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蔓茎堇菜总黄酮提取工艺初探

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郭 晋 隆 ， 由 强 ， 冰 莹 ， 荣 华 陈 叶 林
（ 建 师 范 大 学 生 物 工 程 学 院 ， 国福 建 福 州 ３０ ０ ） 福 中 ５０ ７
摘
要 ： 别 采 用 热 水 浸提 法 、 分 甲醇 浸 提 法 和 乙 醇 浸 提 法 来 提 取 蔓 茎 堇 菜 样 品 的 总 黄 酮 ， 以 芦 丁 为标 准 品 ， 并
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蔓茎 堇 菜 （ ／／ Ｖａ ｏ
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第 ６卷 第 ３ 期 ２０ ０ ２年 ９月
生命 科 学研 究
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蔓 茎 堇 菜 总 黄 酮 提 取 工 艺 初 探
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供 科 学依 据 ．
关 键 词 ： 茎 堇 菜 ； 提 法 ； 外 分 光 光 度 法 ； 黄 酮 ； 丁 蔓 浸 紫 总 芦
中 图 分 类 号 ：９ ５ Ｑ ４ 文 献 标 识 码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ７７４ （０ ２Ｏ — ７—４ １０ ．８７ ２０ ）３０ ７０ ２
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用紫 外分 光光度法在 ２５Ｉ ６ ｍ处测定各提取 液的总黄 酮含 量 ． １ 结果表明 ， 甲醇浸提 法和 乙醇浸提 法显 著优 于热
水 浸 提 法 ， 用 ７ ％ 乙醇 为 提 取 溶 剂 时效 果 最 佳 ． 究 结 果 可 为 利 用 蔓 茎 堇 菜 工 业 化 生 产 黄 酮 类 药 用 成 分 提 而 ０ 研
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是 工业 化 生产 黄 酮 的 良好 材料 ． 实 现 蔓 茎 堇 菜 要 次 生代 谢 物黄 酮 的工 业 化 生 产 ， 需 确 定 其 总 黄 必
长 ２５ｎ ６ ｌ 测定 Ｏ ｎ处 Ｄ值 ， 以芦 丁标 准 品计 算 并 比

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蔓茎堇菜总黄酮和总三萜的含量测定

蔓茎堇菜总黄酮和总三萜的含量测定

Chin JMAP, 2012 February, Vol.29 No.2
·167·
干燥至恒重的芦丁对照品10.03 mg， 置100 mL量瓶 中，加60%乙醇适量，超声振荡使之完全溶解，冷 却至室温，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，得浓度 0.100 3 mg·mL 的芦丁对照品溶液。 2.1.2 供试品溶液的制备 称取药材粉末约1 g， 加70%乙醇30 mL，超声30 min，过滤，将滤液挥 干，用60%乙醇转移至100 mL量瓶中，并用60%乙 醇定容至刻度，摇匀，备用。 2.1.3 测定波长的选择 精密量取对照品溶液 3.0 mL和供试品溶液1.0 mL， 分别置10 mL量瓶中， 加入5%亚硝酸钠溶液0.4 mL，混匀，放置6 min； 再加入10%硝酸铝溶液0.4 mL，放置6 min；最后 加入4%氢氧化钠溶液1.0 mL，用60%乙醇定容至 刻度，摇匀，放置15 min。以60%乙醇为空白，同
Content Determination of Flavonoids and Triterpenoids in Viola Diffusa Ging DAI Jiaojiao, TAO Huaming, ZHU Quanhong*, HAN Zonghua(School of Traditional Chinese Medicine, Southern
蔓茎堇菜总黄酮和总三萜的含量测定
戴娇娇，陶华明，朱全红*，韩宗华南方医科大学中医药学院，广州
摘要：目的 建立蔓茎堇菜中总黄酮、总三萜含量的测定方法。方法
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分别以芦丁、齐墩果酸为对照品，以 5%亚硝酸钠
-10%硝酸铝-4%氢氧化钠、5%香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色剂，检测波长分别为 408，555 nm，采用紫外分光光度法测定 蔓茎堇菜中的总黄酮和总三萜含量。结果 总黄酮在 0.010 03~0.060 18 mg·mL1 内与吸光度线性关系良好(r=0.999 8)，平 均回收率为 108.0%，RSD 为 4.92%(n=9)；总三萜在 0.004~0.036 mg·mL1 内与吸光度线性关系良好(r=0.998 2)，平均回收 率为 101.3%，RSD 为 4.42%(n=9)。蔓茎堇菜中总黄酮的平均含量为 55.25 mg·g1，总三萜的平均含量为 1.14 mg·g1。 结论 本方法准确、可靠、稳定，可用于蔓茎堇菜中总黄酮和总三萜的含量测定。 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2012)02-0166-04 关键词：蔓茎堇菜；总黄酮；总三萜；紫外分光光度法 中图分类号：R284.1
蔓茎堇菜化学成分及体外抗乙型肝炎病毒的研究

蔓茎堇菜化学成分及体外抗乙型肝炎病毒的研究

蔓茎堇菜化学成分及体外抗乙型肝炎病毒的研究乙型肝炎病毒HBV(Hepatitis B Virus,HBV)是引起急、慢性病毒性肝炎、肝硬化、肝癌等疾病的主要病因。

慢性HBV感染最终可发展为肝硬化、肝细胞癌。

我国约有近2亿的HBV携带者,每年约有25万人死于与乙型肝炎有关的慢性肝病(肝癌与肝硬化),且发病率呈现持续上升的趋势。

目前HBV感染的治疗多以干扰素及核苷类药物为主,干扰素能够抑制病毒复制,但难以清除病毒;核苷类药物可抑制HBV-DNA逆转录酶活性,但易对药物产生耐药性,停药后易产生“反跳”现象,治疗效果均很有限。

中医药治疗乙型肝炎具有丰厚的民间基础及确切的临床疗效等独特优势,是我国特有的行之有效的一种治疗手段,许多中药制剂己被用作对乙型肝炎的治疗或辅助治疗,因此从中草药中寻找抗HBV有效成分是发现并研制抗HBV药物的一条有效途径。

1研究背景堇菜科(Violaceae)堇菜属(Viola)植物约有500余种,广布于温带、热带、及亚热带,以北半球的温带为主,我国约有111种,南北各省均有分布。

堇菜属植物一般以全草入药,多具有清热解毒、凉血消肿之功效,民间广泛用于痈疽疮疖,鲜品捣烂可散瘀消肿、排脓生肌;还可用于治疗风热咳嗽、肺痨、哮喘、鼻炎、角膜炎、咽炎、乳腺炎、风湿病等。

蔓茎堇菜(Viola diffusa Ging)为堇菜科(Violaceae)堇菜属(Viola)植物,又名七星莲、黄瓜香、匐伏堇、地百草、天芥菜等,广泛分布于我国长江以南各地。

蔓茎堇菜性凉味微苦,具消肿退热、排脓解毒、生肌接骨等功效。

主治肝炎、痈肿疮毒、风热咳嗽、眼睑炎、牙龈炎、烫伤、毒蛇咬伤等,以全草入药,民间使用历史悠久。

《福建药物志》记载蔓茎堇菜用于治疗肝炎,效果显著。

杭州市第四医院中医科肝炎病房用蔓茎堇菜合剂治疗急性黄疸型肝炎,黄疸指数恢复正常最快的仅3天。

民间常将新鲜的蔓茎堇菜全草捣碎外敷治疖及外伤出血等。

《福建植物志》记载该植物所含化学成分主要为黄酮、糖类及粘液质等。

蔓茎堇菜总黄酮含量的测定

蔓茎堇菜总黄酮含量的测定

蔓茎堇菜总黄酮含量的测定
陈由强;林国宇;代容春;朱锦懋;叶冰莹;林荣华
【期刊名称】《福建师范大学学报：自然科学版》
【年(卷),期】2000(16)4
【摘要】蔓茎堇菜样品经提取、净化后 ,用紫外分光光度法测定 .以芦丁为标准品 ,在 2 65nm处测定其总黄酮含量 .结果表明 ,植株总黄酮含量为 2 .39% ,根总黄酮含量为 1 .0 8% ,细胞悬浮物总黄酮含量为0 .76% .
【总页数】3页(P67-69)
【关键词】蔓茎堇菜;紫外分光光度法;总黄酮;芦丁
【作者】陈由强;林国宇;代容春;朱锦懋;叶冰莹;林荣华
【作者单位】福建师范大学生物工程学院;福建省药材公司
【正文语种】中文
【中图分类】R282.710.3;Q949.759.2
【相关文献】
1.黔产长萼堇菜中总黄酮的含量测定 [J], 龚元;姜艳萍;李咏梅
2.蔓茎堇菜总黄酮提取工艺初探 [J], 郭晋隆;陈由强;叶冰莹;林荣华
3.Ce(NH4)2(NO3)6对蔓茎堇菜悬浮细胞凋亡和总黄酮含量的影响 [J], 代容春;陈由强;黄儒珠;洪丽亚
4.水蔓菁总黄酮的含量测定 [J], 吴宿慧;王琳琳;李瑞琴;曹珊;左艇;史晶晶;苗明三
5.天山堇菜中总黄酮和多糖的微波提取与含量测定 [J], 吴建芳;李炳奇;薛梅;韦文珍
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茎菜类植物中黄酮成分的提取解析

茎菜类植物中黄酮成分的提取解析

茎菜类植物中黄酮成分的提取解析本文以芹菜和花椰菜为研究对象,利用加速溶剂萃取法(ASE)及大孔吸附树脂对其所含黄酮进行提取和纯化,建立了HPLC-ESI-MSn分离鉴定黄酮的方法,并对芹菜和花椰菜中的黄酮进行了鉴定。

通过单因素和正交实验,确定了芹菜黄酮的最佳提取工艺条件：预热时间：5 min,静态萃取时间：5 min,萃取压力：10.3 MPa,萃取温度：90℃,萃取剂：80%乙醇水溶液,冲洗体积：60%,N2吹扫时间：60s,循环3次。

研究了大孔树脂纯化芹菜黄酮的工艺条件,通过比较AB-8型、D101型、D4020型和NKA-9型4种树脂对芹菜黄酮的吸附、解吸附性能,最终选择D101型大孔树脂纯化芹菜黄酮,工艺条件为：黄酮上样量与所用干树脂的比例约为1.4 mg/g,洗脱剂：80%乙醇水溶液,收集4倍柱体积(BV)的洗脱溶液。

实验优化了液相色谱部分和质谱部分的各项仪器参数,建立了黄酮的液相色谱质谱联用分离鉴定方法。

色谱柱型号为ZORBAX Eclipse XDB-C18(2.1 mm×150 mm,3.5 μm Agilent)；柱温为40℃；流速为0.2 mL/min:流动相为甲醇(B)和含0.1%甲酸的水(A)；梯度洗脱条件如下：0-20 min 20%-30%B;20-30 min 30%-40%B；30-55 min 40%-55%B；55-65 min 55%B；65-66 min 55%-20%B；66.76 min 20%B,二极管阵列检测器(PDA)全扫描波长为230-500 nm。

离子源为ESI源；金属毛细管温度为300℃；金属毛细管电压为-15V；电喷雾电压为4.5 kV；鞘气流速为30 arb；辅助气流速为5 arb。

芹菜叶、芹菜茎和花椰菜叶黄酮的提取量分别为14.53 mg/g,1.80mg/g,6.35 mg/g。

经过D101大孔树脂纯化的黄酮粉末的纯度为66.42%,而未经大孔树脂纯化的黄酮粉末的纯度为25.03%。