柞蚕蛹血淋巴多酚氧化酶活性影响因素的研究

野桑蚕多酚氧化酶分离纯化的试验初报
张永亮;朱勇
【期刊名称】《蚕业科学》
【年(卷),期】2009(35)1
【摘要】多酚氧化酶是昆虫初生新表皮硬化过程中的关键性酶。

为有利于研究野桑蚕(Bombyxmandarina)多酚氧化酶的功能与性质,探讨了野桑蚕多酚氧化酶的分离纯化方法。

以野桑蚕5龄幼虫为材料,用磷酸盐缓冲液浸提多酚氧化酶粗提液,再经40%饱和度硫酸铵沉淀、透析及Sephadex G-100凝胶过滤进一步分离纯化,得到了部分纯化的多酚氧化酶,其酶纯化倍数为57.14倍±0.19倍,酶得率为
10.17%±0.18%,酶比活力为(10 166.67±66.16)U/mg。

采用该试验方法可有效分离纯化野桑蚕多酚氧化酶。

【总页数】4页(P175-178)
【关键词】野桑蚕;多酚氧化酶;分离;纯化
【作者】张永亮;朱勇
【作者单位】周口师范学院生命科学系;西南大学生物技术学院
【正文语种】中文
【中图分类】S885.9
【相关文献】
1.野桑蚕酚氧化酶原基因PPO1的克隆及其特征 [J], 张永亮;盛东峰;朱勇
2.野桑蚕各发育时期酚氧化酶原基因的表达谱分析 [J], 张永亮;朱勇
3.桑蚕有色茧杂合体的分离与纯化试验初报 [J], 郭定国;黄嫔;林忠芬;钟苏苑;张桂玲
4.金属离子和抑制剂对野桑蚕多酚氧化酶活性的影响 [J], 张永亮;盛东峰;朱勇
5.槲皮素和硫脲对野桑蚕多酚氧化酶的抑制类型 [J], 张永亮;朱勇
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家蚕眠期血淋巴酚氧化酶活性变化及其基因表达分析杨伟克;刘增虎;钟健;董占鹏【摘要】[目的]探究酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)及酚氧化酶在家蚕眠期血淋巴中的变化规律,为深入解析家蚕眠期酚氧化酶的功能及其基因表达特征提供新线索.[方法]以家蚕四龄将眠、四龄眠(头壳刚开裂)0h、四龄眠6 h、四龄眠12 h、四龄眠24 h和五龄起蚕为试验材料,采用实时荧光定量PCR检测其血淋巴PPO1和PPO2基因的表达情况,并分析血淋巴酚氧化酶活性的变化规律.[结果]家蚕血淋巴PPO1和PPO2基因在四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期均有一定程度的表达,且两者的变化规律一致,表现为四龄将眠最高、五龄起蚕最低,总体上呈先减后增再减的变化趋势.在家蚕四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期血淋巴酚氧化酶活性整体上也呈先降低后急剧升高再降低的变化趋势,四龄将眠为5.99 U/mg,五龄起蚕为6.02 U/mg,与酚氧化酶原基因表达模式基本一致.[结论]家蚕四龄将眠至五龄起蚕不同发育时期血淋巴酚氧化酶活性变化规律与酚氧化酶原基因(PPO1和PPO2)的转录表达模式基本一致,说明酚氧化酶在家蚕眠期即发挥免疫防御功能,又参与蚕体新旧表皮的更替过程.【期刊名称】《南方农业学报》【年(卷),期】2019(050)002【总页数】6页(P391-396)【关键词】家蚕;酚氧化酶;酚氧化酶原基因;眠期;血淋巴;变化规律【作者】杨伟克;刘增虎;钟健;董占鹏【作者单位】云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自 661101;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自 661101;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自 661101;云南省农业科学院蚕桑蜜蜂研究所,云南蒙自 661101【正文语种】中文【中图分类】S881.210 引言【研究意义】酚氧化酶（Phenoloxidase）又名酪氨酸酶，广泛分布于动植物体内（白霜等，2008；陈晓宇等，2015），在昆虫血淋巴中一般以无活性的酚氧化酶原（Prophenoloxidase，PPO）形式存在（Kan et al.，2008；Lu et al.，2014）。

实验四、多酚氧化酶的活性的测定及酶学性质(总3页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除实验四、马铃薯块茎多酚氧化酶（PPO）活性测定及酶学性质一、实验目的1掌握分光光度法测定多酚氧化酶活性的一般原理及操作技术方法。

2了解酶的活性与植物组织褐变以及生理活动之间的关系。

二、实验原理马铃薯不耐储藏，在加工过程中去皮切分后非常容易发生酶促褐变，使外观品质和营养价值大为降低，制约着马铃薯的开发利用。

酶促褐变是马铃薯加工产业必须解决的难题。

其中多酚氧化酶是导致马铃薯等果蔬发生酶促褐变的重要酶类。

多酚氧化酶活性大小直接影响酶促褐变程度。

多酚氧化酶(polyphenol oxidase，PPO)又称酪氨酸酶、儿茶酚酶、酚酶等．是自然界中分布极广的一种含铜氧化酶．普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中。

植物受到机械损伤和病菌侵染后，PPO催化酚与O2氧化形成醌，使组织形成褐变．以便损伤恢复，防止或减少感染，提高抗病能力。

研究多酚氧化酶的特性对食品的加工与保藏工艺有非常重要的意义。

因此，检测食品中多酚氧化酶具有重要意义。

多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶，在一定的温度、pH条件下，有氧存在时，能使催化邻苯二酚氧化生成有色物质，单位时间内有色物质在410nm处的吸光度与酶活性强弱成正相关，在分光光度计410nm处使反应体系的OD值产生变化，通过OD值的变化确定PPO的酶活大小。

多酚氧化酶?邻苯二酚（儿茶酚）＋1∕2?O2——————→邻醌＋H2O?三、试验材料、试剂及试验用品1．材料：马铃薯块茎。

2．仪器：分光光度计；离心机；恒温水浴；研钵；试管；移液管；容量瓶3．试剂：0.1mmol/L 磷酸缓冲液（pH=7.0）；0.01mol/L邻苯二酚；0.1mol/L 磷酸氢二钠；0.1mol/L磷酸二氢钠；10mmol/L柠檬酸；10mmol/L抗坏血酸；10mmol/L乙二胺四乙酸二钠（EDTA）；10mmol/L亚硫酸钠四、实验方法：1.多酚氧化酶的提取取0.5g马铃薯块茎样品，加入预冷的磷酸缓冲液（pH7.0）3ml，研磨匀浆，转移到离心管中，再用7mL磷酸缓冲液冲洗研钵，合并提取液，在４℃下离心（8000r/min）5min，取上清液为多酚氧化酶提取液，并量取粗酶液体积。

沈阳农业大学学报,2000-08,31(4):337-339Journal of Shen y an g A g ricultural Universit y,2000-08,31(4):337-339柞蚕血液过氧化氢酶(CAT)活性的研究李健男1,夏润玺1,刘勤2,曹慧颖1(1沈阳农业大学,辽宁沈阳110161;2内蒙古呼伦贝尔盟蚕业科学研究所,内蒙古扎兰屯162650)摘要:本试验对柞蚕(Antheraea pernyi)血液过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活性进行了研究。

在幼虫期,CAT活性随龄递减。

同一龄期内,CAT活性在龄初时较低,然后迅速上升,在盛食期前后保持较高水平,将眠时迅速降至该龄最低点,就眠后又上升。

化蛹后,CAT活性迅速升高,至蛹中期达峰值,随后下降直至羽化。

不同性别间CAT活性雄性高于雌性。

不同品种间CAT 活性存在较大差异,抗病2号高于青6号,显著高于三里丝。

接种柞蚕核型多角体病毒(A nthera ea p ernyi Nuclear Polyhedrosis Virus,ApNPV)后,血液CAT活性先下降,然后迅速上升,3个品种均出现两个活性峰,抗病2号的两个活性峰分别出现在接种后第3天和第6天,青6号则出现在第4天和第6天,而三里丝出现在第5天和第7天,且抗病2号的活性峰高于青6号,显著高于三里丝。

研究认为,柞蚕血液CAT活性与蚕的生长发育、体内代谢、抗病性密切相关,其活性大小可作为衡量品种抗病性强弱的一个生理指标。

关键词:柞蚕;血液;过氧化氢酶;活性中图分类号:S885;S554+.6文献标识码:A文章编号:1000-1700(2000)04-0337-03Studies on the Activit y of Catalase in Haemol y m p h of Antheraea p ern y iLI Jian-nan,XIA Ren-xi,et al.(S hen g y an g A g r icultu r a l Univ er sit y,Sh en gy an g110161,Chin a)Abstract:The activity of catalase(CAT)in haemolymph of A nthera ea p ern yi was studied.In larval stage,the CAT activity declined with the increase of the instars.In the sam e instar,the CAT activity was lower at the beginning,then increased rapidly and main-tained in a high level during gluttonous stage.It declined rapidly to the lowest level before moulting and increased from the beginning of moulting.After pupation,the CAT activity increased rapidly and reach ed the peak at the middle stage of pupae,then decreased rapidly until emergence.The CAT activity of the male was higher than that of the female.There was great variat ion of CAT act ivity among d ifferent varieties,so that of Kanger was higher than that of Qingliu and much higher than that of Sanlisi.After the inocula-tion with A nthera ea Per nyi Nuclear Polyhedros is Virus(ApNPV),the CAT act ivity declined first,then increased rapidly and two ac-tivity peaks occurred.The two peaks of Kanger appeared at the3rd and6th day and those of Qingliu appeared at the4th and6th day while those of San lisi appeared at4th and7th day.The peak of Kanger was high er than that of Qingliu and much higher than that of Sanlisi.The results showed that there was a ver y close relationshi p between the CAT act ivit y and develo p ment,metabolism and d isease resistance,it could be taken as one of the p h y s iolo g ical index for disease resistance.Ke y words:A nther aea p ern y i;haemol y m p h;catalase(CAT);activit y过氧化氢酶(Catalase,CAT)广泛存在于动植物体内,作用是催化H2O2分解为H2O和O2,防止它与·O2生成更有害的·OH,保护生物体组织免受毒害。

家蚕血液羧酸酯酶活力影响因素研究初报
宋宏图;李兵;王东;沈卫德
【期刊名称】《江苏蚕业》
【年(卷),期】2007(29)2
【摘要】为了研究家蚕血液的羧酸酯酶活性变化规律,利用分光光度计法对家蚕血液中羧酸酯酶活性影响因素及在不同龄期的具体变化规律作了初步研究.结果表明:其最适温度为45℃;最适pH 8.5;不同龄期的活性表现为各龄中期酶活力比较高,而在眠蚕、起蚕期酶活力相对较低,其中尤其以5龄第3、4天活力最高;在同一浓度下的杀虫剂对羧酸酯酶活性离体抑制作用实验中,敌百虫的抑制作用最强,乙酰甲胺磷次之,敌杀死最弱.
【总页数】4页(P11-14)
【作者】宋宏图;李兵;王东;沈卫德
【作者单位】苏州大学蚕桑研究所苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学蚕桑研究所苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学蚕桑研究所苏州大学生命科学学院,苏州,215123;苏州大学蚕桑研究所苏州大学生命科学学院,苏
州,215123
【正文语种】中文
【中图分类】S881.2
【相关文献】
1.家蚕添食活力99保健液的试验初报 [J], 马闹闹;尹钢;琚新丰
2.氟化物对家蚕血液羧酸酯酶及全酯酶活性的影响 [J], 米智;阮成龙;李姣蓉;付巧娟;杜文华;李冠楠;隆耀航;朱勇
3.两种桑叶消毒药物对家蚕影响试验初报 [J], 文廷勇
4.家蚕浓核病病毒越冬存活力试验初报 [J], 廖森泰;朱德贞;郑祥明;方定坚
5.家蚕血液超氧化物歧化酶活力及其影响因素 [J], 吴小锋;徐俊良;崔为正
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实验七影响多酚氧化酶的各种因素一、实验目的学习不同因素对于酶催化反应速度的影响。

二、实验原理细胞环境中各种因素直接影响酶的催化活性。

因为酶是蛋白催化剂，其催化活性易受各种因素的影响，如温度、pH、底物种类、底物浓度、酶浓度以及抑制剂和蛋白质变性剂等都会改变其生物催化活性。

要测定这些因素对于酶反应的影响时，应通过一系列实验，仅在被研究的因素是变化的情况下，测定他对于反应速度的影响，而其它的实验条件应保持一致。

三、实验器材1、实验仪器恒温水浴锅、试管、试管架、滴管2、试剂（1）0.8% HCl：19.2ml浓HCl加水稀释到1000mL（2）0.2%和0.3%（V/V）的乳酸溶液（3）0.5%的碳酸钠溶液（4）0.01%的碳酸钠溶液（5）0.01mol/L的邻苯二酚溶液（6）实验七中获得的粗酶提取液四、实验步骤1、底物浓度的影响按表4加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。

表4底物浓度的影响试管号酶液邻苯二酚水37℃保温1min，观察颜色变化1 5滴0.1ml 3.9ml2 5滴1ml 3ml3 5滴4ml －2、酶浓度的影响按表5加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。

表5酶浓度的影响试管号酶液邻苯二酚水37℃保温2min，观察颜色变化1 15滴15滴－2 1滴15滴14滴3、氢离子浓度的影响按表6加入各试剂，观察反应现象并记录和分析原因。

表6氢离子浓度的影响五、实验结果1. 按实验步骤中各表格要切记录实验现象。

2. 分析每组实验现象产生的原因。

六、思考题1．该多酚氧化酶的最适pH值是多少？为什么？2．通过实验可知哪些因素会影响酶的催化活力？。

柞蚕β葡萄糖苷酶和多酚氧化酶的初探
周祖荫
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】1989(000)006
【总页数】6页(P4-9)
【作者】周祖荫
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】TS201.25
【相关文献】
1.红茶加工中多酚氧化酶、过氧化物酶和β-葡萄糖苷酶活性变化 [J], 丰金玉;刘昆言;秦昱;熊硕;邓燕莉;龚志华;肖文军;
2.红茶加工中多酚氧化酶、过氧化物酶和β-葡萄糖苷酶活性变化 [J], 丰金玉;刘昆言;秦昱;熊硕;邓燕莉;龚志华;肖文军
3.α-葡萄糖苷酶抑制剂和葡萄糖苷酶的作用机制研究 [J], 王文;王金虎;张小康;赵祥妤
4.微池板比色法在多酚氧化酶和β葡萄糖苷酶研究中的应用 [J], 王彬彬;林启美;陈源泉;隋鹏;高旺盛
5.冷冻萎凋对茶叶多酚氧化酶和β─葡萄糖苷酶活性的影响初探 [J], 夏涛;童启庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

家蝇蛹中多酚氧化酶的分离纯化及抑菌活性的研究
家蝇蛹中多酚氧化酶的分离纯化及抑菌活性的研究
采用缓冲液浸提、超滤、亲和层析和高效液相色谱4种方法,从家蝇蛹中分离纯化一种D-半乳糖专一性的多酚氧化酶(PO),并对其抑菌活性进行了研究.在SDS-PGAGE中呈现出两个条带,其中表观分子质量为78 ku的条带为目的蛋白;经过高效液相色谱分析,呈现出了分别和SDS-PAGE结果中相对应的两个峰,其中第一个峰为要纯化的目的蛋白;目的蛋白经过肽指纹图谱检测为PO,精确分子质量为79ku.1mL纯化的PO 在1 g/L的质量浓度下对1 mL稀释后的大肠埃希菌、枯草芽胞杆菌和伤寒沙门菌(106mL-1)的抑制率分别为43.2%、38.7%和50.1%.
作者：孙洋王春玲曹小红 SUN Yang WANG Chun-ling CAO Xiao-hong 作者单位：天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457 刊名：天津科技大学学报 ISTIC英文刊名：JOURNAL OF TIANJING UNIVERSITY OF SCIENCE & TECHNOLOGY 年，卷(期)：2008 23(3) 分类号：Q969.42 关键词：家蝇蛹多酚氧化酶抑菌。

植物多酚氧化酶及其活性特征的研究进展
赵伶俐;范崇辉;葛红;刘洪涛
【期刊名称】《西北林学院学报》
【年(卷),期】2005(020)003
【摘要】对植物就多酚氧化酶类型、细胞和组织中的定位、生理功能、酶活性的影响因素等方面的近年来的研究成果进行了总结.
【总页数】4页(P156-159)
【作者】赵伶俐;范崇辉;葛红;刘洪涛
【作者单位】中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;西北农林科技大学,陕西,杨陵,712100;西北农林科技大学,陕西,杨陵,712100;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081;中国农业科学院蔬菜花卉研究所,北京,100081
【正文语种】中文
【中图分类】Q746.91
【相关文献】
1.园艺植物多酚氧化酶的分子生物学研究进展 [J], 陈桂信;潘东明;赖钟雄;吕柳新
2.植物多酚氧化酶活性测定方法的改进 [J], 李忠光;龚明
3.植物多酚氧化酶的研究进展 [J], 王曼玲;胡中立;周明全;宋运淳
4.植物多酚氧化酶分子生物学研究进展 [J], 李斌;黎秋华;杨宏伟;周英
5.植物多酚氧化酶的生理功能、分离纯化及酶促褐变控制的研究进展 [J], 王馨雨;杨绿竹;王婷;王蓉蓉;刘洁;单杨;张群;丁胜华
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家蚕表皮多酚氧化酶的分离纯化及酶学性质研究马晓春,韩宏岩,许维岸*(苏州大学基础医学与生物科学学院,江苏苏州215123)摘要 [目的]分离纯化家蚕多酚氧化酶,并对其性质进行分析研究。

[方法]采用硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤、蛋白质电泳等方法。

[结果]多酚氧化酶分子量约为81kD;最适温度为30℃;最适pH 值为7.0。

低浓度金属离子A g +、C u 2+、M n 2+、Z n 2+对多酚氧化酶有一定的激活作用,而高浓度有抑制作用。

[结论]金属离子对家蚕多酚氧化酶的影响很大,值得更深入的研究。

关键词 家蚕;多酚氧化酶;分离纯化;性质中图分类号 S188 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2009)17-07870-02S tud y on th e S ep a ra t ion,Pu rific a tio n an d En zym a t ic P rop e rt ie s o f P o ly ph en o lo x id a s e fromEp ide r m is o f B o m byx m o ri M A X ia o -ch u n e t a l (C o llege o f P reclin ica l M ed icin e and B io log ica l S cien ce ,S ooch ow U n iv ers ity ,S u zh ou,J ian g su 215123)A b s tra c t [O b jective]T h e re sea rch a i m ed to sepa ra te an d pu r ify po lyph en o lox ida se from B om by x m ori an d stu dy its prope r ties.[M e th od]T h e m e th ods o f am m on iumsu lfa te p recip ita tion ,ge l filtra tion,p ro te in e lec troph o re sis and so on w e re u sed.[R e su lt]T h e m o lecu la r w e igh t o f po lyph en o lox i da se w a sabou t 81kD.T h e op ti m umtem pe ra tu re w as 30℃an d th e op ti m umpH w as 7.0.T h e m e ta l ion s o f A g +,C u 2+,M n 2+an d Zn 2+a t low con cen tra tion h ad ce r ta in activ a tion on po lyph en o lo x idase an d th a t a t h igh con cen tra tionh ad inh ib ition.[C on clu sion ]T h e in flu en ces o f h eav y m e ta l ion s on po lyph en o lox ida se from B om byx m ori w e re g rea te r ,to be w o rthfu r th e r s tudy.K e y w o rd s B om byx m ori ;P o lyph en o lo x idase ;S epa ra tion an d pu rifica tion;P rope r tie s作者简介 马晓春(1982-),女,山西大同人,硕士研究生,研究方向:动物生理生化与分子生物学。

家蚕血淋巴过氧化物酶活力及其影响因素
吴小锋;徐俊良;崔为正;徐杰
【期刊名称】《蚕业科学》
【年(卷),期】1998(24)1
【摘要】应用Worthington法测定，首次证实家蚕血淋巴中也存在着过氧化物酶（POD），并分析了影响该酶活力的因素。

结果表明，家蚕血淋巴POD活力随不同发育时期而呈现动态变化，不同性别间POD活力均以雄性较高，家蚕不同品种间POD活力有较大差异，桑叶育蚕POD活力明显高于人工饲料育主；氟化物添食后，POD活力发生了显著变化。

研究认为，家蚕POD活力与蚕的生长发育及体内代谢有关，POD活力大小可以作为反映蚕逆境生理的一个生化指标。

【总页数】4页(P35-38)
【关键词】家蚕;血淋巴;过氧化物酶
【作者】吴小锋;徐俊良;崔为正;徐杰
【作者单位】浙江农业大学蚕学系;山东农业大学蚕学专业;浙江省农业厅蚕种冷库【正文语种】中文
【中图分类】S881.21
【相关文献】
1.溶解氧对凡纳滨对虾血淋巴血蓝蛋白、渗透压和鳃丝离子转运酶活力的影响 [J], 郑德斌;潘鲁青;金彩霞
2.酚氧化酶在家蚕血淋巴中的活力分布及影响因素的研究 [J], 陈文柱;李兵;贡成良;
沈卫德
3.病毒感染对栉孔扇贝血淋巴中过氧化氢酶和过氧化物酶活力的影响 [J], 孙虎山;王宜艳;杨静;孙修勤
4.硒碘对大鼠谷胱甘肽过氧化物酶活力及甲状腺激素代谢的影响──Ⅰ．硒碘营养状态对大鼠组织谷胱甘肽过氧化物酶活力的影响 [J], 伊木清;夏弈明;田园
5.氟中毒家蚕幼虫血淋巴中谷胱甘肽过氧化物酶的活性 [J], 吕顺霖;闵思佳;丁春阳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

毕业论文开题报告生物工程多酚氧化酶活性测定及控制一、选题的背景、意义多酚氧化酶（PPO）广泛存在于自然界，在果实和蔬菜收获后，PPO所引起的反应常常会使果肉发生褐变、产生异味和损失营养。

本研究就PPO的活性和影响该酶作用的因素进行阐述，为果蔬贮藏和加工中酶促褐变的防治提供思路。

二、相关研究的最新成果及动态2.1鲜切莲藕组织中多酚氧化酶的分离纯化从鲜切藕中粗提多酚氧化酶，并通过硫酸铵盐析沉淀，DEAE-SepH-Arose离子交换柱层析以及PHenyl SepHArose 6FAsT Flow疏水柱层析进行纯化后，经SDS-PAGE电泳确定为单一条带，表明该酶已被纯化到电泳均一。

在整个过程中，该酶纯化了95．66倍，产率为2．4％。

同时研究表明，鲜切莲藕组织中PPO相对分子质量在65 900～66 100之间。

2.2 不同小麦多酚氧化酶活性检测方法的比较以邻苯二酚和酪氨酸为底物所测PPO活性极显著相关,邻苯二酚所测活性强,但酪氨酸所测活性的变异系数大。

面粉PPO活性和面粉及面制品色泽的变化相关性最强,但籽粒和全麦粉中的PPO活性高,变异系数大。

2.3 PPO活性与小麦粉主要理化指标的关系PPO活性与小麦粉白度成极显著负相关性,与灰分含量成极显著正相关性;前路粉流PPO 活性比后路粉流低;物料含皮较多的在线粉流PPO活性高;物料来源于小麦胚乳外层的粉流PPO活性高。

2.4 核桃组织培养中外植体褐变多酚氧化酶活性的控制在抑制PPO活性方面,PVP作用最明显,其次是NA2S2O3、AGNO3。

2.5 石榴果皮中的多酚氧化酶(PPO)活性测定的最佳试验条件以邻苯二酚为底物时,底物浓度宜大于20mmol/L,其最适波长为420nm,最适pH值为6.8,最适温度为50℃,反应时间不宜超过20min,反应完成后在20min后测定PPO的活性最为稳定。

抑制剂NAHSO4的有效抑制浓度为0.8mmol/L。

2.6 纯化的莲藕多酚氧化酶(PPO)与底物和抑制剂相互作用时的二级结构变化园二色谱分析表明莲藕PPO主要含有α一螺旋和β一折叠结构。

昆虫激素对家蚕血淋巴和体壁酚氧化酶活性及其基因表达水平的影响作者：杨伟克唐芬芬刘增虎董占鹏来源：《南方农业学报》2020年第10期摘要：【目的】研究外源昆虫激素对家蚕酚氧化酶活性及其基因表达水平的影响，明确昆虫激素对酚氧化酶的调控作用，为深入解析家蚕酚氧化酶的功能及基因表达调控机制提供参考依据。

【方法】对五龄第3 d发育良好的家蚕幼虫注射蜕皮激素20E和保幼激素JH，以注射等量0.1%二甲基亚砜（DMSO）为对照，分别在注射3、6、12和24 h后解剖家蚕幼虫采集血淋巴和体壁，检测分析家蚕酚氧化酶活性及其基因表达的变化情况。

【结果】注射外源JH和20E均能促进家蚕血淋巴酚氧化酶原基因PPO1和PPO2的表达，有效增加酚氧化酶活性。

家蚕血淋巴PPO1和PPO2基因对JH和20E的响应时间存在一定差异，其中，经JH处理后2个酚氧化酶原基因（PPO1和PPO2）仅在处理6和12 h时显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）上调表达;而经20E处理后PPO1和PPO2基因从3 h开始一直持续到12 h均呈上调表达趋势。

JH 和20E对家蚕体壁PPO1和PPO2基因的影响恰好相反，具体表现为：JH能有效抑制家蚕体壁PPO1和PPO2基因的表达，降低酚氧化酶活性;20E则促进家蚕体壁PPO1基因上调表达，但不影响PPO2基因表达。

【结论】家蚕酚氧化酶原基因PPO1和PPO2表达受JH和20E的调控，且激素对酚氧化酶原基因表达水平的影响与其酶活性变化规律一致，提示酚氧化酶不仅参与昆虫激素的代谢，还与激素协同调控家蚕的蜕皮变态。

关键词：家蚕;昆虫激素;酚氧化酶;血淋巴;体壁;蜕皮变态中图分类号： S883.89 文献标志码： A 文章编号：2095-1191（2020）10-2573-07Effects of insect hormone on activity of phenoloxidase and its gene expression inhemolymph and integument of Bombyx moriYANG Wei-ke1， TANG Fen-fen2， LIU Zeng-hu1， DONG Zhan-peng1*（1Sericulture and Apiculture Research Institute， Yunnan Academy of Agricultural Sciences，Mengzi， Yunnan 661101， China; 2College of Life Science and Technology， Honghe University， Mengzi， Yunnan 661101， China）Abstract：【Objective】To clarify the regulation effect of insect hormones on phenoloxidase activity and gene expression of Bombyx mori， and study regulation effect of insect hormones on phenoloxidase， which could provide a theoretical reference for further research on the function of phenoloxidase and gene expression regulation mechanism. 【Method】Ecdysone 20E and juvenile hormone JH were injected into the silkworm at day 3 of 5th instar larva and the same amount of 0.1% dimethyl sulfoxide （DMSO） was injected as a control group. The phenoloxidase activity and gene expression level were determined in hemolymph and integument of silkworm at 3 h， 6 h， 12 h and 24 h after injection. 【Result】The results showed that the expression of prophenoloxidase genes PPO1 and PPO2 in hemolymph of silkworm were up regulated by 20E and JH， and the phenoloxidase activity was also higher than the control group. There was difference in response times of PPO1 and PPO2 in hemolymph of silkworm to 20E and JH. The expression of PPO1 and PPO2 were only significantly up-regulated at 6 h（P<0.05） and extremely up-regulated at 12 h（P<0.01）after JH treatment. While the expression of PPO1 and PPO2 were up-regulated from 3 h to 12 h after 20E treatment. The effects were opposite of JH and 20E on the expression of PPO1 and PPO2 in integument of silkworm. The expression of PPO1 and PPO2 were inhibited by JH and the phenoloxidase activity was decreased at the same time. 20E could induce the expression of PPO1，but did not affect the expression of PPO2 in integument of silkworm. 【Conclusion】The PPO1 and PPO2 expression in silkworm are regula-ted by JH and 20E. In addition， the effects of JH and 20E on the gene expression are consistent with the change rule of phenoloxidase activities. It is suggested that the phenoloxidase are involved in the metabolism of insect hormones and coordinately regulates the molting metamorphosis with JH and 20E in silkworm.Key words： Bombyx mori; insect hormone; phenoloxidase; hemolymph; integument; molting metamorphosisFoundation item： Modern Agricultural Sericulture Industrial Technology System Construction （Chief Scientist） Project of Yunnan（2019K-JTX006）; Applied Basic Research Project of Yunnan Academy of Agricultural Sciences（YJM 201710）0 引言【研究意義】酚氧化酶（Phenoloxidase，PO）是一类能将酚类氧化成邻苯醌或对苯醌的酶，广泛分布于动植物界，在生物体内发挥着极其重要的生理功能作用（陈晓宇等，2015;苑胜垒等，2016）。

桑蚕蛹酶解多肽活性研究作者：周建湘来源：《现代食品·下》2019年第07期摘要：桑蚕蛹是一种优质的蛋白质资源，其蛋白质含量占50%以上。

本文对其酶解产物的抗氧化活性进行了研究，结果显示，经酶解反应制得蚕蛹酶解多肽的水解度为21.4%。

使用邻苯三酚自氧化法检测蚕蛹酶解多肽的抗氧化活性，超氧离子清除率可达79.5%，表明其具有一定强度的抗氧化活性。

关键词：蚕蛹;酶解多肽;抗氧化活性Abstract：Silkworm chrysalis is a kind of high quality protein resource with protein accounts for more than 50%. The antioxidant activity of enzymatic hydrolysates from silkworm chrysalis was studied in this paper. The results showed that， hydrolysis degree of the enzymatic polypeptide from silkworm chrysalis was 21.4%. The antioxidant activity of enzymatic hydrolysis polypeptide ofsilkworm chrysalis was determined by pyrogallol autoxidation method. It’s superoxide ion clearancerate can reach 79.5%. It shows thatenzymatic hydrolysate of silkworm chrysalis has strong antioxidant activity.Key words：Silkworm chrysalis; Enzymatic hydrolysate; Antioxidant activity 中图分类号：TS201.1桑蚕是一种以桑叶为食的经济型鳞翅目昆虫，桑蚕整个生命周期经历卵、幼虫、蛹和成虫4个阶段[1]。