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定量方法 演示文稿

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《定量研究方法》课件

《定量研究方法》课件
通过定量研究方法，对心理干预 措施的效果进行评估和优化，提 高心理治疗的成功率。医Fra bibliotek研究01
流行病学研究
利用定量研究方法，对疾病流行趋势、病因和预防措施进行调查和分析
，为医学实践提供科学依据。
02
临床试验
通过定量研究方法，对药物疗效、治疗方案等进行评估和优化，提高临
床治疗效果。
03
健康管理研究
利用定量研究方法，对健康状况、健康行为等进行监测和管理，促进个
聚类分析
要点一
总结词
聚类分析是一种无监督学习方法，用于将相似的对象归为 同一组或簇。
要点二
详细描述
聚类分析通过分析对象之间的相似性或距离，将相似的对 象归为同一组或簇。聚类分析可以用于分类、异常检测和 可视化等应用。常见的聚类方法包括层次聚类、K均值聚 类和DBSCAN聚类等。
定量研究的伦理与
05
实验设计的类型
实验设计可分为独立样本实验、配对样本实验和重复测量实验等类 型，应根据研究目的和研究对象的特征选择合适的实验设计。
实验误差的控制
实验设计过程中应采取措施控制误差，如随机分配被试、设置对照组 、使用盲法等，以提高实验的内部效度。
调查设计
01
02
03
调查目的与问题
调查设计应明确调查目的 ，确定调查问题，并选择 合适的调查方法。
数据处理与分析
对数据进行清洗、整理和统计 分析。
确定研究问题
明确研究目的和问题，确定研 究范围和对象。
数据收集
通过调查、实验、观察等方法 收集数据。
结果解释与报告
根据分析结果，撰写研究报告 并解释结果的意义和价值。
定量研究的设计
02

定量分析的一般步骤详解演示文稿

定量分析的一般步骤详解演示文稿
返回 第26页，共35页。
溶解法
HClO4
强酸、强氧化、脱水性，分解能力强，可分解含 Cr合金及矿石；热HClO4遇有机物易发生爆炸，用前 应用HNO3氧化有机物和还原剂。
HF
强络合能力，与Si形成挥发性SiF4 ，与H2SO4或 HNO3混合使用，在Pt或Teflon器皿中分解硅酸盐。
返回 第27页，共35页。
• 以矿石为例
矿山 取样点
采集量 mQ ≥kd 2
破碎
过筛
混匀
缩分
分析试样
返回 第12页，共35页。
①试样的采集量（最小量）： 切乔特经验公式 mQ ≥kd 2
mQ——试样的最小量，单位是kg d —— 试样最大颗粒的直径，单位是mm k —— 缩分常数，通常在0.05~1kg·mm-2之间
返回 第13页，共35页。
筛孔的选择以样品处理的难易程度确定，
二次取样的量由筛孔径确定。
返回 第18页，共35页。
五、湿存水的处理
湿存水：试样表面及空隙中吸附的空气中的水分。
干基：不含湿存水的试样的质量。 分析之前将试样烘干
（对于受热易分解的物质采用风干或真空干燥的方法干燥）。 • 湿存水的含量可根据烘干前后试样的质量计算。
5.40%
硫
1.20 100.00 5.40
100
1.27%
返回 第20页，共35页。
§14-2 试样的分解
一、概述 二、无机物的分解 三、有机物的分解
返回 第21页，共35页。
一、概述
分解的目的：
将待测组分定量转移至溶液中；
分解方式： 溶解法、熔融法、干式灰化、湿式消化等；
选择分解方法应考虑：
返回 第23页，共35页。

《定量分析方法》课件

《定量分析方法》课件

01
消费者行为分析
通过定量分析方法，研究消费者的购买行为、消费习惯和偏好，为企业制定营销策略提供依据。
02
市场细分
利用定量分析方法对市场进行细分，识别不同消费群体的特征和需求，帮助企业找到目标市场。
社会问题研究
运用定量分析方法对社会问题进行深入调查和研究，了解问题的性质、程度和原因，为政策制定提供科学依据。
THANKS
样本选择的偏见
在选择样本时，可能会因为各种偏见导致样本不具有代表性。这会导致定量分析的结果偏离实际情况。
定量分析的未来发展
03
未来定量分析将更加注重隐私保护和伦理问题，确保数据分析的合法性和公正性。
01
未来定量分析将更加注重跨学科融合，结合其他领域的知识和方法，以解决更为复杂的问题。
02
随着技术的发展和数据的积累，定量分析将更加注重数据可视化，以直观的方式呈现数据分析结果。
适用于各种领域，如经济学、社会学、生物学等。
03
02
01
提供客观、准确的决策依据
定量分析方法能够提供客观、准确的数据和信息，帮助决策者做出科学、合理的决策。
1
2
3
定量分析方法可以追溯到古代数学和统计学的起源，如中国的算术和西方的几何学。
早期发展
随着科学技术的进步和计算机的普及，定量分析方法得到了迅速发展，广泛应用于各个领域。
《定量分析方法》ppt课件
Contents
目录
定量分析方法概述定量分析的基本步骤定量分析的主要方法定量分析的实践应用定量分析的局限性定量分析的未来发展
定量分析方法概述
定量分析方法是一种基于数学模型和统计分析手段，对数据和信息进行量化和预测的方法。
定义

定量分析基本操作(共79张PPT)

定量分析基本操作(共79张PPT)
37
1、滴定操作
38
滴定管的使用
❖ 1、用前检查：酸式滴定管，塞子涂凡士林油，检 漏(等2min)；聚四氟乙烯活塞不需涂油
❖ 2、洗涤：自来水洗净后，蒸馏水洗2～3次； ❖ 3、润洗：用少量滴定液润洗2～3次(约10mL)； ❖ 3、装液：装液到0刻度以上，赶气泡，使液面位于
0.00刻度以下；
❖ 4、滴定：连续滴加，间隙式滴加，溶液悬而不 落，半滴加入；
将称量瓶放入秤盘中央，显示的质量减少量即为试样质量。
1、4d法：也称“4乘平均偏差法”
容量瓶不可在烘箱中烘烤，也不能用任何加热的办法来加速瓶中物料的溶解。
待溶液流毕，等15s后，取出移液管。
离子选择电极，流动注射法（B）；
COU
点数功能
0141 —氯化钠标准溶液的浓度（mol/L）。
容量瓶不可在烘箱中烘烤，也不能用任何加热的办法来加速瓶中物料的溶解。
加入，最后半滴加入，以防过量。
40
碱式滴定管
41
酸式滴定管
42
滴定操作姿势及读数
一般称量使用普通托盘天平即可。
水质氯化物的测定（硝酸银滴定法），要求在规定时间内完成分析方法全过程。
4乘平均偏差法仅适用于测定4-8个数据的检验分析。
预热：接通电源，预热20~30 min以获得稳定的工作温度。
运算过程中，为减少舍入误差，可多保留一位有效数字（不修约），算出结果后，再修约至应有的有效数字位数。
2
基本内容
一、天平的使用及称量操作 二、滴定分析基本操作（滴定管、容量瓶、移液管
与吸量管的使用）
三、滴定法（以水质氯化物的测定为例） 四、有效数字及运算规则
6
一、天平的使用及称量操作

定量分析概述详解演示文稿

定量分析概述详解演示文稿
容量分析法—测物质的相对量，以滴定分 析法为主要手段
第6页，共55页。
定义
适用 范围 优点 缺点 应用
重量分析法
滴定分析法
通过称量反应产物的质 量以确定被测组分在试 样中含量的方法。
＞1%的常量组分
将已知浓度的试剂溶液，加 入到待测物的溶液中，使两 者恰好完全反应，根据加入 的溶液的体积和浓度计算出 试样中被测组分的含量。
x 20.54%
d i xi x(i 1,2 )
dr
d x
100%
d1 x1 x 20.48% 20.54% 0.06% d2 x2 x 20.55% 20.54% 0.01%
d3 0.04%, d4 0.06%, d5 0.01%, d6 0.04%
d | d1 | | d2 | | d3 | .... | dn |
第11页，共55页。
二、误差的分类
分析结果与真实值之间的差值称为误差。分析结果 大于真实值，误差为正；分析结果小于真实值，误差 为负。
根据误差的性质与产生的原因，可将误差分为系 统误差和偶然误差（随机误差）两类。
第12页，共55页。
1. 系统误差
系统误差也叫可测误差，它是定量分析误差的主要来 源，对测定结果的准确度有较大影响。 原因：由于分析过程中某些确定的、经常的因素造
di
n
n
d 0.06% 0.01% 0.04% 0.06% 0.01% 0.04% 0.037% 6
dr
di x
dr1=-0.0029 , dr2 =0.00049, dr3 =0.0019
dr4 =0.0029,
dr5 =-0.00049, dr6 =-0.0019
第24页，共55页。

定量分析概论PPT演示文稿

定量分析概论PPT演示文稿

Example
第 七 章
试计算0.1000mol/L （1/6K2Cr2O7）溶液 对Fe的滴定度。（0.005585g/ml）
定 一含铁试样0.2420g，经处理后以TFe/K2Cr2O7
量 分 析 概
＝0.002500g/ml的K2Cr2O7的标准溶液滴定
之，需用30.20ml，试计算试样中Fe的百分 含量。（31.20％）
定
量
表面张力等；
分
析
二、与溶质的本性无关，仅仅决定于溶质的数
概 论
量。如难挥发非电解质稀溶液的蒸汽压下降、
沸点升高、凝固点下降和溶液的渗透压。
26.10.2020
17
依数性（Colligative properties）：
第
定义：
七
章
只决定于溶质的颗粒和数目，而不决定于溶
质颗粒种类的溶液的性质。
定
计算分析结果
26.10.2020
6
7.1.3 定量分析结果的表示
第
待测组份的化学表示形式
七 章
通常以待测组分实际存在形式的含量表示。
或者是各种元素的氧化物、元素的含量表示。
待测组份含量的表示方法
定 量
（1）固体试样－－质量分数表示。
分
（2）液体试样
析
① 质量百分数（m/m）
概
②体积百分数（V/V）
微量分析
0.1～10mg
0.01～ 1ml
超微量分析 ＜0.1mg
＜0.01ml
5
7.1.2定量分析过程
第 七 章
完成一项定量分析工作，通常需进行的步骤： 取样－－一定要有代表性！
试样的制备
（1）干燥

定量分析方法演示文稿

定量分析方法演示文稿

二、霍尔和切克兰德的系统方法论
霍尔的“三维结构”模式
•特点： ➢ 目标导向：问题明确，评价标准明确 ➢ 核心是寻求最优方案和决策 ➢ 解决问题时用数学方法求取最佳方案
•可以归结为运筹学问题。
二、霍尔和切克兰德的系统方法论
切克兰德的“调查学习”模式
•20世纪70年代初，系统开始应用于社会、经济系统 问题研究，由于涉及因素相当复杂且多难以进行定量 分析，霍尔三维结构已不再适用。 •20世纪80年代，管理科学家中兴起一轮批评狂潮， 认为当时的管理学院太偏重于理论和定量方法，培养 的人成为眼光狭窄的技术型干部，特别是缺乏人际关 系学问。
二、霍尔和切克兰德的系统方法论
霍尔的“三维结构”模式
公共管理的霍尔管理矩阵
7 6 5 4 3 2 1
逻辑维（步骤） 时间维（阶段）
明选系系方作付 确择统统案出诸 问目综分优决实 题标合析化策施
1.规划阶段 2.方案阶段 3.研制阶段 4.生产阶段 5.运行阶段 6.更新阶段
a11 a12 a13 a14 a15 a16 a17 a21 a22 a23 a24 a25 a26 a27 a31 a32 a33 a34 a35 a36 a37 a41 a42 a43 a44 a45 a46 a47 a51 a52 a53 a54 a55 a56 a57 a61 a62 a63 a64 a65 a66 a67
✓ 整体的运动特征只有在比其部分（要素）所处 层次更高的整体层次上才能进行描述；
✓ 整体与部分（要素）遵从不同描述层次上的规 律。
二、霍尔和切克兰德的系统方法论
霍尔的“三维结构”模式
•时间维：六个阶段，按时间顺序 •逻辑维：每一阶段分为七个步骤，思维程序 •专业维：完成各阶段的思维程序时所需的专业知识 •三维结构的理论基础：

管理定量分析演示文稿

管理定量分析演示文稿
第37页，共76页。
解：根据保本销售量的定义：固定成本+销售量×单 位变动成本=销售量×售价，设保本销售量为x,
则有
3000+5x=20x
(*)
解此方程，有x=3000÷ (20-5)=200(盒）
根据（*）可以求出（2）为150盒、（3）为300盒、 （4）为240盒。
第38页，共76页。
系统模拟法
第43页，共76页。
五、结果解释
对结果进行科学合理的解释才能使定量分析的结 果有很好的实际意义，两条原则：
定量与定性相结合
▪ 对定量分析的结果进行综合是一个定性过程 ▪ 决策是一个定性——定量——定性的往复循环过程
第44页，共76页。
提供决策参考
模型求解或仿真后的结果只能作为决策的参考 ▪ 一些复杂的定量分析过程因为指标（变量）是作过变
第18页，共76页。
定量分析与定性分析两种方法对同 一问题有各自的分析标准。 定量分析与定性分析内在联系密切！ 举例：全国2009年的交通状况分析
第19页，共76页。
定 性 分 析 ： 对 全 国 2009 年 的 交 通 状 况 可 以 做 “较好”的评价，还可以做“比2008年更好” 的比较性评价。这两种评价都是定性描述。
出于不同的研究目的，对于相同的数据，分析者 可以采用不同的方法处理，从而得出不同的结果。
分析者对同样的数据采用不同的分析方法，得出 相同或相近的结果，只要结果一致则表明分析结 果有效。
第23页，共76页。
第二节 管理定量分析的理论基础
第24页，共76页。
▪ 统计学
统计学的核心是统计数据分析，通过统计描述 和统计推断的方法探索出数据内在的数量规律序
第27页，共76页。

定量决策方法PPT课件

定量决策方法PPT课件

-40
销路好0.9
210
销路差0.1
-40
销路好0.9
90
销路差0.1
60
60
3年内
7年内
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第二步，从右向左计算各点的期望收益值。
点4：210×0.9×7-40×0.1×7=1295（万元） 点5：-40×7=-280（万元） 点2：1295×0.7+210×0.7×3-280×0.3-40×0.3×3=1227.5（万元） 点8：210×0.9×7-40×0.1×7-400=895（万元） 点9：90×0.9×7+60×0.1×7=609（万元） 点6是个决策点，比较点8和点9的期望收益，选择扩建。 点6：895（万元） 点7：60×7=420（万元） 点3：895×0.7+210×0.7×3+420×0.3+60×0.3×3=1247.5（万元）
回总目录 回本章目录
这是一个多阶段的决策问题，考虑采用期望收益最大为 标准选择最优方案。第源自步，画出决策树图。1227.5
2
建大厂
1295
4
销路好0.7
-280
销路差0.3
5
销路好0.9 销路差0.1
1
895
建小厂
1247.5
3
895
6
销路好0.7
420
销路差0.3
8
扩建
不扩建609
9
7
210
-40
风险决策的敏感性分析
敏感性分析的概念：在决策过程中，自 然状态出现的概率值变化会对最优方案的选 择存在影响。概率值变化到什么程度才引起 方案的变化，这一临界点的概率称为转折概 率。对决策问题做出这种分析，就叫做敏感 性分析，或者叫做灵敏度分析。

定量分析方法ppt课件

定量分析方法ppt课件

随机变量 y 与 x1,x2, ,xk之间的线性关系
y 0 1 x 1 2 x 2 k x k
其中 ~N0,2
0 ,1 ,2 ,,k , 未知
则上式称为多重线性回归模型。
精选课件ppt
30
多重线性回归模型的矩阵形式
y 1
记：
Y
y
2
y
n
1 x 11 x 1k
X
1
收 益 (Y) 收 益 (Y)
下作面线分别性为回直归线拟拟合合和对数拟合的结果做，对从结数果拟中合可以看出，对数
拟合更合适
收益与产量线性拟合结果
50
y = 0.0196x - 2.0861
45
R2 = 0.8482
40
35
30
25
20
15
收益(Y)
10
收益估计值
5
0
0
500
1000
1500
2000
2500
通过变量替换把问题转化为一元或多元线性回归问题后，用线性回 归分析的方法建立回归模型，并进行预测(即化非线性回归为线性回 归) 对于更复杂的情况，现在有很多拟合工具可以使用，如Origin、 Matlab等
精选课件ppt
20
2.1.4.1 幂函数曲线拟合
设Y：aXb （ UlnX、 VlnY） lnY lna(Xb)lnablXn (两边取 ) 对数 V lnabU
注意趋势的延续性。
精选课件ppt
11
2.1 回归分析法
1 回归分析方法概述 2 一元线性回归分析 3 多元线性回归分析 4 一元非线性回归分析 5 多重线性回归 6 Excel的函数使用
精选课件ppt

第四章定量分析方法概述-63页PPT精品文档

第四章定量分析方法概述-63页PPT精品文档

2.高效液相色谱系统适用性试验 （1）色谱柱的理论板数（n）
n5.5 4(tR/W h/2)2
（2）分离度（R）
R 2(tR2 tR1) W1 W2
除另有规定外，定量分析 时分离度应大于1.5
（3）重复性（R） 连续进样，峰面积，RSD≯2.0%
（4）拖尾因子（T）
T W 0.05h 2 d1
朗伯-比尔定律
吸收系数，溶液浓度为1% （g/m1），液层厚度为lcm时 的吸光度值；
Alg 1 EcL 为液层厚度（cm）
T
为100ml溶液中所含被测物质
的重量（按干燥品或无水物
计算）（g）；
二、应用
含有共轭体系、芳香环等发色基团， 均可在紫外区（200～400nm）或可见 光区（400～760nm）产生吸收 ②药物在可见光区若无吸收，但在一 定条件下加入显色试剂或经过处理显 色后，能对可见光产生吸收。
A.酸碱滴定法
B.亚硝酸钠滴定法
D.非水酸量法
E.配位滴定法法
C.非水碱量法
第二节 紫外-可见分光光度法
分光光度法是通过测定物质在特定波长处 或一定波长范围内的吸光度或发光强度，对 该物质进行定性和定量分析的方法
一、基本原理
定量依据：朗伯-比尔定律 单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的 浓度范围内被该物质吸收的量与该物质的浓度 和液层的厚度成正比
条件： 同台仪器，同一波长测，故 E、L相等） B. 待测物与对照品浓度相近
2）吸收系数法（绝对法）
A E11c%m×L×C
C（ g/100ml ） A E11c%m× L
C（ g/ml ）
A E11c%m×L ´ 100
3）比色法 • 加入显色剂后，按照对照品比较法测定。 • 影响显色因素很多，故需注意平行操作。 • 空白对照：溶剂+显色剂，同法处理

第五讲原始的资料收集方法——定量的方法-PPT精品文档

第五讲原始的资料收集方法——定量的方法-PPT精品文档
按照一定的程序和要求拦截，征得同意 意后进入另一处场地开始。往往配合产 品的展示和试用。
留置问卷调查
留置问卷调查是一种自我管理调查。调查员 与事先联络好的被访问者取得联系，向他们 介绍调查的总体目标并把问卷留下给被访问 者自行完成。
最大的优点：周转迅速，反馈高。
计算机辅助访问
访问的方式可以是入户的，也可以是拦截的。具 体的形式主要有两种：
调查者运用问卷这一工具可 以“生产”出调查的基本产 品：原始的数据（信息）。
影响定量调查方法的因素
入户面谈
入户面谈常被认为 是最有效的一种访 问方式：
面对面访谈易获 得细节，易控制；
访谈对象是在一 个自已熟悉的环境 里面进行访谈的
拦截访问
拦截访问的两种类型：
按照一定的程序和要求拦截，征得同意 后就地开始调查；
第一种形式，也是最为常见的形式，是由经过培训 的调查员手持笔记本电脑或者最近发展起来的情报 末端PDA，向受访对象进行面访调查
第二种形式是对被访者进行简单的培训和指导后， 让被访者自己对着电脑上的问卷，通过键盘和电子 笔，逐题地将自己的答案直接输入到电脑中。
电话调查
传统的电话调查：适用的工具是普通的电话、 普通的印刷问卷和书写用笔。
定量调查的优点
标准化； 易于操作； 揭示隐性问题； 易于制表于统计； 敏锐地反应子群之间的
差异。
常用的定量调查方法
定量调查最基本的手段：问卷
问卷是一个为了达到调查目 的和要收集的相关数据而设 计的一系列问题的集合本， 它是定量调查的最基本的手 段，是整个调查的生产线上 的一个重要环节
第五讲 原始资料收集方法（四）
——定量的方法
定量调查的定义

定量方法演示文稿

定量方法演示文稿

定量方法演示文稿Title: A Quantitative Approach to Research MethodsIntroduction:I. Definition and PrinciplesA. Definition: Quantitative research involves the collection and analysis of numerical data to answer research questions and test hypotheses. It focuses on objective measurements and statistical analysis.B. Key principles: objectivity, generalizability,reliability, and validity.II. Steps in Conducting a Quantitative StudyA. Formulating a research question: The research question should be clear, specific, and measurable.D. Data analysis: Statistical techniques such as regression analysis, ANOVA, and correlation analysis are used to analyze the data and test hypotheses.E. Interpretation of results: The findings are interpreted in the context of the research question and presented in a clear and concise manner.III. Advantages and Disadvantages of Quantitative ResearchA. Advantages1. Objectivity: Quantitative research focuses on objective measurements, reducing bias.2. Generalizability: Large sample sizes allow for generalization of findings to the larger population.3. Reliability: The use of standardized instruments and statistical techniques enhances the reliability of the results.4. Replicability: The transparency of quantitative research allows for replication by other researchers.5. Statistical analysis: The use of statistical techniques enables rigorous analysis and identification of relationships between variables.B. Disadvantages2. Limited perspectives: Quantitative research may overlook the subjective aspects of individuals' experiences and perceptions.IV. Application of Quantitative Research MethodsB. Psychology: Quantitative research helps identify and measure psychological phenomena such as personality traits, cognitive abilities, and mental health disorders.D. Healthcare: Quantitative research is used to assess the effectiveness of treatments, identify risk factors for diseases, and analyze patient satisfaction levels.E. Social sciences: Quantitative research methods are extensively used in sociology, political science, economics, and other social sciences to study social behavior and analyze societal trends.Conclusion:。

定量测定数据的方法和过程分析(13张PPT)

定量测定数据的方法和过程分析(13张PPT)
③设3次实验测得每1.000 g碳酸镁
___晶_(_1体_－_产_8__生4_a_的)_/_C1_O_8_a2_平__均___值_(为用a mol，则n值为 含a的表达式表示)。
碳酸镁晶体是一种新型的吸波隐形材料中的增强材料。
(3)称取100 g上述晶体产品进行热重 分析，热重曲线如下图。则该条件下 合成的晶体中，
13、He who seize the right moment, is the right man.谁把握机遇，谁就心想事成。2021/8/292021/8/292021/8/292021/8/298/29/2021 •14、谁要是自己还没有发展培养和教育好，他就不能发展培养和教育别人。2021年8月29日星期日2021/8/292021/8/292021/8/29 •15、一年之计，莫如树谷；十年之计，莫如树木；终身之计，莫如树人。2021年8月2021/8/292021/8/292021/8/298/29/2021 •16、教学的目的是培养学生自己学习，自己研究，用自己的头脑来想，用自己的眼睛看，用自己的手来做这种精神。2021/8/292021/8/29August 29, 2021 •17、儿童是中心，教育的措施便围绕他们而组织起来。2021/8/292021/8/292021/8/292021/8/29
Fe8S7等，这些铁硫簇结构参与了生命起源的相关反应。某化学兴趣小组在
研究某铁硫簇结构的组成时，设计了下列实验。
【实验Ⅱ 】 确定铁的质量：
滴定 待测溶液体
草酸溶液体积/mL
次数
积/mL 滴定前刻 滴定后
将实验Ⅰ硬质玻璃管A中的残
度
刻度
留固体加入稀盐酸中，充分搅拌后
1
25.00
1.50 23.70
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GAPDH mRNA/DNA 12000 10000 8000 6000 4000 2000 0 MSG PSG FB Malpighian middle gut tubule GAPDH mRNA/DNA
GAPDH基因在家蚕幼虫各组织中的表观转录活性 基因在家蚕幼虫各组织中的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of GAPDH gene in various tissues of B. mori larvae
1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 0H 2H 4H 8H 12H 24H 48H CYP4M5 CYP6AB4
P450基因在脂肪体中 基因在脂肪体中NaF诱导的表观转录活性 Ⅱ) 诱导的表观转录活性(Ⅱ 基因在脂肪体中 诱导的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of CYP9A19 gene induced by NaF in fat body of B.mori (Ⅱ). Ⅱ
PCR
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction)简称 ＰＣＲ，是一项在短时间内大量扩增特定的Ｄ ＮＡ片段的分子生物学技术。
ＲＴ－ＰＣＲ
mRNA 逆转录酶 杂化双链
ＤＮＡ聚合酶 ＤＮＡ聚合酶 cDNA
PCR扩增 PCR扩增
荧光定量 PCR（real-time PCR) PCR（real-
表观转录活性和相对表达量的比较 Comparison of the apparent transcriptional level and the relative expressions
测定方法 mRNA/DNA mRNA / A3 mRNA mRNA /GAPDH mRNA mRNA /28S rRNA mRNA FibH in PSG 106453 96.987 689.51 0.039357 FibL in PSG 192029 174.95 1243.8 0.070995 Ser-1 in MSG 196539 1607.7 18208 0.11037
28S rRNA mRNA/DNA 120000 100000 80000 60000 40000 20000 0 MSG PSG FB Malpighian middle gut tubule 28S rRNA mRNA/DNA
28SrRNA基因在家蚕幼虫各组织中的表观转录活性 基因在家蚕幼虫各组织中的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of 28SrRNA gene in various tissues of B. mori larvae.
供试家蚕样品
氟化物添食
解剖组织 mRNA/DNA混合液 组织匀浆
TRNzol-A+
12,000 rpm , 15 min
上清加0.2ml氯仿12,000 rpm , 15 min
上清抽总RNA
去上清后,抽DNA
逆转录
测定
测定
CYP4M9 300 250 200 150 100 50 0 0H 2H 4H 8H 12H 24H 48H CYP4M9
CYP6AB4在丝腺中 在丝腺中NaF诱导的表观转录活性 在丝腺中 诱导的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of CYP6AB4 gene induced by NaF in silk gland.
250 200 150 100 50 0 0H 2H 4H 8H 12H 24H 48H CYP4M5 CYP4M9 CYP6AE
6000 5000 4000 3000 2000 1000 0 0H 2H 4H 8H 12H 24H 48H CYP9A19 CYP9A22
P450基因在中肠中 基因在中肠中NaF诱导的表观转录活性 Ⅱ) 诱导的表观转录活性(Ⅱ 基因在中肠中 诱导的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of CYP9A19 gene induced by NaF in middle gut of B.mori (Ⅱ). Ⅱ
P450基因在马氏管中 基因在马氏管中NaF诱导的表观转录活性 Ⅰ) 诱导的表观转录活性(Ⅰ 基因在马氏管中 诱导的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of P450 gene induced by NaF in Malpighian tubule(Ⅰ). Ⅰ
中心法则(genetic central dogma) 中心法则
任何一种假设都要经受科学事实的检验。 反转录酶的发现，使中心法则对关于遗传信息 从DNA单向流入RNA做了修改，遗传信息是 可以在DNA与RNA之间相互流动的。 那么，对于DNA和RNA与蛋白质分子之间的 信息流向是否只有核酸向蛋白质分子的单向流 动，还是蛋白质分子的信息也可以流向核酸， 中心法则仍然肯定前者。
基因定量研究的方法
苏州大学 卫正国
分子遗传学中基因的概念
基因的本质： 基因的本质：
长度和 （1）基因是特定长度和碱基序列的DNA片段 ）基因是特定长度 碱基序列的 片段 （2）核苷酸序列中蕴藏着遗传信息 ）
中心法则
中心法则(genetic central dogma) 中心法则
是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA 传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译 的过程。也可以从DNA传递给DNA，即完成 DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物 所遵循的法则。
本发明极大地改进了对基因转录水平检测的实 验设计，使得人们可以得到某个基因的真实的 转录水平而不是一个相对水平。此策略对于芯 片分析以及芯片数据的整合同样。
P450基因 基因
外来物 药物包括抗生素 致癌物 抗氧化剂 添味剂 溶剂 农药 染料 麻醉剂 石油产品 醇类
生理过程相关物质 甾类 类花生四烯酸 脂肪酸 丙酮、丙酮醇 脂过氧化氢 类视黄酸
中心法则(genetic central dogma) 中心法则
遗传信息并不一定是从DNA单向地流向RNA， RNA携带的遗传信息同样也可以流向DNA。 但是DNA和RNA中包含的遗传信息只是单向 地流向蛋白质，迄今为止还没有发现蛋白质的 信息逆向地流向核酸。这种遗传信息的流向， 就是克里克概括的中心法则(central dogma)的 遗传学意义。
定量与定量方法
自从1970年克里克提出分子生物学的中心法则以来， 人们对于基因的转录表达和及其调控的机制进行了大 量的研究。 1、Northern杂交方法是最早被用来测定基因转录量的 方法 2、后来，结合逆转录和聚合酶链式反应产生的RTPCR提供了一种灵敏而又简便的半定量测定方法。 3、近年来，实时定量聚合酶链式反应(qPCR)方法的 出现由于其灵敏、准确和重复性好逐步成为基因表达 的定量测定的主要方法。
12000 10000 8000 6000 4000 2000 0 0H 2H 4H 8H 12H 24H 48H CYP6AB4 CYP9A19
P450基因在马氏管中 基因在马氏管中NaF诱导的表观转录活性 (Ⅱ) 基因在马氏管中 诱导的表观转录活性 Ⅱ Apparent transcriptional activity of P450 gene induced by NaF in Malpighian tubule(Ⅱ). Ⅱ
通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针 对 通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对 特异性的探针 PCR产物进行标 记跟踪 实时在线监控反应过 产物进行标 记跟踪,实时在线监控反应过 结合相应的软件可以对结果进行分析,计算 程,结合相应的软件可以对结果进行分析 计算 结合相应的软件可以对结果进行分析 待测样品的初始模板量。 待测样品的初始模板量。
900 800 700 600 500 400 300 200 100 0 0H 2H 4H 8H 12H 24H 48H CYP4M5 CYP4M9 CYP6AE
P450基因在中肠中 基因在中肠中NaF诱导的表观转录活性 Ⅰ) 诱导的表观转录活性(Ⅰ 基因在中肠中 诱导的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of CYP9A19 gene induced by NaF in middle gut of B.mori (Ⅱ). Ⅱ
Excitation Emission
Байду номын сангаасSG
5’ 3’
SG
3’ 5’
SG
SG
SG
SYBR GREEN I
新方法的思考
所有上述方法，为了减少由于RNA不稳定和逆转录的 效率问题产生的误差，通常采用内参或者用相同量的 总RNA来对数据进行归一化。这些内参通常选用一些 看家基因如β-actin, GAPDH and rRNA等。 然而，众所周知，不同组织间总RNA的量差别很大， 那些内参基因在不同组织中的表达也不是一样的，即 使在同一组织不同条件下也不一定是相同的。 此外，还有利用外源的RNA在实时定量PCR中进行跟 踪标定（spike-in qPCR）的方法，此方法结合绝对标 准曲线可以产生更加可靠的结果。
A3 mRNA/DNA 1200 1000 800 600 400 200 0 MSG PSG FB Malpighian middle gut tubule A3 mRNA/DNA
A3基因在家蚕幼虫各组织中的表观转录活性 基因在家蚕幼虫各组织中的表观转录活性 Apparent transcriptional activity of A3 gene in various tissues of B. mori larvae.
利用这些策略，一个基因的转录水平实际上被 表示为与一个参考（内参或外参）基因的相对 表达量。因此，非常需要一个真正的、可靠的 基因的转录水平。