一氧化氮检测.ppt
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呼气一氧化氮含量测定
呼气一氧化氮含量测定是一种用于评估人体肺部疾病的方法,通过检测呼气中的一氧化氮浓度来了解气道炎症的情况。
一氧化氮是一种气体信号分子,人体通过呼吸将其排出体外,一氧化氮的浓度可以间接反映气道炎症的程度。
在进行呼气一氧化氮含量测定时,通常采用的是呼气一氧化氮仪。
被检测者会被要求深呼吸几次,然后吹气进入仪器,仪器会测量呼气中的一氧化氮浓度。
通过这个测定过程,医生或研究人员可以了解被测者气道炎症的情况,进而制定相应的治疗方案或评估疾病的病情。
呼气一氧化氮含量测定在临床上有着广泛的应用,特别是在哮喘、慢性阻塞性肺病等气道疾病的诊断和治疗中。
研究表明,气道炎症会导致气道内一氧化氮的浓度升高,因此测定呼气一氧化氮含量可以帮助医生及时了解气道炎症的情况,及时干预治疗。
另外,呼气一氧化氮含量测定还可以用于评估气道炎症的严重程度和炎症的类型。
不同病症引起的气道炎症会导致一氧化氮的浓度有所不同,通过测定含氮气体的浓度,可以帮助医生做出更为精准的诊断和治疗方案。
总的来说,呼气一氧化氮含量测定是一种简便、非侵入性的检测方法,可以帮助医生更好地了解气道疾病的炎症情况,为病人的治疗提供更为科学的依据。
在今后的临床实践中,呼气一氧化氮含量测定将会有更广泛的应用,为疾病的诊断和治疗提供更多的帮助。
NO Assay(BioAssay Systems--QuantiChrom TM Nitric Oxide Assay Kit )原理: NO能被氧化成亚硝酸盐和硝酸盐,从而通过测定亚硝酸根离子NO2-/硝酸根离子NO3-的总量来确定NO水平。
样品制备:1.用1mL枪头吸弃每孔上层细胞培养基1mL,先横刮3次再竖刮3次,刮起剩下1mL细胞培养液,然后用1mL枪头冲吹细胞3次,显微镜下计数细胞数,收集1×106细胞于1.5mL离心管中,置于冰上。
2.于40C,5000rpm离心3min,吸弃上清液,收集细胞沉淀。
3.向细胞沉淀中加入1mL冰上预冷的1×PBS液,用200uL枪头混匀后于40C,5000rpm离心3min。
吸弃上清液,收集细胞沉淀,置于冰上。
4.向细胞沉淀中加入150uL细胞裂解液,用200uL枪头混匀后于冰上裂解30min。
5.于40C,12000rpm离心10min。
6.向150uL细胞裂解液中加入8uL ZnSO4,vortex上混匀,然后加入8uLNaOH,vortex上混匀,于40C,14000rpm离心10min。
取上清液,按50uL/管分装,作为NO检测样品。
标准曲线制作:稀释标准品:取25uL 1.0mM 标准品,加入225uL ddH2O,用200uL枪头混匀,将标准品稀释成100uM Premix。
1.WR工作液配制:将25uL Reagent A,25uL Reagent B和50uL Reagent C于1.5mL 离心管中充分混匀。
2.样品及标准品反应:将50uL样品和标准品与100uL WR工作液于1.5mL离心管中混匀,于600C孵育10min。
3.测定:将反应好的样品与标准品加到96孔板中,于500-570nm(峰值540nm)测定OD值。
4.NO浓度计算:(按如下公式计算)【NO】=(OD sample-OD blank)/slope (uM),注:OD blank为空白对照吸光值,slope为标准曲线斜率。
一氧化氮测定一氧化氮,简称NO,是一种无色气体,它与氧和二氧化碳一起构成了大气中的重要组成部分。
一氧化氮具有比较强的腐蚀性,在大气中存在具有重要环境意义的污染物,它也是生物体新陈代谢等活动中的主要参与者。
因此,获取NO的浓度信息对于研究区域环境污染有着至关重要的意义。
一氧化氮的测定方法有多种,其中常见的比较有:一、光度法:光度法是利用一种特定的检测器,检测在某一特定波长处,一氧化氮吸收光后所产生的特定信号,从而对环境中一氧化氮的浓度进行测定。
二、比色法:比色法通过用特殊的试剂将环境中的一氧化氮反应,反应后形成一种比色物,通过肉眼观察比色物的色度,从而估算出一氧化氮的浓度。
三、气相分析法:气相分析法是将一氧化氮从空气样品中提纯出来,并进行分析测定,从而得出一氧化氮的浓度。
四、浊度法:浊度法是利用一种特定的仪器,经过特殊处理后将空气样品中的气态一氧化氮吸收到反应室中,当放入一定浓度的NaOH 溶液时,一氧化氮就会被氢氧化钠催化水解成碳酸钠和氨水,然后再被一氧化钠反应产生一个恰当浓度的氯化钠溶液,最后只需通过浊度仪对溶液进行测量,即可知道一氧化氮的含量。
上述是一氧化氮测定常用的几种方法,它们都有各自的优势,使得一氧化氮测定更加高效和准确。
除此之外,在实际测定中,一氧化氮测定也应结合其它测定方法,以及采用先进的仪器设备,提高测定的准确性。
一氧化氮测定在环境监测、医药分析等方面都有着重要的应用,比如用于检测大气中一氧化氮的浓度;检测生物体体液中NO浓度;用于肺功能诊断;研究新药等。
它在环境和医药等领域都有极其重要的作用。
综上所述,一氧化氮测定对于获取一氧化氮的浓度含量具有重要的意义,它的应用领域也十分广泛,在环境保护、药物研发以及临床诊断等方面均占据重要的地位。
只有在选用合适的测定方法的同时,采用先进的仪器来采集和处理测定数据,才能取得准确的结果,为环境保护和药物研发提供有效信息。
呼出一氧化氮测定
呼出一氧化氮测定是一种用于检测肺部炎症程度的诊断方法。
该方法通过测量呼出气体中的一氧化氮浓度来确定肺部炎症的程度。
一氧化氮是由肺部炎症区域产生的一种气体,因此,测量呼出气体中的一氧化氮浓度可以提供有关肺部炎症的信息。
呼出一氧化氮测定非常简单和无痛,只需要在呼出口吸气后,呼出气体被收集,并在设备中进行一氧化氮浓度的测量。
这种测定方法可以帮助医生确定肺部炎症的程度,并制定合适的治疗方案。
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NO Assay(BioAssay Systems--QuantiChrom TM Nitric Oxide Assay Kit )原理: NO能被氧化成亚硝酸盐和硝酸盐,从而通过测定亚硝酸根离子NO2-/硝酸根离子NO3-的总量来确定NO水平。
样品制备:1.用1mL枪头吸弃每孔上层细胞培养基1mL,先横刮3次再竖刮3次,刮起剩下1mL细胞培养液,然后用1mL枪头冲吹细胞3次,显微镜下计数细胞数,收集1×106细胞于1.5mL离心管中,置于冰上。
2.于40C,5000rpm离心3min,吸弃上清液,收集细胞沉淀。
3.向细胞沉淀中加入1mL冰上预冷的1×PBS液,用200uL枪头混匀后于40C,5000rpm离心3min。
吸弃上清液,收集细胞沉淀,置于冰上。
4.向细胞沉淀中加入150uL细胞裂解液,用200uL枪头混匀后于冰上裂解30min。
5.于40C,12000rpm离心10min。
6.向150uL细胞裂解液中加入8uL ZnSO4,vortex上混匀,然后加入8uLNaOH,vortex上混匀,于40C,14000rpm离心10min。
取上清液,按50uL/管分装,作为NO检测样品。
标准曲线制作:稀释标准品:取25uL 1.0mM 标准品,加入225uL ddH2O,用200uL枪头混匀,将标准品稀释成100uM Premix。
按下表制作标准曲线:No. Premix+ddH2O Nitrite(uM)1 0uL+100uL 02 20uL+80uL 203 40uL+60uL 404 60uL+40uL 605 80uL+20uL 80样品NO水平测定:1.WR工作液配制:将25uL Reagent A,25uL Reagent B和50uL Reagent C于1.5mL 离心管中充分混匀。
2.样品及标准品反应:将50uL样品和标准品与100uL WR工作液于1.5mL离心管中混匀,于600C孵育10min。
呼气末一氧化氮测定呼气末一氧化氮(FeNO)测定是一种用于评估气道炎症的非侵入性检测方法。
此项检测方法广泛应用于哮喘和过敏性鼻炎的诊断和管理,在医学界具有很高的价值和重要性。
一、检测前准备在进行FeNO测定之前,需要考虑以下几个方面:1. 患者需要遵循以下准备工作来保证准确的测量结果:① 测量前至少不要吸入药物2小时;② 测量前至少不要吸烟3小时;③ 测量前不要进行激烈的运动,以免影响呼吸(至少30分钟);④ 禁食、禁饮茶、咖啡等刺激食品30分钟。
二、检测过程执行以下步骤进行检测:1. 让患者坐在舒适的椅子上,松开衣领,依据个人情况,可以选择不戴口罩或佩戴口罩;2. 患者用深呼吸呼气至肺黏膜清空,然后将嘴唇用力紧闭于呼吸机端口上,使用耳塞皮下给予预定深度的呼气(平均呼气流速为50~70L/min);3. 随着呼气的过程中,仪器会自动记录呼气流速的变化以计算出FeNO 值;4. 需要测量3次,最终取平均值作为测量结果。
三、分析结果分析FeNO测量结果的方法有以下几种:1. 参考值法:通过参照已知的年龄和性别相关的FeNO值范围,对FeNO测定结果进行评估;2. 绝对值法:测定FeNO值并根据剂量应答和疗效来评估患者;3. 组内变异法:该方法仅适用于哮喘研究,可以根据不同的疗效评估治疗方案;四、意义和价值FeNO测定在临床中已被广泛应用,并具有以下几个方面的意义和价值:1. 评估过敏性鼻炎和哮喘患者的气道炎症;2. 患者建立个性化治疗方案,通过FeNO监测患者哮喘的控制水平,指导哮喘患者管理;3. 提高哮喘患者治疗的有效性和安全性;4. 帮助临床医生作出诊断和治疗建议。
综上所述,FeNO测定是一种非侵入性检测方法,已广泛应用于哮喘和过敏性鼻炎的诊断和管理。
通过准确的测量和分析结果,临床医生可以更好地评估气道炎症和为患者提供更好的治疗建议。
气道一氧化氮测定一、测定方法气道一氧化氮测定是一种非创伤性检查,用于评估气道炎症。
测定方法通常采用气道呼出气一氧化氮(Fractional exhaled Nitric Oxide,FeNO)检测。
这种方法的原理是通过测定呼出气体中一氧化氮的浓度来评估气道炎症反应的程度。
具体操作方法为,受试者通过口含器缓慢、均匀地呼出一口气,仪器立即分析并打印结果。
二、测定前的准备1. 测定前应告知受试者相关注意事项,并签署知情同意书。
2. 受试者应停用可能会影响一氧化氮测定的药物,如吸入性糖皮质激素等。
3. 受试者应避免剧烈运动,以免影响测定结果。
4. 测定时应保持安静,避免咳嗽、深呼吸等动作。
5. 受试者应按照指示正确使用口含器,保证呼出的气体能够被仪器准确测量。
三、结果分析气道一氧化氮测定结果根据不同情况分为不同的范围:1. 健康成人FeNO 值一般<20 ppb。
2. 气道炎症患者FeNO 值可能升高,但不同病因及炎症类型的患者FeNO 值可能有重叠。
3. 过敏体质或哮喘患者FeNO 值可能较高。
四、临床意义气道一氧化氮测定是一种无创、无痛、无辐射的检查方法,对于气道炎症性疾病的诊断、评估及治疗监测具有重要意义。
其临床意义主要包括以下几个方面:1. 辅助诊断:气道一氧化氮测定可以作为哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)等气道炎症性疾病的辅助诊断手段。
通过测定FeNO 值,有助于了解气道炎症反应程度,为临床医生提供参考依据。
2. 监测病情:气道一氧化氮测定可以用于监测气道炎症性疾病的病情变化。
通过定期测定FeNO 值,可以了解患者病情的发展情况以及治疗的效果,有助于及时调整治疗方案。
3. 指导治疗:气道一氧化氮测定可以指导气道炎症性疾病的治疗。
对于FeNO 值较高的患者,可适当增加抗炎药物的剂量或调整治疗方案;而对于FeNO 值较低的患者,可适当减少抗炎药物的剂量或调整治疗方案。
4. 鉴别诊断:气道一氧化氮测定有助于鉴别诊断不同病因引起的气道炎症性疾病。