培养基及其配制
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各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质,能够为微生物提供所需的营养和环境条件。
不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件,因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。
下面是几种常见的培养基配方。
1.大肠杆菌液体培养基配方:-蛋白胨或复合氮源:10g-酵母浸出物:5g-葡萄糖:1g-NaCl:5g-K2HPO4:2g-MgSO4:0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方:-牛心提取物:3g-高级琼脂糖:15g-葡萄糖:10g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方:-玉米浸出物:4g-高级琼脂糖:15g-酵母浸出物:1g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方:-液体LB培养基:10mL-高级琼脂糖:15g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方:-羊血:50mL-肉浸出物:3g-酵母浸出物:3g-肉汤培养基:1L-红细胞素:5g-高级琼脂糖:3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方:-肉浸出物:5g-酵母浸出物:5g-NaCl:5g-蒸馏水:900mL- 加入0.1%的L-cysteine:10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项:-培养基中的成分应严格按照配方比例加入,并保持无菌。
-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。
-不同的微生物可能对一些成分非常敏感,需要根据实际情况进行微调。
-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整,一般在7.0左右。
-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中,避免阳光直射以防止成分分解。
这只是一些常见的培养基配方,不同的微生物有不同的需求,可以根据具体的情况进行配方的调整。
在实际使用中,还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。
几种微生物培养基配方微生物培养基是用来培养和繁殖各类微生物的营养基质,其配方可以根据不同微生物种类和研究需求进行调整。
下面将介绍几种常见的微生物培养基配方。
1.普通营养琼脂培养基普通营养琼脂培养基是最常见的一种培养基,适用于大多数微生物的培养。
其主要成分包括肉汤,琼脂,氨基酸和糖类等。
普通营养琼脂培养基的配方如下:-肉汤:10克-酵母浸泡液(菌种培养基,可选):5克-琼脂:15克-蒸馏水:1000毫升将肉汤和酵母浸泡液加入蒸馏水中,搅拌均匀后加热至溶解,再加入琼脂,继续加热至完全溶解。
搅拌均匀后,将溶液倒入培养皿中,冷却凝固后即可使用。
2.高营养琼脂培养基高营养琼脂培养基适用于对营养需求较高的微生物,如快速生长的细菌或真菌。
其配方相对于普通营养琼脂培养基略有不同,具体配方如下:-肉汤:10克-蛋黄粉:10克-葡萄糖:5克-琼脂:15克-蒸馏水:1000毫升将肉汤和蛋黄粉加入蒸馏水中,搅拌均匀后加热至溶解,再加入葡萄糖和琼脂,继续加热至完全溶解。
搅拌均匀后,将溶液倒入培养皿中,冷却凝固后即可使用。
3.铁琼脂培养基铁琼脂培养基用于培养铁菌等对铁元素营养要求较高的微生物。
其配方如下:-琼脂:15克-蔗糖:10克-磷酸二氢钾:0.2克-氯化铵:2克-硫酸亚铁:0.1克-蒸馏水:1000毫升将以上成分加入蒸馏水中,搅拌均匀后加热至溶解,然后继续加热至沸腾。
搅拌均匀后,将溶液倒入培养皿中,冷却凝固后即可使用。
4.特殊需求培养基除了普通营养基外,一些微生物需要特定的培养基才能生长。
例如,大肠杆菌需要含有葡萄糖和氧气的LB培养基;霉菌需要含有麦芽提取物和琼脂的SDA培养基。
这些特殊需求培养基的配方可以根据具体要求进行调整,以适应不同微生物的生长。
总结:微生物培养基有许多种,以上仅介绍了几种常见的配方。
实际应用中,根据不同微生物种类和研究需求,配方可以根据需要进行调整。
制备培养基时,需要严格按照操作规程操作,避免外界污染,以保证培养基的质量和可靠性。
实验室36种微生物培养基配制方法实验室养菌基是为微生物的培养和研究提供合适营养和条件的培养基质。
不同微生物对培养基的要求各不相同,因此实验室通常需要配制多种不同的培养基。
下面是36种常用的微生物培养基的配制方法。
一、通用培养基1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、葡萄糖5克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
2. 营养肉膏培养基(Nutrient Broth)营养肉膏培养基是一种通用的液体培养基,适用于大多数微生物的培养。
其配方为:蛋白胨10克、牛肉提取物5克、葡萄糖5克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,高压灭菌,分装,即可使用。
3. 大肠杆菌选择性培养基(MacConkey Agar)大肠杆菌选择性培养基是一种常用的培养基,用于选择和鉴定大肠杆菌。
其配方为:蛋白胨17克、葡萄糖1.5克、恶瓜胆汁5克、硼酸紫0.5克、亮矾0.09克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至7.0-7.2,加入琼脂,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
4. Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基(Sabouraud Dextrose Agar)Sabouraud脱氧胆汁蔗糖琼脂培养基是用于真菌的培养和鉴定。
其配方为:脱氧胆汁10克、蔗糖40克、琼脂20克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、调节pH至5.6-6.4,高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
二、选择性培养基1. VC菌属选择性平皿培养基(Vogel-Johnson Agar)VC菌属选择性平皿培养基是用于选择和鉴定Voges-Proskauer菌属(如克雷伯菌)的培养基。
其配方为:葡萄糖1克、琼脂15克、盐酸75克、蒸馏水1000毫升。
将以上成分溶解、加热煮沸,冷却至55-60°C,加入胆盐酯高压灭菌,倒入平皿中,待凝固后用。
发酵工业产品培养基配方大全1.酵母培养基配方:-加糖培养基配方:-酵母提取物10g-葡萄糖20g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml-加酵母提取物培养基配方:-酵母提取物20g-葡萄糖10g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml2.细菌培养基配方:-肉膏蛋白胨加入培养基配方:-肉挫3g-蛋白胨5g-NaCl5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-NaCl10g- Agar 15g- 纯净水 1000ml3.真菌培养基配方:-绵白糖加入培养基配方:-麦芽提取物10g-蔗糖30g-K2HPO41g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-麦芽提取物加入培养基配方:-麦芽提取物20g-FeSO40.1g-K2HPO42g-MgSO41g- 纯净水 1000ml4.菌丝体培养基配方:-淀粉加入培养基配方:-玉米粉20g-淀粉10g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-酵母提取物2g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml5.发酵液培养基配方:-玉米加入培养基配方:-玉米粉100g-蛋白胨10g-NaCl5g-淀粉10g- 纯净水 1000ml-葡萄糖加入培养基配方:-玉米粉10g-蛋白胨5g-葡萄糖20g-淀粉10g- 纯净水 1000ml上述配方仅为其中几种常用的发酵工业产品培养基配方,不同的微生物和发酵过程需要有针对性地选择合适的配方。
在实际应用中,还需要根据具体情况进行调整和优化。
同时,培养基的制备过程中,要注意使用无菌操作,以确保微生物培养的纯净性和成功率。
各种培养基的配方在微生物学中,培养基是为微生物提供营养和生长所必需的营养物质的混合物,可以根据微生物的特性和需求来设计不同成分的培养基。
不同种类的微生物需要不同的培养基来生长和繁殖,为了获得最佳的生长效果,需根据微生物的特性制备相应的培养基。
下面介绍几种常用的培养基及其配方。
1. 加尔沙基培养基(Luria-Bertani,LB培养基)LB培养基是一种常用的细菌培养基,适用于大多数细菌的培养。
其成分包括牛肉浸出物、酵母提取物和氯化钠,PH为7.0。
配方:- 水:1000ml-氯化钠:10g-酵母提取物:5g-牛肉浸出物:10gLB培养基的主要特点是富含氨基酸和碳源,适合于细菌的快速生长。
2. PDA培养基(Potato Dextrose Agar)PDA培养基是一种适合真菌和霉菌生长的培养基,成分简单易得。
它主要包括马铃薯提取物、葡萄糖和琼脂。
PDA培养基是一种半固体培养基,适合于真菌的产孢。
配方:-马铃薯提取物:200g-葡萄糖:20g-琼脂:20g-静置180s后,灭菌PDA培养基适合于真菌和霉菌的生长,常用于菌落计数和生长的研究中。
3.营养琼脂培养基营养琼脂培养基是一种通用的培养基,适用于多种微生物的培养。
它主要包括蛋白水解物、酵母提取物、氯化钠和琼脂。
配方:-蛋白水解物:5g-酵母提取物:1g-氯化钠:5g-琼脂:15g- 水:1000ml-蒸馏后灭菌营养琼脂培养基适合于大多数微生物的生长,是最常用的培养基之一4. 马尼特尔-梅尔特培养基(Mannitol-Salt Agar,MSA)MSA培养基是一种选择性培养基,主要用于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的分离和鉴定。
它的成分包括马尼托尔、氯化钠、酵母提取物和琼脂。
配方:-马尼托尔:5g-氯化钠:75g-酵母提取物:1g-琼脂:15g- 水:1000ml-蒸馏后灭菌MSA培养基在金黄色葡萄球菌的生长过程中,可以通过红色菌落的形成来进行识别。
植物组培培养基及其配制培养基好比土壤,是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。
因此,在组织培养基的各个环节中,应着重掌握培养基,了解它的组成和配制方法。
一、组成培养基的五类成分目前,大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
1.无机营养物无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。
培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。
2.碳源培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。
因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。
蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起重要作用。
3.维生素在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于B 族维生素,其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。
4.有机附加物包括人工合成或天然的有机附加物。
最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。
另外,琼脂也是最常用的有机附加物,它主要是作为培养基的支持物,使培养基呈固体状态,以利于各种外植体的培养。
5.生长调节物质常用的生长调节物质大致包括以下三类:(1)植物生长素类。
如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)。
(2)细胞分裂素。
如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。
(3)赤霉素。
组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。
二、常用培养基配方及其特点1.常用培养基配方组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。
实验二培养基及其配制(理论)一、培养基成分及作用培养基(culture medium)是植物组织培养的物质基础,也是植物组织培养能否获得成功的重要因素之一。
培养基成分对离体培养植物的生长发育起调控作用。
选择合适的培养基并掌握正确的制备方法是组织培养成功的前提。
(一)植物必需的营养元素植物体内至少含有几十种化学元素,其中大部分元素在植物体内起到一定的生理作用:1、组成各种化合物,参与机体的建造,成为结构物质;2、构成一些特殊的胜利活性物质,参与活跃的新陈代谢;3、这些元素之间相互协调,以维持离子浓度平衡、胶体稳定、电荷平衡等点化学方面的作用;4、在发育方面,特定的元素影响植物的形态发生和组织、器官建成。
Arnon和Stout(1939)提出的确定植物必需营养元素的3个标准:A、缺乏该元素,植物生育发生障碍,不能完成其生活史B、缺乏该元素,就表现为专一的病症,且这种缺素症可以用补充改元素来预防和恢复C、改元素在植物营养生理上表现直接的效果,而不是由于土壤的物理、化学、微生物条件的改进而产生的间接效果。
国内外公认的高等植物所必需的营养元素有16(17)种:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl、(Ni)在植物中含量差别很大,同一元素在植物不同时期、不同条件下含量也不同。
根据植物体内含量多少,可把这些元素分为:大量营养元素:占干物质重量的%以上;C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S等9种。
微量营养元素:占干物质重量的%以下有的只含kg。
Fe、B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等7种。
(二)培养基营养成分及作用培养基是外植体生长的土壤,它所含有的不同营养元素直接影响着培养材料的生长发育。
培养基中的营养元素以有机物和无机物两类形式存在,绝大多数营养元素以无机物的形式存在。
按照国际植物生理协会的建议:所需浓度> L的元素为大量元素所需浓度< L的元素为微量元素1、大量元素N是蛋白质、酶、叶绿素、维生素、核酸、磷脂、生物碱等的组成成分,在植物生命活动中占有重要的位置,又称生命元素。
简述配制培养基的基本步骤及注意事项配制培养基是在实验室中进行细胞培养和微生物培养的重要步骤。
正确的配制培养基对于细胞和微生物的生长和繁殖至关重要。
下面将简述配制培养基的基本步骤及注意事项。
一、准备培养基所需的原料和试剂配制培养基所需的原料和试剂包括蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、盐酸、硝酸钠等。
在备用的容器中准备好这些原料和试剂,确保其纯度和质量。
二、称量原料和试剂按照所需的培养基配方,准确称量所需的原料和试剂。
注意要使用准确的称量工具,并遵循准确的称量方法,以确保配制的培养基的准确性和一致性。
三、溶解原料和试剂将称量好的原料和试剂逐一加入适量的蒸馏水中,并充分搅拌溶解。
溶解过程中要注意控制溶解温度和时间,避免结晶或沉淀的产生。
四、调节pH值根据培养基配方的要求,使用盐酸或硝酸钠等酸碱溶液逐渐调节培养基的pH值。
调节过程中要注意使用准确的pH计,并逐渐添加酸碱溶液,以避免pH值过大或过小。
五、加入其他添加物根据具体需要,可以添加抗生素、染料或其他添加物来增强培养基的特定功能。
添加时要注意添加的量不能过多,以避免对细胞或微生物的生长产生不良影响。
六、灭菌配制好的培养基需要进行灭菌处理,以杀死其中可能存在的细菌、真菌或其他微生物。
常用的灭菌方法有高温高压灭菌和过滤灭菌。
要选择适合的灭菌方法,并严格按照操作规程进行灭菌处理。
七、保存和使用灭菌后的培养基应尽快冷却并储存在无菌条件下。
使用时要注意避免污染,使用无菌的培养皿或试管,并采取无菌操作,以确保培养基的纯净度。
在配制培养基的过程中,我们需要注意以下几点:1. 严格按照培养基配方的要求进行操作,避免原料和试剂的误用或误量。
2. 使用纯净的蒸馏水和高质量的原料和试剂,以确保培养基的质量和纯度。
3. 在配制过程中要注意溶解的充分和均匀,避免结晶或沉淀的产生。
4. 调节pH值时要小心操作,逐渐添加酸碱溶液,以避免pH值的剧烈变化。
5. 添加其他添加物时要谨慎,避免添加过多或添加不当。
配置培养基的步骤1、准备培养基:根据培养细菌或霉菌所需养分,准备添加合适量的养分和水份。
可以选用已准备好的快速培养基,或者通过实验中调整成分组成和比例来配置不同养分质量和浓度的培养基。
2、配料步骤:根据配方要求,根据具体实验配置合适的原料质量和量,以谷物粉状的一般原材料为例,如糖、蛋白质、粘粉和滑石粉等,分别从各种原料容器中取出适量原料,放入适当容器中混合,组装成一体。
3、热处理:将搅拌好的原料放入加热装置中,在70℃-80℃的温度下持续加热和搅拌(根据原料不同可能略有改变)10分钟,以除去杂质和有害物质,保证培养基的质量。
4、冷却:培养基热处理搅拌完毕后,送入冷却设备中进行冷却。
控制水温,使温度从100℃~30℃降低,当培养基温度降至30℃~35℃时,可尽快停止加热,不要使培养基在高于50℃的温度下停留时间太长。
5、灭菌:当培养基温度降至50℃以下后,放入灭菌设备中进行滤过灭菌,灭菌温度设置为95℃~105℃,灭菌有功率设置为12W / cm2。
培养基中优先蒸馏或吸附的微生物在温度较低的情况下,然后再进行灭菌。
6、成型:灭菌完毕后,将其中的培养基通过滤装置进行筛选,排除大的杂质,然后将培养基倒入模具中成型,并调节压力,以控制成型品的形状和大小,达到要求。
7、灌装:灌装时,将培养基放入适当的容器,如瓶、盒等,灌装至一定位置,然后进行装封,保证培养基充分被封口,以保持产品质量稳定,防止空气中的细菌进入塑料袋,从而防止培养基污染。
8、包装:通过灌装完毕后,将培养基用内衬袋和外衬袋包装,方便产品的运输和存储,防止空气和光线的污染,同时还可以防止外界杂质进入。
9、检测:将包装完毕的培养基置于检测室中,进行分析检测。
检测产品质量及其各项性能,主要包括微生物活性、消毒效果、润湿性、颗粒大小等。
检测结果与产品要求一致时,即证明培养基产品符合国家标准要求,可以进行量产。
植物组培培养基及其配制培养基好比土壤,是组织培养中离体材料赖以生存和发展的基地。
因此,在组织培养基的各个环节中,应着重掌握培养基,了解它的组成和配制方法。
一、组成培养基的五类成分目前,大多数培养基的成分是由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成的。
1.无机营养物无机营养物主要由大量元素和微量元素两部分组成,大量元素中,氮源通常有硝态氮或铵态氮,但在培养基中用硝态氮的较多,也有将硝态氮和铵态氮混合使用的。
磷和硫则常用磷酸盐和硫酸盐来提供。
钾是培养基中主要的阳离子,在近代的培养基中,其数量有逐渐提高的趋势。
而钙、钠、镁的需要则较少。
培养基所需的钠和氯化物,由钙盐、磷酸盐或微量营养物提供。
微量元素包括碘、锰、锌、钼、铜、钴和铁。
培养基中的铁离子,大多以螯合铁的形式存在,即FeSO4与Na2—EDTA(螯合剂)的混合。
2.碳源培养的植物组织或细胞,它们的光合作用较弱。
因此,需要在培养基中附加一些碳水化合物以供需要。
培养基中的碳水化合物通常是蔗糖。
蔗糖除作为培养基内的碳源和能源外,对维持培养基的渗透压也起重要作用。
3.维生素在培养基中加入维生素,常有利于外植体的发育。
培养基中的维生素属于B族维生素,其中效果最佳的有维生素B1、维生素B6、生物素、泛酸钙和肌醇等。
4.有机附加物包括人工合成或天然的有机附加物。
最常用的有酪朊水解物、酵母提取物、椰子汁及各种氨基酸等。
另外,琼脂也是最常用的有机附加物,它主要是作为培养基的支持物,使培养基呈固体状态,以利于各种外植体的培养。
5.生长调节物质常用的生长调节物质大致包括以下三类:(1)植物生长素类。
如吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)。
(2)细胞分裂素。
如玉米素(Zt)、6-苄基嘌呤(6-BA或BAP)和激动素(Kt)。
(3)赤霉素。
组织培养中使用的赤霉素只有一种,即赤霉酸(GA3)。
二、常用培养基配方及其特点1.常用培养基配方组织培养是否成功,在很大程度上取决于对培养基的选择。
试液标准品滴定液培养基的配制及其使用管理制度一、试液标准品滴定液培养基的配制1.1 实验室物资准备(1)试剂:葡萄糖、牛肉膏、酵母粉、表面活性剂(Tween 80),草酸,氢氧化钠,柠檬酸。
(2)装备:自来水,净水器,玻璃棒,电子天平,量筒,蒸馏器,无菌瓶,pH计。
1.2 实验步骤(1)准备基础试液:将1g牛肉膏与10g葡萄糖混合后加入1L自来水中搅拌至完全溶解为止,滤过灭菌,取50ml加入100ml容量瓶中,加入0.1g酵母粉和1mlTween 80,加水至刻度。
(2)制备柠檬酸-草酸缓冲液:称取7.5g柠檬酸和9.0g草酸,混合后加入1L自来水中,调节pH至6.8(用0.1mol/L NaOH和0.1mol/L HCl溶液),滤过灭菌,取100ml加入预先准备好的基础试液中,做成100ml/瓶的滴定液。
1.3 基础试液质量控制为保证制出培养基的准确性与可靠性,在进行瓶装前,应先对基础试液进行质量检测。
检测方法如下:(1)pH测定:使用pH计,精确至小数点后一位,每个批次均应满足6.8左右的品质标准。
(2)细菌总数检测:将新制备的基础试液分别接种到TSA琼脂平板上,分别在37℃下37±1小时当前后进行菌落数统计。
每个批次的规格应满足100CFU/ml。
1.4 滴定液使用管理滴定液的密封性要求高,使用过后尽量使其保存在条件十分良好、密封性极佳的情况下,杜绝了液体的混杂。
“六择八换”是一种制剂生产管理原则,但有音乐网站的套路一样,制剂生产的“八换”十分可怕。
为充分发挥试液标准品滴定液的效能,在使用该试液时,要严格掌握以下事项:(1)保持环境清洁:因为每一个瓶装滴定液都可能会受到环境的影响导致其质量被污染,因此,在污染等环境条件下,滴定液的使用效果会受到严重限制。
(2)密封保存:如果不正确地保存滴定液,其质量将快速退化。
因此,最好将滴定液保存在密封的瓶子当中,长时间放置时,应放在阴凉、干燥的地方。