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动物细胞培养和核移植技术【教学目标】1．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
3．举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。
【教学重难点】1．动物细胞培养的过程及条件。
2．用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
3．单克隆抗体的制备和应用。
【教学方法】诱思法、分析法、归纳法。
【教学过程】一、引入新课利用植物细胞可以培育成植物体，那么，你利用动物细胞能不能大量繁殖动物体，以提高繁殖率呢？这节课我们来学习动物细胞工程。
二、进行新课动物细胞工程的常用技术手段有哪些？最基础的技术手段是什么？动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。
最基础的技术手段是动物细胞培养。
1．动物细胞培养概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
（1）需分散成单个细胞；（2）需要在培养基上培养；（3）动物细胞培养的实质是细胞增殖。
2．动物细胞培养的过程：（学生自学总结）取动物组织块↓剪碎、胰蛋白酶处理分散成单个细胞↓细胞悬液↓转入培养液原代培养↓胰蛋白酶处理传代培养问题：什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？悬液中分散的细胞很快就贴附在有丝分裂，称为细胞贴壁。
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。
问题：如何打破接触抑制？需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分别继续培养，让细胞继续增殖。
问题：细胞传代培养代数有什么特点？传代培养的细胞一般传至10代后就不易传下去了，一般来说，细胞在传至10～50代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能发生变化，当继续传代培养时，少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性。
所以目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。
3．动物细胞培养的条件（1）无菌、无毒的环境。
动物细胞培养和核移植技术学习目标1、了解动物细胞培养的过程。
2、了解动物体细胞核移植技术的原理。
3、比较动物细胞培养与植物组织培养区别。
4、掌握动物体细胞核移植技术的过程和意义。
学习重点动物体细胞核移植技术学习难点核移植技术的过程和应用我的课堂一、自主学习1．动物细胞工程常用的技术手段有________、______________、____________、________等。
其中，______________是其他动物细胞工程技术的基础。
2．动物细胞培养就是从动物机体中取出相关，将它分散成，然后放在适宜的中，让这些细胞生长和增殖。
3．动物细胞培养的条件有⑴：对和进行无菌处理，还可在培养液中添加一定量的．此外，应定期。
⑵：合成培养基中有、、、、等，通常需加入和等天然成分。
⑶：哺乳动物适宜温度为，多数细胞生存的适宜pH 为。
⑷：主要是和。
CO2的主要作用是。
4.动物核移植是指将动物的一个细胞的，移入一个已经的卵母细胞中，使其并发育成一个，这个胚胎最终发育成动物个体。
可分为和。
二、合作探究与交流展示探究一动物细胞培养1．为什么选用胚胎或幼龄动物组织细胞？用胰蛋白酶将组织分散成单个细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？2．解释“细胞贴壁”和“接触抑制”现象3．什么是原代培养和传代培养？4．动物细胞培养需要怎样的条件5．动物细胞培养技术应用举例探究二动物体细胞核移植技术和克隆动物（阅读教材P48图2-21）1．卵母细胞一般培养至什么时期可用于重组？2．用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，这是为什么？3．为什么说“生出的犊牛与供体奶牛遗传物质基本相同”？4．虽然动物细胞失去了全能性，但该技术证明仍然具有全能型．5．举例说出体细胞核移植技术的应用三、我的疑问四、归纳总结1、知识归纳⑴动物细胞培养过程⑵体细胞核移植的过程2、方法总结五、自主测评1．在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是（）A．使动物组织分散为单个细胞进行培养B．去掉细胞壁成为原生质体C．去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合D．促进蛋白质水解为多肽2．在进行动物细胞培养时，通常选用的培养材料是（）A．衰老退化的动物组织细胞B．成熟动物个体的体细胞C．动物的受精卵细胞D．动物胚胎或幼龄动物个体的细胞3.如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（）A.乳腺细胞的B.卵细胞的C.胃腺细胞的D.囊胚时期的胚胎细胞的4.下列关于哺乳动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是()A.体细胞核移植过程中可以用任何细胞作为受体细胞B.目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体C.利用动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜D.用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞5.核移植的受体细胞是MⅡ期卵母细胞，下列有关说法错误的是()A.MⅡ期卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质B.MⅡ期卵母细胞体积比较大，操作起来相对容易C.可以把供体细胞直接注入去核的卵母细胞中D.MⅡ期卵母细胞对克隆动物的遗传特性没有任何影响6.下图是某克隆羊的培育过程模式图，与获得该克隆羊接近的生殖方式和其发育成熟时所分泌的主要性激素分别是()A.无性生殖；雄性激素B.无性生殖；雌性激素C.有性生殖；雄性激素D.有性生殖；雌性激素7.下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。
2.2.3动物体细胞核移植技术和克隆动物2022-2023学年高二生物学人教版（2019）选择性必修三课前导学【新知导学】➢体细胞核移植的过程1.概念：（1）供体：动物的一个细胞的。
（2）受体：去掉细胞核的。
（3）结果：形成重新组合的细胞并发育成新胚胎，继而发育成动物个体。
2.分类：种类难易程度原因胚胎细胞核移较容易分化程度低，全能性容易表现植体细胞核移植较难分化程度高，全能性难表现3.过程➢体细胞核移植技术的应用前景及存在问题1.核移植技术的应用：（1）畜牧业：加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。
（2）医药卫生：通过建立转基因体细胞系，再利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为，生产许多珍贵的。
（3）治疗人类疾病：①转基因克隆动物的细胞、组织或器官可以作为的供体。
②以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞，经过诱导分化能形成相应的细胞、组织或器官，将它们移植给患者时，可以避免反应。
③研究克隆动物可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。
④克隆一批遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析。
⑤克隆特定疾病模型的动物，还能为研究该疾病的致病机制和开发相应的药物提供帮助。
（4）保护濒危物种：该技术有望增加濒危物种的存活数量。
2.存在问题：（1）成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进一步改进。
（2）相对于技术研究，核移植的理论研究较为滞后，需要与发育生物学、细胞生物学和分子遗传学等学科更深层次的理论研究相结合。
（3）一些研究者指出，绝大多数克隆动物存在健康问题，许多克隆动物表现出遗传和缺陷，如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷和免疫失调等。
【问题思考】1.体细胞核移植技术培养的克隆动物是对细胞核供体动物进行了100%的复制吗?为什么?2.为什么核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同？答案1.不是。
因为克隆动物的遗传物质并不全部来自细胞核供体动物，细胞核DNA 来自供体动物，但是细胞质中DNA来自卵母细胞，也控制生物的一些性状。
专题二2.2.1动物细胞培养和核移植技术一、教材分析《动物细胞培养和核移植》是人教版高中生物选修三《现代生物科技专题》第2章第2节《动物细胞工程》第1节课的教案内容，主要学习叶绿体动物细胞培养这一基础技术和核移植技术的过程和应用。
本节内容是本章的重点同时又是近几年的热点，，又是后面学习动物细胞融合和单克隆抗体的基础。
b5E2RGbCAP二、教案目标1．知识目标：<1）．简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
<2）．简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
2．能力目标：(1> 运用细胞的基础知识，分析细胞工程的理论基础(2>通过小组间的交流与合作，提高学生的语言表达能力及思维的严密性。
3．情感、态度和价值观目标：(1>通过对动物细胞培养和核移植的学习体会生物科学技术的发展和进步。
(2>通过联系知识与生产实践的关系，激发学生对生物学科的兴趣热爱。
三、教案重点难点重点：<1）动物细胞培养的过程及条件。
<2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
难点：用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
四、学情分析我们的学生基础较差，有些学生必修模块的知识掌握不牢固，所以本节知识的学习有一定的难度，讲解时需要详细。
并且这一节的知识离现实生活较远，需仔细分析，但学生对这一块的学习兴趣很浓厚。
p1EanqFDPw五、教案方法1．讲授法：对细胞培养和核移植的过程进行疑难讲解。
2．自学法：学生先自学基本知识。
3．学案导学：见后面的学案。
4．新授课教案基本环节：预习检查、总结疑惑→情境导入、展示目标→合作探究、精讲点拨→反思总结、当堂检测→发导学案、布置预习DXDiTa9E3d六、课前准备1．学生的学习准备：预习实验“动物细胞培养和核移植”，初步把握过程和条件及应用2．教师的教案准备：多媒体课件制作，课前预习学案，课内探究学案，课后延伸拓展学案。
七、课时安排：1课时RTCrpUDGiT八、教案过程(一>预习检查、总结疑惑检查落实了学生的预习情况并了解了学生的疑惑，使教案具有了针对性。
达标检测查漏补缺1、动物细胞工程技术的基础是（C ）
A 动物细胞融合
B 胚胎移植
C 动物细胞培养
D 核移植
2、植物体细胞杂交制备原生质体和动物细胞培养配制一定浓度的细
胞悬浮液，所需要的酶依次是（B ）
A 淀粉酶和磷脂酶
B 纤维素酶和胰蛋白酶
C 脂肪酶和二肽酶
D 过氧化氢酶和半乳糖苷酶
3、克隆羊多利的出生过程中，下列哪项技术没有运用到（D）
Ａ细胞培养技术Ｂ细胞核移植技术Ｃ胚胎移植技术Ｄ基因工程技术
４、下列有关克隆人的说法错误的是（C ）
A克隆人是一种无性生殖方式
B、克隆人证明了人体细胞细胞核具有全能性
C、在现有克隆技术条件下，成功率为100%
D、政府禁止生殖性克隆人
５、世界上第一只克隆绵羊“多利”的培育程序如右图所示。
请看
图后回答：
（1）写出图中a 、b 所指的细胞工程名称:
a ，b
方法
题→点对应
注意审题
反思。
2.2.1 动物细胞培养和核移植技术一、教学目标1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
二、教学重点和难点1.教学重点（1）动物细胞培养的过程及条件。
（2）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
2.教学难点（1）用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。
三、教学策略有了第一节的基础，学生对本节内容易于理解。
因此，本节教学采用讲授、自学、讨论等相结合的教学方法。
具体建议如下。
在动物细胞培养的教学中，可把这部分内容归纳成三个问题：（1）为什么要进行动物细胞的培养？（2）什么是动物细胞的培养？（3）怎样进行动物细胞的培养？第三个问题是本节课的重点。
关于动物细胞的培养过程，教师可参照教材中的动物细胞培养过程示意图进行讲解，讲解中要注意区分原代培养和传代培养这两个概念。
对于动物细胞培养的条件，则要从学生已有的内环境的知识出发，启发学生自己动脑思考这个问题，以加深对培养条件的理解。
在动物体细胞核移植技术及克隆动物的教学中，可首先让学生列举所知道的克隆动物，调动学生已有的知识。
随后可向学生提问：克隆动物的方法与植物组织培养一样吗？然后向学生说明目前动物体细胞克隆是通过核移植技术来实现的，以引入本节课的主题。
关于核移植技术发展简史，可让学生在课堂上阅读，本节课的重点和难点是在动物体细胞核移植技术过程，教材中选用了一个非常好的素材──以诞生在我国的高产克隆奶牛为例，来说明体细胞核移植的过程。
教师应充分利用和挖掘教材内容，带领学生一步步弄清动物体细胞核移植技术的过程。
对于体细胞核移植技术的应用前景和存在的问题这部分内容，可结合本节教材“思考与探究”中的有关问题，以及“拓展视野”中的有关克隆羊多利的早衰问题等。
关于教学，教师要利用好教材提供的材料，突出从问题入手的思路，先介绍医疗实践中仅靠细胞培养难以获得大量抗体，然后，一步一步启发学生讨论怎样解决这个问题。
要把科学家在研制单克隆抗体过程中，通过大胆的想像，创造性地解决问题的过程作为本节教学的重点和亮点，使学生在获得单克隆抗体知识的同时，受到创新精神的教育。
课题 2.2.1动物细胞培养和核移植技术课时 2学习目标 1. 动物细胞培养的过程、条件及应用2. 动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景重点难点重点：1.动物细胞培养的过程及条件 2. 用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程难点：用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程学习流程学：一、动物细胞培养1.动物细胞工程的常用技术手段有哪些？最基础的技术手段是什么？2. 自学总结动物细胞培养的过程：3. 如何打破接触抑制？4. 动物细胞培养的条件是什么？二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1、为什么不能直接利用动物细胞培育动物体？2、自学总结体细胞核移植的过程：思：1、思考比较植物组织培养和动物细胞培养的区别。
2、体细胞核移植技术的意义、应用前景和存在的问题有哪些？用：1．下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（）A．培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清B．原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞C．动物细胞培养一般能够传到40～50代，但其遗传物质发生了改变D．动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞2．生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。
如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是（）A．将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B．将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C．取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体D．将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体3．一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。
这种克隆技术具有多种用途，但是不能（）A．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优秀个体C．用于保存物种 D．改变动物的基因型4．下列哪—项属于克隆（）A．将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B．将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C．将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D．将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系5．有关全能性的叙述，不正确的是（）A．受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高B．生物体内细胞由于分化全能性不能表达C．卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高D．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性6．下列属于组织培养但不是克隆的是（）A．将花粉离体培养成单倍体植株 B．芽发育成枝条C．根尖分生区发育成成熟区 D．上皮细胞无性繁殖产生的细胞群*7．动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是（）A．葡萄糖 B．蔗糖C．动物血清 D．维生素*8．动物细胞培养的细胞来自于（）四、学习小结A．任何个体的细胞 B．只能取自动物胚胎细胞C．只能取自幼龄动物的组织细胞 D．胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞*9．动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是（）A.动物细胞培养B．动物细胞融合 C．单克隆杭体 D．胚胎、核移植**10.(2006，广雅中学考题)CCTV一2于2005年4月7日报道，卫生部4月6日发布了《苏丹红危险性报告评估》，报道中提到苏丹红一号是一种人工色素(工业染料)，它在人体内代谢生成相应的胺类。
2.2.1动物细胞培养和核移植技术编定人：金晓媛审定人：张宏艳班念博学习目标:1.简述动物细胞培养的过程、条件及其应用2.简述克隆动物的概念和原理；体细胞核移植技术和体细胞克隆及其应用前景学习重点:植物体细胞杂交技术学习难点:植物体细胞杂交技术【课前预习】一动物细胞与组织培养1、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的______，将它分散成____________，然后，放在适宜的______中，让这些细胞______和繁殖。
2、原理：_____________________3、动物细胞培养的流程：取动物组织块→______→用______处理分散成______→制成______→转入______中进行______培养→贴满瓶壁的细胞用____________处理分散成____________，制成____________→转入______中进行____________→放入______培养箱中培养关键词辨析:i）细胞贴壁：。
ii）细胞的接触抑制：。
iii）原代培养：。
iv）传代培养：。
传代培养中会出现“传代危机”，试解释之。
4、动物细胞培养需要满足以下条件：（1）____________的环境：培养液应进行______处理。
（2）营养：合成培养基成分：糖、____、促生长因子、无机盐、______、通常需加入_____、血浆等。
（3）温度：适宜温度：____________；pH：____________。
（4）气体环境：______ 95%，______5%。
5、动物细胞培养的应用：动物细胞培养技术的应用：(1)生产蛋白质生物制品。
举例：。
(2)检测有毒物质。
(3) 。
(4)用于科学研究。
如筛选抗癌药物等二．动物体细胞核移植技术和克隆动物1、概念：动物核移植是将动物的一个细胞的______移入一个己经去掉______的____________中，使其______并发育成一个新的______，这个新的______最终发育为动物个体。
2．2 动物细胞工程2．2.1 动物细胞培养和核移植技术1．简述动物的细胞培养及条件。
(重点) 2.举例论证动物细胞培养技术的应用及意义。
3．简述动物核移植的过程及意义。
(重、难点)一、动物细胞工程(阅读教材P 44)1.常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等。
2.技术基础：动物细胞培养技术。
二、动物细胞培养(阅读教材P 44～P 47)1.概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
2.培养过程3.相关概念(1)细胞贴壁：细胞悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上。
(2)细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞停止分裂增殖的现象。
(3)原代培养：指动物组织消化后的初次培养。
(4)传代培养：贴壁的细胞，出现接触抑制后，需要重新用胰蛋白酶来处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖的培养过程。
4．培养条件(1)无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理。
(2)营养⎩⎪⎨⎪⎧无机物：无机盐、微量元素等有机物：糖、氨基酸、促生长因子、天然成分 血清、血浆等(3)温度和pH ⎩⎪⎨⎪⎧温度：36.5±0.5 ℃pH ：7.2～7.4(4)气体环境⎩⎪⎨⎪⎧O 2：是细胞代谢所必需的CO 2：维持培养液的pH 5.应用(1)生产生物制品：如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
(2)应用于基因工程：动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞，离不开动物细胞培养。
(3)检测有毒物质，判断某种物质的毒性。
(4)用于生理、病理、药理等方面的研究，如筛选抗癌药物等。
三、动物体细胞核移植技术和克隆动物(阅读教材P 47～P 50)1．动物核移植概念(1)供体：动物一个细胞的细胞核。
(2)受体：去掉细胞核的卵母细胞。
(3)结果：形成重组胚胎，发育成动物个体。
2．两种类型⎩⎪⎨⎪⎧胚胎细胞核移植体细胞核移植 3．体细胞核移植的过程4．体细胞核移植的应用前景(1)畜牧生产方面：加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。
2019版【高中生物选修三导学案】2.2.1 动物细胞培养和核移植技术【导学目标】1.简述动物细胞培养的过程、条件及应用。
2.简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。
【自主学习】一、动物细胞培养1.原理：。
2．概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞和。
3．过程取动物组织块↓分散组织细胞：剪碎，用或胶原蛋白酶处理一段时间↓配制细胞悬液↓原代培养：具有和的特点传代培养⎩⎪⎪⎨⎪⎪⎧（1）先用胰蛋白酶等处理贴满瓶壁的细胞，再分瓶继续培养（2）10代以内的细胞保持正常的二倍体核型（3）细胞传到10～50代左右时，增殖会逐 渐缓慢，以至于完全停止，但这时部分细胞的细胞核型可能发生改变，克服 细胞寿命的自然极限，获得不死性4．条件(1)无菌、无毒的环境：对 和所有 进行无菌处理。
(2)营养：合成培养基中有糖、 、 、无机盐、 ，通常需加入 、血浆等。
(3)温度和pH①适宜温度： 〒0.5 ℃。
②适宜pH ： 。
(4)气体环境：主要是O 2和CO 2，O 2是细胞代谢所必需的，CO 2的主要作用是 。
5．应用(1)生物制品：如 疫苗、干扰素、 的生产。
(2)检测有毒物质，判断某种物质的 。
(3)用于 、 、 等方面的研究，如筛选抗癌药物等。
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物1.理论基础：动物的细胞核具有 。
2．概念：将动物的一个细胞的 ，移入一个已经去掉细胞核的中，使其并发育成一个新的胚胎，最终发育为动物个体。
3．分类：包括和，其中较易成功。
4．过程5．应用前景(1)在畜牧生产中：可以加速家畜遗传改良进程，促进。
(2)在保护濒危物种方面：可增加这些动物的。
(3)在医药卫生领域：转基因克隆动物可以作为生产珍贵的医用蛋白。
(4)在治疗人类疾病方面：转基因克隆动物细胞、组织和器官可以作为的供体。
(5)人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织、器官后，可以用于。
(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的和。
6．存在问题(1) 低。
(2)绝大多数克隆动物还存在。
(3)克隆动物食品的存在争议。
思考交流1．动物细胞培养和植物组织培养的原理一样吗？2．为什么切取动物组织块进行细胞培养时，常选择胚胎或幼龄动物的器官或组织？正误判断1．常选用胚胎或幼龄动物的器官或组织进行动物细胞培养是因为这些细胞容易获得。
( )2．动物细胞是基因工程技术中常用的受体细胞，离不开动物细胞培养。
( ) 3．克隆动物时，常以去核的卵母细胞为受体细胞的原因是细胞体积大、含有促进细胞核全能性表达的物质。
( )4．克隆动物成功率低且存在健康问题，因此克隆动物研究无意义。
( )【合作探究】一、动物细胞培养①动物细胞培养的具体过程如何？什么是原代培养？什么是传代培养？分别有什么特点？②什么叫接触抑制？什么样的细胞具有这一机制，什么样的细胞失去这一机制？例1某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。
供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。
请回答下列有关动物细胞培养的问题。
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。
一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量________。
(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是的恒温___________________________________________。
细胞培养应在含5%CO2的作用是______________________________________。
培养箱中进行，CO2(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长________。
药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更________。
若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需要________处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的________。
【答案】(1)多(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质维持培养液的pH(3)停止多胰蛋白酶(4)抗生素二、动物体细胞核移植技术及克隆什么是克隆？如何从不同的层次理解克隆？【达标检测】课堂达标1．下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是( )A．动物细胞培养的目的就是为获得细胞分泌蛋白B ．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散开C ．动物细胞培养通常不会出现接触抑制现象D ．可以通过细胞培养技术获得完整的动物个体2．一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件( )①无毒的环境 ②无菌的环境 ③合成培养基需加血浆 ④温度与动物体温相近 ⑤需要O 2，不需要CO 2 ⑥CO 2调节培养液pHA ．①②③④⑤⑥B ．①②③④C ．①③④⑤⑥D ．①②③④⑥3．中科院动物研究所与福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫细胞核植入去核后的兔子卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。
下列描述与克隆无关的是( )A ．“复制”B ．无性繁殖C ．组织培养D ．基因工程4．一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。
这种克隆技术具有多种用途，但是不能( )A ．有选择地繁殖某一性别的家畜B ．繁殖家畜中的优良个体C ．用于保存物种D ．改变动物的基因型5．下列对哺乳动物体细胞核移植技术的描述不正确的是( )A ．该技术的难度明显高于胚胎细胞核移植B ．通常采用减数第二次分裂期卵母细胞作为受体细胞C ．可通过显微操作法除去卵母细胞核D．克隆动物是对提供体细胞核的动物进行了完全复制6．现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质；B品种牛则为B细胞核、B细胞质。
(1)如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞核和B细胞质组成，基本步骤是：从A品种牛体内取出体细胞，进行体外培养。
然后再从培养细胞中取出________注入B品种牛的________卵母细胞中，经过某种刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被称为________，将该胚胎移入代孕母牛的________中，通过培育可达到目的。
(2)克隆牛的产生说明______________具有全能性。
克隆牛的性状主要表现________品种牛的特征。
由A、B两个品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自________个亲本，细胞质来自________性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成_______________________(填“相同”或“不同”)。
(3)请举一例说明克隆牛培育成功的实际意义。
____________________________________。
课外强化1．为了将用于培养的动物组织细胞分散开，以便配制成一定浓度的细胞悬浮液，应选用下列哪种物质处理选取来的动物组织( )A．胃蛋白酶B．胰蛋白酶C．盐酸D．胰脂肪酶2．动物细胞培养过程的顺序是( )①原代培养②传代培养③胰蛋白酶处理组织，形成分散的悬浮液A．①②③B．①③②C．②③①D．③①②3．乙马的卵细胞核被甲马的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂发育成重组胚胎，再植入丙马的子宫内发育，结果产下一匹小马。
下列叙述正确的是( )A ．直接在体外对甲马的体细胞进行诱导也能培养出胚胎B ．小马的性状与甲马完全相同C ．此项技术可用于保护濒危物种D ．该过程可以很好地证明动物细胞的全能性4．下列属于动物细胞培养与植物组织培养区别的是 ( )A ．动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同B ．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C ．动物细胞培养过程中可发生基因重组，而植物组织培养不能D ．植物组织培养和动物细胞培养都体现了细胞的全能性5．实验小鼠皮肤细胞培养(非克隆培养)的基本过程如下图所示。
下列叙述错误的是( ) 实验小鼠――→甲 皮肤组织――→乙 皮肤细胞――→丙 细胞1培养――→丁 细胞2培养A ．甲过程需要对实验小鼠进行消毒B ．乙过程对皮肤组织可用胰蛋白酶消化C ．丙过程得到的细胞大多具有异倍体核型D ．丁过程得到的细胞具有异质性6．下列不属于动物细胞工程应用的是( )A ．大规模生产干扰素，用于抵抗病毒引起的感染B ．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C ．大规模生产食品添加剂、香料等D ．利用核移植技术，加快优良种畜的繁殖7下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。
请据图回答下列问题。
(1)图中①所示的结构名称是________。
(2)图中③④所示的生物技术名称分别是________________、__________________。
(3)过程③通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它________________________________________________________________________。
(4)过程④通常用②作为受体细胞的原因是____________________________________________。
(5)图示方法与一般的异体核移植相比最大的优点是__________，该种基因治疗所属类型为_________________________________________________。
