下载文档原格式
细胞的化学成分实验原理
细胞是生物体的基本单位，它由多种化学成分组成。
细胞的化学成分实验原理可以通过以下几个方面来介绍：
1. 核酸：细胞中的遗传物质DNA和RNA是由核酸组成的。
通过提取细胞中的核酸，可以使用化学试剂将其转化为观察和测定的形式，如使用核酸染料进行染色、利用酶的反应来确定核酸的浓度和特定序列等。
2. 蛋白质：细胞中的蛋白质是由氨基酸组成的。
蛋白质的组成和结构可以通过酶切、电泳、质谱等方法进行分析和测定。
比如，利用酶对蛋白质进行特定位点的切割，然后使用电泳或者质谱等方法测定切割后得到的片段的大小和质量。
3. 脂质：细胞膜主要由脂质组成。
脂质的组成和结构可以通过质谱、色谱和荧光染色等方法进行分析和测定。
比如，使用质谱技术可以确定脂质的分子量和结构，而使用荧光染色可以观察和测定细胞膜的完整性和脂质的分布情况。
4. 糖类和多糖类：细胞中的糖类和多糖类是细胞的重要能源和结构组分。
糖类的组成和结构可以通过色谱、质谱和光谱等方法进行分析和测定。
比如，利用高效液相色谱技术可以确定糖类的类型和含量，而利用红外光谱可以确定糖类的结构。
综上所述，细胞的化学成分实验原理包括了提取、分离、酶切、染色、质谱、色
谱和光谱等多种方法，通过这些方法可以对细胞的核酸、蛋白质、脂质和糖类等成分进行分析和测定，从而了解细胞的化学组成。
高中生物的细胞实验教案
实验目的：通过观察显微镜下的细胞结构，了解细胞的组成和功能
实验材料：
1. 显微镜
2. 盖玻片
3. 鲤鱼皮细胞样本
4. 盐水
5. 小刀
6. 小勺
7. 水滴管
8. 缝纫针
实验步骤：
1. 取一片鲤鱼皮细胞样本，用盐水洗净。
将样本放在盖玻片上，加入一滴盐水。
2. 用小刀先将细胞表面削平，然后用小勺轻轻压碎细胞，使细胞内液体渗出。
3. 用水滴管加入一滴水，混合细胞内液体。
用缝纫针搅拌均匀，覆上盖玻片。
4. 将盖玻片放在显微镜台上，调整放大倍率，观察细胞结构。
5. 观察细胞的外观特征，包括细胞核、质体、液泡等结构。
记录观察到的细胞结构和特点。
6. 总结细胞的结构与功能，讨论细胞结构与功能之间的关系。
实验注意事项：
1. 操作过程要轻柔，避免破坏细胞结构。
2. 使用显微镜时要小心操作，避免损坏显微镜。
3. 实验后要注意清洁实验台和实验器材。
拓展实验：
1. 观察其他种类的细胞样本，比较不同种类细胞的结构与功能。
2. 进一步研究细胞器官的功能和相互作用。
实验评价：
通过本实验，学生能够深入了解细胞的结构与功能，培养观察、记录和分析实验结果的能力。
同时，也促进学生的团队合作与沟通能力。
新高考生物：专题一考点04 细胞中的糖类和脂质1.下列有关组成细胞的糖类的叙述，正确的是( )A. 乳糖是所有细胞中的二糖B. 少数糖类的组成元素中含有N、PC. 淀粉、纤维素、糖原的最终水解产物都是葡萄糖D. 糖类都可以为细胞提供能量2.苏轼诗“小饼如嚼月，中有酥和饴”中，“饴”是麦芽糖，“酥”是酥油。
下列相关叙述错误的是( )A.“饴”和“酥”化学元素组成相同B.质量相同的麦芽糖和酥油相比较，酥油被彻底氧化分解耗氧更多C.糖类和脂肪是细胞的能源物质，多食富含糖与脂肪的食品会影响健康D.“饴”属于非还原糖，溶解后滴加斐林试剂水浴加热处理无砖红色沉淀生成3.细胞内糖类是主要的能源物质。
下列关于糖类的叙述正确的是( )A.常被形容为“生命的燃料”的是糖原B.食物中的蔗糖在消化道中可被直接吸收C.肝脏中的糖原可以分解产生葡萄糖及时补充血糖D.细胞膜上的糖被能够为细胞生命活动提供能量4.糖类和脂质是组成细胞的重要化合物，下列叙述正确的是( )A.磷脂中的磷酸“头”是疏水的，脂肪酸“尾”是亲水的B.糖类、脂肪、磷脂和胆固醇均参与动物细胞膜的构成C.等质量的脂肪比糖类含能量多，是动、植物体中重要的储能物质D.脂肪和糖类的元素组成相同，在人体细胞中可相互大量转化5.葡萄糖和脂肪是细胞呼吸常用的物质，葡萄糖中的氧含量远多于脂肪，科学研究中常用RQ（释放的CO2体积/消耗的O2体积）来推测生物的呼吸方式和呼吸底物类型。
下列叙述错误的是( )A.水淹时植物根细胞的RQ>1，该植物根细胞呼吸的产物可能有酒精B. 若测得酵母菌在葡萄糖培养液中的RQ=1，说明酵母菌进行的是有氧呼吸C.若测得某植物种子在萌发初期的RQ<1，该植物种子可能富含脂肪D.人体在剧烈运动的时候，若呼吸底物只有葡萄糖，RQ会大于16.在小麦种子萌发的过程中，淀粉和麦芽糖含量的变化如图所示。
下列有关说法正确的是( )A.表示麦芽糖变化的是曲线a，检测该物质可用双缩脲试剂B.表示麦芽糖变化的是曲线a，检测该物质可用斐林试剂C.表示淀粉变化的是曲线b，检测该物质可用双缩脲试剂D.表示淀粉变化的是曲线a，检测该物质可用碘液7.肝细胞内的甘油三酯、磷脂和胆固醇等质量超过肝质量的5%或在组织学上肝细胞50%以上有脂肪变性时，称为脂肪肝。
细胞生物学实验（本科生）实验内容实验一细胞的结构目的：1、熟悉实验室规范2、掌握光镜下细胞器的形态、分布特点；3、掌握临时制片法；4、学会生物绘图内容：（一）录像：临时标本片的制作（二）光镜下细胞器形态学观察：1、高尔基体（兔神经节切片）2、细胞核及核仁（蝾螈表皮装片）3、线粒体（肾小管切片）4、细胞骨架（培养肝癌细胞飞片）5、中心体*（马蛔虫受精卵切片）（二）操作：制作人口腔上皮细胞临时制片（显示活体线粒体）（三）实验报告：绘制人口腔粘膜上皮细胞实验二细胞化学细胞工程目的：1、掌握甲基绿-派洛咛染色法原理及操作技巧2、了解几种化学成分的显示方法及原理；3、观察各种化学成分在细胞中的分布；4、了解PCC原理；5、了解细胞融合及其应用；内容：（一）录象：克隆羊（二）观察：1、糖原（动物肝切片，PAS反应）2、酸性蛋白（蟾蜍血涂片，酸性固绿染色）3、酸性磷酸酶*（鼠腹腔液涂片，金属沉淀法显色）4、DNA* （小鼠睾丸切片，Feulgen反应）5、DNA、RNA*（人口腔粘膜上皮细胞涂片，吖啶橙染色，荧光显微镜观察）6、细胞融合（鸡血细胞、培养细胞）7、PCC*（Hela细胞）（三）操作：制作蟾蜍血涂片，显示DNA、RNA（四）实验报告：甲基绿-派洛咛染色原理、步骤及结果实验三显微测量细胞的生理活动目的：1、掌握显微测量技术；2、观察细胞的生理活动；3、掌握死活细胞的鉴别方法及原理；内容：(一)录象：细胞的活动显微测量（二）观察：1、胞质环流（黑藻叶片）2、吞噬作用*（小鼠白细胞）3、吞噬作用（蟾蜍白细胞）（三）操作：1、显微测量（蟾蜍红细胞）2、死活细胞鉴别（酵母细胞）（四）实验报告：1、测量5-10个细胞的大小，计算平均值；2、计算细胞存活率。
实验四细胞增殖染色体（质）目的：1、熟悉细胞增殖的主要方式；2、掌握细胞增殖周期各期的形态学特点；3、熟悉人染色体的基本形态特征；4、掌握X染色质标本的制备方法及原理；内容：（一）观察：1、动物细胞有丝分裂（马蛔虫受精卵切片）2、植物细胞有丝分裂（洋葱根尖纵切片）3、收缩环*（肝癌细胞飞片）4、无丝分裂*（草履虫装片）5、人染色体的基本形态（人血涂片）（二）操作：1、制作有丝分裂压片（洋葱根尖）2、制作X染色质标本片（人口腔粘膜上皮细胞）（三）实验报告：绘有丝分裂图、X染色质图。
实验七细胞组分的化学反应【实验目的】了解核酸、蛋白质、糖及酶的细胞化学反应原理，掌握Brachet反应及碱性蛋白、酸性蛋白、糖原和过氧化物酶的细胞化学染色方法。
【实验用品】一、材料和标本蟾蜍、小白鼠各一只、肝脏石腊切片、培养的Hela细胞。
二、器材和仪器光学显微镜、解剖器材、蜡盘、载玻片、吸水纸、染色缸、盖玻片、水浴箱。
三、试剂PBS缓冲液(pH7.2)、甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液、纯丙酮、l/2丙酮+1/2二甲苯、纯二甲苯、70％乙醇、5％三氯醋酸、0.1％碱性固绿、0.1％酸性固绿、0.5％硫酸铜、联苯胺混合液、1％番红、无水乙醇、过碘酸酒精液、Schiff 氏酒精液、亚硫酸水、Ehrlieh苏木精、95％乙醇、Carnoy固定液(甲醇：冰醋酸=3:1，体积比)【实验内容】细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。
它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。
一、Brachet反应一显示细胞内的DNA和RNA(一)原理细胞经甲基绿一呱咯宁混合液处理后，其中的DNA和RNA出现不同的呈色反应，一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和甲基绿具有亲和力，且这两种染料的作用有选择性，甲基绿染高聚分子的DNA呈蓝绿色，呱咯宁染低聚分子的RNA呈红色。
由此对细胞中的DNA和RNA进行定位、定性、和定量分析。
(二)方法l．接种Hela细胞于盖片上并培养24～48小时，使长成单层。
2．取出盖片，用PBS(pH7.2)轻轻冲洗盖片表面去除残渣。
3．放入Carnoy固定液中固定l小时。
4．浸入甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液中30分钟染色。
生药学实验讲义漯河医学高等专科学校目录实验室守则 3 实验一生药中常见的化学成分的理化鉴定（一） 4 实验二生药中常见的化学成分的理化鉴定(二) 5 实验三根类生药 6 实验四根茎类生药7 实验五皮类生药8 实验六茎木类生药9 实验七植物细胞基本结构10 实验八植物的组织11 实验九根的组织构造12 实验十双子叶植物茎的初生构造和次生构造单子叶植物、裸子植物茎的构造13 实验十一叶的构造14 实验十二花的组织构造15 实验十三果实的内部组织构造16 实验十四种子的内部组织构造17 实验十五菌类、裸子植物的性状显微鉴定18 实验十六双子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定19 实验十七单子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定20 实验十八皮类生药的显微及显微理化鉴定21 实验十九花类生药的显微及显微理化鉴定22 实验二十果实种子类生药的显微及显微理化鉴定23 实验二十一全草及其他类类生药的显微及显微理化鉴定24 实验二十二动物类和矿物类生药的性状鉴别25 实验二十三户外见习26 实验二十四附院药房见习27 附录一常用试剂配置法28 附录二层离法常用显色剂29 附录三显微镜测量法30 附录五显微镜的构造与使用31 附录六生物绘图32实验室守则一、实验注意事项：1．根据教学进程，温习与本次实验有关的课堂讲授内容。
2．仔细阅读本次实验的内容，要求弄懂实验的原理与方法。
3．准备好各种自备的实验用品，如铅笔、橡皮、直尺、报告纸等。
二、实验过程中的几点要求：1．遵守实验室规则，保持实验室安静。
2．实验认真，观察仔细，观察应当与思考结合起来，应当手、眼、脑三者并用。
3．由于实验时间有限，实验时应当善于安排自己的工作，注意力应当集中在主要问题上，不要用过多时间去钻研细小的次要问题，一时解决不了的次要问题，可留课外时间去解决o4．在实验过程中，应当随时注意观察到的现象，测量或称量的数据，计算结果等写在报告纸上，养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好习惯。
细胞化学是细胞形态学与化学、生物化学之间的边缘科学。
其特点是利用已知的化学反应，在保持细胞原有的形态结构上，以化学反应的方法显示出细胞中的化学成分，然后通过光学显微镜进行定性、定位和定量分析。
细胞化学不但有利于研究细胞的形态联系功能与代谢，定位显示化学性质和化学成分，而且还有利于确定细胞的特征及化学成分的变化规律、细胞损伤状态的诊断、病因机制和预后治疗等。
随着现代科学技术的发展，细胞化学除了普通染色及光学显微镜基础上的细胞化学外，电镜细胞化学、荧光细胞化学、免疫细胞化学等现代细胞化学技术正在广泛应用，这些技术不但丰富了细胞化学的研究内容，而且进一步加深了我们对细胞结构及活动规律的了解。
实验目的：1.了解并掌握Brachet反应的原理和操作方法2.了解并掌握细胞中多糖和过氧化物酶反应的原理和方法实验器材：DNA和RNA的Brachet染色普通光学显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸、洋葱鳞茎表皮（1）Unna试剂：甲基绿派洛宁染色液甲液：5％派洛宁水溶液6 ml，2％甲基绿水溶液6 ml，蒸馏水16 ml 乙液：1 M乙酸缓冲液（pH 4.8）16 ml甲、乙两液分别置4℃冰箱备用，用时甲乙两液混匀。
（2）1 M乙酸缓冲液（pH 4.8）：A液：冰醋酸6 ml加蒸馏水至100 mlB液：乙酸钠13. 5g加蒸馏水至100 ml取A液40 ml＋B液60 ml混匀后pH为4.8。
实验器材：细胞中多糖和过氧化物酶反应普通光学显微镜、镊子、培养皿、载玻片、盖玻片、洋葱鳞茎、马铃薯块茎（1）高碘酸溶液：高碘酸（HIO4·2H2O）0.4 g，蒸馏水10 ml、95％乙醇35 ml，1/3 M乙酸钠溶液（2.72 g乙酸钠溶于100 ml H2O）5 ml，。
（2）Schiff试剂：称取0.5 g碱性品红加入到100 ml煮沸的蒸馏水中（用三角烧瓶），时时振荡，继续煮5 min（勿使之沸腾），使之充分溶解。
观察人血的永久涂片的变量说明摘要：一、人血永久涂片的制作方法二、观察人血永久涂片的变量1.细胞形态2.细胞数量3.细胞分布4.细胞化学成分三、变量在人血永久涂片观察中的应用四、人血永久涂片在临床检测中的应用五、总结与展望正文：观察人血的永久涂片是为了对人体血液细胞进行详细的研究和分析。
在人血永久涂片的制作过程中，首先需要采集新鲜的人血液，然后将血液涂抹在载玻片上，使用甲醛或其他固定液进行固定，最后进行染色和封片。
这个过程对于保证涂片的质量和可观察性至关重要。
在观察人血永久涂片时，需要注意以下几个变量：一、细胞形态细胞形态是人血永久涂片观察中最基本的变量。
通过观察细胞形态，可以了解细胞的正常与否，以及可能存在的病理变化。
例如，贫血患者的红细胞形态会发生改变，表现为大小不等、形状不规则等。
二、细胞数量细胞数量是衡量血液细胞浓度的重要指标。
在观察人血永久涂片时，可以通过计数细胞数量来评估患者的健康状况。
例如，白细胞数量增多可能表示存在感染或炎症。
三、细胞分布细胞分布是指细胞在涂片上的分布情况。
正常情况下，红细胞和白细胞在涂片上的分布应该是均匀的。
如果出现细胞分布不均，可能与某些疾病有关。
四、细胞化学成分细胞化学成分是指细胞内的各种物质。
通过观察人血永久涂片，可以了解细胞内化学成分的改变，从而判断患者的生理状况。
例如，观察细胞内脂肪颗粒的增多可以提示脂质代谢异常。
在人血永久涂片的观察中，这些变量具有重要的临床应用价值。
人血永久涂片广泛应用于临床检测，如贫血、白血病、淋巴瘤等疾病的诊断。
通过观察人血永久涂片，医生可以快速、准确地了解患者的病情，为临床治疗提供依据。
总之，观察人血永久涂片对于临床检测具有重要价值。
了解和掌握涂片观察中的变量，可以帮助医生更好地诊断和治疗疾病。
实验四细胞的化学成分观察
一、实验原理
（一）细胞内DNA和RNA的原位显示
细胞被甲基绿-哌洛宁混合液染色后，其中的DNA和RNA将呈现不同的颜色，这是由于DNA、RNA的聚合程度不同引起的。
DNA聚合程度较高，与甲基绿结合后被染成蓝绿色，而RNA聚合程度较低，与哌洛宁结合后显示红色。
（二）蛋白质
1．细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示
细胞中不同的蛋白质分子所携带的酸性基团和碱性基团的数量不同，造成这些蛋白质在一定的pH溶液中所携带的电荷数也不相同。
生理条件下细胞中带负电荷多的蛋白质即为酸性蛋白，而带正电荷多的蛋白质即为碱性蛋白。
用三氯醋酸将细胞中的核酸抽提掉，再用不同pH的固绿染液分别染色，则可将细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白显示出来。
2．糊粉粒
蛋白质可以贮藏物的形式存在于植物种子内。
某些植物种子胚乳细胞中液泡内的贮藏蛋白质因水分丧失而成结晶体，称为糊粉粒(alenronegram)，革兰氏碘液能与糊粉粒作用而呈黄色。
（三）细胞内过氧化物酶的原位显示
在生物体内，细胞代谢过程中会产生对机体有害的过氧化氢。
细胞内有过氧化氢酶(catalase)存在，能使有毒的过氧化氢分解，生成水并释放氧气，对机体起保护作用。
（四）碳水化合物的观察
1. 可溶性糖类
单糖和双糖是以溶解状态存在于活细胞中，凡是含有自由醛基(—CHO)、或含α-OH、或多羟基的酮基(C=O)的单糖或双糖，都能在碱性溶液中将二价铜离子(Cu2+)还原成一价铜离子(Cu+)，从而生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
2．淀粉
淀粉是植物细胞内贮藏的最重要的碳水化合物，遇碘可变成蓝色或紫色。
二、实验用品
（一）材料：蟾蜍、豚鼠、马铃薯、苹果。
（二）仪器设备：光学显微镜、剪刀、镊子、解剖盘、牙签、吸水纸、载玻片、盖玻片、染色缸。
（三）试剂：70%乙醇、甲基绿-哌洛宁混合液、5%三氯醋酸、0.1%酸性固绿（pH2.2）、
0.1%碱性固绿（pH8.0～8.5）、1%革兰氏碘液、2%菲林试剂。
三、实验步骤与结果
（一）细胞内DNA和RNA的原位显示
1．蟾蜍血涂片的制备：
处死蟾蜍后，打开体腔，剪开心包，小心地在心脏尖剪一小口，血液从心脏流出，用干净载玻片的一端蘸取少许血液，以300～40°紧贴另一载玻片的一端，向玻片的另一端推去，形成较薄的血膜，血涂片制备完成后，室温下晾干备用。
2．固定：
取一张晾干的血涂片，放入70%乙醇中固定5min～10min后取出，室温下晾干。
3．染色：
将已经固定的晾干的血涂片放入甲基绿-哌洛宁混合液中染色10min～15min取出，用
吸水纸吸去多余染液后，放在显微镜下镜检观察。
4．实验结果：
在低倍镜和高倍镜下，可以观察到蟾蜍红细胞的细胞质呈现红色，细胞核呈现蓝绿色。
说明DNA主要分布于细胞核；而RNA主要分布于细胞质。
（二）蛋白质
1．细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的原位显示
1）固定：
每组取2张已经晾干的蟾蜍血涂片（前面已经制备好），放入70%乙醇中固定5min～10min，取出晾干备用。
2）抽提核酸：
将2张已经固定的晾干后的血涂片放入5%三氯醋酸中抽提核酸15min，该步骤在温度高于60℃（T＞60℃）的水浴箱中进行，取出后用自来水反复冲洗，晾干后进行染色。
3）染色：
一张血涂片放入0.1%酸性固绿（pH2.2）中染色10min；另一张血涂片放入0.1%碱性固绿（pH8.0～8.5）中染色40min～60min，取出后用自来水反复冲洗干净后，晾干，置于显微镜下观察。
4）实验结果：
在低倍镜和高倍镜下，可以观察到经0.1%酸性固绿染色的蟾蜍红细胞的细胞质和核仁均被染成绿色，说明酸性蛋白主要分布于细胞质和核仁区域；经0.1%碱性固绿染色的蟾蜍红细胞的细胞核被染成绿色，说明碱性蛋白主要分布于细胞核区域。
2．糊粉粒
取发芽的小麦种子，在其胚芽附近横切一薄片，放于载玻片上，加上革兰氏碘液一滴，盖上盖玻片。
在高倍镜下观察，可见种子中部染成蓝色，种皮内有一层略呈方形的细胞中有被染成黄色的颗粒，这就是蛋白质结晶体即糊粉粒。
（三）细胞内过氧化物酶的原位显示
1．准备新鲜马铃薯和熟马铃薯各一小块
2．用刀片分别切取新鲜马铃薯和熟马铃薯各一小块，置于载玻片两端，同时滴加新配制2％过氧化氢溶液2—3滴。
3．实验观察
放置5min后观察反应现象，哪一块周围有气泡生成，为什么?
（四）碳水化合物的观察
1. 可溶性糖类
吸取裴林试剂2滴于载玻片卜，用刀片切取一薄片新鲜苹果，放于溶液中。
将载玻片于酒精灯上微微加热，盖上盖玻片后，置低倍镜卜观察，细胞内出现大量砖红色的氧化亚铜颗粒。
2．淀粉
取清洁的载玻片l张，先加1滴清水在载玻片中央，然后加l／2滴1％革兰氏碘液，混匀。
再用刀片切取生马铃薯一薄片(越薄越好)放人染液中，盖上盖玻片。
置于低倍镜下观察，可见薄壁细胞中充满了大小不等的卵圆形或圆锥形的蓝色颗粒，即为淀粉粒，它是细胞中的一种内含物。
移走低倍镜，换高倍镜观察，可见淀粉粒具有层纹结构
[附] 试剂的配制
1．甲基绿-哌洛宁混合液
（1）0.2mol/L醋酸缓冲液（pH4.8）：
冰乙酸1.2ml，加蒸馏水至100ml。
醋酸钠（NaAc·3H2O）2.72g溶于100ml蒸馏水中。
使用时两种液体按照2:3的比例混合。
（2）2%甲基绿染液：去杂质甲基绿粉2.0g溶于100ml 0.2ml/L醋酸缓冲液（pH4.8）中。
甲基绿粉往往混合有影响染色效果的甲基紫，所以必须预先除去，其方法是甲基绿粉溶于蒸馏水，装入分液漏斗中，加足量的氯仿用力振荡，静置，弃去含甲基紫的氯仿，再加入氯仿重复数次，至氯仿中无甲基紫为止，最后放入40℃温箱干燥备用。
（3）1%哌洛宁染液：哌洛宁1.0溶于100ml 0.2mol/L醋酸缓冲液（pH4.8）。
上述各种溶液预先配置完成，使用时将2%甲基绿染液和1%哌洛宁染液以5:2的比例混合即成。
该溶液须现配现用，不宜久置。
2．5%三氯醋酸：三氯醋酸5.0g溶于100ml蒸馏水中。
3．0.1%酸性固绿（pH2.2）：固绿0.2g溶于100ml蒸馏水中，制成0.2%固绿液，再取盐酸（比重1:19）0.11ml加蒸馏水至100ml，使用时将0.2%固绿液和上述盐酸稀释液以1:1混合即为0.1%酸性固绿（pH2.2）。
4．0.1%碱性固绿（pH8.0～8.5）：先配制0.2%固绿液（方法同上），再取碳酸氢钠50mg溶于100ml蒸馏水中制成0.05%的碳酸氢钠溶液，使用时将上述两种溶液以1:1混合即成
0.1%碱性固绿（pH8.0～8.5）。
5．裴林试剂
甲液：结晶硫酸铜(CuSQ·5H：0)34．5g，溶于500ml蒸馏水中。
乙液：将酒石酸钾钠173g和氢氧化纳125g，溶于500mi蒸馏水中，临用前将甲溶液和
乙溶液等量混合。
6．革兰氏碘液
碘化钾2g，碘1g，溶于300ml蒸馏水中。
