菌种的保藏

菌种保藏方法
菌种保藏方法，如下：
1、传代保藏，传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。

很多微生物在低温或者干燥处理时，会很快死亡，为了保存菌种的活性，就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。

2、斜面低温保藏，将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上，在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子，随后密封试管置于4℃左右保存，具体保存温度按照保存菌种设定。

保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。

3、冷冻干燥保藏，冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一，对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用，这种方法适用于菌种长期保存，一般可保存数年至十余年。

我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。

4、半固体穿刺保藏，配制半固体培养基，高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3，待培养基凝固，用接种环从平面培养基上挑取单菌落，穿入培养基若干次。

在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长，之后密封试管，根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。

保存时间至少可以达到
1 年，对于有些菌种甚至能达到20 年之久。

5、液氮超低温保藏，液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。

液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内，将该安瓶瓶放人液氮（-196℃）中保藏。

几种食用菌菌种保藏方法食用菌菌种是指用于食用或驯化培养的真菌种类。

在保藏食用菌菌种时，主要有以下几种方法：1.冷冻保藏：将菌种置于-80℃的低温环境中。

首先，将菌种种植在琼脂平板上的单独菌落。

然后，将单独的菌落切下并置于含有30%甘油的琼脂平板上。

最后将含有菌落的琼脂平板置于-80℃的低温冷冻库中进行保存。

这种方法适合于长时间保存，但对设备和电力有一定需求。

2.雪贮法：将菌种置于冷藏室的冷湿源物质上。

首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后，将菌落保留在琼脂平板上并将其置于冷藏室中。

这种方法适用于一般食用菌的保存，在适宜的湿度和温度下，可以保存数月至一年。

3.干燥保藏：将菌种置于干燥环境中。

首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后将菌落切下并置于无菌的滤纸或多孔塑料袋中。

最后将菌种放置于干燥通风良好的地方，等待其自然干燥。

这种方法适用于一些干货类食用菌种，如香菇、平菇等。

4.培养罐保藏：将菌种保藏于培养罐中。

首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后将菌落切下并置于无菌培养罐中，加入适宜的培养基，并密封培养罐。

最后将培养罐保存在适宜的温度和湿度下。

这种方法适用于菌种的短期保藏。

5.低温干燥保藏：将菌种保藏于低温干燥器中。

首先，将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。

然后将菌落切下并置于低温干燥器中，通过低温干燥将其保存起来。

这种方法适用于一些低温耐受性较强的食用菌。

总结起来，以上是几种食用菌菌种保藏的方法。

选择合适的方法可根据菌种的特性、用途和预期保藏时间来确定。

在进行菌种保藏时，要注意无菌操作，避免菌种的污染或变异，并在适宜的环境条件下保存。

这将有助于保持菌种的营养价值和生物特性，以及保证其在后续使用中的质量。

常用的菌种保藏方法及其优缺点菌种保藏是微生物学研究中的重要环节，其目的是长期保存各类菌种以便于日后的使用和研究。

常用的菌种保藏方法有冷冻保存、制备淡防冻溶液、干燥保存、液氮冷冻保存、冷冻干燥保存等。

下面是这些方法的优缺点。

1.冷冻保存：冷冻保存是通过将菌种保存在低温下，在液氮冷冻罐中或冷冻干燥保存，常见的保存温度为-80°C或液氮温度。

其优点是保存方便，菌种保存时间相对较长；缺点是保存设备和条件要求较高，保存过程中会有一定的细胞破坏。

2.制备淡防冻溶液：制备淡防冻溶液是指制备一种富含保护物质的冻存液，然后将菌种悬浮于其中，并在-20°C或-80°C保存。

其优点是相对简单，易于操作以及相对较长的保存时间；缺点是需要特定的冻存液配方和保存温度。

3.干燥保存：干燥保存是将菌种培养物在低温和低气压下干燥，然后保存于干燥剂中。

其优点是较为简单，设备要求低，保存时间较长；缺点是保存后重新复苏的成功率较低，保存过程中可能会有一定的细胞破坏。

4.液氮冷冻保存：液氮冷冻保存是将菌种保存在极低温的液氮中，常见的保存方法是将菌种培养物按一定比例混合液氮与甘油，然后使用液氮保存。

其优点是保存时间极长，细胞破坏较小；缺点是保存设备和条件要求较高。

5.冷冻干燥保存：冷冻干燥保存是将菌种首先冷冻，然后通过真空干燥的方法去除水分，最后保存在干燥剂中。

其优点是保存效果稳定，保存时间长；缺点是设备要求较高，操控难度大。

总的来说，不同的菌种保藏方法有各自的优点和缺点。

选择合适的方法应根据菌种的特性、实验室的设备和条件、保藏期限以及实验目的等因素综合考虑。

同时，在进行菌种保藏时，应严格控制一系列的操作步骤，包括消毒、菌种的培养与保存温度的选择、保存条件的监测等，以确保菌种的质量和纯度，以及保存结果的可靠性。

菌种的保藏方法菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。

菌种保藏的目的是保存菌种的遗传信息、保持菌种的稳定性和纯度，为后续的研究提供保障。

本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。

1. 冻干法冻干法是一种常用的菌种保藏方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻干管吸取菌液。

将冻干管放入液氮中，冷冻至-80℃，待冻干后，将管子密封，保存在-80℃的冰箱中。

冻干菌株可以保存多年，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

2. 静态液氮法静态液氮法是一种高效、长期保存菌株的方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将菌液加入等量的甘油（最终甘油浓度为20%），混合均匀后分装到冻存管中。

将冻存管放入液氮中，冷冻至-196℃，保存在液氮罐中。

静态液氮保存的菌株可以保存数十年，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

3. 冷藏法冷藏法是一种简单、易行的菌株保存方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将冻存管放入4℃的冰箱中保存。

冷藏法保存的菌株可以保存数个月，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

4. 活体保存法活体保存法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将菌液加入等量的甘油（最终甘油浓度为20%），混合均匀后分装到冻存管中。

将冻存管放入冰箱中，温度为4℃-8℃。

活体保存法可以保存数个月，但是需要注意菌株的密封性和保存温度。

5. 长期培养法长期培养法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。

将菌株培养在适宜的培养基上，生长到适当的密度后，用无菌的冻存管吸取菌液。

将菌液加入等量的甘油（最终甘油浓度为20%），混合均匀后分装到冻存管中。

将冻存管放入冰箱中，温度为4℃-8℃。

每隔一段时间，将菌株转移到新的培养基上进行培养，以保持菌株的纯度和稳定性。

总之，菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。

简述菌种保藏的几种方法及条件。

菌种保藏是重要的生物资源的保护和利用过程，其主要方法有：
一、冷冻法。

冰冻法是最常用的保藏菌株的方法，也是目前最理想的保藏方法之一，其主要原理是将活菌体放入冰冻室，温度由常温降至-80℃，使得菌种活动受到抑制，在-80℃的状态下可以长期保存。

二、液氮法。

液氮法是一种依靠低温和高压技术保存菌种的方法，主要是将活菌体置入液氮容器中，使其处于-195℃的极低温状态。

三、干燥法。

干燥法是将活菌体及高浓度营养培养基同时干燥，使其中的水份完全蒸发而获得半干燥的状态，这种状态下可以防止菌种的增殖。

四、水银法。

水银法是一种利用活菌体对水银的耐受性，将活的菌体悬浮在7%的水银中的保存方法。

保藏菌种的条件：
1、环境温度应该控制在0~4℃，并保持温度稳定。

2、控制保藏过程中的湿度，干燥法中的湿度应在10%～15%之间，而冷冻、液氮保藏则要求保证容器中有足够多的液氮，避免菌种因温度过高而复苏。

3、控制光照，避免菌株遭受接触紫外线的伤害、褪色、衰退和增强其致病性等。

4、控制空气中的致病因子；
5、定期检测样品的质量，确保其始终处于较好的保藏状态。

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菌种安全保藏方法菌种安全保藏方法点击：23食用菌由于生产投入少，经济效益高，近年来在农村兴起了食用菌生产热潮。

生产中食用菌菌丝繁殖快，容易老化，菌种保藏更难。

下面介绍七种简单易行的菌种保藏方法供广大农户参考：蒸馏水法适用于平菇、金针菇、香菇的苗种。

1、保藏平菇、金针菇菌种先将八成熟待保藏试管菌种移入接种箱内灭菌后，用注射器从试管栓内注入蒸馏水，将培养基面全部淹没至管口2厘米为止。

管口用矿蜡封闭，常温下置于阴凉处立放可以保藏1～1.5年。

2、保藏香菇、木耳菌种，用150×15毫米的指型管将培养至7成熟的固体或半固体试管种在接种箱内无菌操作下，放人25×200毫米的大试管内，向大试管内注入蒸馏水至管口1厘米处，封口用橡皮栓包好，并用矿蜡加固密封，置于阴凉处。

木耳可保藏7～8个月，香菇可保藏9～12个月。

此法在自然温度下也可以保藏其他菌种。

尿素暂存法在避光、干燥通风良好的地方放置袋装尿素，将试管菌种主体埋在尿素颗粒中，试管口露在外面，可保藏菌种活力30天之多。

此法在恒定低温环境下即可进行。

液体石蜡保藏法选用化学液体石蜡，高压灭菌后放入40℃恒温箱中数小时或干燥器中数日，用无菌吸管或注射器吸取液体石蜡注入菌种试管。

注入量应高出斜面尖端1厘米左右，管口塞上棉塞并用石蜡封好。

直立保藏在清洁、干燥、凉爽的低温处可以保藏5年。

麸皮保藏法取一定麸皮加水或营养液后拌匀即可备用。

将水麸皮装入试管经高压灭菌后拌入菌种，放在适温下培养，待菌丝体发育好后将试管放入室温下进行干燥。

然后在20℃以下干燥处保藏，可保藏3～5年。

生理盐水保藏法将菌种接入马铃薯培养液中，每250毫升三角瓶装60毫升养液，振动培养液或每天摇动5～10次，培养5～7天，然后将形成的菌丝球吸入装有5毫升无菌生理盐水的试管中，每管约移入4～5个菌丝球，塞上棉塞，用蜡封好管口。

低温可保藏1年。

麦粒保藏法取优质小麦淘洗后浸入20℃水中泡5小时，稍晾干后装管。

在现代生物学研究和生物技术应用中，菌种保藏是至关重要的环节。

恰当的菌种保藏方法能够确保菌种的活性、遗传稳定性和可用性，为科学研究的持续开展以及相关产业的发展提供坚实的基础。

本文将重点介绍实验室中最常用的五种菌种保藏方法，深入探讨它们各自的特点、适用范围以及操作要点。

一、低温冷冻保藏法低温冷冻保藏法是目前最为广泛应用且效果较为可靠的菌种保藏方法之一。

其基本原理是将菌种置于超低温环境（通常为液氮温度，即-196℃）下，使菌种细胞处于极度冷冻的状态，从而抑制其代谢活动，达到长期保存的目的。

该方法具有诸多显著优点。

低温能够极大地减缓细胞的生理活动，几乎使其处于完全停滞状态，从而有效地延长菌种的存活时间。

低温冷冻保藏对菌种的遗传稳定性影响较小，经过长期保存后，菌种的特性通常能够较好地保持。

操作相对简单，只需将菌种制备成适宜的冷冻保存液，然后置于液氮罐中即可。

在具体操作时，首先要选择合适的冷冻保存液。

常用的冷冻保存液一般含有一定比例的保护剂，如甘油、二甲基亚砜等，它们能够降低细胞内冰晶的形成对细胞的损伤。

制备好冷冻保存液后，将菌种接种到冷冻保存液中，制成菌悬液。

将菌悬液分装到合适的冷冻管中，迅速放入液氮罐中进行保存。

在液氮罐中，要定期检查液氮的液位，确保菌种始终处于适宜的低温环境中。

低温冷冻保藏法适用于大多数微生物菌种的长期保存，尤其对于那些对温度敏感、容易变异的菌种，如细菌中的一些致病菌、真菌中的丝状真菌等，具有良好的保藏效果。

然而，该方法也存在一些不足之处，例如液氮的成本较高，液氮罐的储存空间有限，以及在取出菌种进行复苏时可能存在一定的风险等。

二、干燥保藏法干燥保藏法是利用菌种在干燥环境下代谢活动受到抑制的原理来实现保藏的方法。

常见的干燥保藏法包括沙土管保藏法、滤纸保藏法等。

沙土管保藏法是将菌种接种到无菌的沙土中，然后将沙土管置于干燥器中进行干燥保存。

该方法具有操作简便、成本低廉的特点。

在干燥过程中，菌种细胞内的水分逐渐散失，代谢活动减缓，从而达到保藏的目的。

菌种保藏储存方法大全菌种保藏储存方法大全食用菌由于营养价值高，生产成本低，经济效益高，近几年在农村兴起了生产热潮，但是，生产中食用菌菌丝繁殖快，容易老化。

本文根据实际情况介绍了7种简单易行的菌种贮藏方法供广大农户参考。

1.麦粒贮藏法取优质小麦淘洗后浸入20℃水中泡5小时，稍晾干后装管。

装入量以管长的l/4~1/3为宜。

将装有麦粒的试管灭菌后趁热摇散，冷却后接入菌丝体，在适温下培养至大多数麦粒上出现稀疏菌丝时，终止培养。

菌种可置于20℃以下干燥处保藏1～2年。

2.冰箱贮藏法将已经长好的试管菌种放于冰箱内储存，置于保鲜层保藏，能保证7个月菌种不退化。

3.生理盐水贮藏法将菌种接入马铃薯培养液中，每250ml三角瓶装60ml培养液，振动培养液或每天摇动5～10次，培养5～7天，然后将形成的菌丝球吸入装有5ml无菌生理盐水的试管中，每管约移入4～5个菌丝球，塞上棉塞，用蜡封好管口。

低温可保藏1年。

4.尿素暂存法在避光、干燥、通风良好的地方放置袋装尿素，将试管菌种主体埋在尿素颗粒中，试管口露在外面，可贮藏菌种活力30天之多。

此法在恒定低温环境下即可进行。

5.液体石蜡贮藏法选用化学液体石蜡，高压灭菌后放入40℃恒温箱中数小时或干燥器中数日，用无菌吸管或注射器吸取液体石蜡注入菌种试管。

注入量应高出斜面尖端1cm，管口塞上棉塞并用石蜡封好。

直立贮藏在清洁、干燥、凉爽的低温处，可以贮藏5年。

6.蒸馏水法 //农村致富经网 //适用于平菇、金针菇、香菇的菌种。

在自然温度下也可以贮藏其他菌种。

6.1贮藏平菇、金针菇菌种先将8成熟待贮藏试管菌种移入接种箱内后，用注射器从试管栓内注入蒸馏水，将培养基面全部淹没至管口2cm为止。

管口用矿蜡封闭，常温下置于阴凉处立放，可以贮藏1～1.5年。

6.2贮藏香菇、木耳菌种用15015mm的指型管将培养至7成熟的固体或半固体试管种在接种箱内无菌操作下，放人25200mm的大试管内，向大试管内注入蒸馏水至管口1cm处，封口用橡皮栓包好，并用矿蜡加固密封，置于阴凉处。

一、石蜡油低温保藏法本方法的原理是在长好的斜面菌上覆盖灭菌的液体石蜡，达到菌体与空气隔绝，使菌处于生长和代谢停止状态，同时石蜡油还防止水分蒸发，在低温下达到较长期的保藏菌种的目的。

保藏温度要求在-4～4℃下。

液体石蜡法适用于不产孢子的菌种。

具体操作是：菌种为斜面培养菌种，斜面不宜过长；选择纯净优质石蜡油，置三角烧瓶中经过121℃高压蒸汽灭菌1～2h，将其放烘箱中(160℃左右)干热处理，去除灭菌时渗入的水分，待石蜡油变得清澈透明后冷却即可加入斜面，斜面上不能出现气泡，液蜡添加量以高出斜面顶部约1cm为宜。

二、甘油管冷冻保藏法1．试验方法介绍本法也是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。

其方法是，将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。

将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液(108～1010/ml)。

取1ml灭菌甘油放入与甘油充分混匀，使甘油浓度约为10%-30%，于-70℃下冻存。

-20℃保存时间较短。

或采用体积比为8：2的甘油－生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。

2．效果该法适用于一般细菌的保存，同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种，适用范围广，操作简便，效果好，无变异现象发生。

甘油－生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液，其原因可能是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用，且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分，从而更好地保护了待保存的菌株。

三、真空冷冻干燥法1．试验原理真空冷冻干燥保藏法是兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素，除不宜于丝状真菌的菌丝体外，对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用，不宜用冻干法保存的微生物不到2%。

冷冻干燥法是在低温下快速将细胞冻结，然后在真空条件下干燥，使微生物的生长和酶活动停止。

为了防止在冷冻和水分升华过程中对细胞的损害，要采用保护剂来制备细胞悬液，使菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质，通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。

菌种保藏的三大原理
菌种保藏的三大原理包括：冻存、干燥保藏和液氮保藏。

1. 冻存：将菌种培养物在低温条件下迅速冷冻保存。

冻存一般使用液氮或深冷冰箱等低温设备进行，通过快速降温减少细胞内冻结结晶的形成，以减少冻结对细胞的损伤。

冻存适用于大多数细菌和真菌。

2. 干燥保藏：将菌种培养物在无水或低湿度条件下进行干燥保存。

干燥保藏可以通过直接晾干或使用干燥剂等方法实现。

干燥保藏可以有效地抑制微生物生长和代谢，并减缓其老化速度。

干燥保藏适用于许多细菌、真菌和酵母等微生物。

3. 液氮保藏：将菌种培养物在低温液氮中进行保存。

液氮保藏是最常用的长期菌种保藏方法之一，可以将菌种长期保存数十年甚至更久。

液氮保藏利用液氮的低温和绝缘性质，有效防止细胞内的代谢反应和酶活性，并减缓噬菌体感染、遗传变异和突变等现象。

液氮保藏适用于许多微生物，包括细菌、真菌、酵母等。

这三种保藏方法可以根据具体菌种的特点和需求选择使用，以确保菌种的长期保存和使用。