紫荆皮总黄酮超声提取工艺优化
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紫荆皮总黄酮超声提取工艺优化
李君玲
【摘 要】@@%以总黄酮含量为考察指标,采用正交试验法,考察了加醇量、提取次数、提取时间、乙醇浓度4个因素对紫荆皮中总黄酮的超声提取工艺的影响,并优化其提取工艺条件.结果表明:最佳提取工艺为药材加8倍量乙醇,提取2次,提取15min,乙醇浓席60%.优化后的提取工艺简单、可行,适合提取紫荆皮中总黄酮.
【期刊名称】《江苏农业科学》
【年(卷),期】2012(040)007
【总页数】2页(P266-267)
【关键词】紫荆皮;总黄酮;超声提取法;正交试验法
【作 者】李君玲
【作者单位】宜春学院,江西宜春336000
【正文语种】中 文
【中图分类】R284.2
紫荆(Cercis chinensis Bunge)为豆科紫荆属植物,其树皮和木材可入药,具有活血行气、清热解毒、消肿止痛等功效。紫荆花可用于治疗风湿骨痛、鼻中疳疮。紫荆果可治疗咳嗽[1]。研究发现,紫荆花含有丰富的黄酮类化合物[2]。黄酮类化合物是一类具有多样生物活性的化学成分,尤其在治疗心血管疾病方面有强心、抗心肌缺血、扩张血管、降压、抗心律失常、降血脂、抗动脉粥样硬化等多种作用,能有效抑制血小板聚集[3-4]。有关紫荆皮中总黄酮的研究鲜有报道,本研究对紫荆皮中总黄酮的含量进行了测定,并以总黄酮得率为考察指标,优化其超声提取工艺,旨在为进一步研究开发紫荆提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料和试剂
芸香苷对照品(中国药品生物制品检定所提供);无水乙醇、亚硝酸钠、氢氧化钠、硝酸铝等均为分析纯;紫荆皮(樟树市庆仁中药饮片有限公司)。
1.2 仪器与设备
TU-1810紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限公司),SK2510HP超声波机(上海科导超声仪器有限公司),YP601N电子天平(厦门精艺兴业科技有限公司),SF-130万能粉碎机(江苏黎明制药机械有限公司),SHZ-Ⅲ 型循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂),旋转蒸发仪 RE-2000(上海亚荣生化仪器厂)。
1.3 方法
精确称取120℃下干燥至恒重的芸香苷标准品10 mg,置于50 mL容量瓶中,加60%乙醇使之溶解,然后再加入60%乙醇定容至刻度,摇匀。即得每1 mL芸香苷标准溶液中含无水芸香苷0.20 mg。
2 结果与分析
2.1 标准曲线的绘制
分别精确吸取芸香苷标准溶液 0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL于25 mL容量瓶中,加入5%亚硝酸钠溶液1 mL,摇匀,放置6 min,加入10%硝酸铝溶液1 mL,摇匀,放置6 min,加入10%氢氧化钠10 mL,摇匀,定容至刻度,放置15 min,在510 nm波长处测定吸光度。将所得数据进行一元线性回归,得标准回归方程 D=13.459 82C+0.008 11,r=0.999 6,在0.2 ~0.12 mg范围内呈良好的线性关系[2]。 2.2 供试品溶液的制备及其总黄酮的含量测定
精确称取1 g紫荆皮粉末(20目),按料液比1∶15加入55%浓度的乙醇,100℃下回流提取2 h,提取3次。提取液合并回收乙醇,用70%乙醇定容至25 mL容量瓶中,吸取3 mL于25 mL容量瓶中,按标准曲线制备各项处理,在510 nm波长处测定吸光度。得供试品中总黄酮得率为4.73%。
2.3 紫荆皮总黄酮超声提取工艺优化
采用4因素3水平的正交试验法L9(34)对影响乙醇超声提取的主要因素加醇量、提取时间、提取次数、乙醇浓度进行考察,每个因素选择3个水平(表1)。
表1 正交试验L9(34)因素水平水平因素A:加醇量(倍)B:提取时间(min)C:提取次数D:乙醇浓度(%)1 15 1 50 2 10 30 2 60 8 3 12 45 3 70
表2 正交试验结果与极差分析序号因素水平A:加醇量 B:提取时间C:提取次数D:乙醇浓度总黄酮得率(%)1 1 1 1 1 5.76 2 1 2 2 2 5.24 3 1 3 3 3 3.68 4 2 1 2
3 6.45 5 2 2 3 1 4.23 6 2 3 1 2 2.62 7 3 1 3 2 6.61 8 3 2 1 3 4.01 9 3 3 2 1
3.36 k1 4.89 6.27 4.13 4.37 45 k2 4.43 4.49 5.02 4.82 k3 4.66 3.22 4.84 4.71
R 0.46 3.05 0.89 0.
表3 方差分析表注:F0.05(2.2)=19.00,* 表示显著性影响因素。值 显著性变异来源 离均差平方和 自由度 均方 F A因素0.317 4 2 0.158 7 1.437 46 B 因素
14.113 2 7.056 3 63.909 4 *C 因素 1.321 5 2 0.660 7 5.984 4 D 因素 0.220 8
2 0.110 4 1总计15.972 8
方差分析结果表明,提取时间为显著影响因素。影响紫荆皮总黄酮提取含量的因素顺序为提取时间>提取次数>加醇量>乙醇浓度。结合生产实际,确定最佳提取工艺为A1B1C2D2,即药材加8倍量乙醇,提取时间15 min,提取2次,乙醇浓度60%。对优选出的工艺进行验证,以确保工艺的重复性和正确性,按照选定的条件重复测定3次,结果表明总黄酮含量为6.62 mg/g。表明所选择的工艺合理可行。
3 结论
紫荆皮中含有丰富的总黄酮类成分,值得进一步研究与开发。另外采用超声波提取法具有保护药物活性成分、提取时间短、提取效率高等优点[5-6]上。优化后的提取工艺简单可行,适合提取紫荆皮中的总黄酮。
【相关文献】
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