内镜活检食管癌组织E—CD蛋白的检测及其意义

王斌等．内镜活检食管癌组织Ｅ—ＣＤ蛋白的检测及其意义　・６９・　

［文章编号］１００６－９６７４（２００２）０２—００６９—０２　

内镜活检食管癌组织Ｅ—ＣＤ蛋白的检测及其意义　

王斌　，徐少勇　，　邓长生　

（１竿　荧　管　消化内科，湖北十堰４４２０ｏ０；２武汉大学中南医院消化内科）　

［摘要］：日的探讨内镜活检组织Ｅ—ＣＤ检测对食管癌浸润转移的诊断价值。方珐　采用免疫组织化学ＬＳＡＢ　技术检测食管癌活检组织和对照组中Ｅ—ＣＤ的表达，分析其表达与癌侵袭转移的关系。结果Ｅ—ＣＤ蛋白表达与　

食管癌患者年龄、性别、发生部位无关（Ｐ＞０．０５）；与食管癌细胞分化程度相关（Ｐ＜０．０５），与食管癌浸润深度、淋　巴结转移密切相关（Ｐ＜０．０１）。结论Ｅ—ＣＤ与肿瘤侵袭转移相关，食管癌活检组织中Ｅ—ＣＤ蛋白表达可以作为　

预测癌浸润转移潜能标志之一。　［关键词］食管肿瘤；Ｅ—ＣＤ；侵袭转移　

［中图法分类号］　Ｒ７３５．１　［文献标识码］Ａ　

Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｄｈｅｓｉｏｎ　Ｍｅｌｅｃｕｌｅ　Ｅ－・ＣＤ　ｉｎ　Ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　Ｓｑｎａｍｏｕｓ　Ｃｅｌｌ　Ｃａｒｄｎｏｍ　Ｐａｔｉｅｎｔｓ　Ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ　Ｅｓｏｐｈａｇｏｓ－　ｃｏｐｙ　ａｎｄ　ｉｔ§Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ＷＡＮＧ　Ｂｉｎｇ，ＸＵ　Ｓｈａｏ—ｙｏｎｇ，ＤＥＮＧ　Ｃｈｎｇ—ｓｈｅｎｇ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，　

ｔｈｅ　Ｐｅｏｐｌｅ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｓｈｉｙａｎ　Ｃｉｔｙ，Ｙｕｎｙａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ．Ｓｈｉｙａｎ　４４２０００）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：　Ｏｂｊｅｏｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｅ—ＣＤ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｔ￣ｌｕａｎｏｔｌ８　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉ．　

ｎｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ　ｅｓｏｐｈａｇｏｏｃｏｐｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｅ—ＣＤ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｗｅｒ℃ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｉｎ　ｕｎｄｅｒｇｉｏｎｇ　ｅｓｏｐｈａｇｏｓｅｏｐｙ　ｔｉｓ・　ｓｕｅｓ　ｆｒｏｍ　６３　ｅｓｏｐｈａ￣ａｌ　８ｑｌｌａｍｏｕ８　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄ　ｉｎ　ｎｏｒｍａｌ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｗｉ出ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｉ＿ＳＡＢ　ｍｅｔｈ－　ｏｄｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｅ—ＣＤ　Ｗａｓ　ｎｏｔ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ａｇｅ，ｓｅｘ，ｌｏｃａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　８ｑｕａｍｏｕ８　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　（Ｐ＞０．０５）；Ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　Ｗａｓ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｌｏｗ　Ｅ—ＣＤ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｅｌｕｌａｒ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｓｑｕ・　

ｍｏｉｌ８　ｃｅｌｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ（Ｐ＜０．０５）；Ｔｈｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　Ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｅ—ＣＤ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｉｎｖａｓｉｏｎ，ｍｅｔａｓ・　ｔａｓｉｓ（Ｐ＜０．Ｏ１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＬｏｗＥ—ＣＤ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｗ髓ｒｅｌａｔｅｄｔｏｉｎｖａｓｉｏｎａｎｄｍｅｔａｓｔａｓｉｓｉｎ　ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　８ｑｕｓｇｎｏｕ８ｃｅｌ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇ　ｅｓｏｐｈａｇｏｓｃｏｐｙ．ａｎｄ　ｃａｎ　ｈｅ　ｒｅＳ＝ｄｅｄ　ａｓ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｐｔａｎｔ　ｓｉｇｎ　ｏｆ　ｉｎｖａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ　ｎｅｏｐｌａｓｍｓ；　Ｅ—ＣＤ；　Ｉｎｖａｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．　

寻找食管癌转移相关的生物指标多年来一直是　

食管癌基础与临床研究主题之一，近年来研究提示，　

Ｅ一钙粘附素（Ｅ—Ｃａｄｈｅｒｉｎ，Ｅ—ＣＤ）与多种肿瘤生　

长、侵袭转移和预后有关¨Ｊ，但与食管癌侵袭转移　

的相关报导少见。本研究利用免疫组织化学ＬＳＡＢ　

法研究食管癌活检组织Ｅ—ＣＤ表达及与临床和病　

理的关系，评价Ｅ—ＣＤ对食管癌浸润、转移的预测　

价值。　

１材料与方法　

１．１　材料　

１９９９年１月一２００２年１月，在本院经内镜诊断　

并经病理证实的食管癌活检标本６３例，所有食管癌　

患者均经手术治疗，肿瘤组织学类型，浸润深度、转　

移程度参照国际抗癌联盟（ＵＩＣＣ）食管癌ＴＮＭ分期　

标准　Ｊ。男性４４例，女性１９例，年龄３６—７８（平均　

［作者简介］　王　斌（１９６８一），男，湖北丹江口人，讲师，硕　士，１９９２年毕业于郧阳医学院临床医学专业　５４．８）。另取食管粘膜良性组织作对照３Ｏ例。　

１．２方法　

取３Ｏ例食管粘膜活检良性组织（对照组，包括　

食管炎１８例，食管粘膜糜烂９例、食管不典型增生　

４例）和活检食管鳞癌标本６３例，经用１０％福尔马　

林固定，石蜡包埋。鼠抗人单克隆抗体Ｅ—ＣＤ，马　

抗鼠［ｇＧ，ＬＳＡＢ等试剂均匀为ＤＡＫＯ公司产品，采　

用ＬＳＡＢ法、ＡＥＣ显色、无醇苏本素复染胞核。常规　

石蜡切片置６ｏ℃烤箱５—６　ｈ，有利于石蜡切片脱　

水；ＰＢＳ洗３次，每次３　ｍｉｎ，置高压锅加热至沸腾２　

ｍｉｎ，冷却后用自来水冲洗，ＰＢＳ洗２次，一抗４℃过　

夜，其它步骤按ＬＳＡＢ法操作技术进行。ＤＡＢ染色，　

苏木素复染，采用ＰＢＳ代替一抗作为阴性对照。　

１．３结果判断　

凡细胞膜或（和）细胞浆呈现棕色黄色染色反　

应为阳性。高倍镜下随机计数５个视野，以１　０００　

个瘤细胞中的阳性数百分比。阴性（一），未发现阳　

性瘤细胞；弱阳性（＋），阳性瘤细胞数＜２５％；阳性　

（＋＋），阳性瘤细胞数２５％一一７５％；强阳性（＋＋　维普资讯 http://www.cqvip.com ・７Ｏ・　郧阳医学院学报（Ｊ　ＹＭＣ）２００２年４月．２１（２）：６９　

＋），阳性瘤细胞数＞７５％。　

１．４统计学处理　

采用ｘ　检验及四格表确切概率法。　

２　结果　

２．１　Ｅ—ＣＤ在正常食管鳞状上皮和不典型增生长　

皮的表达　

在３Ｏ例食管粘膜良性组织中Ｅ—ＣＤ均呈阳性　

表达，染色主要位于近基底层１／３～２／３，呈膜性表　

达为主，向上皮浅表层过渡减弱或成为阴性。　

２．２　Ｅ—ＣＤ在食管癌活检标本的表达　

２．２．１　Ｅ—ＣＤ表达部位：６３例食管癌中，Ｅ—ＣＤ蛋　

白阳性表达２９例，以细胞膜性表达为主，部分呈细　

胞浆或细胞膜和细胞浆混合表达。阳性表达的癌　

巢，其边缘部细胞较癌巢中央细胞表达强，癌巢中央　

部细胞或角化区域减弱甚至呈阴性表达。　

２．２．２　Ｅ—ＣＤ蛋白表达与食管癌患者的临床病理　

关系：由表１可见Ｅ—ＣＤ蛋白表达阳性率与食管癌　

患者年龄、性别及肿瘤部位无相关性（Ｐ＞０．０５）；与　

食管癌分化程度有关（Ｐ＜０．０５），分化低食管癌，Ｅ　

—ＣＤ阳性表达率低；与食管癌浸润深度及淋巴结转　

移密切相关（Ｐ＜０．Ｏ１），浸润深及淋巴结转移食管　

癌中Ｅ—ＣＤ表达阳性率低。　

表１　Ｅ—ＣＤ与食管癌患者的临床病理关系　

３讨论　

Ｅ—ＣＤ是一种分子量为１２０　ｋＤ的跨膜蛋白，　介导细胞的粘连作用，主要由上皮细胞表达。人们　

推测肿瘤细胞依赖Ｅ—ＣＤ形成和保持肿瘤组织的　

结构，Ｅ—ＣＤ的表达下降或功能缺失使癌细胞与邻　

近细胞间的粘附作用降低，导致肿瘤细胞的活动能　

力或活动范围增强，从而增强癌细胞的浸润和转移　

能力。体外实验发现，将Ｅ—ＣＤｃＤＮＡ转染高度浸　

润的癌细胞后，其浸润能力消失，将Ｅ—ＣＤ的反义　

ｍＲＮＡ导人癌细胞内阻断Ｅ—ＣＤ的表达，又可重新　

发浸润反应　Ｊ。Ｅ—ＣＤ的下调表达与人类胃癌、结　

肠癌、膀胱癌等多种恶性肿瘤转移密切相关，高分化　

癌Ｅ—ＣＤ表达水平较高，而低分化或未分化表达水　

平低或完全消失　。　

本研究结果显示在食管粘膜良性活检组织中Ｅ　

—ＣＤ均呈阳性表达，而在活检癌组织中Ｅ—ＣＤ的　

表达明显减弱，并显示分化越低食管癌组织中Ｅ—　

ＣＤ表达水平低、差异显著，可以认为肿瘤细胞的Ｅ　

—ＣＤ表达减弱或缺失可能是细胞恶性转化的结果。　

本研究结果还表明，在食管癌活检组织中Ｅ—ＣＤ表　

达减弱与其浸润深度及淋巴结转移密切相关，可以　

认为Ｅ—ＣＤ表达减弱对判断食管癌浸润深度及淋　

巴结转移是一个敏感指标。这与Ｉｍａｄａ—ｓ　５　等对　

食管癌术后标本Ｅ—ＣＤ免疫组织化学检测结果相　

一致，即Ｅ—ＣＤ表达率较低，发生食管壁浸润、淋巴　

管浸润和淋巴结转移的机率越高，提示食管癌活检　

组织Ｅ—ＣＤ表达可作为食管癌发生发展过程中一　

项监测指标。　

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［收稿日期］２００１—１１—２６　维普资讯 http://www.cqvip.com