桑黄多糖提取工艺研究

桑黄提取精制工艺的研究【摘要】目的优选桑黄多糖的提取、精制工艺。

方法采用正交实验设计优选桑黄多糖提取工艺。

通过吸附法与醇沉法的比较，选出最佳精制工艺。

结果桑黄多糖最佳提取工艺为：粉碎粒度60目，浸泡12 h，用14倍的水，提取3 h，用壳聚糖吸附法精制多糖。

结论浸泡时间对实验影响较大，采用壳聚糖吸附法精制，多糖损失少，此提取精制工艺方法可行。

【关键词】桑黄；多糖；正交设计；提取；精制Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction and purification method of the polysaccharide of Phellinus igniarius.MethodsThe bset extract method of the polysaccharide was determined by orthogonal design. Through the comparison of the ethanol extraction and adsorbing purification， the best purification method was chosen. ResultsThe best extraction method of the polysaccharide in the Phellinus igniariuswas :the Phellinus igniarius granularity was about 60 screen mesh，the immersion time was12 h， the solvent is water and the material 14:1，and extracted 3 times . Chitosan absorbing purification was used to extract the Phellinus igniarius.Conclusionthe immersion time greatly influenced the extraction of Phellinus igniarius .Chitosan absorbing purification was used to extract the Phellinus igniarius and the polysaccharide losses little. The extraction and purification technology of Phellinus igniarius is feasible.Key words：Phellinus igniarius; Polysaccharide; Orthogonal design; Extraction; Purification桑黄［1］是寄生于桑树的一种药用真菌。

Review22 April 2021, 40(4): 895-911 Mycosystema菌物学报创刊4(7周年40th anniversary of M y c o s y s t e m aISSN 1672-6472 CN11-5180/Q特约综述DOI: 10.13346/j.mycosystema.200364崔宝凯北京林业大学教授、博士生导师，获得中国青年科技奖、国家优秀青年科学基 金、教育部新世纪优秀人才支持计划。

担任中国菌物学会常务理事、副秘书长、菌 物多样性及系统学专业委员会副主任委员、桑黄产业分会副会长，中国青年科技工 作者协会理事、农业科学与技术专业委员会秘书长，《Frontiers in Microbiology 》《MycoKeys》《Forest Ecosystems 》等S C I 期刊编委，《菌物学报》《生物技术通报》等中文期刊编委。

主要从事真菌多样性与生态学、分子系统学、食药用真菌、真菌产 酶活性与利用等方向的研究。

以第一或通讯作者发表S C I 论文100余篇，出版专著2 部，获授权发明专利5项，获省部级科技奖励5项、梁希林业科技奖励3项。

司静北京林业大学生态与自然保护学院副教授、硕士生导师。

现任中国菌物学会会 员、桑黄产业分会理事、中国林学会会员及多个国内外期刊杂志的审稿专家。

一直 从事大型真菌多样性与资源利用等方面的研究。

筛选出了多株高效稳定且对多种复 杂化合物有降解能力的菌株，提出了提高真菌漆酶稳定性及使用效率的新方法，对 多种药用真菌的生物活性进行了系统研究，获得了可有效提高灵芝多糖产量的培养 基质组成。

已发表研究论文40余篇，其中2篇被评选为领跑者5〇00中国精品科技 期刊顶尖学术论文、5篇被授予《菌物学报》优秀论文奖，获梁希林业科学技术奖2 项，授权发明专利2项。

桑黄类真菌多糖研究进展王豪钱坤司静。

崔宝凯。

北京林业大学生态与自然保护学院微生物研究所北京100083摘要：桑黄是一类珍稀药用真菌的统称，多糖作为其主要的有效成分之一，具有抑肿瘤、抗氧化、抑菌、消炎、免疫调节等多种药理功效。

张琨霖，王贺琪，郭庆彬，等. 桑黄子实体多糖的提取工艺优化、结构解析及免疫活性分析[J]. 食品工业科技，2023，44（20）：93−100. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022120199ZHANG Kunlin, WANG Heqi, GUO Qingbin, et al. Optimization of Extraction Process, Structure Analysis and Immunological Properties of Polysaccharides from the Fruiting Body of Phellinus igniarius [J]. Science and Technology of Food Industry, 2023,44(20): 93−100. (in Chinese with English abstract). doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022120199· 研究与探讨 ·桑黄子实体多糖的提取工艺优化、结构解析及免疫活性分析张琨霖1，王贺琪1，郭庆彬1,2，刘欢欢1,2，梁宏合3，王　乐4，李贞景1,2,*（1.天津科技大学食品科学与工程学院，天津 300457；2.天津科技大学食品营养与安全国家重点实验室，天津 300457；3.广西壮族自治区亚热带作物研究所，广西南宁 530001；4.河南省食品检验研究院，河南郑州 450003）摘　要：以桑黄子实体为原料，优化桑黄子实体多糖的提取条件，对其结构进行解析并评价其免疫调节活性。

以提取温度、提取时间、料液比、提取次数为因素，采用单因素实验及正交试验优化桑黄子实体多糖提取条件，利用酶解法和透析法纯化多糖，通过相对分子质量测定、傅里叶红外光谱、单糖组成和甲基化分析其化学结构，并采用RAW-Blue™细胞实验初步研究其免疫活性。

桑叶中多糖提取分离工艺的研究桑叶多糖提取分离。

目的：优选桑叶多糖提取分离最佳工艺。

方法：比较稀酸、稀碱、蒸馏水3种提取方法，采用L9（34）正交试验，比较了不同蛋白去除法对多糖提取分离的影响。

结果：桑叶多糖的最佳提取工艺为用10倍蒸馏水在70℃下提取2次，每次1.5h。

醇沉分离最佳工艺优于传统的Savage法。

结论：优选的桑叶多糖提取分离工艺稳定可行。

标签：多糖；提取；分离工艺1材料和仪器752型紫外外-可见分光光度计，R-201旋转蒸发器，pHS-3C精密pH计，ALPHA1-2真空冷冻干燥机，FA/IA型电子天平。

2方法和结果2.1原料预处理：将桑叶粉碎、过筛，加入一定体积95%乙醇，使溶液中乙醇的体积分数达到80%，回流4h，间隙搅拌。

回流完毕，离心分离取滤渣，滤渣风干，备用。

2.2桑叶多糖的测定[3]2.2.1对照品溶液的制备：精密称取葡萄糖对照品（105℃干燥至恒重）100mg，置于100mL量瓶中，加水适量使溶解，稀释至刻度，摇匀。

精密吸取10mL置于100mL量瓶中，加水稀释至刻度，即得。

2.2.2标准曲线的绘制：准确吸取葡萄糖对照品溶0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.60、0.80mL，用蒸馏水补到1.00mL。

分别加入4.00 mL0.2%蒽酮-硫酸试剂，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖玻璃球，以防蒸发。

自水浴重新煮沸起，准确煮沸10min取出，自来水冷却，室温放置10min左右。

以同样处理的重蒸水为空白，于620nm处测定。

2.2.3測定：精密称取桑叶多糖提取物50mg，加水适量使溶解，蒸馏水定容至50ml量瓶中，摇匀。

精密吸取1 mL，按2.2.2 项下操作，测定吸光度值，计算多糖的质量分数。

2.3浸膏得率的测定：采用重量法。

精密量取等量的提取液（m），置于已干燥至恒重的蒸发皿中（m0），水浴浓缩干，于105℃干燥3h，移至干燥器中，冷却至室温，迅速精密称定质量（mi），按公式（mi-mo）/m×100%计算浸膏得率。

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精品整理
桑黄粗多糖分离纯化的工艺
多糖，又称多聚糖，是一类由相同或不同的单糖及糖醛酸通过糖苷键连接缩合而成的重要生物大分子。

由相同的单糖组成的多糖称为均多糖，如淀粉、纤维素等；由不同的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶等。

目前已发现的天然多糖有数百种，广泛存在于动物、植物、菌物和微生物中。

桑黄粗多糖脱蛋白和除色素是目前分离纯化多糖的重点和难点之一。

桑黄粗多糖脱蛋白常用的是Sevage法、醇析法、酶法、三氟二氯乙烷法以及三氯乙酸法(TCA)等，桑黄粗多糖除色素常用纤维素、等层析柱的方式。

目前，为得到高纯度桑黄多糖，主要的分离技术有分级醇沉(初步分离)、超滤法、大孔树脂吸附纯化凝胶柱层析、离子交换层析、凝胶过滤、高速逆流色谱法及各种色谱法，但色谱价格昂贵，制备量少，目前限于实验室，不能大规模工业生产。

真菌多糖将会成为生物界的新研究领域，可能带来医学、工业和农业上的迅速发展和应用。

桑黄多糖生物活性好，没有细胞毒性，已成为新药发展的方向之一。

桑黄多糖的生物活性通常是其结构(化学结构和空间立体结构)决定的，是目前桑黄多糖研究的焦点和难点，学者普遍认为桑黄多糖的高级结构对其活性的影响比一级结构大，这和提取方法、分离纯化方法密切相关，而不同的提取、分离纯化方法对桑黄多糖的结构和生物活性的影响等相关问题还在进一步的研究中。