【医学ppt课件】 血红蛋白测定

Hematological pipets
动物生理学实验报告
姓名 班级
组别 日期
实验序号及实验题目
一、实验目的
二、实验原理
三、实验方法
四、实验结果
五、讨论和结论
书写实验报告时需要注意以下几点： 物质对光的吸收有选择性，各种不同的物质都有其各自的吸收光谱。
5 mark and diluted only to the "11" or "101" mark with appropriate diluting fluid dependent upon the type of cell count 动物生理学实验报告
RBC & WBC Counting Chamber
whole blood to be drawn exactly to the 0.5 mark and diluted only to the Hemacytometer p"ro1pe1rl"y looadred";1B.01" mark with appropriate diluting fluid dependent upon the type of cell count whole blood to be drawn exactly to the 0.
top left corner of the image above,magnified
full original image
结果计算： 红细胞数 × 1010（个/mL）
红白细胞稀释吸管，吸血到0.5处，立即 吸取生理盐水至101处，并使血液与稀释 液充分混匀。
加样计数：加样后放置1-2分钟才开始计数
Haemocytometer 每个计数室9个大方格，每个为1mm2

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临床意义： 素所致的溶血性贫血以及某些急性或慢性 失血所致的贫血。
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正常值：
男性 120～160g／L（12.0-16.0g／ dl）； 女性 110～150g／L（11.0-15.0g ／dl）； 新生儿 170～200g／L（18.019.0g／dl）。
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相关检查： 血清转铁蛋白、红细胞计数(RBC)、蔗糖 溶血试验、血小板计数、骨髓象分析、出 血时间。
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相关症状： 口腔幻触、劳动耐力下降、眼前发黑、肢 端发绀。
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相关疾病：
铁利用性贫血、维生素B12缺乏所致贫血、 溶血过度所致贫血、镰状细胞病、地中海 贫血、再生障碍性贫血、肾癌、自身免疫 性溶血性贫血、先天性心脏病、缺铁性贫 血、小儿缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血、 大肠癌、结肠癌、胃癌、慢性肺源性心脏 病。
谢谢！
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临床意义：
血的相对不足，一般可较正常人的低10%20％。妊娠中期和后期由于妊娠血容量增 加而使血液被稀释，老年人由于骨髓造血 功能逐渐降低，可导致红细胞和血红蛋白 含量减少。 (2)病理性减少： A.骨髓造 血功能衰竭，如再生障碍性贫血、骨髓纤 维化所伴发的贫血； B.因造血物质缺乏 或利用障碍所致
医学检验·各论 血红蛋白浓度（Hb）
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采血人 赵敏敏
√ ╳ √ √ √ √ √ √ √ √ √
邢慧琴 √ √ √ √ ╳ √ √ √ ╳ √ √
②平行样质控法：
平行样数占总样本数的5％。 具体方法：同一采血员对同一对象采2 个血样，由实验室检测后，如两个血红蛋 白值在T±0.05T范围内，则采血员合格 ；反之，则为不合格。 若不合格，要求质量控制人员对采血员 的采血过程进行检查，找出发生错误的原 因并立即纠正。
√
√ ×
补充混匀照片
4.质量控制要点：
（1）体检前：
使用定值溶血液（盲样），对采血人员进
行岗前培训与技术考核。 此考核亦为中心实验室对各点实验室检测
能力的技术考核。
表2 血红蛋白检测质控考核记录表
区县： ___________ 单位：____________ 检测日期：______________ 质控品编号：___________________ 质控品真值：___________________ 采血者：________ 检测仪器：________________ 检测者：___________ 是否经过计量部门检定：（是 否） 检测仪器最近检定日期：________
血红蛋白 铁氰化钾 高铁血红蛋白
氰化钾
氰化高铁血红蛋白
氰化高铁血红蛋白：显红色，极为稳定。
二、检测流程
（一）试剂 （二）采血 （三）检测
（一）试剂
采用文齐氏液。 文齐氏液(Hb试剂)为浓缩50倍的贮备液， 用时加蒸馏水稀释50倍。 如：配制1000ml工作液时，取文齐氏浓缩 液20ml。
文齐氏液
编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
平均值
Hb值（g/L）
表3 采血人员考核记录表 定值血Hb值 100 采血人 赵敏敏 考核人 孙颖

HbA1c检测注意事项
（1）糖化血红蛋白可作为糖尿病的普查和健康检查的项目， 但不能取代糖耐量试验作为诊断糖尿病的依据
（2）对昏迷病人的鉴别：在脑血管急症时，由于应激反 应可使血糖增高，但糖化血红蛋白检测正常。若糖化血红 蛋白增高预示患者处于高血糖状态。
（3）糖化血红蛋白很高的患者要警惕酮症酸中毒的发生。
现在，我国已成为世界上糖尿病人口最多的国家！
2024/3/9
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糖化血红蛋白
糖化血红蛋白（HbA1c）是人类血液中葡萄糖 与红细胞中的血红蛋白形成的非酶促的稳定糖 基化产物。是不可逆反应，其量与血糖浓度成 正相关，其中以HBA1c为主。红细胞在血循环 中的寿命为120天，所以可以观测到之前120 天的平均血糖水平。
餐后血糖11.1 mmol/l （ ≥200mg/dl ）。 2、没有典型症状，仅空腹血糖7.0 mmol/l （ 126mg/dl ）或
餐后血糖11.1 mmol/l （ 200mg/dl ）者应再重复一次，仍达以上值者，可以确诊为糖 尿病。 3、没有典型症状，仅空腹血糖7.0 mmol/l （ 126mg/dl ）或
空腹血糖和餐后血糖
反映某一具体时间的血糖水 平，容易受到进食和糖代谢
等相关因素的影响。
糖化血红蛋白
不受抽血时间、是否空腹、 是否使用胰岛素等因素的干 扰，可以稳定可靠地反映出 检测前120天内的平均血糖 水平。
2024/3/9
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国内目前糖尿病诊断标准
（一）确诊为糖尿病： 1、具有典型症状，空腹血糖7.0 mmol/l （ 126mg/dl ）或
的空腹高血糖，还要控制负荷状态的餐后高血糖， 这两个血糖都控制好了，糖化血红蛋白才能降到 理想水平，进而延缓和防止多种并发症的发生。

实验二 血红蛋白的测定
• 三 实验原理 • 氰化高铁血红蛋白测定法 • 国际标准参考方法
实验二 血红蛋白的测定
• 四 实验仪器及试剂 • 便携式血红蛋白测试仪 • 血红蛋白试纸条 • 采血装备
实验二 血红蛋白的测定
• 五 实验步骤 • 1.取指血 • 2.测试 • 3.读数 • 4.分析结果
注意事项
• 2.使用离心机时，一定要用台秤称量配平离心管，
必须对称放置！！！
五 思考题
• 试分析运动员运动时血糖变化特点和规律。
实验二 血红蛋白的测定
• 一 实验目的 • 了解运动员血红蛋白测定的意义 • 学习便携式血红蛋白测定方法
实验二 血红蛋白的测定
• 二 实验意义 • 血红蛋白是红细胞中重要的含铁蛋白质 • 功能是运输氧气和二氧化碳，并参与调节酸碱平衡 • 与耐力关系密切 • 正常成年男性：120-160g/L，女性：110-150g/L
• 2.用采血管取指血0.02ml加入硫酸液中，混匀；
• 3.加入1%钨酸钠溶液0.48ml，稀释50倍；
• 4.静置10分钟
• 5.以3000转/分的转速离心5分钟，取上清液备用。
二、显色反应
ml 第1步 葡萄糖标准应用液 蒸馏水 无蛋白上清液 碱性铁溶液 第2步 第3步 第4步 第5步 蒸馏水 酸性硫酸高铁铵溶液 空白管 ----0.5 ----1.0 1.0 4.5 标准管 测定管 0.5 -------1.0 1.0 4.5 -------0.5 1.0 1.0 4.5糖测定
• 2.血红蛋白测定
实验一
血糖测定
• （一）实验目的
• 1.了解运动员测定血糖的意义
• 2.学习微量血采集技术
• 3.学习掌握超微量法测定血糖含量的原理和方法

虽然毒性小于HiCN，但仍有公害问题 蛋白：珠蛋白 α类多肽链：αζθ
HbA
α2β2
显色快，结果稳定可靠
Hb Gower II
胚胎期
Hb Gower I
ζ2ε2
Hb Gower II
α2ε2
Hb Portland
ζ2γ2
血液中血红蛋白以各种形式存在：
• 氧合血红蛋白（oxyhemoglobin) • 碳氧血红蛋白 (carboxyhemogloin) • 高铁血红蛋白 (hemiglobin，Hi)
HbA2
α2δ2
肺疾病
用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入血细胞计数池，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经换算，求出每升血液中的细胞数量。
胎儿期 HbF α γ P1.CV（包括常量法和微量法）:将抗凝全血置于标准的温氏管或毛细管中，在一定转速下离心一定2 时2间后，计算红细胞层占全血的体积比。
缺点：
测定波长为575nm, 与仪器常用的540nm滤光板
不匹配。
优点：
操作简单 缺点： 误差较大，建议淘汰。
5、仪器法 优点： 操作简单，快速，可同时获得多项红细胞参数 注意： 不同仪器使用的溶血剂不同，形成Hb的衍生物不同， 应严格控制溶血剂加入量及溶血时间。
质量控制
1. 标本：异常血浆蛋白、高脂血症、白细胞数大
二、红细胞计数
红细胞计数（red blood cell count, RBC)是常用的 血液学基本检查项目
方法：
手工法
仪器法
（3）血小板计数受小红检细测胞干原扰理时的校正。 用等渗稀释液将血液稀释一定倍数， 利用电阻抗和（或）光散
十二烷基硫酸钠（SDS)血红蛋白测定法 碳氧血红蛋白 (carboxyhemogloin) IDA时HCT减少更明显

医学ppt
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正常心电图
医学ppt
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正常心电图波形特点
P波 振幅：肢体导联≤0.25mV；胸导联≤0.20mV。
R波 振幅：I导联的R波≤1.5mV； V1导联的R波≤1.0mV； V5导联的R波≤2.5mV；aVR导联的R波≤0.5mV；aVL 导联的R波≤1.2mV；aVF导联的R波≤2.0mV。
抗血清和血液混和。 静置室温下10-15min后，观察有无凝集现象，假如只是抗A侧发生凝
集，则血型为A型；若只是抗B侧凝集，则为B型；若两边均凝集， 则为AB型；若两边均未发生凝集，则为O型。
医学ppt
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Rh血型鉴定
取干净玻片1个，滴入抗D血清及受检者 血液各1滴，混匀，20 min后观察。凝集者 为Rh阳性，否则为Rh阴性。
将左下肢与心电图机的正极端相连左上肢电极与负极端相联图形单极肢体导联?将心电图机的负极与中心电端连接探查电极在连接在人体的左上肢右上肢或左下肢分别得出左上肢单极导联vl右上肢单极导联vr和左下肢单极导联vf加压单极肢体导联?goldberger提出在描记某一肢体的单极导联心电图时将该肢体与中心电端相连接的高电阻断开这样就可使心电图波形的振幅增加50这种导联方式称为加压单极肢体导联图形胸导联?亦是一种单极导联把探查电极放置在胸前的一定部位这就是单极胸导联导联位置?vl
血红蛋白含量的测定、血型 鉴定、人体心电图描记、人 体动脉血压的测定
本课件参考了国内多个课件，谨 此表示感谢！
医学ppt
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实验目的
掌握血红蛋白的测定方法； 学习鉴定血型的基本方法，观察红细胞凝集现
象，掌握ABO血型和Rh血型鉴定的原理； 学习并掌握人体间接测压法的原理和方法； 学习心电图波形的测量方法；了解人体正常心

昆明医科大学第一附属医院医学检验科
（四）红细胞检验的应用
1.恶性增殖性疾病的辅助诊断； 2.贫血的辅助诊断与分类； 3.骨髓造血功能评价； 4.职业病筛查。 5.非血液系统疾病的辅助诊断。
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
1.恶性增殖性疾病的辅助诊断 1）.红细胞与血红蛋白增高性疾病 ①原发性红细胞增多症
贫血类型 正常细胞性
大细胞性 单纯小细胞性
疾病 急性失血，溶贫、 AA 巨幼贫、肝脏疾病
慢性感染、慢性肾病
小细胞低色素性 缺铁贫、珠蛋白生成 障碍性贫血
贫血类型 正常细胞均一性 正常细胞非均一 性 小细胞均一性
疾病 急性失血 再障、G6PD缺乏症
珠蛋白生成障碍性
小细胞非均一性 大细胞均一性 大细胞非均一性
造血干祖细胞异常所致贫血：
包括再生障碍性贫血，纯红细胞再生障碍性贫血，先天性红细胞生成异 常性贫血，造血系统恶性克隆性疾病。
造血微环境异常所致贫血： 骨髓基质、基质细胞和细胞因子
包括骨髓坏死、骨髓纤维化、骨髓硬化症、髓外肿瘤性疾病的骨髓转移 及各种骨髓炎，肝肾功能不全或垂体、甲状腺功能低下时产生EPO不足 或肿瘤性疾病产生过多的造血负调控因子造成的贫血。
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
结合MCV和RDW分析贫血的类型
正常细胞均一性贫血： MCV RDW
急性失血性贫血
正常细胞性非均一性贫血 再生障碍性贫血 MCV RDW
小细胞非均一性贫血： MCV RDW
缺铁性贫血
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
小细胞均一性贫血：
MCV RDW
珠蛋白生成障碍性贫血
血液学检验
第一章 红细胞检验
刘子杰 云南省实验诊断研究所 昆明医科大学第一附属医院

注：若无糖尿病症状，尚需另有一次血糖超过11.1mol/l（200㎎/dl)
国际专家委员会建议的HbA1c 诊断糖尿病的切点
• HbA1c≥6.5%作为诊断非妊娠相关的糖尿病的切 点
• 将HbA1c在≥6.0%和≤6.5%范围内的个体定义为 “高危的亚糖尿病状态”
糖尿病的首选诊断标准
• 2009年美国糖尿病协会在糖尿病治疗指南中将 HbA1c列为糖尿病的首选诊断标准。
HbA1c常规测定方法：
Mission
亲和色谱微柱法
操作简单，快速，价廉。据报道EDTA抗凝血标本
优点
在20-24℃下可保存三周，其GHB值仍与第一天同
一血标本值无差异。
缺点
不能测试GHB的单一组分，且包含HbA1c的糖化
组分，但并不影响它作为可靠地糖代谢指标的价值。
HbA1c检测的标准化：
HbA1c标准化
• HbA1c水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时 间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关，是判定糖尿病长期 控制的良好指标
• HbA1c在患有各种贫血，出血性疾病或应用心得安，吗啡等药物时可 降低，而在服用大量阿司匹林，维生素C或肾功能不全时可增高
HbA1c形成的动力学
优点
价廉，操作快速
缺点
易受以下多种因素的干扰 不稳定型HbA1HbF温度
综上表明：阳离子交换树脂法测定GHB不是一种精确，可靠，重复性强， 灵敏度搞的检测方法。用作要求不太高的衡量糖尿病长期控制水平的监测指 标，尚可勉强采用，而作为要求精确程度高的科研手段是困难的
高压液相法（HPLC)
• 是目前各种GHB测定方法中高效，精确 的方法之一
• 国家，地区标准化（National)：美国，瑞典及日本 • 国际标准化（International)；国际临床化学与医学实验

39、没有不老的誓言，没有不变的承 诺，踏 上旅途 ，义无 反顾。 40、对时间的价值没有没有深切认识 的人， 决不会 坚韧勤 勉。
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
红细胞计数和血红蛋白测定
36、“不可能”这个字(法语是一个字 )，只 在愚人 的字典 中找得 到。--拿 破仑。 37、不要生气要争气，不要看破要突 破，不 要嫉妒 要欣赏 ，不要 托延要 积极， 不要心 动要行 动。 38、勤奋，机会，乐观是成功的三要 素。(注 意：传 统观念 认为勤 奋和机 会是成 功的要 素，但 是经过 统计学 和成功 人士的 分析得 出，乐 观是成 功的第 三要素 。