循环肿瘤细胞的检测与临床意义研究

临床医药文献电子杂志Electronic Journal of Clinical Medical Literature2019 年 第 6 卷第 30 期

2019 Vol.6 No.3016

转移性结直肠癌循环肿瘤细胞的临床检测意义

顾心怡1，陈荣进1，张 宇2，黄雪洁2

（1.遵义医学院研究生院，贵州 遵义 563000；2.大连大学附属中山医院，辽宁 大连 116001）

【摘要】目的 探讨转移性结直肠癌患者外周血循环肿瘤细胞与临床参数之间的关系。方法 收集2014-10-01～2017-10-31确诊为转移性结直肠癌的44例患者的血液样本，采用Cell Search系统检测CTC，分析CTC

与转移性结直肠患者各病例参数之间的关系。结果 转移性结直肠癌患者外周血循环肿瘤细胞检出阳性水平

与患者的年龄、性别、肿瘤位置、原发部位、转移部位、化疗方案、浸润深度（T分期）无关（P＞0.05）；

与淋巴结转移状态（N分期）相关（P＜0.05）；CTC阳性的患者中位PFS为10个月，而CTC阴性的患者中位PFS为14个月；差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 患者淋巴结转移数量越多，外周血循环肿瘤细胞的阳

性检出率越高；外周血循环肿瘤细胞阳性的患者比阴性的患者无进展生存期短。

【关键词】转移性结直肠癌；外周血循环肿瘤细胞；检测

【中图分类号】R735.3+7 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.30.16.01

本文通过研究转移性结直肠癌患者外周血循环肿瘤细

胞数量与临床参数之间的关系，探讨循环肿瘤细胞在结直

肠癌诊疗中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象

收集2014-10-01～2017-10-31就诊于大连大学附属中

山医院的44例转移性结直肠癌患者作为研究对象，男性30例，女性14例；年龄28～93岁，中位年龄63岁；使用

FOLFORI化疗方案13例，使用FOLFOX化疗方案17例，其

・３０２４・　国际检验医学杂志２０１５年ｌＯ月第３６卷第２０期Ｉｎｔ　Ｊ　Ｌａｂ　Ｍｅｄ，Ｏｃｔｏｂｅｒ　２０１５，Ｖｏ１．３６，Ｎｏ．２０　ｔａｒｎａｓｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｂｙ　ＮＸＩ　１　０４　ｉｎ　ｃｏｒｒｌｂｉｎａｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｃｅｆｔａｒｏｌｉｎｅ：ｅｘ—　ａｍｉｎｉｎｇ　ｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ｗｉｔｈ　ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｔｙｐｅｓ　ｏｆ口一ｌａｃｔａｍａｓｅｓ［Ｊ］．Ａｎｔｉ—　ｍｉｃｒｏｂ　Ａｇｅｎｔｓ　Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ，２０１２，５６（１）：２５８—２７０．　［３７］Ｓｔｅｉｎｍａｎｎ　Ｊ，Ｋａａｓｅ　Ｍ，Ｇａｔｅｒｍａｎｎ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｏｕｔｂｒｅａｋ　ｄｕｅ　ｔＯ　ａ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｓｔｒａｉｎ　ｈａｒｂｏｕｒｉｎｇ　ＫＰＣ一２　ａｎｄ　ＶＩＭ—ｌ　ｉｎ　ａ　Ｇｅｒｍａｎ　ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｕｌｙ　２０１０　ｔｏ　Ｊａｎｕａｒｙ　２０１１［Ｊ］．Ｅｕｒｏ　Ｓｕｒｖｅｉｌｌ，２０ｌ１，１６（３３）：１９９４４．　［３８３　Ｔｓａｋｒｉｓ　Ａ，Ｔｈｅｍｅｌｉ—Ｄｉｇａｌａｋｉ　Ｋ，Ｐｏｕｌｏｕ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｅ—　ｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ—－ｄｉｓｋ　ｔｅｓｔｓ　ｕｓｉｎｇ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｏｒｏｎｉｃ　ａｃｉｄ　ＣＯ１ＴＩ—－　ｐｏｕｎｄｓｆｏｒ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅｐｒｏ—　ｄｕｅｉｎｇ　ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｉｓｏｌａｔｅｓ［Ｊ］．Ｊ　Ｃｉｉｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ，　２０１ｌ，４９（８）：２８０４—２８０９．　［３９］Ｌｅ￣ｉｏ　ＲＳ，Ｃａｒｖａｌｈｏ—Ａｓｓｅｆ　ＡＰ，Ｃｏｒｒｅａｌ　ＪＣ，ｅｔ　ａ１．ＫＰＣ　２　ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ　・综　述・　（收稿日期：２０１５－０４—１４）　循环肿瘤细胞的分子检测及临床应用的研究进展　韩丹丹，魏敏，邓　芳△综述，李　明审校　（安徽省肿瘤医院，安徽合肥２３００００）　关键词：肿瘤；　循环肿瘤细胞；　分子诊断；　个体化治疗　ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４１３０．２０１５．２０．０４３　文献标识码：Ａ　文章编号：ｌ６７３　４１３０（２０１５）２０—３０２４—０４　癌症是目前危害人类健康的首要疾病，分子检测在癌症的　诊断和治疗中发挥的作用日益增大，基因重排、染色体易位和　融合基因形成、原癌基因及抑癌基因等分子检测对于疾病的诊　断、疗效监测、预后判断等具有重要的意义。并且在个体化治　疗的时代，基因检测成为决定日常临床治疗的一部分　。］。　肿瘤细胞经过上皮间质转变，突破细胞外基质进入外周血　液循环成为循环肿瘤细胞（ＣＴＣｓ）Ｅ４　５］。鉴于其取材简便，能反　映机体肿瘤情况，相当于实时活检，日益得到广泛的关注。从　１８６９年Ａｓｈｗｏｒｔｈ最早在转移性癌症患者血液中观测到　ＣＴＣｓ　］，随后在９Ｏ年代中期开始探索捕获、分析ＣＴＣｓ的方　法并进行大量临床试验Ｅ　］，２００４～２００８年美国ＦＤＡ相继批　准ＣｅｌｌＳｅａｒｃｈ技术用于转移性乳腺癌、结直肠癌和前列腺癌的　临床诊断　”］，２００７年ｃＴＣｓ被ＡＳＣ０推荐为肿瘤标志物，　ＣＴＣｓ的应用已经从细胞计数发展到对其分子特性的研究，其　检测可反应肿瘤的生物学行为，可在证实肿瘤的存在、发病过　程、评估患者的预后和个体化治疗后改善情况等作出提供相关　信息，以及发现和鉴定新的治疗靶点。本文就近年来ＣＴＣｓ富　集技术的研究进展进行总结，并探讨其在肿瘤诊治中应用　价值。　ｌ　ＣＴＣｓ富集技术　ＣＴＣｓ在外周血的中浓度极为罕见，每毫升血液中约为　１～ｌｏ个。因此对外周血中的ｃＴＣｓ进行富集是研究ＣＴｃｓ的　特性、形态及细胞标志的基础［　］。目前，ＣＴＣｓ的富集主要是　根据其物理和生物属性原理，随着纳米材料等新技术的不断进　步，ＣＴＣｓ分离技术层出不穷。　１．１传统物理技术在应用物理原理分离方面，传统的分离　法是基于ＣＴＣｓ的密度梯度进行离心分离，但该方法缺乏特异　性，易导致目的肿瘤细胞丢失。Ｖｏｎａ等　提出的基于肿瘤细　胞与Ｊ下常细胞的大小差异来分离肿瘤细胞的分离方法　（ＩＳＥＴ），但ＩＳＥＴ只能分离直径大于８　ｍ的肿瘤细胞，使其分　离的灵敏性也受到限制。近年来发展的微流控制技术，利用细　胞的大小和变形能力特征来捕获ＣＴＣｓ，制作半径介于ＣＴＣｓ　和血细胞的阵列微流控制芯片，使得ＣＴＣｓ向一侧汇聚而血细　胞保持原有路径流过阵列，从而实现肿瘤细胞和正常细胞的分　选和富集。这种通过物理方法分离的肿瘤细胞形态和表面的　各种抗原或分子标记均保存完整，不影响细胞的特性，为后续　的检测提供了良好的条件　。随着纳米技术的发展，纳米技　术应用到肿瘤的分子诊断有很大的前景，纳米材料可使磁珠达　纳米（１Ｏ～１００　ｒｉｍ）级，增大了比表面积从而增加与待测细胞　接触的概率，同时可降低对细胞造成的机械性压力，大大提高　ＣＴＣｓ的富集效率，被广泛用于ＣＴＣｓ的富集和检测　。２０１３　年，Ｎａｔｕｒｅ杂志将ＣＴＣｓ纳米检测列为最具创新性和转化潜力　的肿瘤诊断新方法［１　。　１．２传统免疫技术　免疫方法分为阳性选择法和负性选择　法，阳性选择法研究较多，其根据ＣＴＣｓ表面免疫分子表征进　行选择性捕获。常用的分子标志有：ＥｐＣＡＭ和ＣＫ等。目前　公认的金标准Ｃｅｌｌ　Ｓｅａｒｃｈ　ＴＭ　ＣＴＣｓ检测系统即依赖于免疫　磁珠吸附肿瘤细胞表达ＥｐＣＡＭ（上皮细胞黏附分子）抗原，利　用抗体包被的磁珠来捕获ＥｐＣＡＭ阳性的细胞，然后成像并计　数＿１　。２０１０年，Ｓｔｏｔｔ开发出一种“人字形ＣＴＣｓ芯片”，利用　ＥｐＣＡＭ抗体来捕获ＣＴＣｓ，这种设计能够比较快速地处理血　液，每小时达２　ｍＬ，且具有良好的灵敏度和选择性¨ｌ　。Ａｒｉｉｌ—　ｓｔｒｏｎｇ等［１　的研究表明在乳腺癌和前列腺癌患者的ＣＴＣｓ细　胞中均可检测到同时表达上皮标志及问皮标志以及干细胞标　志的ＣＴＣｓ细胞，可用此装置进行选择性富集。但是Ｇｏｒｇｅｓ　等【　研究表明在正常细胞样和基底样型乳腺癌细胞中很多不　表ＥｐＣＡＭ，因此仪通过ＥｐＣＡＭ来捕获ＣＴＣｓ细胞则可能会　丢失部分ＣＴｃｓ。ｊ　时可利用ＣＴＣｓ细胞ＣＤ４５表达缺如的特　作者简介：韩丹丹，女，技师，主要从事血液学检验方面的研究。　通讯作者，Ｅ—ｍａｉｌ：ａｙｈａｎｄａｎｄａｎ＠１６３．ｃｏｒｎ。　Ｈ　㈨　一　～～　一一一　一一～一¨　Ｔ协　Ｌ二　一．　舯　ｍ　ｍ～　～

中华临床实验室管理电子杂志２０１４年８月第２卷第３期Ｃｈｉｎ　ＪＣｌｉｎＬａｂＭ　（ＥｌｅｃｔｒｏｎｉｃＥｄｉｔｉｏｎ），Ａｕｇｕｓｔ２０１４，Ｖｏ１．２，Ｎｏ．３　

循环肿瘤细胞检测及临床应用价值　

郭玮孙云帆潘柏中　樊嘉　・新技术与新进展・　

【摘要】　循环肿瘤细胞（ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｔｕｍｏｒ　ｃｅｌｌｓ，ＣＴＣ）作为“液体活检”标志用于肿瘤患者实　

时动态监测。随着分离、富集和检测技术的发展，已经能够在外周血中检测到单个ＣＴＣ。近几年来，　

关于循环肿瘤细胞的研究受到多方关注。已有大量证据提示ＣＴＣ与预后的关系，此外，对肿瘤微转　

移早期诊断和分期、疗效监测及个体化医疗更具临床价值。许多针对早期和转移性肿瘤的临床试验将　

ＣＴＣ作为监测指标，并联合其他平行试验研究ＣＴＣ分子特征的临床价值。ＣＴＣ作为实时监测肿瘤治　

疗反应的指标广泛应用于临床，为确定肿瘤患者治疗策略提供依据。　

【关键词】　循环肿瘤细胞；　液体活检；　转移和分期；　预后；　疗效监测；　个体化医疗　

Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ　ｔｕｍｏｒ　ｔｅｎｓ　Ｇｕｏ　Ｗｅｉ＊Ｓｕｎ　咖　Ｐａｎ　Ｂａｉｓｈｅｎ，Ｆａｎ　Ｊｉａ．　

＂ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｚｈｏｎｇ￣＇ｈａｎＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｆｕｄａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００３２，Ｃｈｉｎａ．　

ＬｉｖｅｒＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅ．Ｆｕｄａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００３２，Ｃｈｉｎａ　

Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ．＂Ｆａｎ　Ｊｉｄ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆＬｉｖｅｒＳｕｒｇｅｒｙ，Ｚｈｏｎｇｓｈａｎ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，＂Ｌｉｖｅｒ　ＣａｎｃｅｒＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｆｕｄａｎ　

Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０００３２，Ｃｈｉｎａ，Ｅｍａｉｌ：ｆａｎ．ｊｉａ＠ｚｓ－ｈｏｓｐｉｔａ１．ｓｈ．ｃｎ　

黑龙江医学第４２卷２０１８年第６期　ＨＥｌ１　ＯＮＧＪＩＡＮＧ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＪＯＵＲＮＡ１　Ｖｏ１．４２　Ｎｏ．６　Ｊｕｎ．２０１８　

循环肿瘤细胞检测对于肺癌患者的临床意义分析　

申凤乾　（开封市中心医院肿瘤科，河南开封４７５０００）　

摘要：目的　研究分析循环肿瘤细胞检测对肺癌患者的临床意义。方法　选取２０１６年１２月一２０ｌ７年ｌＯ月开封市中心　

医院接收的８Ｏ例肺癌患者为研究组，对其临床资料进行回顾性分析，并选择同期入院健康群体８０例为参照组，所有患者　均给予循环肿瘤细胞检测，　４－结循环肿瘤细胞检测的临床意义。结果　统计数据，研究组检出阳性率为（７６．２５％），参照　组检出阳性率为（０．００％），差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；同时循环肿瘤细胞阳性与肺癌患者的临床分期、转移关系密切　

相关，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论对肺癌患者的临床诊断以及治疗过程中，积极进行循环肿瘤细胞检测，能够　对肺癌患者病情发展判断起到十分关键的作用，有助于肺癌细胞患者及时获得了病情有效控制策略，对延长肺癌患者生命　以及提升肺癌患者生存治疗均有着十分重要的意义，值得推广。　

关键词：循环肿瘤细胞检测；肺癌；应用价值　

ｄｏｉ：ｌ０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４—５７７５．２０１８．０６．０２９　学科分类代码：３２０．６７４０　中图分类号：Ｒ７３４．２　文献标识码：Ｂ　

肺癌作为临Ｊ米·｝Ｊ常见的一种恶性肿瘤，近ＪＬｑ－＇－Ｎ癌的　

发　率逐渐Ｉ　升，威胁着我国闫民的生命安令。男性群体　常发的恶性肿瘤就是肺癌，是造成男性群体死　的重要因　

素，肺癌早期的临床特征缺乏一定的特异性，一些患者在　接受临床诊断的过程中，已经发展成为了晚期，即便是一　

些肺痴患着及时接受了　期诊治，也会有着极高的复发　率，如何有效对肺癌患者病情发展以及控制给予更加科学　

的方法，足Ｈ前ｔ分关注的焦点问题。根据目前临床研究　，】＝＝，很多肺癌患者的原发灶中会产生循环肿瘤细胞，其