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实验动物病原微生物检测中的标本采集技术实验动物的病原菌和寄生虫多定植于身体的特定部位，检测时需从相应部位采样以提高检出率，因此实验动物的细菌学、真菌学和寄生虫学检测涉及的标本种类众多，且采样方法和样品的制备各不相同。
一、细菌和真菌检测时的标本采集（一）皮毛、鳞屑标本将动物进行吸入麻醉（乙醚等）后适当保定，待检部位用75%乙醇消毒，直接用灭菌接种刀、镊刮取皮毛、鳞屑少许。
（二）呼吸道分泌物标本将动物麻醉后仰卧保定，并使四肢舒展固定。
用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒，沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤，使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露，无菌分离颈部肌肉暴露气管，于咽部以下5mm左右气管上剪一“V”形口，插入无菌接种针由下至上直达咽部轻轻转动数下，沾取气管分泌物。
如分泌物过少，可将咽部及部分气管剪下增菌培养。
（三）回盲部内容物标本将动物麻醉后仰卧保定，并使四肢舒展固定。
用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒，沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤，使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露，无菌剪开腹部肌肉暴露回盲部，在回盲部剪一小口，用接种环伸入直接挑取适量内容物。
如内容物过少，可剪下包括回盲部在内的一段肠组织适当剪碎后作增菌培养。
（四）粪便标本将粪便前段弃去，取中段粪便，加适量PBS或培养液匀浆后接种，如为稀软便可直接接种。
（五）肛拭标本将灭菌棉签用生理盐水或培养液浸润后，轻轻插入动物肛门深处3～4cm，缓缓转动后取出。
（六）病灶组织分泌物及浓汁标本标本用于直接接种时，保定动物并对病灶周围用75%乙醇消毒，用接种环直接沾取分泌物或脓汁进行接种，或取下少量病变组织（对已死亡动物）于培养基表面接触后再划线接种；标本用于制备涂片时，可于载玻片上滴加适量灭菌生理盐水，挑取少量脓汁与之混匀且风干，火焰上固定，或取适量病灶分泌物与生理盐水混匀涂抹成相对较浓的涂片。
二、检测体内寄生虫的标本采集和制备体内寄生虫寄生于肠道、血液和组织内，检测时须根据不同的寄生部位采集相应标本。
体内外寄生虫检查方法大全展开全文粪便检查是诊疗过程中最常见的实验室检查之一。
制备和阅读检查结果所需的技术都是很简单的，也是每个医师都要会的。
尽管简单，但这些检查结果及随后的治疗往往决定动物康复的情况。
01采集、处理、储存与运输采集（1）样品尽可能新鲜，因为排出体外后虫卵会快速孵化。
（2）饲主应该目睹动物排便，确保新鲜并观察有无任何染色、新鲜血液或其他问题。
（3）新鲜样品如果2h内不检查应冷藏保存，且不能超过24h。
（4）提供的检测量相当于成年男性的拇指大小，至少10g。
（5）样品应标明动物的名字、号码、采集时间以及是否冷藏过。
常规处理（1）样品应认真处理，以免造成人为污染。
（2）保持清洁的实验室检查环境。
（3）保存清晰的操作记录。
储存（1）可使用无菌取样袋、小塑料夹层袋、塑料容器或实验室一次性手套（把里面翻出来）贮存粪便。
（2）样品可以无限期地储存在10%的福尔马林中（1份粪便+9份福尔马林），局限性较小。
（3）样品不能冷冻储存，不能用70%酒精或100%甲醇储存。
运输（1）样品应在冰箱中放置到4℃，然后包裹在冰上或冰袋上24～48h。
（2）将重要样品装入单独的塑料袋中，以免样品液体泄漏。
02内寄生虫检查方法大体检查用途黏稠度颜色血液、黏膜或寄生虫成虫技术直接用肉眼检查粪便或呕吐物备注肉眼检查不到（如潜血）要使用其他检查方法直接涂片：湿法制片用途原虫（如贾第鞭毛虫）寄生虫荷量（隐孢子虫）细菌（如螺旋体、弯曲杆菌）技术1、在载玻片上滴1滴盐水或水后，加上等量的粪便。
充分混匀粪便和水，在载玻片上涂抹制成一层薄膜。
2、移除任何大块粪便，盖上盖玻片以待检查。
3、先在10倍镜下检查寄生虫卵，40倍镜下检查原虫，100倍镜下检查细菌。
可以从盖玻片一侧滴加染色剂，以便更清楚地鉴定。
备注1、没有虫卵变形。
2、没有一种浓缩技术（小样本）会导致低数目。
3、活力可以成为一个有用的辅助诊断。
直接涂片：干法制片用途原虫（如贾第鞭毛虫）寄生虫荷量（隐孢子虫）细菌（如螺旋体、弯曲杆菌）技术1、在玻片上放小量的粪便，使用涂药棒将其薄薄散开。
猪的寄生虫分类名称寄生部位中间宿主终末宿主感染阶段诊断阶段诊断防治吸虫布氏姜片吸虫Fasciolopsisbuski小肠扁卷螺（并以水生植物为媒介物）人、猪囊蚴虫卵粪便检查：直接涂片法反复水洗沉淀法敌百虫吡喹酮硫双二氯酚华枝睾吸虫Clonorchissinenisis胆囊、胆管第一中间宿主：淡水螺第二中间宿主：鱼、虾人、猪、狗、猫囊蚴虫卵粪便检查：离心漂浮法。
间接血凝试验（IHA）、酶联免疫吸附试验（ELISA）辅助诊断，吡喹酮丙酸哌嗪丙硫苯咪唑绦虫囊尾蚴Cysticercuscellulosa横纹肌，心脏、脑、眼等器官。
成虫——小肠。
主要：猪和野猪；其他：犬、猫、骆驼和人。
人囊尾蚴生前诊断比较困难，常用免疫学检查方法。
卫生检验主要在肌肉中检出。
吡喹酮丙硫咪唑细颈囊尾Cysticercustenuicollis（泡状带绦虫的中绦期幼虫）成虫：小肠；幼虫：肝脏浆膜、网膜、肠系膜等处。
猪、牛、羊犬、狼等肉食兽囊尾蚴吡喹酮硫双二氯酚裂头蚴Sparganum（成虫：曼氏迭宫绦虫）肌肉、皮下组织、结缔组织、腹腔、胸腔。
成虫：小肠。
第二中间宿主：鱼、蛇、蛙、鸟以及一些哺乳动物（包括人）曼氏迭宫绦虫：犬、猫裂头蚴免疫学诊断：间接荧光抗体（IFA）和皮内试验（IT）等吡喹酮丙硫苯咪唑分类名称寄生部位中间宿主终末宿主感染阶段诊断阶段诊断防治线虫旋毛虫Trichinellaspiralis成虫：小肠幼虫：横纹肌人、猪、犬、猫、鼠（后为中间宿主）人、猪、犬、猫、鼠（先为终末宿主）包囊（内含幼虫）肉眼和镜检法检查成虫，消化法检查幼虫，免疫学方法。
丙硫咪唑甲苯咪唑蛔虫Ascaris suum小肠不需要中宿贮藏宿主：蚯蚓猪感染性第3期幼虫刚排出虫卵2个月以上猪：直接涂片法或漂浮法；2月龄以内猪：不能用粪检法，可用贝尔曼氏幼虫分离法左旋咪唑丙硫咪唑伊维菌素多拉菌素氯苯哒唑食道口线虫Oesophagostomumspp盲肠和结肠猪感染性第3期幼虫虫卵粪检：漂浮法与猪蛔虫相似毛首线虫Trichuris suis大肠（主要是结肠）猪含第1期幼虫的感染性虫卵刚排出虫卵粪检：漂浮法；剖检：盲肠中的虫体噻咪唑丙硫咪唑伊维菌素类圆线虫Strongyloidesransomi小肠黏膜猪（主要是仔猪）丝虫型幼虫虫卵或幼虫新鲜粪便：盐水漂浮法检查虫卵；贝尔曼氏幼虫分离法检查幼虫。
寄生虫学实验教学中标本的收集途径和方法
一、寄生虫学实验教学中标本的收集途径和方法
1.收集动物标本
（1）野外观察：在山野中，保护区，动物园或沼泽野生动物足迹中观察，发现动物并把它们带回来，例如老鼠、飞蝗、蚂蚁等各类活体动物。
（2）饲养动物：在实验室中饲养一些动物，使它们的营养状况恢复正常，然后使它们接种寄生虫，以便实验教学。
（3）采集病理标本：采集来自屠宰场、经营者、病理实验室、解剖室的肉食性动物病理标本，通过解剖或清洗来发现寄生虫。
2.收集植物标本
（1）野外观察：在山野中，保护区，植物园，草原，林地等地点，观察发现寄生在植物上的各类虫卵或各类动物软体虫，例如飞虱、叶蝉等等。
（2）实验室培养：把收集来的植物标本放在实验室照明下培养，方便老师在实验室给学生们展示发现的各类寄生虫。
（3）病虫害检查：从病虫害采集站，把一些植物病害标本带回实验室，根据病害的性质，一般可以发现寄生该病害的虫子或者病毒。
总之，在实验教学中，采集标本是实验教学中的重要组成部分，要根据实际情况采取恰当的收集途径和方法，以便发现和收集各类寄生虫标本，保证实验教学的顺利进行。
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