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霍乱弧菌实验室检测ppt课件

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霍乱弧菌ppt参考课件

霍乱弧菌ppt参考课件
1883年，埃及发生了一次瘟疫大流行，一批 批的病人相继死亡，共计58500人。
患者往往起病急，出现严重的腹泻和呕吐， 米泔水样（rice water）腹泻物。若得不到及时救 治，常常在短时间内因全身脱水、肌肉痉挛和周 围循环衰竭，造成休克而死。
问题： 1、患者患有什么疾病？ 2、如何确诊？ 3、如何治疗？
二、幽门螺杆菌
1、形态、染色和培养特性：呈螺旋形、S 形或海鸥展翅状。有鞭毛，运动活泼。革兰染 色阴性。微需氧菌，营养要求高，需加血液， 37℃培养3d后，可见针尖状半透明的菌落。
尿素酶丰富，快速尿素酶试验强阳性，是 鉴定该菌的主要依据之一。
二、幽门螺杆菌
2、所致疾病：是引起慢性胃炎和消化性溃 疡（胃溃疡、十二指肠溃疡）的病原菌，与胃 癌、胃黏膜相关B细胞淋巴瘤的发生密切相关。
霍乱弧菌
德国细菌学家科赫通过尸体解剖和镜检， 从肠道乳白色液体中发现了外形短小、略有弯 曲、拖曳细小尾部而形如逗号的霍乱弧菌。通 过水、食物、生活接触和苍蝇等传播而进入人 体的“逗号”，导致了霍乱。
霍乱弧菌
一、生物学特性
形态与染色：革兰染色阴性，弧菌，排列如 “鱼群”状。单端鞭毛，运动活泼。可取呕吐或 腹泻物，作悬滴法活菌检查，可见细菌呈穿梭状 或流星雨样运动。加入鞭毛血清（抗鞭毛抗体）， 运动终止（制动试验阳性）。
霍乱弧菌
2．The microbial responsible for the patients’s diarrhea is a toxin（毒素）that A．Blocks EF-2 and inhibits protein synthesis B．Yields increased intracellular levels of cAMP C．Yields increased intracellular levels of cGMP D．Inbibits the release of acetylcholine（乙酰胆 碱）at the synapse（突触） E. Stimulates neural receptors

霍乱弧菌实验室检测

霍乱弧菌实验室检测

霍乱弧菌的实验室检测
目的:提高检出率,减少漏检以及误判的发生 手段:
检测人员是否有足够的责任心? 检测试剂准备是否齐全且符合要求? 是否严格按照检测流程进行操作?
霍乱概述
▪ 什么是霍乱?
霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）
引起的急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波 及范围广、危害严重的甲类传染病。
霍乱弧菌
O1群 非O1群
古典生物型 埃尔托生物型
小川型 Ogawa (AB) 稻叶型 Inaba (AC) 彦岛型 Hikojim (ABC)
霍乱病原菌
O139群（Bengal）
O2-O200群
腹泻病原菌
▪ 病原体
O1群，O139群霍乱弧菌
▪ 发病特征：
剧烈腹泻、呕吐、严重脱水时致酸中毒、循环衰竭而致死亡 不治疗或医疗很差的条件下病死率可达到20－50％（重症病人达70－ 100％）
菌落鉴定
▪ 染色镜检
革兰染色阴性的短杆菌
▪ 血清凝集试验：
➢分别使用O1群，O139群霍乱血清进行凝集试验，同时使用生理盐水进行 对照凝集，以排除与生理盐水发生凝集的自凝菌。 ➢生理盐水不凝集，O1群血清明显凝集的菌落，进一步使用稻叶型和小川型 血清进行凝集试验，判定型别：稻叶型血清凝集而小川型血清不凝集的菌落 为稻叶型，小川型血清凝集而稻叶型血清不凝集的菌落为小川型，如稻叶型 血清和小川型血清均出现凝集的时候，要注意鉴别是否为彦岛型，需进行试 管凝集试验且两者的凝集效价均超过一半以上才能判定为彦岛型，因为某些 小川型菌落自身会带有少量的C抗原而出现与稻叶型血清发生弱凝集，因此 如小川型血清凝集较稻叶型血清凝集有明显优势时应维持小川型的判定。 ➢生理盐水不凝集，O139群血清明显凝集的菌落，一般为O139群，但其与 O22群及O155群甚至一些非霍乱弧菌会出现交叉凝集，由上级实验室进行 进一步确认。

【传染病学】霍乱PPT课件

【传染病学】霍乱PPT课件
•2、特异性血清制动实验：依次加入01群抗血 清-0139抗血清停止运动
— 早期快速诊断的主要参考
实验室检查（3）
3、培养和分离： 病原诊断：PH8.6碱性蛋白胨增菌后培养 -----确诊、鉴定与分离
4、核酸检测：CTxA TcpA (PCR) o139 5、霍乱弧菌快速辅助检测：胶体金快速检测
不典型OⅠ群霍乱弧菌：可被01群血清凝集，但不产生 肠毒素，无致病性。
病原学（2）
抵抗力：
古典型在外环境抵抗力弱，埃尔托型对 外环境抵抗力强， 易形成流行
两型对热、干燥、酸和一般消毒剂均敏 感，胃酸4分钟杀灭。
自然环境中存活时间较长，河海井水埃 尔托型可存活1-3周，粘附于藻类和甲壳 类动物，存活时间更长，长达1年
液体种类：
5：4：1即含氯化钠5g，碳酸氢钠4g，氯化钾1g， 葡萄糖20g
如： 0.9%氯化钠550ml 1.4%碳酸氢钠300ml
10%氯化钾10ml, 10%葡萄糖140ml
注意：幼儿肾功能排钠功能差，其比例常调整 为氯化钠2.65g，碳酸氢钠3.75g，氯化钾1g，葡 萄糖10g
补液量 ： 最初24h补液量
霍乱疫苗接种 保护率低：50% - 80% 有效时间短：3-6个月
流行特征：流行性（散发和暴发）、地方
性（印度）、 季节性（夏秋季节7-10月） 流行地区：两广，江浙沪一带
O139的特点：
有荚膜， 能在无NaCL或30g/L NaCL蛋白胨生长 发病无家庭聚集性 以成人为主 男性多于女性 主要经水和食物传播 新流行菌株，普遍易感 霍乱菌苗无保护作用
尿液检查：• 比重1.010 ~ 1.025 • 蛋白、红细胞、白细胞及 管型
粪常规：少许粘液 白细胞 红细胞

霍 乱 ppt课件

霍 乱 ppt课件
印度是世界古典型霍乱的地方性疫源地， 印尼的苏拉威西岛是El-Tor型霍乱的地
方性疫源地。
印度是世界O139霍乱的地方性疫源地
〔2〕 O139流行特征： 疫情来势猛，传播快，病
例散发，无家庭聚集现象。与 O1群无交叉免疫力。
其余情况与O1群相似。
(3)季节性与周期性： 在热带地区全年可发病。我 国以夏秋季为流行季节，高峰 期7～8月。
尿液呈酸性，比重1.010～1.025， 有尿蛋白，RBC及WBC管型。
3、粪便检查：
(1)常规检查 (2)细菌学检查： ①粪便直接检查：粪便悬滴镜检：G-、
流星样运动 ②粪便培养(甲Ⅱ)
4、血清学检查
抗菌抗体和抗毒抗体的检测。〔病后第5 日出现〕
1.凝集试验：病程2周效价1：100有意义。 2.杀弧菌试验：效价1：32或双份血清抗体效价4倍以上增
霍乱的确诊依靠粪便培养阳性
或其他特异检查。
疑似诊断：
①有典型症状，但病原学检查未确定 者。 ②流行期间有明显接触史，且发生泻 吐症状，不能以其他原因解释者。
根据细菌培养结果确立 或排除诊断。
每日作粪培养，如3次阴性，且血清学检 查2次阴性，可否定诊断。
鉴别诊断
1.急性胃肠炎 2.急性细菌性痢疾 3.大肠杆菌性肠炎
四、发病机制和病理生理
〔一〕发病机制及病生
小肠碱性环境
↓
霍乱弧菌 → 粘附肠粘膜后大量繁殖－
→产生霍乱肠毒素及释放内毒素〔弧菌崩 溃时〕
霍乱肠毒素
|
受 体 （小肠粘膜细胞膜） 腺苷环化酶
|
ATP—>cAMP
| 腺细胞分泌功能增加
| 肠液分泌增加
1、霍乱肠毒素激活细胞cAMP系 统而引起小肠过度分泌。

霍乱弧菌实验室检验技术PPT课件

霍乱弧菌实验室检验技术PPT课件
骨可以改善融合率。加拿大一项 4 年的研究结果发现
rhBMP-2的融合率（94％）高于髂骨植骨组（69％）。另
一项研究发现联合应用 “ INFUSE ” + 自体髂骨”可以提
高椎间融合率（> 95％）。65岁以上的老年患者与年轻患
者使用rhBMP-2，二者的并发症发生率并没有太大差异。
+ 椎间盘置换术
在过去的几年内，有2种新型的人工椎间盘装置获得了美国
FDA 的批准，其适应症是单节段脊髓神经根病，还有1种装置同
时适用于单节段或者双节段的病变。这3种人工椎间盘装置的临 床功能预后和安全性和其他已经批准上市的人工椎间盘类似。
+ 椎间盘置换术
已获得上市的人工椎间盘 7-9 年的随访显示其具有较好的预 后，和融合手术相比，其邻近节段退变而导致的再手术率较低。
但是，人工椎间盘也有其潜在的缺点，如边缘撞击造成的椎间盘
装置磨损，由此而形成的磨损碎屑的炎症反应等，目前报道这类
并发症的发生率较少。美国医疗保险数据库的调查发现，使用人
工椎间盘的花费要少于融合手术，可能与术后较少的再手术率和 术后较少的费用相关。
+ 2013 年脊柱生物学研究的焦点在重组人骨形态发生蛋白
+ 过去数十年间，有3种人工椎间盘获得了相关监管机构的批
准，其长期随访取得了较为满意的结果。
+ 脊髓型颈椎病
Fehling 等人报道一项对 222 例脊髓型颈椎病患者进行了术后 1 年随访的多中心观察研究，结果发现术后疼痛、功能、步态、 生活质量等可以获得较好的改善。 作者认为：前后路手术效果无显著差异；多因素分析显示， 临床功能预后较差有关的因素包括：症状持续时间长，术前较差 的基础功能，合并有精神疾病，严重步态障碍，较高的年龄等。

霍乱弧菌实验室检测

霍乱弧菌实验室检测

分离培养（两管两板法）：
接种后的碱性蛋白胨水37℃培养过夜，取菌膜下表层培养物接种选择性培养 基（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板）．同时吸0.1～0.2 ml表层培养物转种于 10ml碱性胨水管中作二次增菌，37℃培养6～8h再划线接种于选择性培养基
平板分离及可疑菌落挑取
平板分离
选择性分离平板应采用9cm分离平板（不建议采用7cm平板），一个平 板分离一个样品（严禁一个平板分离2份或以上样品！！ ）。 样品平板分离时应进行分区划线分离，平板分离的单个菌落数量应该达到 50个以落挑取
经典的鉴定步骤要求每个平板应挑取5个以上可疑菌落,转种于克氏双糖斜 面或者普通琼脂斜面待分纯培养后,再进行O1、O139群血清玻片凝集试验， 鉴于对霍乱疫情应急处理的考虑,现大多数监测实验室一般采用将血清玻片 凝集试验前置的做法,作为快速筛查的手段,直接对平板上生长的单个可疑菌 落进行玻片凝集试验,出现明显凝集时可做初步报告,对平板上出现可疑凝集 的菌株必须马上转种于克氏双糖斜面或者普通琼脂斜面,待纯培养物生长良 好后再次进行玻片凝集试验加以确证。 庆大霉素平板和4号琼脂：多呈半透明状，菌落中央常呈灰色或灰黑色，并 随培养时间的延长而加深（由于这类培养基均含有亚碲酸盐成份）。 TCBS（硫代硫酸盐枸櫞酸盐胆盐琼脂）：菌落生长呈黄色发亮、表面光滑、 润湿、稍凸起、边缘整齐。 （TCBS平板生长的菌落不能直挑取进行玻片凝 集试验，需按经典方法进行纯培养后再进行玻片凝集试验）
分离培养要点（两管三板法）：
挑取粪便，直接接种于碱性蛋白胨水（第一管）中，同时划线分离选择 性平板（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板，第一板）。 第一管碱性蛋白胨水在３７ ℃增菌６－８小时，沾取菌膜下表层液体， 划线分离选择性平板（庆大／四号／ＴＣＢＳ平板，第二板），同时吸取 0.1～0.2 ml表层培养物，接种碱性蛋白胨水（第二管）。 第二管碱性蛋白胨水增菌１８小时后划线分离选择性平板（庆大／四号 ／ＴＣＢＳ平板，第三板）。

霍乱弧菌ppt课件

霍乱弧菌ppt课件
培养特性：耐碱怕酸，pH 8.8-
9.2，可在无盐环境中生长
抗原构造与分群：
H抗原：无特异性 O抗原：分群
一、生物学特性
古典生物型
O-1群
EL Tor 生物型
非O-1群 引起散发性胃肠炎。
O-139型，1992年起引起 霍乱流行。
与人类感染有关的主要弧菌
弧菌
人类疾病
霍乱弧菌O1和O139 血 清群
病例分析
一名在印度某水电站工作的44岁工程师，突 发大量水样泻，由于每小时约0.5L液体的丢失， 患者很快出现紫绀及重度脱水症状，肠鸣音减 弱，低血压，血容量减少，其排出物呈等渗， 暗视野显微镜检查，发现逗点状微生物。
Q1、患者最有可能患有何种疾病？ Q2、如何确诊？
一、生物学特性
形态与染色：革兰染色阴性，弧菌，单端鞭毛， 运动活泼。
霍乱
• 剧烈的喷射状呕吐 • 休克、电解质紊乱及酸中毒 • 腹泻物呈米泔水样 • 不治疗，死亡率达60%
致病性与免疫性
所致疾病： 霍乱
易感者：人类是霍乱弧菌的唯一易感者 传播途径：消化道
可疑水、食物（菌 103—105，108—1010）
2-3天突然出现剧烈腹泻与呕吐
严重脱水，电解质紊乱，肾衰、死亡
致病物质：
鞭毛与菌毛：运动并粘附至小肠粘膜
肠毒素： A—A1：毒性组分，使腺苷酸环化酶活
性增高，cAMP 大量增加。
A2：与 B 结合 B—与小肠上皮细胞神经节苷脂受体结合
霍乱肠毒素结构：1A、5B
霍乱肠毒素（ CT）：由一个A亚单位和5个相同的B亚单 位构成的一种聚合蛋白。
致病物质---霍乱肠毒素:
致病性与免疫性
病后带菌一般不超过 2 周，个别 可长达数年，病菌主要存在于胆囊中 。

霍乱ppt幻灯片1

霍乱ppt幻灯片1
分为小川型(A、B)、稻叶型(A、C)及彦岛型(A、B、C) ② 不典型O1群霍乱弧菌∶可被多价O1血清凝集，不产生 肠毒素，无致病性
8
病原学
分类 ③非O1群霍乱弧菌
不能被O1群霍乱弧菌的多价血清所凝集，统称为不凝 集弧菌
从O2—O200型以上，一般无致病性，少数血清型可引 起散发性腹泻
92年新发现O139血清型霍乱弧菌，含有O1群霍乱相同 的毒素基因，可产生肠毒素，引起流行性腹泻，被列为 国际检疫的病原，与O1群霍乱弧菌同等对待
2
Drawing of Death bringing the cholera, in Le Petit Journal
3
病原学
形态 • G(-)，无芽胞，无荚膜 • 短小稍弯曲的杆菌，如逗点状 • 长1.5-3μm，宽0.3-0.4μm • 菌体末端有一根鞭毛，运动活泼，悬滴检查可见穿 梭状或流星状运动 • 粪便直接涂片可见弧菌呈“鱼群”样排列 • O139血清型霍乱弧菌在菌体外有荚膜
4
病原学
培养特性 • 兼性厌氧菌，37℃，普通培养基中生长良好 • 先在碱性(pH8.4—9.0)肉汤或蛋白胨水中增菌，分 离时采用碱性琼脂平板培养基，可见菌落光滑、较 大、扁、无色，似水滴状
5
病原学
抗原结构 • 霍乱弧菌具有耐热的菌体（O）抗原和不耐热的鞭毛（H）抗原 • 各群霍乱弧菌的H抗原大多相同 • O抗原特异性高，有群特异性和型特异性两种抗原,是霍乱弧菌 分群和分型的基础 • O1型霍乱弧菌型的特异性抗原有A、B、C三种 • A抗原为O1群弧菌所共有，是群特异性抗原，而B、C为型特异 性抗原
19
流行病学
流行特征 • 霍乱在热带地区全年均可发病，但在我国仍以 夏秋季为流行季节，高峰期在7-8月间 • 无明显周期性流行 • 沿海地区发病较多 • O139流行特征：疫情来势凶猛，传播快，散发 为主；经水和食物传播，人群普遍易感，与O1群无 交叉免疫

《霍乱弧菌》课件

《霍乱弧菌》课件
霍乱毒素。
霍乱弧菌的防治措施
01
02
03
04
预防接种
接种霍乱疫苗，提高人群免疫 力。
饮食卫生
保持良好的饮食卫生习惯，避 免食用生冷食物。
水源管理
加强水源管理，保证饮用水安 全。
环境卫生
保持环境卫生，减少霍乱弧菌 的传播。
霍乱弧菌的疫苗研究
传统疫苗
利用灭活或减毒的霍乱弧菌作为疫苗，已取得一定效果。
控制霍乱弧菌的传播需要国际社会的合作，共同 加强出入境检验检疫，防止疫情跨国传播。
THANKS
感谢观看
《霍乱弧菌》PPT课件
• 霍乱弧菌简介 • 霍乱弧菌的生物学特性 • 霍乱弧菌的致病性 • 霍乱弧菌的检测与防治 • 霍乱弧菌的流行病学
01
霍乱弧菌简介
霍乱弧菌的发现与命名
发现
1817年，印度恒河三角洲地区首 次发现霍乱弧菌感染的人类病例 。
命名
由英国医生John Snow在1854年 正式命名为“霍乱”。
霍乱弧菌的抵抗力
霍乱弧菌对干燥、阳光和一般消毒剂 较为敏感，但在水体中可存活数周至 数月之久，甚至在污染的食物或水中 也能存活较长时间。
霍乱弧菌的抵抗力与其变异有关，变 异株可能具有更强的抵抗力，需要引 起关注。
霍乱弧菌对某些抗生素如四环素和氟 喹诺酮类具有抗性，但仍然对一些抗 生素如多黏菌素和磺胺类药物敏感。
霍乱弧菌的形态与结构
形态
霍乱弧菌呈逗点状或弯曲的杆状，大 小约1.5-3微米 x 0.3-0.4微米。
结构
单极鞭毛，无芽孢，无荚膜，革兰氏 染色阴性。
霍乱弧菌的分类地位
01
02
03
生物型
根据其抗原特性和生化反 应的不同，霍乱弧菌可分 为O1型和O139型。

霍乱弧菌检测ppt

霍乱弧菌检测ppt

A、C
异型 中间型
小川型（Ogawa）
彦岛型 （Hikojima）
A、B A、B、C
-
非O1群霍乱弧菌
O139群霍乱弧菌 1992年，在印度印度马德拉斯、泰米尔纳
德发生的霍乱疫情，分离到的菌株不与O1 群霍乱血清凝集，但是引起O1群霍乱的典 型症状。引起WHO重视，定为O139群霍乱弧 菌，被认为下一次霍乱大流行主角。
-
疑似菌落鉴定基本要求：
分别从庆大霉素琼脂或TCBS 琼脂、碱性琼脂 平板上各挑取5 个以上的（少于5 个的全部挑取）
疑似菌落接种于营养琼脂斜面置37℃18-24h 纯培养（即每份样品至少从4 个分离平板上获 得约20 株可疑菌落菌株），取斜面纯培养物 进行O1 群及O139 群霍乱诊断血清玻片凝集试 验，血清凝集阳性的菌株继续相关的系统鉴定 并报告结果。必须注意同一样品中O1、O139群 霍乱弧菌可能同时存在，有必要对所有选出的
TCBS 琼脂平板和一个碱性琼脂平板进行划线 分离培养。 同时，以无菌吸管吸取0.2-0.5ml 增菌液接种 到新的碱性蛋白胨水中，进行二次增菌培养后， 再如上述步骤进行划线分离培养。 特别强调所有环境样品的增菌分离培养步骤必 须包括上述二次增菌和强、弱双平板分离。
-
鉴定
TCBS上出现黄色菌落，4号琼脂或庆大霉素 平板上出现灰褐色中心的菌落，均为可疑 菌落，应使用O1群和O139群霍乱弧菌的多 价和单价抗血清进行玻片凝集试验，结合 菌落特征和菌体形态，作出初步报告。
El Tor霍乱弧菌为主。
-
霍乱弧菌古典生物型和 El-Tor生物型的区别
特征
古典生物型
羊红细胞溶血
-
鸡红细胞凝集
-
VP 试验

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(二）所致疾病
正常胃酸可杀灭霍乱弧菌，当胃酸分泌缺乏或低下，或入侵的 霍乱弧菌数量较多，未被杀灭的弧菌就进入小肠，在碱性肠液内迅 速繁殖，并通过粘液对细菌的趋化吸引作用、细菌鞭毛活动及弧菌 粘蛋白溶解酶和粘附素等的作用，粘附于小肠粘膜的上皮细胞表面 ，并在此大量繁殖，产生霍乱肠毒素。
1个毒素分子由一个A亚单位和5个B亚单位组成。A亚单位又分 为A1和A2两个肽链，两者依靠二硫链连接。A亚单位为毒性单位， 其中A1肽链具有酶活性，A2肽链与B亚单位结合参与受体介导的内 吞作用中的转位作用。B亚单位为结合 单位，能特异地识别肠上皮细胞上的 受体。
15、 一 个 人 炫 耀什 么，说 明他内 心缺少 什么。 。2021年 5月*21.5.15*May15, 2021
16、 业 余 生 活 要有 意义， 不要越 轨。**5/15/2021
17、 一 个 人 即 使已 登上顶 峰，也 仍要自 强不息 。***21.5.15
谢谢大家
9、 人 的 价 值 ，在 招收诱 惑的一 瞬间被 决定。 2021/5/152021/5/15Saturday, May 15, 2021
12、 人 乱 于 心 ，不 宽余请 。***Saturday, May 15, 2021
13、 生 气 是 拿 别人 做错的 事来惩 罚自己 。21.5.1521.5.15**May 15, 2021
14、 抱 最 大 的 希望 ，作最 大的努 力。2021年 5月 15日星 期六**21.5.15
13、 生 气 是 拿 别人 做错的 事来惩 罚自己 。2021/5/152021/5/152021/5/152021/5/155/15/2021
14、 抱 最 大 的 希望 ，作最 大的努 力。2021年 5月 15日星 期六2021/5/152021/5/152021/5/15
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11.12.2020
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19
11.12.2020
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20
• 6.增菌培养6-8小时后，需要取胨水生长物再次观察动力 ，进行6-8小时动力报告。并转种到庆大霉素平板并放入 35℃孵箱中培养。在进行6-8小时动力报告时，需要先取 消之前的审核，在原报告单上进行审核（1505970005） 。
11.12.2020
0139霍乱弧菌，并认定为真正的霍乱弧菌。
三、不典型01群霍乱弧菌：可被多价01群血清所凝集，但该群 菌不产生肠毒素，因此无致病性
11.12.2020
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6
霍乱病原学特点
• 形态与染色
– 弧状或逗点状 – 革兰染色阴性 – 有一根单鞭毛，细菌运动非常活泼，呈鱼群穿梭样或流星状
11.12.2020
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霍乱实验室检测
2020/12/11
检验科
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1
霍乱病原菌发现
• 1883年德国科学家Koch发现霍乱弧菌 • 1 9 0 5 年埃及埃儿托检疫站首次分离到ElTor弧菌，与霍乱
弧菌甚为相似，但经过多年的观察并不致病或仅引起轻度 腹泻，直到1937-1958年发生4次爆发后才逐渐认识到 ElTor弧菌致病性 • 1992年10月印度马德拉斯发现了新菌型O139霍乱弧菌
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11.12.2020
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22
疑似菌落初步鉴定：
7.庆大平板培养18-24h后挑取可疑菌落进行动力观察， 如动力阴性，可进行最终阴性报告，如下图。
11.12.2020
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11.12.20ห้องสมุดไป่ตู้0
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• 注意：
• 1.动力试验阴性，无需进行血清制动试验。 • 2.任何一次动力阳性，都需进行血清制动试验并
革兰染色
11.12.2020
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电镜负染色—鞭毛
11.12.2020
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9
• 霍乱弧菌动力视频链接 /v_show/id_XNTg3MTczNTY4.html
11.12.2020
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10
三、霍乱弧菌常规检验
样本采集、送检和保存 标本的检验流程
11.12.2020
11.12.2020
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2
一、霍乱概述
• 霍乱是由01群和0139群霍乱弧菌（V．cholerae）引起的
急性肠道传染病，发病急、传播速度快、波及范围广、危 害严重的甲类传染病。 • 是国内交通检疫传染病之一。
• 也是当今三种国际检疫传染病中最严重的一种。
11.12.2020
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二、霍乱病原学
• 霍乱的病原学分类 • 霍乱的病原学特征
11.12.2020
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注意：门诊在上午11：00之前收到的大便弧培标本，需要将 转种好的胨水和患者化验单一起转运至微生物室，后续步 骤由微生物室来完成：门诊在上午11：00以后收到的标本， 需将转种好的胨水和患者化验单一起放置门诊35°C的培 养箱中培养，门诊拖班人员需跟当晚住院部夜班人员交班， 夜班人员需在转种胨水6-8h后看动力和转种庆大平板，记 录并审核结果，第二天由师傅将平板和化验单转运至微生 物室，后续步骤由微生物室来完成。
在LIS上记录和审核试验结果。 • 3.当动力和血清制动试验同为阳性时，为疑似霍
乱弧菌感染，要立即通知开单科室和医务处，对 病人采取相应的隔离治疗等必要措施。
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• 血清制动试验包括4瓶血清。第1瓶为O1群多价，第2、3 瓶为小川、稻叶型单价。第4瓶为O139群抗血清。当观察 到动力阳性，首先进行O1群多价的制动试验。如为阴性 ，接着做O139群的制动试验。两者均阴性，可初步排除 霍乱弧菌病感染。如O1多价制动试验阳性，则进一步进 行第2、3瓶的制动试验，即进行小川、稻叶型单价血清的 制动试验
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样本采集、送检和保存
• 粪便：标本的采集以病人粪便为主，水样便采取1～
3mL，亦可用棉拭或采便管由肛门插入直肠内3～5cm 处采取。急性期病人取水样便标本在增菌培养的同时 可取其粘液絮片或用棉拭子直接接种于碱性琼脂、 TCBS琼脂培养基。不能立即检查的粪便标本，要放入 碱性蛋白胨水中。
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二、非01群霍乱弧菌：本群弧菌鞭毛抗原与01群相同，而菌体 （0）抗原则不同，不被01群霍乱弧菌多价血清所凝集，依O 抗原之异，本群可分为137个血清型。以往认为本群仅引起散 发的胃肠炎性腹泻，一般此类弧菌感染不作霍乱处理，但 1992年在印度及孟加拉等地发生霍乱暴发流行，后证实流行 菌不被01群和137个非01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。乃定为
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霍乱弧菌抗原结构及分类
• 抗原结构 霍乱弧菌有耐热的菌体（O）抗原和不耐热 的鞭毛（H）抗原。H抗原为霍乱弧菌属所共有；O抗 原有群特异性和型特异性两种抗原，是霍乱弧菌分群 和分型的基础。
• WHO腹泻控制中心将霍乱弧菌分为三群。
一、01群霍乱弧菌：包括古典生物型霍乱弧菌（vibrio cholerde ）和埃尔托生物型（vibrio cholerde EL-Tor biotype）。01群 的特异抗原有A、B、C三种，其中A抗原为01群所共有， A抗原与其他B与C抗原结合则可分为三型，即：原型——AC （稻叶，Inaba）、异型——AB（小川，Ogawa）和中间型 ——ABC（彦岛，Hikojima）。
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4.编号由lis自动生成后，根据病人实际信息，先选择“患者类别”，然后输 入患者编号（门诊号或住院号），项目类别自动显示为大便力霍乱弧培
养。最后一步，点“建单”。
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建单完成后，如下图
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• 5.取粪便标本在高倍镜暗视野下看动力，看完动力后，在“ 初步动力”栏录入结果（阴性或阳性），并审核打印报告 。同时粪便标本转种到碱性胨水中并放入35℃孵箱中培养, 在化验单上记录转种时间。
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检验流程
• 接收到大便动力弧菌培养标本，请先建单。方法如下
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1. 左键单击微生物检验，进入微生物检验窗口。
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2.单击标本号（左键、右键均可），会出现下拉框。单击“其它”
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3.该标本会由lis自动生成编号，如1505970005。