EDDS与EDTA植物提取土壤重金属及潜在环境风险评价
金属污染是主要的环境问题之一，危害着生态环境和人类健康[1]。作为一项高效、低廉、非破坏的土壤净化技术，植物修复越来越受到人们的关注。植物修复的效益取决于植物地上部分金属含量及其生物量。虽然连续种植植物提取的第一次田间试验取得了成功，但目前已知绝大多数超累积植物生长慢，生物量小，且大多数为莲座生长，很难进行机械操作[2]，而生物和非生物螯合剂能提高金属在土壤中的迁移活性，增强土壤溶液中有效态重金属浓度，从而提高植物对重金属的吸收和富集能力[2]。利用生长速度快、生物量大的普通植物借助螯合剂辅助的联合植物修复便成了有效可行的替代途径。通过添加化学试剂，运用大生物量植物螯合受污染土壤中重金属被认为是有效的方法[1]。
技术的基本原理是通过螯合剂或移动剂的媒介作用打破重金属等污染物在土壤液相和固相之间的分配平衡，使污染物更多的以液相的形式存在[2、3]。螯合剂的主要作用体现在增加土壤中重金属的溶解度，提高重金属根际散能力和促进重金属自根系向地上部转运, 增加了植物修复效率[3]。乙二胺四乙酸（EDTA）是目前被广泛应用的一种螯合剂。EDTA能够活化Pb、Zn、Cd 、Cu、Co、Ni 等多种重金属离子，促进植物对这些离子的吸收，其中对Pb 的活化效果最好。但是，EDTA对环境残留效应明显，很容易造成二次污染[4]。乙二胺二琥珀酸（EDDS）是一种最近发现的易生物降解且低毒的螯合剂，半衰期短，对环境残留效应少，是目前推荐的能够大量使用的螯合剂。EDDS对Cu的活化效果最好，对其他重金属活化能力欠佳[3]。
本文拟对非生物螯合剂乙二胺四乙酸EDTA和生物螯合剂乙二胺二琥珀酸EDDS优点进行整合，低剂量复合式施用EDTA、EDDS螯合剂，进行螯合剂不同配比设计与潜在环境风险研究，为合理利用螯合剂植物螯合修复土壤重金属污染提供科学依据。
1材料和方法
1.1实验材料
1.1.1实验植物
选择生长快，生物量大且能同时富集几种重金属的单子叶植物玉米(Zea mays L)、双子叶植物油菜（Brassica junica）。
1.2.1土壤培养：
试验取渝涪高速公路两旁受汽车尾气污染严重的Cu、Pb、Cd三种重金属污染表层0-30cm 菜地土壤，自然风干后研磨，过4mm筛备用。每盆称量2kg公路旁菜地土壤，混合0.5kg 腐殖土，以及速效肥尿素（100g）和磷酸二氢钾（50g）以提供植物充分营养元素，土壤反复混匀后，自然条件下静置平衡15天后播种。
1.2实验方法
1.2.1 盆栽培养
盆栽试验在室内进行。每盆装2kg土壤重金属平衡好后，播撒20颗种子，待种子出苗2周后，每盆保留生长程度一致的幼苗10株，植物生长期间定期称重，定量补充蒸发水分100-150mL，保证植物生长。同时室温控制在20℃-25℃湿度控制在50%-70%。出苗后6周后，按如下处理分别添加EDTA和EDDS：
a．对照组（CK）：加去离子水
b: EDTA：施入3mmol•kg-1EDTA
c．配比1（EDTA/EDDS=1:1）：施入0.5mmol•kg-1（EDTA）+0.5 mmol•kg-1（EDDS）
d．配比2（EDTA/EDDS=2:1）：施入1mmol•kg-1（EDTA）+0.5 mmol•kg-1（EDDS）
e．配比3（EDTA/EDDS=1:2）：施入0.5mmol•kg-1（EDTA）+ 1mmol•kg-1（EDDS）
f ．EDDS ：施入3mmol •kg-1（EDDS ）
在添加螯合剂EDTA 和EDDS 两周以后对植株进行收割。 1.2.2 土壤淋滤实验
实验中进行人工纯水模拟雨水淋滤。第一次淋滤在盆栽实验添加螯合剂一周以后进行，第二次淋滤在盆栽实验添加螯合剂两周以后进行。每次根据重庆市年平均雨量添加纯水量350mL ，在1小时内均匀添加入盆。实验过程中采用较大雨量，历时较短，因此忽略了植被截留和雨期蒸发。淋滤液经慢速滤纸过滤后用500mL 玻璃瓶收集待测TN 、TP 以及重金属Pb 、Cu 、Cd 含量。 1.3测定方法
采集完整植株样品以及模拟雨水淋滤液。
植株经自来水和超纯水清洗，80℃烘箱烘干，研碎过100目筛，待测。植物样品的消解采用Durali Mendil 等的方法[5]。即在Teflon 消化罐中加入0.5 g 植物样品，依次加入6 mL 硝酸（65%）和2 mL 双氧水（30%），在微波炉中加压加热消解。消解完全后定容至25 mL 。 在原子吸收分光光度计(岛津AA6800)测定土壤、植物样品消解液和土壤淋滤液中重金属Cu 、Pb 、Cd 含量。
整个测定过程中植物样则用灌木枝叶GBW07602作质量控制参考物质。
测试过程中每批样品分析均作2 个全程序空白,借以检查和控制样品在处理和测试过程中可能带来的污染。 采用平行样控制样品测试的精密度,平行样品数不少于测试样品的10 %，同时对样品采用加标回收，回收率在85%-112%。 淋滤液中总氮(TN)采用半微量凯氏法进行测定。总磷(TP)采用硫酸-高氯酸消解,钼锑抗比色法分析。
2结果与讨论（Results and discuss ）
2.1 重金属富集
植物重金属P b 富集系数
植物根部重金属C u 富集系数
植物根部重金属C d 富集系数
EDTA/EDDS 配比
图1 不同EDTA/EDDS 配比对植物的重金属Pb 、Cu 、Cd 富集系数影响 Figure 1. Enrichment factors of heavy metals in different EDTA/EDDS ratio plant roots
螯合剂具有多齿状的配位基，能与单一金属离子形成化学复合物。对于利用添加螯合剂到土壤中，利用植物提取土壤中重金属，诱导产生超累积效应。螯合剂与土壤中重金属结合，扰动了金属在土壤固相与液相只见到平衡，减弱金属与土壤的结合常数，把金属从土壤固相结合位点上竞争下来，以金属螯合物的形式增加了土壤溶液中重金属的浓度，这一过程持续直到螯合剂与金属的结合达到饱和[3-7]，从而促进重金属自根系向地上部转运。
从图1可以看出，加入螯合剂的植物重金属富集系数均高于相应对照组植物富集系数。玉米重金属Pb 富集系数值在添加单一螯合剂EDTA 时达到最高0.87；，重金属Cu 富集系数值在添加螯合剂配比2（EDTA/EDDS=2:1）达最高4.6；重金属Cd 富集系数值在添加螯合剂配比1（EDTA/EDDS=1:1）达最高为1.01。对于作物油菜而言，重金属Pb 富集系数在添加螯合剂配比3（EDTA/EDDS=1:2）时，达到最高1.26；重金属Cu 富集系数在添加螯合剂配比2（EDTA/EDDS=2:1）时，达到最高7.3；重金属Cd 富集系数在添加单一螯合剂EDTA 时，达到最高0.95。当部分金属离子穿过细胞壁和细胞膜进入细胞以后，能和细胞质中的蛋白质形成复杂的稳定螯合物。从而能使重金属的毒性降低。螯合剂作用下重金属是通过非选择性的
质外体途径进入植物根部，在蒸腾流的驱动下向植物地上部转移，其情形可能涉及重金属的单一被吸收，以及金属-螯合剂络合物的共同被吸收
[8-9]
。
2.2EDTA/EDDS 联合施用配比对环境风险性分析
2.2.1土壤淋滤液重金属浓度
土壤淋滤液P b 浓度（m g L -1）
EDTA/EDDS 配比
土壤淋滤液C u 浓度（m g L -1）
土壤淋滤液C d 浓度（m g L -1）
EDTA/EDDS 配比
图2 EDTA/EDDS 配比处理对玉米组土壤淋滤液中Pb 、Cu 、Cd 浓度影响
Figure 2 The effects of different ratio of EDTA/EDDS application on the concentration of leaching Pb 、Cu 、Cd solution in corn soil
