超临界CO2萃取香草兰化学成分分析

时珍国医国药２００７年第１８卷第５期　ＩＪＳＨＩＺＨＥＮ　ＭＥＤＩＣＩＮＥ　ＡＮＤ　ＭＡＴＥＲＩＡ　ＭＥＤＩＣＡ　ＲＥＳＥＡＲＣＨ　２００７　ＶＯＬ・１８　ＮＯ・５　

超临界二氧化碳萃取气相色谱　

一质谱联用分析东当归挥发油化学成分　

孙仁文，朴惠善　

（延边大学医学部药学院，吉林延吉１３３０００）　

摘要：目的对吉林省延边地区产东当归的挥发油化学成分进行分析。方法采用超临界ＣＯｚ萃取技术对东当归中挥发　油成分进行提取，用ＧＣ—Ｍｓ联用技术分离鉴定其化学组成，计算其相对百分含量。结果超临界ｃ０ｚ萃取物为黄棕色　

油状物，得率为０．９％，用ＧＣ—ＭＳ联用技术从中鉴定出亚油酸乙酯、５，５一二甲基一双环（６，３，０）一１，７一十一烯一３一酮　

等３０种成分，占挥发油总含量６５．６６％；萃取物经硅胶柱色谱分离纯化，从中鉴定出十八酸乙酯等１１种成分，占总含量　

的８５．１％。结论首次从／ｊ－，当归挥发油当中分离鉴定出５，５一二甲基一双环（６，３，０）一１，７一十一二烯一３一酮等１０种化　

学成分，超临界ＣＯ２萃取与传统方法提取的东当归中挥发油化学成分有显著不同。　

关键词：东当归；超临界二氧化碳萃取；气相色谱一质谱；挥发油　

中图分类号：Ｒ２８４．２　文献标识码：Ａ　文章编号：１００８－０８０５（２００７）０５—１１３６－０２　

Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　

ｔｌｌ　Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ　Ｆｌｕｉｄ　ＣＯ２　ａｎｄ　ＧＣ—ＭＳ　Ｍｅｔｈｏｄ　

ＳＵＮ　Ｒｅｎ—ｗｅｎ，ＰＩＡＯ　Ｈｕｉ—ｓｈａｎ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｙａｎｂｉａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　彬１３３０００，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｓｓｅｎｔｉａｌ　ｏｉｌ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ａｎｇｅｌｉｃａ　ａｃｕｔｉｌｏｂａ　ｌ（ｉｔａｇ　ｏｆ　Ｙａｎｂｉａｎ　ｒｅｇｉｏｎ　

黄山学院学报Vo1.22,NO.5Oct.2020第22卷第5期2020年10月JournalofHuangshanUniversity

无花果也叫蜜果、文仙果等，属于桑科榕属植

物。在我国，无花果资源很丰富，经常当作绿化植

物种植，用于观赏，果实可以食用，味道甜美，营养

丰富，叶子还可以药用[1]。据《本草汇言》记载，无花

果叶可以去湿热，解毒疮[2]。对于白癜风、痔疮、带

状疱疹以及腹泻等症具有很好的治疗效果[3]。

相关研究发现无花果叶中香豆素的相对含量

较高，除外还含有一定的挥发油、黄酮、微量元

素、维生素等成分[4]。无花果叶水、醇提取物可以

降血糖、降血脂、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤、镇静催

眠等[5，6]。挥发油具有较好的抑菌消炎、止咳平喘、

解热镇痛等作用[7]。

植物中挥发油成分的提取方法很多，其中最常

用的是水蒸气蒸馏法[8]，但是，在蒸馏提取的过程

中，挥发油组分比较容易发生一些化学反应，如分

解、氧化等，从而导致得到的挥发油组分发生了一

些变化。超临界CO2流体萃取技术是在低温条件

下，以超临界CO2作为流体，可以快速渗透到植物

中，溶解性能较好，能够实现挥发油组分的高效提

取，同时还具有快捷、简便、无污染等优点[9-10]。截止

目前，对于无花果果实的研究较多，而将超临界技术应用于无花果叶挥发油的提取还未见有文献报

道。

本文以黄山产无花果叶为原料，采用超临界CO2流体萃取技术提取无花果叶挥发油，用无水硫

酸钠干燥后，适当稀释数倍，应用气相色谱-质谱联

用(GC-MS)技术对成分进行分析，色谱峰面积归一

化法计算各组分的相对含量，以期为无花果叶的进

一步开发和利用提供参考。

1实验部分

1.1材料与仪器

WatersMV-10超临界萃取系统（美国waters公

司），Agilent7890A-5975C气相色谱-质谱联用仪

（美国Agilent公司），电子分析天平(上海梅特勒-托

利多仪器有限公司)。新鲜无花果叶采摘于黄山学

院北校区，经鉴定为桑科榕属植物。无水乙醇，无

山东医药２０１０年第　－０卷第　半枝莲超临界ＣＯ２萃取物化学成分分析　及其体外抗肿瘤作用　张海方。许化溪’　（江苏大学基础医学与医学技术学院，江苏镇江２１２０１３）　摘要：目的　探讨半枝莲超临界ＣＯ：萃取物的化学成分及其在体外的抗肿瘤作用，为其临床应用提供依据。　方法利用超临界ＣＯ：萃取技术提取半枝莲中的挥发油，并采用气相色谱质谱联用仪（ＧＣ－ＭＳ）分析其主要化学成　分；ＭＴｒ法测定挥发油体外对肿瘤细胞Ｕ９３７和ＡＧＳ的抗肿瘤作用。结果超临界ＣＯ　萃取半枝莲中的挥发油提　取率为１０．２８％，ＧＣ．ＭＳ法共分离到６４种化学成分，对其中含量较高的１０种化学成分进行鉴定；半枝莲挥发油对　Ｕ９３７和ＡＧＳ细胞的生长具有一定的抑制作用。结论超临界ＣＯ：萃取法可用于半枝莲中的挥发油成分提取，具　有操作简单、提取率高和无有机溶剂残留等特点；挥发油的主要成分有亚油酸、软脂酸和邻苯二甲酸二异辛基酯　等，并且具有一定的体外抗肿瘤作用；　关键词：半枝莲；超临界ＣＯ：萃取；抗肿瘤作用　中图分类号：Ｒ２７３；Ｒ７３０．５　文献标志码：Ｂ　文章编号：１００２－２６６Ｘ（２０１０）４７－００６０－０２　半枝莲为黄芪属植物。近年来已对其化学成分　的报道较多，但利用超临界ＣＯ：流体萃取技术研究　半枝莲挥发油化学成分及提取工艺的报道甚少…。　２００９年８月，我们采用超临界ＣＯ　流体萃取技术提　取半枝莲的挥发油，并对其成分进行气相色谱一质　谱联用仪（ＧＣ—ＭＳ）分析和体外抗肿瘤作用观察。　现报告如下。　１材料和方法　１．１材料半枝莲（购于江苏镇江存仁堂药店），　所用试剂均为国产分析纯。超临界ＣＯ　萃取设备　（江苏华安超临界萃取设备公司）；Ａｇｉｌｅｎｔ新一代　５９７５ｉｎｅｒｔ气一质联用仪（美国安捷伦科技公司），谱　库为ＮＩＳＴ９８。Ｕ９３７（人白血病细胞株）和ＡＧＳ（人　胃癌细胞株），均从中国科学院上海药物研究所肿　瘤细胞库引进并在本室长期传代培养。　１．２半枝莲挥发油提取及分析采用超临界ＣＯ　流体萃取法：半枝莲经干燥、粉碎、过１００目筛，准确　称取５００　ｇ置于萃取池中。①萃取条件　ｊ：压强３０　ＭＰａ、温度５Ｏ℃、时间４　ｈ，气体流量为１２　Ｌ／ｈ。②　萃取物ＧＣ—ＭＳ分析：取半枝莲超临界ＣＯ　萃取物　０．１　ｇ用ｌ　ｒＩｌｌ丙酮溶解，过０．４５　ｍ微孑Ｌ滤膜后即　可进样。色谱条件：ＨＰ－５ＭＳ毛细管柱（０．２５　ｌｎｌｎ　ｘ　３０　１＇Ｉ１，０．２５　Ｉｘｍ）；载气为氦气，流速２　ｍｌ／ｍｉｎ；进样　基金项目：江苏省高校自然科学研究项目（１０ＫＪＢ３１０００１）；江苏大学　校基金资助项目（１０ＪＤＧＩ３８）。　・通讯作者　１２Ｉ温度３００　ｏＣ；进样量１　Ｉｚｌ，分流比３０：１；柱升溜程　序：起始７０℃，于７Ｏ℃保持２　ｒａｉｎ；以１０￣Ｃ／ｍｉ，￣片　温至３００℃、保持１０　ｍｉｎ。质谱条件：ＥＩ离子源，离　子源温度２３０℃，四极杆温度１８０　ｃＣ，传输管线温度　２８０　ｃＩ：，电子能量７０　ｅＶ，电子倍增器电压１　２８２　Ｖ，　扫描范围３５～５００　ａｍｕ。对主要色谱峰质谱图经人　工解析及ＮＩＳＴ９８质谱数据系统检索，并与标准质谱　图比较，确定其化学结构，用面积归一化法确定各成　分及相对含量。　１．２．３半枝莲挥发油体外抗肿瘤作用　取对数生　长期Ｕ９３７和ＡＧＳ细胞（观察组），配置成２×１０　个／ｍｌ的单细胞悬液，加入９６孑Ｌ培养板中，每孔１９８　ｌ，培养２４　ｈ后加人半枝莲挥发油（丙酮做溶剂）２　，使其终浓度分别为３２０、１６０、８０、４０、２０、１０和　５　ｇ／ｍｌ，培养液中丙酮的终浓度为１．０％。阴性对　照组加入含终浓度为１．０％的丙酮ＤＭＥＭ细胞悬　液，每个稀释度设６个平行孔。培养７２　ｈ后，每孔　加入ｌ０　ｌ含５　ｍｇ／ｍｌ的Ｍｑｑ＇生理盐水溶液，继续　培养４　ｈ，离心后弃上清液，每孔加人１５０　ｌ的ＤＭ—　ＳＯ，振荡１０　ｍｉｎ，使结晶充分溶解，用空白调零，置　于酶标仪测定各管５７０　ｎｍ的吸光值。按下列公式　计算抑制率（ＩＲ）。ＩＲ＝（１一观察组ＯＤ值／阴性对　照组ＯＤ值）Ｘ　１００％。　２　结果　２．１半枝莲挥发油成分挥发油为棕黄色透明油　状物，带有浓郁的香味，其出油率为１０．２８％。共分　离到６４种化学成分，挥发油含量最多的前十种化学　

分离提取　食品研究与开发　

Ｆｏｏｄ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　２０１２年３月　第３３卷第３期　３９　

超临界ＣＯ２萃取凤眼草挥发油化学成分　

刘字，梁剑平，华兰英，尚若峰，王学红，吕嘉文，李冰　（中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所，甘肃省新兽药工程重点实验室，甘肃兰州７３００５０）　

摘　要：为了研究凤眼草挥发油的化学成分，本文采用超临界ＣＯ　萃取技术从凤眼草中提取挥发油，并用ＧＣ—ＭＳ法　采用最佳分析条件对化学成分进行鉴定，用峰面积归一法测定各化合物在挥发油中的相对百分含量；通过研究，鉴定　出４２种化合物，其峰面积相对含量约占挥发油总量的９２．９１％。风眼草挥发油的主要组分为邻苯二甲酸异丁辛酯　（７．０５％），棕榈酸（８．７４％），（ｚ，Ｚ）－９，１２一十八碳二烯酸（２０．４７％），（ｚ）一９，１７一十八碳二烯醛（１５．１４％），２２，２３一二氢豆　甾醇（１４．Ｏ９％），３，５，６，７，８，８ａ一六氢一４—８ａ一二甲基一６一［１一甲乙烯基卜２（１Ｈ）萘酮（６．８６％），　一香树脂醇（２．０４％），羽扇　烯ｍ（３．５３％）等。　关键词：凤眼草；超临界二氧化碳萃取；挥发油；气相色谱一质谱　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｖｏｌａｔｉｌｅ　Ｏｉｌ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｓｅｅｄｓ　ｏｆ　Ａｉｌａｎｔｈｕ。　Ａｌｔｉｓｓｉｍａ（Ｍｉｌ１．）Ｓｗｉｎｇｌｅ　ｂｙ　Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ　ＣＯ２　

ＬＩＵ　Ｙｕ，ＬＩＡＮＧ　Ｊｉａｎ—ｐｉｎｇ，ＨＵＡ　Ｌａｎ—ｙｉｎｇ，ＳＨＡＮＧ　Ｒｕｏ－ｆｅｎｇ，ＷＡＮＧ　Ｘｕｅ－ｈｏｎｇ，ＬＵ　Ｊｉａ—ｗｅｎ，ＬＩ　Ｂｉｎｇ　

（Ｌａｎｚｈｏｕ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　ａｎｄ　ＶＥｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｐｈａｒｍｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ；Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｎｅｗ　Ａｎｉｍａｌ　Ｄｒｕｇ　Ｐｒｏｊｅｃｔ，Ｌａｎｚｈｏｕ　７３００５０，Ｇａｎｓｕ，Ｃｈｉｎａ）