型,A 型,Z 型。
B-DNA 的螺距为3.4 nm,每圈螺旋的碱基对数为10 ,细胞里的B-DNA 每圈螺旋的实际碱基对数为10.4 。
Z-DNA 是左手螺旋,每圈螺旋的碱基对数为12 。
第十一章分子生物学常用技术及其应用一、名词解释1.DNA重组 2.基因工程3.限制性核酸内切酶 4.基因组DNA文库5.cDNA文库 6.聚合酶链反应(PCR)7.载体 8.转化9.感染 10.核酸分子杂交11.Southern印迹杂交 12.Northern印迹杂交13.斑点印迹 14.原位杂交15.DNA芯片 16.基因诊断17.基因治疗二、选择题A型题:1.限制性核酸内切酶作用特点不包括:A.在对称序列处切开DNA B.DNA两链的切点常不在同一位点C.酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端 D.DNA两链的切点常在同一位点E.酶辨认的碱基一般为4~6个2.限制性核酸内切酶:A.可将单链DNA任意切断 B.可将双链DNA序列特异切开C.可将两个DNA分子连接起来 D.不受DNA甲基化影响E.由噬菌体提取而得3.cDNA文库包括该种生物的:A.某些蛋白质的结构基因 B.所有基因组C.结构基因与不表达的调控区 D.内含子和调节区E.内含子和外显子4.下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的:A.从特定组织或细胞中提取mRNAB.将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后,克隆到噬菌体或质粒中C.用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNAD.用DNA聚合酶,以单股DNA为模板合成双链DNAE.加S-腺苷甲硫氨酸(SAM),以使新生的DNA双链甲基化5.限制性核酸内切酶的通常识别序列是:A.粘性末端 B.RNA聚合酶附着点C.回文对称序列 D.聚腺苷酸E.甲基化“帽”结构6.pUC系列是指:A.经人工改造的大肠杆菌质粒 B.天然的大肠杆菌质粒C.天然的酵母质粒 D.经人工改造的大肠杆菌噬菌体E.经人工改造的酵母质粒7.用于转染哺乳类细胞的常用载体是:A.质粒 B.噬菌体C.逆转录病毒RNA D.结构基因E.乳糖操纵子8.转化常指:A.噬菌体感染 B.基因的转位C.摄取外来DNA,引起细胞生物学类型的改变 D.产生点突变E.产生移码突变9.基因工程的操作程序可简单地概括为:A.载体和目的基因的分离、提纯与鉴定 B.分、切、接、转、筛C.将重组体导入宿主细胞,筛选出含目的基因的菌株 D.将载体和目的基因接合成重组体E.限制性核酸内切酶的应用10.用于基因治疗较为理想的载体是:A.质粒 B.噬菌体C.经改造的逆转录病毒 D.人类DNAE.酵母质粒11.常用质粒有以下特性:A.是线形双链DNA B.插入片段的容量比λ噬菌体DNA大C.含有抗生素抗性基因 D.含有同一限制性核酸内切酶的多个切口E.不随细菌繁殖而进行自我复制12.在重组体中切出插入片段最常用的方法是:A.以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出 B.用其它限制性酶将其切出C.用S1核酸酶将其切出 D.用DNA酶将切出E.用多种限制性内切酶将其切出13.利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是:A.反应体系内存在特异DNA片段 B.反应体系内存在特异RNA片段C.反应体系内存在特异DNA引物 D.反应体系内存在特异RNA引物E.反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是:A.大肠杆菌表达体系 B.原核表达体系C.酵母表达体系 D.昆虫表达体系E.哺乳类细胞表达体系15.限制性核酸内切酶切割DNA后产生:A.3′-磷酸基末端和5′-羟基末端 B.5′-磷酸基末端和3′-羟基末端C.3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端 D.5′-羟基末端和3′-羟基末端E.3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸16.下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是:A.小型环状双链DNA分子 B.携带有某些抗生素抗性基因C.在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 D.具有自我复制功能E.获得目的基因17.在分子生物学领域分子克隆主要是指:A.DNA的大量复制 B.DNA的大量转录C.DNA的大量剪切 D.RNA的大量剪切E.RNA的大量反转录18.在分子生物学领域重组DNA技术又称:A.酶工程 B.蛋白质工程C.细胞工程 D.发酵工程E.分子克隆技术19.在重组DNA技术中不涉及的酶是:A.限制性核酸内切酶 B.DNA聚合酶C.DNA连接酶 D.反转录酶E.DNA解链酶20.多数限制性核酸内切酶切割后的DNA末端为:A.平端末端 B.3′突出末端C.5′突出末端 D.粘性末端E.缺口末端21.可识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类酶为:A.限制性核酸外切酶 B.限制性核酸内切酶C.非限制性核酸外切酶 D.非限制性核酸内切酶E.DNA内切酶22.cDNA是指:A.在体外经反转录合成的与RNA互补的DNA B.在体外经反转录合成的与DNA 互补的DNAC.在体外经转录合成的与DNA互补的RNA D.在体外经反转录合成的与RNA 互补的RNAE.在体外经反转录合成的与DNA互补的RNA23.基因组代表一个细胞或生物体的:A.部分遗传信息 B.整套遗传信息C.可转录基因 D.非转录基因E.可表达基因24.在基因工程中通常所用的质粒存在于:A.细菌染色体 B.酵母染色体C.细菌染色体外 D.酵母染色体外E.病毒DNA外25.就分子结构而论质粒是:A.环状双链DNA分子 B.环状单链DNA分子C.环状双链RNA分子 D.线状双链DNA分子E.线状单链DNA分子26.聚合酶链式反应可表示为:A.PEC B.PERC.PDR D.BCRE.PCR27.在已知序列信息的情况下,获取目的基因的最方便方法是:A.化学合成法 B.基因组文库法C.cDNA文库法 D.PCRE.差异显示法28.重组DNA的基本构建过程是将:A.任意两段DNA接在一起 B.外源DNA接入人体DNA C.外源基因插入宿主基因 D.目的基因接入适当载体E.目的基因接入哺乳类DNA29.EcoRⅠ切割DNA双链产生:A.平端 B.5′突出粘端C.3′突出粘端 D.钝性末端E.配伍末端30.催化PCR的酶是:A.DNA连接酶 B.反转录酶C.末端转移酶 D.碱性磷酸酶E.TaqDNA聚合酶31.将PstⅠ内切酶切割后的目的基因与用相同内切酶切割后的载体DNA连接属:A.同聚物加尾连接 B.人工接头连接C.平端连接 D.粘性末端连接E.非粘性末端连接32.重组DNA技术中实现目的基因与载体DNA拼接的酶是:A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶C.DNA连接酶 D.RNA连接酶E.限制性核酸内切酶33.以质粒为载体,将外源基因导入受体菌的过程称:A.转化 B.转染C.感染 D.转导E.转位34.最常用的筛选转化细菌是否含重组质粒的方法是:A.营养互补筛选 B.抗药性筛选C.免疫化学筛选 D.PCR筛选E.分子杂交筛选35.α互补筛选法属于:A.抗药性标志筛选 B.酶联免疫筛选C.标志补救筛选 D.原位杂交筛选E.免疫化学筛选36.下列常用于原核表达体系的是:A.酵母细胞 B.昆虫细胞C.哺乳类细胞 D.真菌E.大肠杆菌37.在对目的基因和载体DNA进行同聚物加尾时,需采用:A.反转录酶 B.多聚核苷酸激酶C.引物酶 D.RNA聚合酶E.末端转移酶38.在分子生物学领域分子克隆专指:A.细胞克隆 B.RNA克隆C.DNA克隆 D.抗体克隆E.mRNA克隆39.用于重组DNA 的限制性核酸内切酶,识别核苷酸序列的:A.正超螺旋结构 B.负超螺旋结构C.α螺旋结构 D.回文结构E.锌指结构40.在基因工程中通常所用的质粒是:A.细菌染色体DNA B.细菌染色体以外的DNA C.病毒染色体DNA D.病毒染色体以外DNAE.噬菌体DNA41.构建基因组DNA文库时,首先需要分离细胞的:A.染色体DNA B.线粒体DNAC.总mRNA D.tRNAE.rRNA42.DNA连接酶是从T4 噬菌体感染大肠杆菌中分离的,这种连接酶:A.只能催化平末端连接,而不能催化粘性末端连接B.即能催化单链DNA连接又能催化粘性末端双链DNA连接C.双链DNA中不需一条完整的单链D.单链中的切口位点可缺少几个核苷酸E.切口存在相邻的5′-磷酸和3′-羟基末端,使其以磷酸二酯键连接43.末端转移酶是合成酶类:A.作用时不需模板 B.是从小牛胸腺中分离C.能催化单链核苷酸转移到5′-磷酸上 D.需要带有5′-端磷酸的末端的ssDNA E.需要有延伸5′-端磷酸的末端dsDNA44.在基因工程中可用碱性磷酸酶:A.防止DNA的自身环化 B.同多核苷酸激酶一起进行DNA3′-羟基末端标记C.制备突出的3′-末端 D.特异切除DNA或RNA的3′-末端羟基E.水解特异的核苷酸片段45.以下哪种酶作用时需要引物:A.限制性核酸内切酶 B.末端转移酶C.反转录酶 D.DNA连接酶E.碱性磷酸酶46.S1核酸酶的功能是:A.切割双链的DNA B.切割单链的RNA C.切割发夹环 D.切割单链DNA E.以上有两项是正确的47.在cDNA技术中所形成的发夹环可用:A.限制性核酸内切酶切除 B.用3′外切酶切除C.用S1核酸酶切除 D.用5′外切酶切除E.碱性磷酸酶切除48.下面有关限制性内切酶的叙述正确的是:A.限制酶是外切酶而不是内切酶B.限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割C.同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的D.一些限制酶在识别位点稍有不同的点切割双链DNA,产生粘性末端E.一些限制酶在识别位点相同的位置切割双链DNA,产生平末端49.限制性核酸内切酶可以特异识别:A.双链DNA的特定碱基对 B.双链DNA的特定碱基序列C.特定的三联码 D.双链RNA的特定碱基序列E.双链RNA的特定碱基对50.DNA聚合酶的主要用途:A.利用它的3′→5′聚合活性,合成ds-DNA第二条链B.对DNA的5′-端进行填补或末端标记C.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ用于缺口平移,制作DNA标志探针D.DNA聚合酶Ⅱ可用于DNA测序E.TaqDNA聚合酶用于PCR51.反转录酶:A.是依赖于DNA的RNA聚合酶 B.用于真核DNA反转录生成mRNA C.用于RNA探针的制备 D.用于RNA序列测定E.是依赖于RNA的DNA聚合酶52.基因工程中作为载体应具备以下特点:A.能在宿主细胞中复制繁殖 B.容易进入宿主细胞C.具有多克隆位点 D.容易从宿主细胞中分离出来E.以上均是53.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大:A.质粒 B.粘粒C.酵母人工染色体 D.λ噬菌体E.cDNA表达载体54.pUC是一种改造型质粒,含有:A.乳糖操纵子调节基因、启动子 B.多克隆位点C.lacZ′基因 D.氨苄青霉素抗性基因E.以上均有55.质粒具有以下特点:A.是位于细菌染色体外的RNA B.不能自主复制C.为单链环形DNA D.大小在2~300kb之间E.以上都不对56.粘粒是一种人工建造的载体不具有以下特点:A.可借cos位点将多个粘粒串联成大环 B.本身约4~6kb之间C.进入受体细胞后可进行复制 D.可克隆DNA大片段E.以上都不是57.下面关于多克隆位点的描述不正确的是:A.仅位于质粒载体中 B.具有多种限制性内切酶识别的位点C.不同酶的识别序列可以重叠 D.一般是人工合成后添加到载体中E.可位于不同载体中58.下列筛选重组体的方法中不属于遗传学方法的是:A.限制性内切酶图谱法 B.PCRC.Northern印迹法 D.Southern印迹法E.抗药性标记基因59.利用基因工程可以进行:A.建立染色体基因文库 B.分析基因的结构与功能C.疾病的发生、发展及治疗的分子机制 D.疾病的诊断和基因治疗E.以上均可以60.Southern印迹的DNA探针杂交:A.只与序列完全相同的RNA片段 B.可与任何含有相同序列的DNA片段C.可与任何含有互补序列的DNA片段 D.可与用某些限制性核酸内切酶切成的DNA片段E.只与含有互补序列的RNA片段61.下列哪个不是Southern印迹法的步骤:A.用限制性核酸内切酶消化DNA B.DNA与载体连接C.用凝胶电泳分离DNA片段 D.DNA片段转移至硝酸纤维素膜上E.用一个标记的探针与膜杂交62.下列哪个不是Northern印迹法的步骤:A.从细胞和组织中提取RNA B.用凝胶电泳分离RNAC.将RNA转移到支持物上 D.与核酸探针进行杂交E.将RNA反转录合成DNA63.原位杂交具有以下特点:A.不需从组织或细胞中提取核酸 B.对靶序列有很高的灵敏度C.可完整保护组织与细胞的形态 D.准确反映出组织细胞的相互关系及功能状态E.以上均是64.下列哪项不是探针的特点:A.要加以标记 B.应是双链DNAC.只与靶核酸序列杂交 D.探针长度可以是十几个碱基到几千个碱基不等E.高灵敏度65.探针的种类包括:A.基因组DNA探针 B.cDNA探针C.寡核苷酸探针 D.RNA探针E.以上均是66.下面哪一步不是获得基因组DNA探针的步骤:A.从基因组文库筛选得到特定基因 B.克隆、扩增C.纯化 D.连入表达载体E.切取插入片段67.RNA探针具有以下特点,但除外:A.采用反转录方法可以得到 B.单链、杂交效率高C.杂交体系稳定 D.不存在高度重复序列E.特异性高68.下面哪一步不是cDNA探针的步骤:A.从相应组织细胞直接中分离特异的cDNA B.从相应组织细胞中分离特异的mRNA C.反转录合成cDNA D.与载体连接E.切割cDNA,分离纯化69.常用的标记物有,但除外:A.放射性核素 B.生物素C.荧光素 D.地高辛E.NTP70.用于标记核酸探针的放射性核素主要有,但除外:A.32P B.35SC.3H D.125IE.14C71.放射性核素标记物具有,但除外:A.检测时间短 B.灵敏度和特异性高C.可检出样品少于1000个分子的核酸量 D.半衰期短,稳定性差E.污染环境72.非放射性核素标记物包括,但除外:A.生物素 B.地高辛C.荧光素 D.酶E.核酸73.非放射性核素标记物具有,但除外:A.灵敏度高于放射性核素 B.稳定C.经济 D.实验周期短E.安全、无污染74.PCR反应体系包括,但除外:A.基因组DNA(模板) B.引物C.dNTP D.TaqDNA聚合酶E.T4DNA连接酶75.PCR技术主要应用于:A.目的基因的克隆 B.基因表达与调控C.DNA微量分析 D.遗传病与传染性疾病的诊断E.以上均可以76.以DNA为模板的PCR反应,具备以下条件:A.反应体系一般选用50-100μl B.引物、TaqDNA聚合酶C.4种dNTP、模板DNA D.缓冲液E.以上均是77.以mRNA为模板的PCR反应,具备以下条件:A.需将mRNA反转录生成cDNA B.反应体系一般选用20μl体积、4种dNTP、引物C.需要RNA酶抑制剂、反转录酶 D.TaqDNA聚合酶E.以上均是78.关于PCR停滞的原因,取决于很多因素,但除外:A.样品模板的拷贝数 B.PCR扩增效率C.DNA酶种类及活性 D.dNTP的大量消耗E.非特异性的竞争因素79.用于核酸分子杂交的探针可以是放射性核素标记的:A.核糖体 B.RNAC.抗体 D.抗原E.以上都不是80.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段,而Northern印迹则是:A.用RNA探针检测DNA片段 B.用RNA探针检测RNA片段C.用DNA探针检测RNA片段 D.用RNA探针检测蛋白片段E.用DNA探针检测蛋白片段81.用免疫化学筛选重组体的原理是:A.根据外源基因的表达 B.根据载体基因的表达C.根据mRNA与DNA的杂交 D.根据DNA与DNA的杂交E.根据RNA与RNA的杂交82.原位杂交包括:A.转膜杂交 B.斑点杂交C.菌落杂交或噬菌斑杂交 D.直接对染色体或组织的杂交E.以上均有83.外源性DNA进入菌体的方式是:A.转化 B.转录C.翻译 D.半保留复制E.以上都不是84.要将无粘性末端的两种平端DNA片段结合在一起,可在:A.两种片段上都接上聚(dT)尾部 B.一种片段接聚(dT)尾部,另一种接聚(dA)尾部C.两种片段都接上聚(dA)尾部 D.反应液中加以T4DNA连接酶E.有两项是对的85.用原核生物表达真核生物的基因存在的问题是:A.大肠细菌只能表达克隆的cDNA B.细菌不能切除原始转录物中相当于内含子的核苷酸序列C.缺乏翻译后加工机制 D.表达的蛋白质常形成不溶性包涵体E.以上都正确86.常用载体有:A.质粒 B.噬菌体C.病毒DNA D.大肠杆菌基因组DNAE.有3项是正确的87.构建cDNA文库时,首先需分离细胞的:A.染色体DNA B.线粒体DNAC.总mRNA D.tRNAE.rRNA88.构建DNA文库时,首先需分离细胞的:A.染色体DNA B.线粒体DNAC.总mRNA D.tRNAE.rRNA89.设计PCR的引物时,应考虑引物与模板的:A.5ˊ端特定序列互补 B.5ˊ端任意序列互补C.3ˊ端特定序列互补 D.3ˊ端任意序列互补E.中间序列互补90.用于鉴定转化子细胞是否含重组DNA的最常用方法是:A.抗药性选择 B.分子杂交选择C.RNA反转录 D.免疫学方法E.体外翻译91.下列哪一步是DNA芯片技术的最关键的环节:A.样品的准备与标记 B.芯片的制备C.信号的检测 D.数据分析处理E.杂交92.基因诊断常用的技术方法有:A.核酸分子杂交 B.单链构象多态性分析C.DNA序列测定 D.DNA芯片技术E.以上均是B型题:A.基因从原来位置转到基因组的另一位置 B.噬菌体或病毒DNA进入细胞中繁殖C.外来DNA引起细胞生物学特性的改变 D.移码突变 E.非移码突变1.感染是指:2.转化是指:3.转位是指:4.结构基因中3个核苷酸的插入或丢失是指:5.结构基因中1个核苷酸的插入或丢失是指:A.抗药性选择 B.分子杂交选择 C.RNA转录 D.免疫学方法 E.体外翻译6.用于鉴定是否有质粒转入受体菌的一般方法是:7.用于鉴定转化子细胞是否含目的基因的常用方法:8.利用目的基因表达产物的特异抗体来筛选含目的基因的转化子细胞的方法是:A.限制性核酸内切酶 B.DNA连接酶 C.反转录酶 D.TaqDNA聚合酶 E.碱性磷酸酶9.识别DNA回文结构并对其双链进行切割的是:10.用于聚合酶链式反应的是:11.将目的基因与载体DNA进行连接的酶是:12.特异切除DNA或RNA5ˊ端磷酸的酶是:13.mRNA转录合成cDNA的酶是:A.支原体 B.衣原体 C.噬菌体 D.细菌 E.酵母14.常用作原核表达体系的是:15.常用作真核表达体系的是:A.基因组文库 B.cDNA文库 C.mRNA文库 D.tRNA文库 E.rRNA 文库16.分离细胞染色体可制备:17.分离细胞总mRNA可制备:A.抗药性选择 B.RNA反转录 C.免疫化学方法 D.体外翻译E.PCR18.对重组体内基因进行直接选择的方法是:19.通过鉴定基因表达产物筛选重组体的方法是:A.RNA聚合酶 B.末端转移酶 C.碱性磷酸酶 D.反转录酶 E.核苷酸酶20.切除DNA末端磷酸基需要用:21.在DNA3′羟基末端进行同聚物加尾需要用:22.合成cDNA需要用:A.同聚物加尾连接 B.人工接头 C.粘性末端连接 D.缺口末端连接 E.平端连接23.外源基因和载体DNA经限制性酶切后的连接属于:24.在外源基因和载体DNA末端添加同聚物序列后再进行连接属于:25.在外源基因和载体DNA末端添加短核苷酸序列,人为制造粘性末端再进行连接属于:26.需用适当的酶将DNA突出末端削平或补齐的连接属于:A.将单链DNA任意切断 B.将双链DNA序列特异切开 C.将两个DNA分子连接起来D.将缺口末端连接 E.切除DNA末端磷酸基团27.限制性内切酶的作用是:28.DNA连接酶作用是:29.碱性磷酸酶作用是:A.某些蛋白质的结构基因 B.所有基因结构 C.不表达的调控区D.内含子和调节区 E.外显子和调节区30.cDNA文库包括:31.DNA文库包括:32.真核mRNA包括:A.DNA聚合酶 B.RNA聚合酶 C.DNA连接酶D.RNA连接酶 E.限制性核酸内切酶33.切除特异DNA片段:34.连接两个DNA片段:35.大量扩增DNA片段:A.反转录酶 B.多聚核苷酸激酶 C.引物酶 D.RNA聚合酶 E.末端转移酶36.催化ATP的磷酸转移到DNA或RNA的5ˊ端羟基上:37.催化单核苷酸转移到DNA的3ˊ端羟基上:38.合成cDNA:C型题:A.将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B.将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C.两者都是 D.两者都不是1.转化:2.感染:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是3.含内含子:4.含结构基因:A.将含有目的基因的噬菌体感染细菌 B.将含有目的基因的质粒导入细菌进行表达C.两者都是 D.两者都不是5.转化:6.转位:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是7.含转录调控区:8.较易表达:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是9.制备目的基因可在真核生物体系中表达:10.几乎含有人的全部基因:A.cDNA文库 B.基因组文库 C.两者都是 D.两者都不是11.具有组织特异性:12.可在原核生物体系中表达:A.光介导原位合成 B.压电打印合成 C.两者都是 D.两者都不是13.原位合成芯片:14.DNA微集阵列:A.喷墨打印 B.针式打印 C.两者都是 D.两者都不是15.原位合成芯片:16.DNA微集阵列:A.光介导原位合成 B.喷墨打印 C.两者都是 D.两者都不是17.原位合成芯片:18.DNA微集阵列:A.压电打印合成 B.针式打印 C.两者都是 D.两者都不是19.原位合成芯片:20.DNA微集阵列:A.DNA序列测定 B.突变分析 C.两者都是 D.两者都不是21.DNA芯片技术可用于:22.PCR技术可用于:A.基因表达 B.DNA的微量分析 C.两者都是 D.两者都不是23.DNA芯片技术可用于:24.PCR技术可用于:A.药物研究 B.基因诊断 C.两者都是 D.两者都不是25.PCR技术可用于:26.核酸分子杂交:A.目的基因克隆 B.基因结构研究 C.两者都是 D.两者都不是27.DNA芯片技术可用于:28.PCR技术可用于:A.DNA与DNA的杂交 B.DNA与RNA杂交 C.两者都是 D.两者都不是29.Southern印迹杂交:30.斑点杂交:A.DNA与RNA杂交 B.DNA与DNA的杂交 C.两者都是 D.两者都不是31.原位杂交:32.Northern杂交:A.遗传性疾病的诊断 B.感染性疾病的诊断 C.两者都是 D.两者都不是33.分子杂交技术可用于:34.PCR技术可用于:A.肿瘤 B.个体鉴别 C.两者都是 D.两者都不是35.PCR技术可用于:36.DNA芯片技术可用于:三、问答题1.简述基因工程的主要过程。
L111. 如何理解结构决定功能(通过2个以上实例说明)12. 互补测验的原理及用途。
顺反试验,测定两个基因突变作用方式的遗传学试验,即互补测验。
通过测验可确定两个表型效应相似的突变位点是否位于同一个顺反子或基因内。
,L27. The specificity determines the blood group for human (illustrate by example) 决定人类血型的特异性(举例阐述)基因座可能会有不止一条野生型等位基因,即基因座可能会有等位基因的多态分布,而无任何一条等位基因可以被认为是野生型的。
在任何一个遗传位点上并非一定要有一个野生型基因。
ABO血型基因座编码半乳糖基转移酶,其特异性决定了血型的差别。
功能缺失可由空白型表示,即O型。
但是功能性的A型和B型是共显性的,并且对O型表现出显性。
在所有的个体中都产生O型或者H型抗原,它们含有特殊的碳水化合物基团连接到蛋白质。
)ABO等位基因编码一种半乳糖基转移酶,能够在O抗原加上糖基,其特异性决定了血型。
A、B等位基因表达相应的转移酶并利用相应的碳水化合物辅因子产生了A、B抗原,O等位基因无法表达产生转移酶,因此O抗原没有发生修饰。
A和B都不能被认为是野生型的,因为他们表达出一种功能,而没有存在功能缺失或者新功能的产生。
这种现象,即一个群体中存在多条功能型等位基因,被称为多态性L31.Conservation of exons and its application(外显子的保守性及其作用)L41.}2.非互补粘性末端DNA分子间的连接方式;1经过专门作用于单链DNA的Sl核酸酶处理变成平末端之后,可以使用T4 DNA连接酶进行有效连接。
2使用附加衔接物or附加接or同聚物加尾技术的办法提高平末端间的连接作用的效率L51.蛋白质组学研究中所用方法及原理二维电泳(2ED)2.'3.试说明每个等位基因具有不同的表型(举例)4.限制性位点孟德尔遗传定律15人类基因组数目与蛋白质组关系人类基因组的数目约为×109bp,约含有3000~4000条基因,而人类蛋白质组约有50000~60000个蛋白质成员1)基因表达是不连续,且受外部环境影响,存在时间和空间的表达差异。
1. 半保留复制(semiconservative replication):DNA复制时,以亲代DNA的每一股做模板,以碱基互补配对原则,合成完全相同的两个双链子代DNA,每个子代DNA中都含有一股亲代DNA链,这种现象称为半保留复制。
2.复制子replicon:由一个复制起始点构成的DNA复制单位。
57. 复制起始点(Ori C)DNA在复制时,需在特定的位点起始,这是一些具有特定核苷酸序列顺序的片段,即复制起始点。
24.(35)复制叉(replication fork)是DNA复制时在DNA链上通过解旋、解链和SSB蛋白的结合等过程形成的Y字型结构称为复制叉。
3. Klenow 片段klenow fragment:DNApol I(DNA聚合酶I)被酶蛋白切开得到的大片段。
4. 外显子exon、extron:真核细胞基因DNA中的编码序列,这部分可转录为RNA,并翻译成蛋白质,也称表达序列。
5.(56)核心启动子core promoter:指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区。
(Hogness区)6. 转录(transcription):是在DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下,按照硷基配对的原则,以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。
7. 核酶(ribozyme):是具有催化功能的RNA分子,是生物催化剂,可降解特异的mRNA序列。
8.(59)信号肽signal peptide:常指新合成多肽链中用于指导蛋白质的跨膜转移(定位)的N-末端的氨基酸序列(有时不一定在N端)。
9.顺式作用元件(cis-acting element):真核生物DNA中与转录调控有关的核苷酸序列,包括增强子、沉默子等。
10.错配修复(mismatch repair,MMR):在含有错配碱基的DNA分子中,使正常核苷酸序列恢复的修复方式;主要用来纠正DNA双螺旋上错配的碱基对,还能修复一些因复制打滑而产生的小于4nt的核苷酸插入或缺失。
现代分子生物学部分课后习题及答案第一章绪论1. 你对现代分子生物学的含义和包括的研究范围是怎么理解的?分子生物学是从分子水平研究生命本质的一门新兴边缘学科,它以核酸和蛋白质等生物大分子的结构及其在遗传信息和细胞信息传递中的作用为研究对象,是当前生命科学中发展最快并正在与其它学科广泛交叉与渗透的重要前沿领域。
狭义:偏重于核酸的分子生物学,主要研究基因或DNA的复制、转录、表达和调节控制等过程,其中也涉及与这些过程有关的蛋白质和酶的结构与功能的研究。
分子生物学的发展为人类认识生命现象带来了前所未有的机会,也为人类利用和改造生物创造了极为广阔的前景。
所谓在分子水平上研究生命的本质主要是指对遗传、生殖、生长和发育等生命基本特征的分子机理的阐明,从而为利用和改造生物奠定理论基础和提供新的手段。
这里的分子水平指的是那些携带遗传信息的核酸和在遗传信息传递及细胞内、细胞间通讯过程中发挥着重要作用的蛋白质等生物大分子。
这些生物大分子均具有较大的分子量,由简单的小分子核苷酸或氨基酸排列组合以蕴藏各种信息,并且具有复杂的空间结构以形成精确的相互作用系统,由此构成生物的多样化和生物个体精确的生长发育和代谢调节控制系统。
阐明这些复杂的结构及结构与功能的关系是分子生物学的主要任务。
2. 分子生物学发展前景如何?21世纪是生命科学世纪,生物经济时代,分子生物学将取得突飞猛进的发展,结构基因组学、功能基因组学、蛋白质组学、生物信息学、信号跨膜转导成为新的热门领域,将在农业、工业、医药卫生领域带来新的变革。
3. 人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么?社会意义:人类基因组计划与曼哈顿原子计划、阿波罗登月计划并称为人类科学史上的三大工程,具有重大科学意义、经济效益和社会效益。
(1)极大地促进生命科学领域一系列基础研究的发展,阐明基因的结构与功能关系、生命的起源和进化、细胞发育、生产、分化的分子机理,疾病发生的机理等,为人类自身疾病的诊断和治疗提供依据,为医药产业带来翻天覆地的变化(2)促进生命科学与信息科学、材料科学和与高新技术产业相结合,刺激相关学科与技术领域的发展,带动起一批新兴的高技术产业(3)基因组研究中发展起来的技术、数据库及生物学资源,还将推动对农业、畜牧业(转基因动、植物)、能源、环境等相关产业的发展,改变人类社会生产、生活和环境的面貌,把人类带入更佳的生存状态。