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第一章绪论名词解释：1.基因操作：将在细胞外产生的核酸（物质）分子插入到病毒，质粒或其它载体系统中，再整合到特定的宿主中，从而形成一种新的可连续繁殖的有机体。
2.间断基因：序列中间插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区，使一个基因分隔成不连续的若干区段。
我们称这种编码序列不连续的基因为间断基因。
3.启动子：DNA分子可以与RNA聚合酶特异结合的部位，也就是使转录开始的部位。
4.亚克隆：当初始克隆中的外源DNA片段较长，含有许多目的基因以外的DNA片段时，在诸如表达、序列分析和突变等操作中不便进行，将目的基因所对应的一小段DNA找出来，这个过程叫“亚克隆”。
填空题：1.基因操作的核心部分是基因克隆，基因克隆的基本要点有（克隆基因的类型），（受体的选择）和（载体的选择）。
2.（基因）是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。
它可以是连续的，也可以是（不连续的）；可以是（DNA），也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以（存在于染色体之外如质粒、噬菌体）。
3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的（表达）、（调控）、（检测）和（改造）等与基因研究相关的内容。
4.启动子是指（基因转录过程中控制起始的部位）。
通常一个基因是否表达，（转录起始）是关键的一步，是起决定作用的。
在转录过程中，启动子还是（RNA聚合酶）的结合位点。
5.原核生物的RNA聚合酶主要由两部分组成：（核心酶）和（σ因子），其中σ-因子并不参与RNA的合成，它的作用主要是（识别要转录的起始位点）。
6.从（启动区）到（终止区）的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其中可包括一个或者多个基因。
7.转录终止子主要有两种，一种是（依赖ρ因子），另一种是（不依赖ρ因子）。
8.基因的书写方式，通常是写出的DNA序列总是与（mRNA）相同的那条链，方向是从（5'）到（3'）。
对于碱基的位置，一般自转录起始点向两个方向编号，其中转录起始点定为（+1），（在起始点上游第一个碱基）定为-1。
1.限制性核酸内切酶：是识别DNA的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。
2.同裂酶：来源不同，识别位点的序列相同或相近、切割产生相同或不同的黏性末端的限制酶。
3.同尾酶：指来源各异、识别靶序列各不相同、但产生相同的黏性末端的限制酶4.引物：是人工合成的与模板DNA互补的寡核苷酸序列5.基因组文库：将某生物的全部基因组DNA切割成一定长度的DNA片段克隆到某种载体上，贮存在一个受体菌的群体之中形成的集合。
6. cDNA文库：将某生物某一发育时期所转录的mRNA经反转录形成的cDNA片段与载体连接，贮存在一个受体菌的群体之中形成的集合。
1.基因组文库构建的基本步骤。
答：①基因组DNA的提取和片段化；②制备载体；③载体与基因组DNA片段的连接重组；④转化或离体包装、转染宿主细胞；⑤扩增、筛选文库2.简述PCR的基本原理。
答：聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）原理类似于DNA的变性和复制过程，即在高温（93 ～ 95℃）下，待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板；而后在低温（37～65℃）情况下，两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合，形成部分双链；在Taq酶的最适温度（72℃）下，以引物3’端为合成的起点，以单核苷酸为原料，沿模板以5’→3’方向延伸，合成DNA新链。
这样，每一双链的DNA模板，经过一次解链、退火、延伸三个步骤的热循环后就成了两条双链DNA分子。
如此反复进行，每一次循环所产生的DNA均能成为下一次循环的模板，每一次循环都使两条人工合成的引物间的DNA特异区拷贝数扩增一倍，PCR产物得以2n的批数形式迅速扩增1.载体：将外源目的DNA导入受体细胞，并能自我复制和增殖的工具。
2.多克隆位点：载体都具有供外源基因插入的限制性核酸内切酶位点，且在此位点上插入外源基因片段，不影响本身的复制功能即多克隆位点（MCS）。
基因工程试题及答案解析一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶是：A. 蛋白酶B. DNA聚合酶C. 核糖核酸酶D. 限制性核酸内切酶答案：D2. 基因工程中，用于将目的基因导入植物细胞的方法是：A. 电穿孔法B. 显微注射法C. 农杆菌转化法D. 脂质体介导法答案：C3. 下列哪项不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的获取B. 基因表达载体的构建C. 目的基因的扩增D. 目的基因的检测与鉴定答案：C二、填空题1. 基因工程中，常用的运载体有____、____和____。
答案：质粒、噬菌体、动植物病毒2. 基因工程中，常用的筛选标记基因有____、____和____。
答案：抗性基因、荧光蛋白基因、酶基因三、简答题1. 简述基因工程的应用领域。
答案：基因工程的应用领域包括农业、医学、工业、环境保护等。
在农业中，基因工程可以用于培育抗病、抗虫、抗旱等性状的作物；在医学领域，基因工程可以用于生产重组蛋白药物、基因治疗等；在工业上，基因工程可以用于生产酶、疫苗等；在环境保护方面，基因工程可以用于生物修复、污染物降解等。
2. 基因工程中，如何确保目的基因在宿主细胞中正确表达？答案：确保目的基因在宿主细胞中正确表达需要考虑以下几个方面：首先，目的基因需要有合适的启动子和终止子，以确保其在宿主细胞中得到正确转录和终止；其次，需要考虑目的基因的密码子偏好性，以确保其在宿主细胞中能被高效翻译；再次，需要考虑目的基因的稳定性，避免其在宿主细胞中被降解；最后，还需要考虑目的基因产物的后翻译修饰和定位。
四、论述题1. 论述基因工程在医学领域的应用及其可能带来的伦理问题。
答案：基因工程在医学领域的应用主要包括生产重组蛋白药物、基因治疗、疾病诊断和基因疫苗等。
重组蛋白药物可以用于治疗糖尿病、侏儒症等疾病；基因治疗可以用于治疗遗传性疾病；疾病诊断可以通过基因检测来实现；基因疫苗可以用于预防某些遗传性疾病。
然而，基因工程的应用也带来了伦理问题，如基因隐私权、基因歧视、基因治疗的安全性和有效性等。
高中生物《基因工程》练习题题号一二总分得分一、单选题（本大题共20小题，共20.0分）1.如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次为（）A. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶C. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶D. DNA连接酶、限制酶、解旋酶2.下列有关基因工程技术的叙述，正确的是（）A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C. 选用细菌为重组质粒受体细胞是因为质粒易进入细菌细胞且繁殖快D. 只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达3.如图为基因表达载体的模式图。
下列有关基因工程的说法错误的是（）A. 基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建B. 任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C. 图中启动子和终止子不同与起始密码子和终止密码子D. 抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了载体4.一些细菌能借助限制性核酸内切酶抵御外来入侵者，而其自身的基因组DNA经预先修饰能躲避限制酶的降解。
下列在动物体内发生的过程中，与上述细菌行为相似的是（）A. 巨噬细胞内溶酶体杀灭病原体B. T细胞受抗原刺激分泌淋巴因子C. 组织液中抗体与抗原的特异性结合D. 疫苗诱导机体产生对病原体的免疫5.某目的基因两侧的DNA序列所含的限制性核酸内切酶位点如图所示，最好应选用下列哪种质粒作为载体（）A. B.C. D.6.下图是研究人员利用供体生物DNA中无限增殖调控基因制备单克隆抗体的思路流程。
下列相关叙述正确的是（）A. 酶a、酶b作用位点分别为氢键和磷酸二酯键B. Ⅰ是经免疫的记忆细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞C. 筛选出既能无限增殖又能产生专一抗体的Ⅱ必须通过分子检测D. 上述制备单克隆抗体的方法涉及转基因技术和动物细胞核移植技术7.下列关于基因工程技术的说法，正确的是（）A. 切割质粒的限制酶均只能特异性地识别3-6个核苷酸序列B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制8.在其他条件具备的情况下，在试管中进入物质X和物质Z，可得到相应产物Y．下列叙述正确的是（）A. 若X是DNA，Y是RNA，则Z是逆转录酶B. 若X是DNA，Y是mRNA，则Z是脱氧核苷酸C. 若X是RNA，Y是DNA，则Z是限制性内切酶D. 若X是mRNA，Y是核糖体上合成的大分子，则Z是氨基酸9.下图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是A. 甲、乙、丙黏性末端是由两种限制酶作用产生的B. 若甲中的G处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C. 乙中的酶切位点在A与G之间D. 目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物10.如图是利用基因工程技术生产可使用疫苗的部分过程，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。
《基因工程》习题及参考答案一、习题：1. What are biotechnology and genetic engineering?2. What is a gene?3. What are genetically engineered medicines?4. What do genome research and human genetics deal with?5. What potentials are held out by genetic diagnosis?6. What options are given by gene therapy?7. What is an embryo - and what is a fetus?8 What is a genetic fingerprint?9 What does the term "therapeutic cloning" mean?10 What are stem cells?11 What is a transgenic organism?12 What does xenotransplantation mean?13 How will genetic engineering be used in agriculture?14 How are genetically modified organisms assessed?15 What does the German Embryo Protection Act regulate?16. What is a genome?17. Is there a risk of bioterrorism?18. How does genetic engineering affect the environment?19. Are genetically engineered crops good for farmers?20.What is the difference between restriction digestion and restriction mapping?21.Can you combine two different restriction enzymes in the same reaction tubes todigest the DNA molecules?22.Why should we need to generate restriction mapping data?23.How many restriction enzymes available now on the market?24.Why do you consider mutagenesis in vitro as one of the most critical techniquesfor us to understand in genetic engineering class?25.How do we choose the methods for DNA modification?26.How do we choose a gene expression system?27.How can we express eukaryotic gene in E.coli?28.What should we consider before we start the recombinant protein expressionexperiment?29.What is the advantage of yeast expression system?30.What is the advantage of insect expression system?31.Why there are so many different types of vectors available for cloning?32.What is the difference between cloning vector and expression vector?33.What is a genetic fingerprint?34. 基因具体分成多少种类？35. 什么叫印记基因？36．什么叫遗传漂变？37．人类基因组图谱和初步分析结果是在哪一年公布的？38．人类基因组共有多少基因?39. 克隆羊成功的技术关键是什么？40. 有人计划将两个不同物种的动植物体细胞进行融合，然后将融合体的核移植到其中一种生物的未受精卵细胞中，进行体细胞克隆。
大学基因工程试题及答案一、选择题1. 基因工程中常用的限制酶属于哪一类酶？A. 核酸酶B. 蛋白酶C. 脂肪酶D. 淀粉酶答案：A2. 以下哪个不是基因工程的基本步骤？A. 目的基因的克隆B. 目的基因的表达C. 目的基因的检测D. 目的基因的复制答案：D3. 基因工程中常用的运载体有哪些？A. 质粒B. 噬菌体C. 动植物病毒D. 所有以上答案：D二、填空题1. 基因工程中常用的_________技术可以用于目的基因的检测。
答案：PCR2. 基因工程中，_________是将目的基因导入受体细胞的关键步骤。
答案：转化3. 在基因工程中，_________是将目的基因插入到运载体中形成重组DNA分子的过程。
答案：克隆三、简答题1. 简述基因工程在医学领域的应用。
答案：基因工程在医学领域的应用包括生产重组药物、基因治疗、疾病诊断和疫苗开发等。
2. 描述基因工程中目的基因的克隆过程。
答案：目的基因的克隆过程包括提取目的基因、构建基因文库、筛选含有目的基因的克隆、目的基因的扩增和纯化等步骤。
四、论述题1. 论述基因工程技术在农业中的应用及其可能带来的问题。
答案：基因工程技术在农业中的应用包括改良作物品质、提高作物产量、增强作物抗病虫害能力等。
可能带来的问题包括生态平衡的破坏、基因污染、食品安全问题等。
2. 分析基因工程中目的基因表达调控的重要性及其策略。
答案：目的基因表达调控在基因工程中至关重要，它决定了基因工程产品的功能和产量。
调控策略包括启动子的选择、增强子的应用、转录后调控等。
高中生物基因工程练习题学校:___________姓名：___________班级：___________一、单选题1．蛋白质工程中目前已成功的是( )A．对胰岛素进行改造，使其成为速效型药品B．蛋白质工程应用于微电子方面C．室温下可保存半年的干扰素D．耐储存的番茄2．下列有关限制性酶的描述，错误的是（）A．限制酶主要从原核生物中提取B．限制酶具有热稳定性C．限制酶和DNA连接酶作用的化学键相同D．一种限制酶一般只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列3．蛋白质工程的最终目的是（）A．分析蛋白质的三维结构B．研究蛋白质的氨基酸组成C．获取编码蛋白质的基因序列信息D．改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，满足人类的需求4．下列基因工程的基本操作程序中，属于基因工程核心步骤的是（）A．基因表达载体的构建B．目的基因的检测与鉴定C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的筛选与获取5．葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，科学家将其第 138 位甘氨酸替换为脯氨酸后，其最适温度提高了 10℃左右。
相关叙述正确的是（）A．蛋白质功能是由氨基酸的种类和数量决定B．改造蛋白质结构可通过改造基因结构实现C．蛋白质工程不可以定向改变蛋白质的结构D．酶最适温度提高是因为脯氨酸比甘氨酸更耐热6．基因和表达载体相连时既可以正向连接也可以反向连接。
下图甲、乙分别表示某质粒、含目的基因和酶切位点的DNA片段，构建基因表达载体时应用酶B和酶C进行切割，不应用酶A切割运载体和DNA片段，其原因不包括（）A．防止目的基因和运载体发生反向连接B．保证构建的重组质粒中含有标记基因C．防止目的基因或运载体重新自身环化D．保证构建的重组质粒中含有启动子7．关于基因工程和下图所示黏性末端的叙述，正确的是（）A．①与③是由相同的限制酶切割产生的B．DNA连接酶可催化①与③的连接C．经酶切形成④需要脱去2分子水D．基因工程中常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体8．DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛效应是指作为支持介质的琼脂糖，具有网络结构，使大分子物质在通过时受到较大阻力，借此分离不同大小的DNA片段。
基因工程测试题（附解析）一、基础题点练1．(2019·徐州模拟)已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C CCGGG 和CCC GGG。
有关这两种酶及应用的叙述，错误的是()A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是—GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等解析：选B 限制酶作用的底物是双链DNA 分子；这两种限制酶作用的核苷酸序列相同，所以这两种识别序列在DNA 中出现的的几率相同；根据碱基互补配对原则，CCCGGG 的互补链是GGGCCC，并根据Xma Ⅰ的切割位点可知，切割后的黏性末端是—CCGG；温度能影响酶的活性，所以使用酶时需要注意控制反应温度和时间等。
2．如图表示的是三种黏性末端，下列说法正确的是( ) ↓↓A．图中所示黏性末端是由同种限制酶切割形成B．若图甲中的G 碱基处发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点C．图中所示黏性末端是限制酶断开氢键形成D．目前常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等几类原核生物GAATTC 解析：选B 产生甲黏性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG =====，产生乙黏性末端的限制酶CAATTG CTTAAG 的识别序列为GTTAAC =====，产生丙黏性末端的限制酶的识别序列为GAATTC =====，可见甲、乙、丙黏性末端是由3种限制酶作用产生的；限制酶具有专一性，能够识别双链DNA 分子的某种特定核苷酸序列，如果甲中的G 发生突变，限制酶可能无法识别该切割位点；图中所示黏性末端是限制酶断开磷酸二酯键形成的；质粒是环状DNA 分子，噬菌体和动植物病毒都没有细胞结构，它们都不属于原核生物。
3．下列关于蛋白质工程的叙述，错误的是()A．蛋白质工程的基础是基因工程B．蛋白质工程遵循的原理包括中心法则C．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构D．蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子解析：选C 蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造，或合成新的蛋白质，故蛋白质工程的基础是基因工程；蛋白质工程遵循的原理包括中心法则；蛋白质工程是通过改造基因来实现对蛋白质分子的改造的；蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。
基因工程练习题一、单项选择题1．在基因工程中，切割载体和含有目的基因的DNA片段中，一般需使用A.同种限制酶B.两种限制酶C.同种连接酶D.两种连接酶2．基因工程常用的受体有①大肠杆菌②枯草杆菌③结核杆菌④动植物细胞A.①②③④B.①②③C.②③④D.①②④3．有关基因工程的叙述正确的是A.限制酶只在获得目的基因时才用B.重组质粒的形成是在细胞内完成的C.质粒都可作为载体D.蛋白质的结构成分为合成目的基因提供资料4．下列哪项不是基因工程中经常使用的用来运载目的基因的载体A.细菌质粒B.噬菌体C.动植物病毒D.细菌核区的DNA5．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。
在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是A.人工合成目的基因B.目的基因与运载体结合C.将目的基因导入受体细胞D.目的基因的检测表达6．不是基因工程方法生产的药物是A.干扰素B.白细胞介素C.青霉素D.乙肝疫苗7．在基因工程中用来修饰改造基因的工具是A.限制酶和连接酶B.限制酶和水解酶C.限制酶和运载酶D.连接酶和运载酶8．下列哪项叙述不是运载体必须具备的条件A.具有某些标记基因B.决定宿主细胞的生存C.能够在宿主细胞中复制D.有一个或多个限制酶切点9．水母发光蛋白由236个氨基酸构成，其中有三种氨基酸构成发光环，现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记。
在转基因技术中，这种蛋白质的作用A.促使目的基因导入宿主细胞中B.促使目的基因在宿主细胞中复制C.使目的基因容易被检测和选择D.使目的基因容易成功表达10．应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到检测疾病的目的。
这里的基因探针是指A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子10/ 1C.合成β—球蛋白的DNAD.合成苯丙氨酸羟化酶的DNA片段11．基因工程第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。
基因工程练习题（打印版）# 基因工程练习题## 一、选择题1. 基因工程中常用的载体是：- A. 质粒- B. 病毒- C. 噬菌体- D. 所有上述选项2. 基因枪法属于哪种类型的基因转移技术？- A. 物理方法- B. 化学方法- C. 生物方法- D. 机械方法3. 以下哪项不是基因工程中常用的酶？- A. 限制性内切酶- B. DNA聚合酶- C. 逆转录酶- D. 淀粉酶4. 重组DNA技术中，目标基因的克隆通常需要：- A. 单克隆抗体- B. 单细胞培养- C. 单链DNA- D. 单链RNA5. 基因编辑技术CRISPR-Cas9的基本原理是什么？- A. 利用Cas9蛋白切割目标DNA序列- B. 利用RNA分子与目标DNA序列结合- C. 利用Cas9蛋白和RNA分子共同识别并切割目标DNA序列- D. 利用RNA分子直接编辑目标DNA序列## 二、填空题6. 基因工程中，将外源基因导入植物细胞的方法有______、______和______等。
7. 基因工程产品在上市前需要进行严格的______和______，以确保安全性。
8. 基因工程中，通过______技术可以快速筛选出含有重组质粒的细胞。
9. 基因工程中，常用的标记基因有______、______等，用于筛选重组细胞。
10. 基因编辑技术CRISPR-Cas9中，Cas9蛋白的作用是______。
## 三、简答题11. 简述基因工程在医学领域的应用。
12. 解释基因工程中“同源重组”的概念，并举例说明其在基因治疗中的应用。
13. 描述基因工程中“定向进化”技术的原理及其在工业生产中的应用。
## 四、论述题14. 论述基因工程在农业领域中的潜力和面临的挑战。
15. 讨论基因编辑技术CRISPR-Cas9的伦理问题及其对未来生物技术发展的影响。
注意：本练习题旨在帮助学习者巩固基因工程的基础知识和应用，提高分析和解决问题的能力。
基因工程训练题1．下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是A．用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个B．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大C．-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的粘性末端碱基数不同D．只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒2.如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述，正确的是（）Ａ．②的构建需要限制性核酸内切酶和ＤＮＡ聚合酶参与Ｂ．③侵染植物细胞后，重组Ｔｉ质粒整合到④的染色体上Ｃ．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状Ｄ．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异3．下图1表示含有目的基因的DNA片段和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。
现有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。
下列叙述正确的是A．上述4种限制性核酸内切酶中BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ切出的粘性末端不相同B．BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ酶切DNA后加DNA连接酶重新拼接，都能被Mbo Ⅰ再次切割C．Msp Ⅰ、Sma Ⅰ切出的两个末端可以用DNA连接酶相互连接D．作为载体的质粒上，原本一定就有抗生素A抗性基因4．下图甲表示大肠杆菌质粒，图乙表示外源DNA，实线箭头表示限制性核酸内切酶PstⅠ的切割位点，Amp r表示氨苄青霉素抗性基因，Ne r表示新霉素抗性基因。
下列叙述正确的是A ．图甲中的质粒通常还具有控制质粒DNA 转移的基因B ．用Pst Ⅰ处理图乙所示的DNA 片段后，导致2个磷酸二酯键断裂即可获得目的基因C ．用Pst Ⅰ酶切，加入DNA 连接酶后得到的质粒-目的基因连接物都是符合要求的D ．导入重组质粒的大肠杆菌在含新霉素或氨苄青霉素的培养基中均不能生长5.下列关于基因工程的说法正确的是A ．基因工程的核心是将重组DNA 分子导入受体细胞中B ．利用受体细胞克隆出大量的目的基因也属于基因工程的范畴C ．DNA 连接酶的作用是将2个DNA 分子片段的互补碱基连接起来D ．构建重组DNA 的质粒上有四环素的抗性基因，若受体细胞能在有四环素的培养基中 生长，说明该受体细胞中一定含有目的基因6．已知限制性内切酶Xma Ⅰ和Sma Ⅰ的识别序列分别为C ↓CCGGG 和CCC ↓GGG 。
有关这两种酶及应用的叙述，错误．．的是 A ．这两种酶作用的底物都是双链DNAB ．DNA 中出现这两种酶识别序列的几率不同C ．Xma Ⅰ切割DNA 形成的黏性末端是-GGCCD ．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等7．将乙肝抗原基因导人到酵母菌中，通过发酵能大量生产乙肝疫苗。
下列叙述正确的是A ．目的基因在酵母菌中表达出抗体B ．目的基因的表达需要线粒体提供能量C ．用限制性核酸内切酶处理目的基因D ．目的基因转录后即可用于翻译8．下图表示科学家利用小鼠皮肤细胞培养出多种细胞的过程。
下列叙述正确的是A ．过程①中细胞内发生了基因突变B ．过程②中细胞内某些基因处于关闭状态C ．过程②中细胞内核酸的种类和数目不变D ．诱导性多能干细胞中没有同源染色体神经细胞、肝细小鼠皮肤导入诱导基诱导性多能干① ②10．对下图所示粘性末端的说法错误．．的是A．甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的B．甲、乙具相同的粘性末端可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能C．DNA连接酶作用位点在b处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键D．切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子11．下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（amp r为抗氨苄青霉素基因），其中①。
④表示相关的操作步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。
Pst I酶和Sma I酶切割基因后将产生不同的粘性末端。
据图分析下列说法错误的是A．图中甲代表的是基因表达载体，乙可代表番茄细胞B．可用Pst I酶和Sma I酶切割鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接C．若用Pst I酶和Sma I酶切割质粒产生的DNA片段有3种D．图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的脱分化和再分化过程12．某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），分别用限制性核酸内切酶Ⅰ和酶Ⅱ完全切割后，得到的DNA片段大小如下表。
限制性核酸内切酶Ⅰ和酶Ⅱ的识别序列和切割位点如下图所示。
下列有关叙述正确的是酶Ⅰ切割产物（bp）酶Ⅱ切割产物（bp）2100、1400、15001900、200、700、500A．该DNA分子经过酶Ⅰ作用后产生4个游离的磷酸基团B．该DNA分子含有能同时被酶Ⅰ和酶Ⅱ切割的位点C．该DNA分子中酶Ⅱ的识别碱基序列有3个D．酶Ⅰ和酶Ⅱ切出的DNA片段不能相互连接13. 科学家将人的生长激素原基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。
但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。
已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：（1）过程①表示的是采取___________________的方法来获取目的基因。
（2）在构建基因表达载体过程中，应用限制性核酸内切酶 (Ⅰ、Ⅱ)切割质粒，用限制性核酸内切酶 (Ⅰ、Ⅱ)切割目的基因。
用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________ 原则进行连接。
人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是。
（3）在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理，以增大的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。
（４）人体的生长激素原基因能在细菌体内成功表达出人的生长激素原是因为。
写出目的基因导入细菌中表达的过程。
（5）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上倒置培养，将平板倒置的意义是__________________________。
培养后得到如下图a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）。
与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是，这些细菌中导入了________________。
14．纤维素分子不能进入酵母细胞。
为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含３种不同基因片段的重组质粒。
下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。
据图回答：（１）本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如下图。
为防止酶切片段的自身连接，可选用的限制酶组合是或。
Ａ．①②Ｂ．①③Ｃ．②④Ｄ．③④（２）设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证__________________不携带纤维素酶基因。
（３）纤维素酶基因的表达包括和过程。
与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有。
（４）在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株不能存活，原因是。
（５）酵母菌生成酒精的细胞部位是，产生酒精时细胞的呼吸方式是。
在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具优势，因为导入的重组质粒含有，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率。
15.将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有T－DNA片段能转移到植物细胞中）。
（1）过程①需用同种＿＿＿＿酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。
为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用＿＿＿＿培养基。
（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让＿＿进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（3）若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加＿＿＿＿以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿。
（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是＿＿＿＿。
种植转基因抗虫棉能减少＿＿＿的使用，以减轻环境污染。
16. 浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。
用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因（如Ｐ450基因和红霉素抗性基因）表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。
某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题。
（１）获得油菜素内酯合成酶基因的方法有、。
步骤①用ＰＣＲ技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指；步骤②用到的酶有。
（２）图中导入重组质粒的方法是，在导入之前应用处理受体细菌。
（３）导入重组质粒２以后，往往还需要进行检测和筛选，可用制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入可将含有目的基因的细胞筛选出来。
（４）请你为该课题命名：。
(5)请你说说该研究发现的生态学意义。
1-5:BDBAB 6-10:BBBCC 11C 12A13（1）反转录法（人工合成法）（2）ⅠⅡ?；碱基互补配对? 人的基因与大肠杆菌DNA的双螺旋结构相同（3）CaCl2 细胞壁（4）共用一套（遗传）密码子生长激素基因→转录→ｍＲＮＡ→翻译→生长激素（5）防止皿盖冷却水倒流入培养基（合理即可得分）；?普通质粒或重组质粒（缺一不给分）普通质粒或重组质粒抗氨苄青霉素、不抗四环素重组质粒14（１）Ｂ（或Ｃ）Ｃ（或Ｂ）（２）质粒ＤＮＡ和酵母菌基因组（３）转录翻译内质网、高尔基体（４）Ⅱ缺少信号肽编码序列，合成的纤维素酶不能分泌到胞外，细胞无可利用的碳源（５）细胞溶胶厌氧呼吸Ａ基因片段15.（１）限制性核酸内切选择（２）Ｔ－ＤＮＡ筛选获得Ｔ－ＤＮＡ片段的植物细胞（３）细胞分裂素浓度芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化（４）投放棉铃虫农药16.（１）从基因文库中获取人工合成目的基因或ＰＣＲ合成耐热的ＤＮＡ聚合酶限制酶和ＤＮＡ连接酶（２）转化法氯化钙溶液（３）红霉素抗性基因红霉素（４）油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解。
