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非感染性骨不连的发生及治疗骨不连是骨折治疗过程中较常见的并发症，发生率为5％～10％，尽管医学不断进步，但治疗效果仍然差强人意。
骨不连可以分为感染性和非感染性两大类，治疗方法虽有所不同，但基本策略是先把感染性骨不连变为非感染性骨不连，再按非感染性骨不连的方法来治疗。
因此，对非感染性骨不连的认识成为了治疗这类疾病的基础。
随着科技进步，新的针对骨不连的发生机制和诊疗方法被不断提出来，如“钻石学说”、“生物刺激”和“基因治疗”等，给治疗这类疾病提供了新的途径。
骨不连的产生原因和发生机制对于骨不连的认识，经历了一个从单一到综合、从宏观到微观的过程。
内外因学说和三元论内外因学说将骨不连发生的原因归为内因和外因两大类，内因指遗传、性别、年龄、合并症等患者自身因素，外因包括环境因素、创伤因素和治疗因素。
三元论将骨不连的原因归纳为全身因素、局部因素和技术因素。
这两个学说浅显易懂，容易被患者理解，但均停留在现象的表面，没有对骨不连的发生机制进行深层次说明。
基本多细胞单位理论基本多细胞单位（BMU）又叫骨重建单位，主要由多功能干细胞、骨祖细胞、成骨细胞、骨细胞和破骨细胞等组成。
这些细胞按时间顺序相互之间发生作用，引起数量和功能上的变化，形成了静止期、激活期、吸收期、反转期和形成期等5个阶段，构成了骨折愈合的过程。
Frost发展了这个理论，提出了技术性愈合失败与生物性愈合失败的概念，并进一步提出了开关理论和骨塑型成骨机制理论。
虽然这一学说存在很多缺陷，但却做了从细胞水平解释骨不连机制的尝试，为后期研究打下了基础。
一元论McKibbin提出了“原始骨痂反应”（PCR）的概念。
在此基础上，刘振东结合BMU概念，推论了有关骨折愈合与骨不连的发生机制，大胆假设骨折的愈合过程就是原始骨痂反应不断重复和继续的过程。
他把这一思想称为“一元论”。
一元论为我们认识骨愈合提供了一个新视野，似乎能解释骨折愈合领域的所有问题，在骨搬运领域里更得到了大量应用。
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象rl歪d未He系al妻th曩D至igeⅢst歪M臻edⅢic戮al豢Pe杰ri至od臻ic至al歪强豢搬鬟要襄未磊臻强系至至东臻临床研究面血窦迅速关团，从而达到止血目的，时间可持续2～3小时‘”．探讨．，产后出血是产科的危急症之一，能否迅速采取有效措施直接关系到抢救的成败及产妇的预后．本研究显示欣母沛组比缩宫索组术后z小时及24小时的平均出血量均显著减少，且研究组产后出血发生率也明显少于对照组，所以对于存在产后出血高危因素的产妇剖官产术中及时早期使用欣母沛是预防产后出血的一种起效迅速，安全可靠，疗效显著的方法，但其价格昂贵。
不能作为产后出血的首选药物，何时应用，什么情况下使用，既不增加费用，又不延误抢救时机，值得我们临床医务人员进一步参考文献1-13全国孕产妇监测研究协作组，全国孕产妇死亡监测结果分析[J]．中华妇产科杂志，1899．34(n)645—648[2]孙忠安，史亦丽．国家新药新制剂总览．北京；化学工业出版社．2002．371作者单位：211500江苏省南京市六合区人民医院～自体骨髓间充质干细胞局部注射治疗骨不连的临床研究施政【中图分类号]R322．7+1【文献标识码】A【文章编号】1672--508512008)04--0085--01【摘要】目的：探讨骨髓问充质干细胞局部注射对骨不连的疗效。
方法：将20例骨不连患者进行骨髓问充质干细胞注射治疗。
结果：85％的骨不连患者2个月后均出现不同程度的新生骨生成和骨髓腔中有骨小梁形成．结论：自体骨髓间充质干细胞治疗骨不连疗效显著。
【关键词】骨髓问充质干细胞；局部注射；骨不连’。
创伤骨折后骨不连是目前临床上的常见病、多发病，目前现有的临床治疗均未取得满意的疗效，寻求一种有效、可行的治疗方法已成为研究方向和热点。
骨髓中的骨髓问充质干细胞(B M-SC s)具有无限增殖和双向分化的能力，可以在特定诱导条件下分化成成骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞等[1]。
骨不连疾病治疗手术治疗与闭合治疗手段指南骨不连治疗起来难度较大，不论是手术还是保守，都不能保证100% 痊愈，需要针对具体情况进行个体化治疗。
骨不连的手术与闭合治疗共 12 种方法手术治疗目前手术治疗仍是骨不连最主要且有效的治疗方法，包括内固定、外固定、骨移植以及各方法的联合应用。
手术方式的选择主要依据骨不连的类型以及病人的全身及局部状况。
80% 的病人骨折愈合良好，无明显的肢体不等长及功能受限情况，可以早期恢复肢体功能，提高生活质量，是治疗的金标准。
但手术治疗创伤大，可能破坏软组织及骨的血供，引起术后并发症，特别是供骨区的疼痛、畸形等。
术前计划：骨不连治疗起来难度较大，术前一定要进行详细的伤情评估。
制订治疗方案应该要考虑如下问题：①软组织情况：在制订治疗方案时必须考虑骨不连周围软组织的状况，如果骨不连处为贴骨瘢痕，骨组织缺少周围软组织的滋养供血，植骨后骨愈合能力差。
且手术容易发生内固定的外露和切口闭合问题，术前需考虑行肌皮瓣转移改善局部软组织状况。
②骨不连的类型骨不连为肥大型、血管丰富，考虑以合理内固定为主，萎缩型骨不连，除要有合理内固定外，强调大量植骨。
③畸形，短缩及缺损情况：骨不连时往往合并有成角、旋转、侧移位、短缩畸形或者节段性骨缺损。
制定治疗计划应当考虑这些畸形纠正方法，一般说成角、旋转、侧方移位畸形，经内固定后多能矫正，肢体短缩和严重畸形的矫正可采用截骨和外固定牵引的方式。
④邻近关节活动受限：骨不连常合并邻近关节活动功能受限。
术前应最大限度改善邻近关节活动，以减少术后内固定剪力。
如果术中内固定坚强，可一期行邻近关节的松解术，也能获得满意效果。
2、选择合理的固定材料：手术治疗的固定一般都主张加压固定。
加压固定可以增加骨折端的静态摩擦力，增加纵向挤压力，能使骨折端紧密接触，减少骨折端的裂隙，消除骨折端的应力，有利于毛细血管的生长和爬行，促进愈合。
压应力还可以通过骨折端的电压效应，使骨折端负电位增加，加速骨折愈合进程。
中国异基因造血干细胞移植治疗血液系统疾病专家共识(Ⅰ)——适应证、预处理方案及供者选择(完整版)异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)已经广泛用于恶性血液病和非恶性血液病的治疗。
在我国，仅参加HSCT登记的移植中心已经达到60个，但各个中心的移植指征、预处理方案和供者选择各不相同。
为了规范我国allo-HSCT适应证和移植时机、为患者推荐合适的预处理方案和供者，我们在参考NCCN指南、欧洲骨髓移植协作组(EBMT)指南的基础上，制订了体现中国特色的专家共识。
一、allo-HSCT的适应证和移植时机当具有某些特征的患者采用非移植疗法预期效果很差，或者已有资料显示该组患者接受移植的疗效优于非移植时，这类患者具有HSCT的指征。
(一)恶性血液病1．急性髓系白血病(AML)：(1)急性早幼粒细胞白血病(APL)：APL患者一般不需要allo-HSCT，只在下列情况下有移植指征：1)APL初始诱导失败；2)首次复发的APL患者，包括分子生物学复发(巩固治疗结束后PML/RARα连续两次阳性按复发处理)、细胞遗传学复发或血液学复发，经再诱导治疗后无论是否达到第2次血液学完全缓解，只要PML/RARα仍阳性，具有allo-HSCT指征。
(2)AML(非APL)：1)年龄≤60岁：①在CR1期具有allo-HSCT指征：Ⅰ．按照WHO分层标准处于预后良好组的患者，一般无须在CR1期进行allo-HSCT，可根据强化治疗后微小残留病(MRD)的变化决定是否移植，如2个疗程巩固强化后AML/ETO下降不足3 log或在强化治疗后由阴性转为阳性；Ⅱ．按照WHO分层标准处于预后中危组；Ⅲ．按照WHO分层标准处于预后高危组；Ⅳ．经过2个以上疗程达到CR1；Ⅴ．由骨髓增生异常综合征(MDS)转化的AML或治疗相关的AML。
②≥CR2期具有allo- HSCT指征：首次血液学复发的AML患者，经诱导治疗或挽救性治疗达到CR2后，争取尽早进行allo-HSCT；≥CR3期的任何类型AML患者具有移植指征。
干细胞移植治疗骨关节疾病的实验操作指南骨关节疾病是一类常见的疾病，包括关节炎、骨质疏松等，严重影响人们的生活质量。
干细胞移植被认为是一种有希望的治疗方法，可以通过重新生长健康的骨和软骨组织来恢复关节功能。
本文将为你提供一份干细胞移植治疗骨关节疾病的实验操作指南，帮助你了解如何进行这一治疗方法。
实验准备：1. 确保实验室拥有必要的设备和试剂，包括培养皿、培养基、细胞培养箱、离心机、显微镜等。
2. 从可靠的来源获取足够数量和质量的干细胞样品，可以是人体骨髓、脂肪组织或其他合适的来源。
3. 准备适当的动物模型，如实验鼠或实验猴。
操作步骤：1. 干细胞的提取：根据选定的来源提取干细胞。
例如，从骨髓中提取干细胞的方法是通过穿刺骨髓，并使用适当的培养基对提取的细胞进行培养和扩增。
2. 干细胞的培养和扩增：将提取到的干细胞放入培养皿中，加入适当的培养基，如骨髓基质或适宜的培养基，并将其放入细胞培养箱中。
培养条件如温度、湿度和氧气浓度要符合干细胞的生长需求。
定期观察和评估细胞的生长情况，并确保细胞达到足够的数量和活力。
3. 鉴定干细胞特性：使用适当的细胞标记物和染色方法鉴定干细胞的特性，如CD34和CD45等标记物可以用于通过流式细胞术识别干细胞。
4. 干细胞的分化：将培养的干细胞分化为适当的骨和软骨细胞系。
可以通过添加特定的生长因子和信号分子来促进干细胞的分化，并在不同时间点上进行评估和检测。
5. 动物模型准备：使用合适的方法建立骨关节疾病的实验动物模型，如通过手术、化学诱导或遗传改良等手段引发相关的关节疾病病理变化。
6. 干细胞移植：在合适的时间点和方式下将培养好的干细胞移植至动物体内。
可以选择直接注射干细胞或将其种植到特定的载体上，并将其植入到患有关节疾病的动物体内。
7. 观察和评估：在干细胞移植后，观察并评估移植部位的治疗效果。
可以通过影像学方法（如X射线、CT或MRI）和组织学分析来综合评估骨和软骨的再生情况。
干细胞移植疗法与骨不连国内指南
专家介绍：
孙天胜，教授,主任医师, 硕士后导师，北京军区总医院全军创伤骨科研究所全军骨科中心主任兼副院长。
干细胞移植疗法治疗骨不连
骨不连的治疗原则：必须首先明确，骨不连治疗的目的在于保存、恢复肢体功能，提高患者生活质量。
如果患者关节粘连、软组织挛缩、骨折对位对线不良未曾纠正，即使骨不连处获得骨性愈合，也没有实际意义。
骨不连的治疗可分两大类：开放与闭合治疗。
开放手术仍然是骨不连治疗的主要方法，包括切开内固定、植骨、带血管蒂骨瓣移植、骨延长术等，治愈率达到9O ，疗效确切，并且可以尽早恢复肢体功能，提高生活质量，因此是治疗的金标准。
从本质上说，以上各种治疗方法都在于重新启动骨折的愈合过程，促进成骨性细胞的募集，增加骨诱导物质的浓度，加速愈合过程，以达到骨折端的骨性愈合。
很明显，直接在骨折部位移植成骨性干细胞，将极大提高细胞募集阶段的质与量，明显加速骨折的愈合过程，具有其他方法不可比拟的优势。
因而近年来对干细胞移植治疗骨不连、骨缺损的研究逐渐成为骨科领域研究的热点。
骨髓间充质干细胞的研究回顾：骨髓内有两类干细胞：造血干细胞和间充质干细胞。
临床上出于骨髓移植的需要，对造血干细胞的研究比较深入。
造血干细胞能分化成全系列的血液细胞，但无法分化成结缔组织的细胞，显然不具备成骨能力。
早在19世纪6O年代就已发现了骨髓的成骨特性。
自20世纪70年代有研究发现骨髓标本中有少量贴壁细胞在培养过程中能分化形成类似骨、软骨的集落后，对骨髓中这一小部分贴壁细胞的研究日渐深入。
随后的研究证实，骨髓成骨特性的基础在于骨髓内的这种成骨性前体细胞。
大量文献报道了从不同种属如鼠、兔、犬、人的骨髓中分离得到这种贴壁细胞。
因为在体外不同诱导分化条件下其可分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及神经细胞等，具有强大的多向分化潜能，因此命名为骨髓间充质干细胞。
骨髓间充质干细胞的成骨方向分化:骨髓间充质干细胞容易获取，其纯化、扩增难度不大，扩增后添加诱导剂如转化生长因子一p(TGF—p)、地塞米松、甘油磷酸钠、消炎痛等后就能诱导其向成骨细胞、软骨细胞、肌腱细胞、脂肪细胞以及成纤维细胞等结缔组织的各种特定细胞分化。
间充质干细胞分化受微环境影响E143，但是目前对微环境的认识是基于体外实验环境，与体内微环境相去甚远，其体内的分化影响因素还所知甚少。
因为骨髓内存在间充质干细胞，具有成骨潜能，所以可以通过移植骨髓以达到移植干细胞的目的，通过骨髓间充质干细胞向成骨方向分化以获得骨的再生。
大量的动物实验以及临床研究均证实了这一点。
包括复合自体骨髓植骨的治疗方法，以及单独应用骨髓经皮注射治疗骨不连的方法均取得了满意的疗效。
在动物实验中发现骨髓中的干细胞浓度与骨髓成骨能力存在正相关，临床研究更是进一步证明了移植的骨髓中干细胞浓度、总量与骨不连处骨痂的量呈正相关，与骨不连愈合时间呈负相关。
间充质干细胞的分布与数量:虽然间充质干细胞最早是在研究骨髓时发现的，一度认为主要存在于骨髓、松质骨和骨膜、肌肉、血管壁等处，但近来发现间充质干细胞广泛存在于人出生后所有的组织器官中口。
膑下脂肪垫中间充质干细胞含量较多。
值得重视的是，脂肪间充质干细胞与骨髓间充质干细胞形态相似，而且同样具有强大的体外增殖力和多向分化潜能。
间充质干细胞在人体内的含量非常低，即使在分布较多的骨髓内也仅占有核细胞的1／10 000～1／lOO 000，并且骨髓间充质干细胞的数目随着年龄的增加而减少，8O岁老人的骨髓中BMSCs只占有核细胞的1／2 000 000。
研究证实，自体骨髓移植治疗失败的骨不连患者无一例外骨髓内干细胞浓度过低，与治疗成功者差异有非常显著性口。
因此有学者提出，为提高胫骨萎缩性骨不连的治愈率，移植的骨髓内干细胞浓度应大于1 000个／ml，总数应大于30 000个，若患者骨髓干细胞浓度低，应尽量多采集骨髓加以浓缩。
骨髓间充质干细胞的采集、浓缩与移植：因骨髓间充质干细胞数量不多，目前常用的方法为自体骨髓采集浓缩后经皮注入骨不连处。
骨髓采集时一般取仰卧位，全麻后取髂前上棘，以内径为1．5 mm、针尖为斜面的穿刺针刺入髂骨内外板之间6～8cm，旋转抽吸，然后将穿刺针拔出1 cm 再次旋转抽吸。
共吸取骨髓300～400 ml，然后经浓缩、过滤，分离出单个核细胞约20 ml，在X线监视下经皮插入穿刺针，在骨折端间隙内、骨折端周围软组织内注入口。
既往认为萎缩性骨不连骨折端间隙内的纤维组织妨碍骨性愈合，必须清除，然后进行确切固定。
但无论动物实验还是临床研究都证明，虽然经皮注射骨髓的治疗方法无法有效清除此类组织，但仍然获得骨性愈合。
这表明骨折端间的软组织对骨不连治疗的影响很小。
因为在骨折端间隙内、骨折端周围软组织内都注入了骨髓，所以很难阐明是注入该组织的干细胞促其成骨还是周围的骨髓形成骨痂，使骨折端稳定进而出现骨性融合。
这部分组织在注射骨髓后是如何转归的仍有待进一步研究。
因移植骨髓后所成骨痂较小，故此方法不适合骨折端间隙大于5 mm者。
另外，此方法有可能引起肢体轻微短缩以及成角，对已有短缩或成角畸形者有加大畸形的可能，因此不适用。
经皮自体骨髓移植的安全性好，多项临床研究没有发现明显并发症。
骨髓间充质干细胞复合支架材料移植：如骨缺损较大，需干细胞复合支架材料经切开植入骨缺损处。
此种方法可通过添加多种生长因子来加强骨诱导活性。
在大段骨缺损动物模型中应用BMP一7及自体骨髓复合多聚微球基质材料，发现BMP一7能诱导新骨长入、穿过移植物，使间充质干细胞的生骨活性增强。
此外还有转染BMP一2基因的骨髓间充质干细胞复合支架材料治疗骨缺损的实验研究，均完全修复了骨缺损口。
目前尚无大宗干细胞复合支架材料治疗骨缺损的临床研究报告。
随着支架材料的进步，可注射支架材料复合骨髓间充质干细胞经皮植入治疗骨不连、骨缺损的治疗方法有望大规模应用于临床。
需要注意的是，干细胞移植仅仅完成了骨折愈合过程中细胞募集阶段，如果缺少骨诱导物质，仍然无法形成骨性愈合。
所以需要骨髓间充质干细胞复合骨诱导物质或者把骨髓间充质干细胞向成骨细胞诱导后再加以移植。
骨髓间充质干细胞转染BMP基因等方法因涉及到相关法规，临床应用尚有很大限制。
