2017_2018年高中生物第一单元生物技术与生物工程第一章基因工程与蛋白质工程章末综合测评中图版选修3
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第二节基因工程的应用(时间:30分钟满分:50分)一、选择题(共5小题,每小题4分,共20分)1.人们将苏云金杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中培育成为抗虫棉,这个过程中所利用的主要原理是 ( )。
A.基因突变DNA→RNA→蛋白质B.基因重组DNA→RNA→蛋白质C.基因工程DNA→RNA→蛋白质D.染色体变异DNA→RNA→蛋白质解析将苏云金杆菌的抗虫基因导入棉花细胞中,通过DNA复制、转录、翻译合成特定的蛋白质,表现出特定的性状。
此题易错选C。
基因工程是一种技术手段,而不是生物学原理,抗虫棉的培育利用的是基因工程这一技术手段使基因发生重组。
答案 B2.目前人类利用基因工程的方法成功培育出转基因抗虫棉,以下说法正确的是( )。
A.苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因与质粒结合后直接进入棉花的叶肉细胞表达B.抗虫基因导入棉花叶肉细胞后,可通过传粉、受精的方法,使抗虫性状遗传下去C.标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因D.转基因抗虫棉经过种植,棉铃虫不会产生抗性,这样可以有效消灭棉铃虫解析A项错误:目的基因导入植物细胞的方法包括农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
质粒不能直接进入植物细胞内起基因表达载体的作用;B项错误:抗虫基因导入棉花叶肉细胞中,并插入到植物细胞中染色体的DNA上,然后以此细胞进行植物组织培养,得到抗虫棉,才能使目的基因的遗传特性得以表达,但通过有性生殖,该性状一般不能稳定遗传;D项错误:棉铃虫抗性的产生与抗虫棉的种植有关;C项正确:标记基因的作用就是鉴别体细胞中是否含有目的基因。
答案 C3.下列关于应用基因工程治疗人类遗传病的叙述,不正确的是 ( )。
A.基因治疗可以有效地改善患者生理状况,其操作对象是基因B.进行基因治疗时,基因的受体细胞都是受精卵C.基因治疗并不是对患者体内细胞的缺陷基因进行改造D.基因治疗时可只对患者部分细胞输入正常基因解析动物基因工程操作的受体细胞一般为受精卵,但基因治疗时,不需对全部体细胞发挥作用,受体细胞不是受精卵,而是部分体细胞。
1.4 蛋白质工程的崛起1.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。
2.理解蛋白质工程的原理。
(重、难点)3.了解蛋白质工程的应用。
4.掌握蛋白质工程的操作过程。
(难点)1.基因工程的实质:将一种生物的基因转移到另一种生物体内,后者可以产生它本不能产生的蛋白质,进而表现出新的性状。
2.蛋白质工程的崛起(1)理论和技术条件:分子生物学、晶体学以及计算机技术的迅猛发展。
(2)基因工程存在不足:原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。
(3)天然蛋白质存在不足:天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。
(4)实例。
①延长干扰素保存时间:体外很难保存――→改造体外可以保存半年②提高玉米赖氨酸含量:改造后玉米叶片和种子中的游离赖氨酸分别提高5倍和2倍。
[合作探讨]探讨1:蛋白质工程为什么需直接改造基因,而不直接改造蛋白质?提示:①任何一种天然蛋白质都是由基因编码的,改造了基因即对蛋白质进行了改造,而且可以遗传下去。
如果对蛋白质直接改造,即使改造成功,被改造的蛋白质也是无法遗传的。
②对基因进行改造比对蛋白质直接改造要容易操作,难度要小得多。
探讨2:蛋白质工程操作的基本思路是什么?提示:蛋白质工程是按照以下思路进行的:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因),可以创造出自然界不存在的蛋白质。
[思维升华]1.天然蛋白质的不足天然蛋白质的结构和功能符合特定物种生存的需要,却不一定完全符合人类生产和生活的需要。
2.对蛋白质工程内容的理解(1)改造对象:改造蛋白质的结构,本质上是改造控制该蛋白质合成的基因的结构。
(2)产物:产生新的蛋白质。
(3)原理:基因改造。
由于基因决定蛋白质,要对蛋白质的结构进行改造,最终还必须通过改造基因来完成。
(4)蛋白质工程中经过处理得到的新基因与基因突变得到的新基因有较大差别,基因突变的新基因中含有不编码蛋白质的序列,而蛋白质工程中的新基因则没有。
04第一节基因工程的原理HUOrEGUII-ANXUlNLIAN-------' 活页规范训练(时间:30分钟满分:50分)一、选择题(共7小题,每小题4分,共28分)1下列关于限制酶的说法正确的是()。
A. 限制酶广泛存在于各种生物中,微生物中很少分布B. —种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C. 不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D. 限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键解析此题主要考查限制酶的有关知识。
限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,并不是广泛存在于各种生物中;一种限制酶能识别双链DNA的某种特定核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,DNA分子经限制酶切割后会形成黏性末端或平末端。
答案B2•用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。
下列叙述不正确的是()。
A. 常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒B. DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C. 可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D. 导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达解析基因工程中限制性内切酶和DNA连接酶是构建重组质粒必需的工具酶;质粒作为载体必须具有标记基因;导入的目的基因不一定能够表达成功,还要进行修饰或处理。
答案B3.利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需要的产品。
下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是( ) 。
A. 棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B. 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及mRNAC. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D. 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白解析在基因工程中,判断外源基因是否“表达”常用的方法是看有无目的基因产物产生。
答案D4. DNA连接酶的重要功能是()。
A. DNA复制时母链与子链之间形成氢键B. 黏性末端互补碱基之间形成氢键C. 将两DNA片段之间的缝隙连接起来D. A B、C都不正确解析DNA连接酶的作用是恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
基因工程与蛋白质工程知识点总结一、基因工程基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
(一)基因工程的基本工具:1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。
2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。
②区别:E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。
(2)与DNA聚合酶作用的异同: DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。
②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。
(2)最常用的载体是--质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。
(3)其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取1.目的基因是指:编码蛋白质的结构基因。
2.原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成。
人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。
3.PCR技术扩增目的基因(1)原理:DNA双链复制(2)过程:第一步:加热至90~95 ℃DNA解链;第二步:冷却到55~60 ℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75 ℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
高中生物学习中的生物技术与生物工程生物技术和生物工程是现代生物学领域中的重要分支,广泛应用于医药、农业、工业等领域。
在高中生物学习中,了解生物技术和生物工程的原理和应用,有助于学生深入理解和应用相关知识。
本文将重点介绍高中生物学习中的生物技术与生物工程。
一、生物技术的基本原理与方法生物技术是利用生物的特性和生物体内的分子、细胞、组织等生物基础物质开展实验和应用的技术手段。
其中,基因工程是生物技术的核心内容之一。
基因工程通过改变生物体基因组的结构和特性,实现对基因的编辑和调控。
在高中生物学习中,学生需要了解常见的生物技术方法,如PCR 技术、酶切技术、DNA测序技术等。
PCR技术可以在体外扩增DNA 序列,用于基因克隆和基因分析;酶切技术通过特定的酶切剪切DNA 分子,用于DNA重组和基因插入等操作;DNA测序技术可以准确地测定DNA序列,用于解读基因信息。
二、生物工程在医药领域的应用生物工程在医药领域的应用广泛而深入。
高中生物学习中,学生需要了解生物工程在药物研发、基因治疗、组织工程等方面的应用。
在药物研发方面,生物工程技术可用于大规模生产药物。
例如,利用重组DNA技术,可以构建表达人类胰岛素的真核细胞,用于生产胰岛素制剂,治疗糖尿病。
此外,通过生物工程技术,可以改良传统的药物,提高疗效和降低副作用。
在基因治疗方面,生物工程技术可以用于改变患者的基因组,治疗遗传性疾病。
例如,通过基因工程技术,可以将正常的基因导入患者体内,修复或替代缺陷基因,实现基因治疗。
在组织工程方面,生物工程技术可以用于构建人体组织和器官。
通过体外培养细胞和支架材料的结合,可以构建人工皮肤、骨骼和血管等。
这种技术在烧伤、创伤等伤口愈合方面有重要的应用价值。
三、生物技术在农业领域的应用生物技术在农业领域也具有广泛的应用。
高中生物学习中,学生需要了解生物技术在农业生产中的应用,如转基因技术和基因编辑技术。
转基因技术可以将外源基因导入作物或动物基因组中,赋予其新的性状和功能。
第一单元生物技术与生物工程第一章基因工程和蛋白质工程章末检测A卷(时间:45分钟满分:100分)一、选择题(共12小题,每小题4分,共48分)1.关于限制性内切酶的说法中正确的是( )。
A.限制性内切酶是一种酶,只识别GAATTC序列B.EcoRI切割的是G—A之间的氢键C.限制性内切酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNAD.限制性内切酶只存在于原核生物中解析限制性内切酶是一类酶的总称,不同的限制性内切酶识别序列不同,其作用是切割外源DNA,保护自身DNA的安全。
限制性内切酶切割的是磷酸二酯键,它不只存在于原核生物中。
答案 C2.根据mRNA的信息推出并获取目的基因的方法是( )。
A.用DNA探针测出目的基因B.用mRNA探针测出目的基因C.用mRNA反转录形成目的基因D.用PCR技术扩增mRNA答案 C3.下列操作不属于重组质粒构建过程的是( )。
A.用一定的限制酶切割质粒露出黏性末端B.用同一种限制酶切割目的基因露出黏性末端C.将切下的目的基因片段插入质粒切口处D.将重组DNA导入受体细胞中解析重组质粒的构建过程属于目的基因和载体的结合过程。
答案 D4.基因工程技术也称DNA重组技术,其实施必须具备的4个必要条件是( )。
A.工具酶、目的基因、载体、受体细胞B.重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶C.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞D.目的基因、限制性内切酶、载体、受体细胞解析基因工程是按照人们的意愿,把一种生物的个别基因在体外剪切,并与特殊的运载工具进行重新组合,然后放到另一种生物的细胞(受体细胞)里,定向地改造生物的遗传性状。
基因操作的工具酶是限制性内切酶和DNA连接酶,基因进入受体细胞的运输工具是载体。
答案 A5下列有关基因工程技术的应用中,对人类不利的是( )。
A.制造“工程菌”用于药品生产B.创造“超级菌”分解石油、DDTC.重组DNA诱发受体细胞基因突变D.导入外源基因纠正缺陷基因解析基因突变一般是有害的,故基因工程诱发受体细胞的基因突变一般对人类是不利的。
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学业分层测评(二)(建议用时:45分钟)[学业达标]1。
转基因食品已大量进入我们的日常生活,如转基因西红柿、转基因草莓等,涉及的问题甚至关系到国家之间的贸易竞争,如图为“霸占中国市场的转基因大豆油”的部分图示。
下列关于转基因大豆的叙述不正确的是( )A.培育过程中可能用到抗病、抗虫等抗性基因B.目的基因的受体细胞可以是大豆受精卵,也可以是体细胞C.转基因大豆的种植过程中减少了农药等的使用量,生产成本更低D.固氮菌的固氮基因也是必需的目的基因之一【解析】与豆科植物共生的根瘤菌中有固氮基因,因此固氮基因不是目的基因。
【答案】D2.下列属于利用基因工程技术培育的新品种是()A.抗棉铃虫的转基因抗虫棉B.耐寒的小黑麦C.试管牛D.太空椒【解析】转基因抗虫棉是将外源的抗虫基因导入到棉株细胞中,使抗虫基因得以表达从而产生抗虫性.【答案】A3.抗虫转基因植物具有的优点是( )A.减少农药的应用,保护环境B.损害人体健康C.增加了生产成本D.抗病毒感染【解析】抗虫转基因植物能减少农药的使用,避免了环境污染,保护了人类健康,减少了生产成本。
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章末综合测评(一)(时间:45分钟,分值:100分)一、选择题(共6个小题,每题7分,共42分)1.限制酶是一种核酸切割酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。
下图为四种限制酶B am H Ⅰ、E co R Ⅰ、H indⅢ以及B glⅡ的识别序列。
箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合及正确的末端互补序列分别为()A.B am H Ⅰ和E co R Ⅰ;末端互补序列—AATT-B.B am H Ⅰ和H indⅢ;末端互补序列-GATC-C.E co R Ⅰ和H indⅢ;末端互补序列—AATT—D.B am H Ⅰ和B glⅡ;末端互补序列—GATC—【解析】只有碱基序列能够互补配对的两个黏性末端才能连接在一起形成双链DNA。
【答案】D2.质粒与目的基因具有相同的黏性末端,结合过程中不可能出现下列哪种情况() 【导学号:99310018】A.形成环状的外源DNAB.可能形成环状载体DNAC.可能出现重组DNAD.只能出现重组DNA【解析】基因工程具体操作中,目的基因的切割和质粒的切割要用同一种限制性内切酶,切割结果是目的基因两端及环状DNA的切口都具有相同的黏性末端。
必修一第一章生命科学和我们1、身边的生物科学2、生物科学的学习过程第二章细胞的化学组成1、细胞中的原子和分子2、细胞中的生物大分子第三章细胞的结构和功能1、生命活动的基本单位——细胞2、细胞的类型和结构3、物质的跨膜运输第四章光合作用和细胞呼吸1、A TP和酶2、光合作用3、细胞呼吸第五章细胞增殖、分化、衰老和凋1、细胞增殖2、细胞的分化、衰老和凋亡3、关注癌症必修二第一章生物科学和我们1、身边的生物科学2、生物科学的学习过程第二章减数分裂和有性生殖1、细胞的减数分裂2、有性生殖第三章遗传和染色体1、基因的分离定律2、基因的自由组合定律3、染色体变异及其应用第四章遗传的分子基础1、探索遗传物质的过程2、DNA的结构和DNA的复制3、基因控制蛋白质的合成4、基因突变和基因重组5、关注人类遗传病第五章生物的进化1、生物进化理论的发展2、生物进化和生物多样性必修三第一章生物科学和我们1、身边的生物科学2、生物科学的学习过程第二章内环境稳态的重要性1、人体的稳态第2节人体生命活动的调节3、动物生命活动的调节4、植物生命活动的调节第三章生物群落的演替1、生物群落的基本单位——种群2、生物群落的构成3、生物群落的演替第四章生态系统的稳态1、生态系统和生物圈2、生态系统的稳态第五章人与环境1、人类影响环境2、创造人与自然和和谐选修一第一章无茵操作技术实践1、微生物的培养和应用2、植物组织培养技术第二章发酵技术实践1、运用发酵技术加工食品2、测定发酵食品中的特定成分第三章酶的应用技术实践1、酶的制备和应用2、制备和应用固定化酶第四章生物化学与分子生物学技术1、生物成分的分离与测定技术2、分子生物学技术选修二第一章生物科学与现代农业1、繁殖与育种技术2、植物病虫害和动物疾病的防治3、现代农业第二章生物科学与工业1、发酵工程与食品生产2、酶工程3、生物技术与生物工程制药第三章生物科学与健康1、人类辅助生殖技术2、基因诊断与基因治疗3、人体器管移植第四章生物科学与环境保护1、生物污染与生物净化2、合理利用生物资源选修三第一章基因工程1、基因工程概述2、基因工程的应用3、蛋白质工程第二章细胞工程1、细胞工程概述2、植物细胞工程3、动物细胞工程第三章胚胎工程1、动物的胚胎发育和胚胎工程2、胚胎干细胞的研究及其应用第四章生态工程1、生态工程的原理及类型2、关注生态工程的建设。
章末综合测评(一)一、选择题(共6个小题,每题7分,共42分)1.限制酶是一种核酸切割酶,可识别并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。
下图为四种限制酶B am H Ⅰ、E co R Ⅰ、H indⅢ以及B glⅡ的识别序列。
箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合及正确的末端互补序列分别为( )A.B am H Ⅰ和E co R Ⅰ;末端互补序列—AATT—B.B am H Ⅰ和H indⅢ;末端互补序列—GATC—C.E co R Ⅰ和H indⅢ;末端互补序列—AATT—D.B am H Ⅰ和B glⅡ;末端互补序列—GATC—【解析】只有碱基序列能够互补配对的两个黏性末端才能连接在一起形成双链DNA。
【答案】 D2.质粒与目的基因具有相同的黏性末端,结合过程中不可能出现下列哪种情况( ) A.形成环状的外源DNAB.可能形成环状载体DNAC.可能出现重组DNAD.只能出现重组DNA【解析】基因工程具体操作中,目的基因的切割和质粒的切割要用同一种限制性内切酶,切割结果是目的基因两端及环状DNA的切口都具有相同的黏性末端。
将目的基因与处理过的质粒混合,在DNA连接酶的作用下,断开的基因片段之间会重新缝合,在DNA双链骨架之间重新形成磷酸二酯键,因质粒切口处露出的两个黏性末端相同,则很可能在DNA连接酶催化下重新连接成完整的环状结构,而目的基因两端也可能相互连接起来,当然最符合人们要求的是目的基因黏性末端与质粒黏性末端进行连接,形成重组质粒。
【答案】 D3.科学家将含人的α抗胰蛋白酶基因的DNA片段注射到羊的受精卵中,该受精卵发育的羊能分泌含α抗胰蛋白酶的乳汁,这一过程涉及( )①DNA按碱基互补配对原则进行自我复制②DNA以其一条链为模板合成RNA ③RNA 以自身为模板自我复制④按照RNA密码子的排序合成蛋白质A.①②B.③④C.①②③D.①②④【解析】外源基因导入到羊的受精卵中,在乳腺细胞中表达,在这一过程中有细胞分裂,也就是进行了DNA的复制,即①;在羊的乳汁中有α抗胰蛋白酶,说明该基因完成了表达,也就是发生了转录和翻译两个步骤,即②和④。
【答案】 D4.科学家通过基因工程的方法,能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。
以下有关该基因工程的叙述,错误的是( )A.采用反转录的方法得到的目的基因有内含子B.基因非编码区对于目的基因在块茎中的表达是不可缺少的C.马铃薯的叶肉细胞可作为受体细胞D.同一种限制性内切酶,分别处理质粒和含目的基因的DNA,可产生相同黏性末端而形成重组DNA分子【解析】本题考查基因工程的有关知识。
基因工程操作的过程有四个步骤,其中第一步获取目的基因的方法有“鸟枪法”、反转录法和人工合成法等。
反转录法是以mRNA为模板逆转录为目的基因的DNA,由于mRNA已经经过剪切和拼接,其上不含有内含子转录的成分,因此逆转录得到的目的基因中不含有内含子。
【答案】 A5.提高农作物抗盐碱和抗旱能力的目的基因是( )A.抗除草剂基因B.调节细胞渗透压的基因C.抗冻蛋白基因D.Bt毒蛋白基因【解析】因为盐碱和干旱对农作物的危害与细胞内渗透压调节有关,所以可以利用一些调节细胞渗透压的基因,来提高农作物的抗盐碱和抗干旱能力,这在烟草等植物中已取得了比较明显的成果。
【答案】 B6.从1997年开始,我国自行生产乙肝疫苗等基因工程药物,方法是( ) 【导学A.在受体细胞内大量增殖乙肝病毒B.在液体培养基中大量增殖乙肝病毒C.将乙肝病毒的全部基因导入受体细胞中并表达D.将乙肝病毒的表面抗原基因导入受体细胞中并表达【解析】疫苗为去毒性的抗原,仍能引起人体的特异性免疫。
在生产疫苗时将决定抗原的基因导入受体细胞,从而获得产物。
【答案】 D二、非选择题(共58分)7.(14分)如图是利用基因工程生产人白细胞干扰素的基本过程图,据图回答:(1)①过程需要________(酶)的参与。
(2)②物质是从大肠杆菌分离出的________。
其化学本质是________,它必须能在宿主细胞中________。
(3)将目的基因导入大肠杆菌时,用________处理细胞,使细胞容易吸收DNA分子。
(4)③过程表明目的基因___________________________________________。
【解析】对基因工程的应用过程中的原理、步骤、需要的物质等要有清晰的思路。
基因工程的基本操作步骤包括:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
当受体细胞是不同的生物细胞时处理的方法也不同,要注意区分。
【答案】(1)限制性内切酶(2)质粒DNA 复制并稳定地保存(3)Ca2+(4)在大肠杆菌内成功表达8.(14分)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。
(1)图中基因工程的基本过程可以概括为“四步曲”:即________;________;________;________。
(2)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?________,为什么?________________________________________________________________________。
(3)过程②必需的酶是________酶,过程③需要的条件是___________________________________________________________________;过程④需要的酶是________。
(4)在利用A、B获得C的过程中,必须用________________切割A和B,使它们产生________________,再加入________,才可形成C。
(5)为使过程⑧更易进行,可用________(药剂)处理D。
【解析】本题考查基因工程的基本操作过程及操作过程中每个环节的要求,明确四个操作步骤的顺序及特点是解题的必备前提。
(1)基因工程的四个过程为:获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞及目的基因的检测与鉴定。
(2)人体的皮肤细胞中含有合成胰岛素的基因,但在此细胞中不表达(即基因的选择性表达),所以不能找到相应的mRNA。
(3)②以mRNA为模板合成DNA的过程被称为逆转录,此过程需要逆转录酶;③④⑤过程是利用PCR技术扩增目的基因;③过程利用加热使DNA解旋;④过程需要热稳定的DNA聚合酶(T aq酶)。
(4)A为目的基因而B为载体,两者结合时首先要用同一种限制性内切酶切出相同的黏性末端,然后在DNA连接酶的作用下相互结合。
(5)⑧过程是将重组DNA导入受体细胞,大肠杆菌用Ca2+处理可以增大细胞壁的通透性,从而使重组DNA更容易导入受体细胞。
【答案】(1)获取目的基因基因表达载体的构建将目的基因导入受体细胞目的基因的检测与鉴定(2)不能 皮肤细胞中的胰岛素基因未表达(或未转录),不能形成胰岛素mRNA(3)逆转录 加热使DNA 解旋为单链 T aq 酶(4)同一种限制性内切酶 相同的黏性末端 DNA 连接酶(5)Ca 2+9.(15分)下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程,请据图回答下列有关问题:(1)若限制性内切酶 Ⅰ 的识别序列和切点是—G ↓ATC —,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—GG ↓ATCC —,那么在①过程中,应用限制性内切酶________切割质粒,用限制性内切酶________切割抗虫基因。
①过程在________(填“体内”或“体外”)进行。
(2)将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有________的培养基上,能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入,该培养基从功能方面属于________培养基。
(3)重组质粒导入大肠杆菌的目的是_________________________________。
(4)⑤过程所用技术称为________,从遗传学角度来看,根本原因是根细胞具有__________________________。
【解析】 由限制性内切酶Ⅰ和限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点可知,限制性内切酶Ⅰ可以识别并切割限制性内切酶Ⅱ的位点,而限制性内切酶Ⅱ则不能识别并切割限制性内切酶Ⅰ的位点。
故质粒用限制性内切酶Ⅱ切割,保留四环素抗性基因,目的基因用限制性内切酶Ⅰ(或限制性内切酶Ⅰ和Ⅱ)切割。
①为构建目的基因载体的过程,该过程在体外进行。
大肠杆菌导入重组质粒后,含有正常的四环素抗性基因,将其涂布在含有四环素的选择培养基上,它能够正常生长。
将目的基因导入大肠杆菌后目的基因可在大肠杆菌体内大量复制。
根细胞中含有发育成完整个体所需的全套遗传物质,故通过植物组织培养技术可将根细胞培养成一个完整植株。
【答案】 (1)Ⅱ Ⅰ(Ⅰ和Ⅱ) 体外 (2)四环素 选择 (3)大量复制目的基因(抗虫基因) (4)植物组织培养 发育成完整个体所需的全套遗传物质10.(15分)如右图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性内切酶E co R Ⅰ、B am H Ⅰ的酶切位点、amp R 为青霉素抗性基因。
tet R为四环素抗性基因,P 为启动子,T 为终止子,ori 为复制原点。
已知目的基因的两端分别有包括E co R Ⅰ、B am H Ⅰ在内的据图回答:(1)将含有目的基因的DNA 与质粒表达载体分别用E co R Ⅰ酶切,酶切产物用DNA 连接酶进行连接后,其中由两个DNA 片段之间连接形成的产物有________________、________________、________________三种。
若要从这些连接产物中分离出重组质粒,需要对这些连接产物进行________。
(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。
之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是__________________________________________________。
(3)目的基因表达时,RNA聚合酶识别和结合的位点是________,其合成的产物是________。
(4)在上述实验中,为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接,酶切时应选用的酶是________。
【解析】将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用E co R Ⅰ酶切,所产生的黏性末端相同,用DNA连接酶处理后,不同的DNA片段随机结合,可形成3种不同的连接物,这些连接物可采用电泳、层析或超速离心等手段分离纯化。
将这3种连接物导入受体菌后,可根据不同连接物所携带抗性基因的差异,选择不同的选择培养基进行筛选。