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抗MDV-1 VP22羧基端单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定

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ＣＶＩ ９ ８ ８ ／ Ｒｉ ｓ Ｄ ｅ ｎ ｓ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｏ ｆ Ｍａ ｒ ｅ ｋ ’ Ｓ ｄ ｉ ｓ ｅ ａｓ ｅ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｓ ｅ ｒ ｏ ｔ ｙ ｐ ｅ １ ．
［ 关键 词 ］ 马 立 克 氏病 病 毒 ；Ｖ Ｐ ２ ２羧 基 端 ；单 克 隆 抗体 ；
特 性 鉴 定
［ 中图分类号 ］ Ｒ ３ ９ ２ ． １ １
［ 文献标识码 ］ Ａ
ＭＥ Ｔ Ｈ ＯＤ Ｓ：Ｃ ａ ｒ ｂ ｏ ｘ ｙ ｌ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｕ ｓ Ｏ ｆ ＣＶ Ｉ ９ ８ ８ Ｖ Ｐ ２ ２ （ ９ ４ ａ ａ～
２ ４ ３ ａ ａ ）ｗ ａ ｓ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｅ ｄ ｉ ｎ ｐ ｒ ｏ ｋ ａ ｒ ｙ ｏ ｔ ｉ ｃ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ．ｍＡ ｂ ｓ ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｓ ｔ
Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎａ ｒ ｙ Ｍ ｅ ｄ ｃ ｉ ｎ ｅ， Ｙａ ｎ ｇ ｚ ｈｏ ｕ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ， Ｙａ ｎ ｇ ｚ ｈｏ ｕ ２ ２５ ０ ０９， Ｃｈｉ ｎ ａ
ｍ Ａ ｂ呈现整个 单 层 的细胞 核荧 光。Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 和 Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ 分
达产物 Ｇ Ｓ Ｔ — Ｖ Ｐ ２ ２ Ｃ 。将该表达产 物切胶 免疫小 鼠 ， 利用 杂交
瘤 技术 制备抗 ＭＤ Ｖ 一 １ Ｖ Ｐ ２ ２ Ｃ的 ｍ Ａ ｂ ， 并通过 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ、间接免 疫荧光 （ Ｉ Ｆ Ａ） 、Ｗｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｎ ｂ ｌ ｏ ｔ 鉴定其 特性 。结果 ：获得 了 ２株 ３ Ｆ ７ 、 ４ Ｅ ４ 。Ｉ Ｆ Ａ鉴定 表明 ， 两株 ｍ Ａ ｂ均能与感染 ＭＤ Ｖ 一 １的成 纤 维细胞反应 ， 其 中，３ Ｆ ７ ｍ Ａ ｂ染色 呈现 ＭＤ Ｖ空斑 ，而 ４ Ｅ ４
抗 ＭＤ Ｖ ． １ Ｖ Ｐ ２ ２羧 基 端 单克 隆抗 体 的 制备 与 免疫 学 特性 鉴定
宋翠 萍 ，陈鸿 军 ， 秦 爱建 ，张晨 飞 （ 扬州大学兽医学院 江苏省动物预防医学重点实验室， 江苏 扬州 ２ ２ ５ ０ ０ ９ ）
Ｐｒ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｉ ｍｍ ｕ ｎｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｃ ｈａ ｒ ａ ｃ － ｔ ｅ ｒ ｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｍｏ ｎ ｏ ｃ ｌ ｏ ｎａ ｌ ａ ｎｔ ｉ ｂｏ ｄ ｉ ｅ ｓ
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Ｉ Ｓ Ｓ Ｎ １ ０ ０ ７— ８ ７ ３ ８细胞 与 分 子 免疫 学 杂 志 （ Ｃ ｈ ｉ ｎ Ｊ Ｃ ｅ ｌ ｌ Ｍｏ ｌ Ｉ ｍｍ ｕ ｎ ｏ １ ） ２ ０ ０ ７ ， ２ ３ （ ３
２ ４ ９
・
论Hale Waihona Puke ・ 文 章编 号 ：１ ０ ０ ７— ８ ７ ３ ８ （ ２ ０ ０ ７ ） ０ ３— ０ ２ ４ ９— ０ ４
Ｓ Ｏ Ｎ Ｇ Ｃ ｕ ｉ － ｐ ｉ ｎ ｇ， Ｃ Ｈ Ｅ ＮＨ ｏ ｎ ｇ － ｊ ｕ ｎ ， Ｑ Ｉ ＮＡ ｉ － ｊ ｉ ０ ｎ ， Ｚ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ Ｃ ｈ ｅ ｎ － ｆ ｅ ｉ
Ｋｅ ｙ Ｌ ａ ｂ ｏ ｆ Ｊ ｉ ａ ｎ ｇ ｓ ｕ Ｐ ｒ ｅ ｖ ｅ ｎ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｖｅ ｔ ｅ ｒ ｉ ｎ ａ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ， Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｏ ｆ
析表 明 ， ３ Ｆ ７能与杆状病毒表达 的 Ｖ Ｐ ２ ２反应 ， ４ Ｅ ４不具备该 特性 。对 ３ Ｆ ７ ｍ Ａ ｂ进一步鉴定 ， 确定了该 ｍ Ａｂ针对的具体位
置在 ９ ４～１ ９ ３ ａ ａ处 ， 是蛋 白转导域 的预测位置。结论 ： 成功地 制备 了抗 ＭＤ Ｖ 一 １ Ｖ Ｐ ２ ２ Ｃ的 ｍ Ａ ｂ ，为深 入研 究 Ｖ Ｐ ２ ２蛋 白的转 导功能提供 了有用 的试剂 。
ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｓ ｔ ＶＰ２ ２ ｃ ａ ｒ ｂｏ ｘ ｙ ｌ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎｕ ｓ ｏ ｆ 可稳定 分泌抗 ＭＤ Ｖ 一 １ Ｖ Ｐ ２ ２ Ｃ的 ｍＡ ｂ的杂交 瘤细胞 ，命名 为 Ｍａ ｒ ｅ ｋ’ Ｓ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｓ ｅ ｒ ｏ ｔ ｙ ｐｅ １
ｃ ｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｚ ｅ ｄ ｂ ｙ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ，ｉ ｎ ｄ ｉ ｒ ｅ ｃ ｔ ｆ ｌ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ａ ｓ ｓ ａ ｙ（ Ｉ Ｆ Ａ）
ＶＰ ２ ２ ｗｅ ｒ ｅ ｐ ｒ ｅ ｐ ａｒ ｅ ｄ ｂ ｙ ｈ ｙ ｂ ｒ ｉ ｄ ｏｍａ ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ｆ ｒ ０ ｍ ＢＡＬ Ｂ ／ ｃ ｍｉ ｃ ｅ ｉ ｍｍｕ ｎ ｉ ｚ ｅ ｄ ｗｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｆ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ＧＳ Ｔ— ＶＰ ２ ２ Ｃ ａ ｎ ｄ
［ Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ａ Ｉ ￣ Ｉ ：Ｔ ０ ｐ ｒ ｅ ｐ ａ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ ｃ ｈ ａ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ｚ ｅ ｍ ｏ ｎ ｏ —
ｃ ｌ ｏ ｎ ａ ｌ ａ ｎ ｔ ｉ ｂ ｏ ｄ ｉ ｅ ｓ（ ｍＡ ｂ ）ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｓ ｔ Ｖ Ｐ ２ ２ ｃ ａ ｒ ｏｘ ｂ ｙ ｌ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｕ ｓ ｏ ｆ
血 清 Ｉ型 马立 克 氏病病 毒 （ Ｍａ ｒ ｅ ｋ ’ ｓ ｄ ｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｖ ｉ ｒ ｕ ｓ ｓ ｅ ｒ ｏ ｔ ｙ ｐ ｅ １ ，ＭＤ Ｖ 一 １ ）的 Ｖ Ｐ ２ ２由 Ｙ ａ ｎ ａ ｇ ｉ ｄ ａ等 从
Ｍ Ｄ Ｖ 一 １ Ｇ Ａ株 的一段长 为 ８ ． ４ ｋ ｂ的 Ｂ ａ ｍＨ Ｉ — Ｅ ｃ ｏ Ｒ Ｉ

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猪细小病毒核衣壳VP2蛋白单克隆抗体的制备及部分特性鉴定

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Ａｂ ｔａ ｔ ｓｒ ｃ ：Ｔｈ ｅＢＡＬ ｃｍｉｅｗｅ ｅｉ Ｂ／ ｃ ｒ ｍｍｕ ｉｅ ｔ ｕ ｉ ｅ ＰＶＶＰ ． ｉｅｈ ｂ ｉｏ ｅｌ ｉｅ ， ａ ｄ ｎ ｚ ｄ ｗｉ ｐ ｒｆ ｄ Ｐ ｈ ｉ ２ Ｆ ｖ ｙ ｒｄ ｍａ ｃ ｌ ｌ ｓ ｎ ｍｅ ｎ
２ Ｄ５， １ ２Ｂ４， Ｃ８ ｎ ３， ｔ ａ ｌ ｅ ｒ ｔｎ ｎｔ— Ｆ １， ３ ａ ｄ １Ｈ ｓ ｅ ｄｉｙ ｓ ｃ ｅ ｉ ｇ ａ ｉＰＰＶ ＶＰ２ Ｍ ｅ ｂ Ａ ｓ， ｗｅ ｅ ｏ ａｎｅ ． Ｔ ｈｅ ｃ ｏ ｏｓ ｍ ａ ｒ ｂｔ ｉ ｄ ｈｒ ｍ ｏ ｌ ａｅａ ｅｎ ｖ ｒ ｇ ｕｍ ｂｅ ｆ ｈｙ ｉ ｏ ａ ｃ ｌｓ ｗ ａ ７～ １ ２， ｈｅ ２ ５ ｅ ｏ ｅ ｏ Ｉ Ｇ ２ ｕ ｙ ｅ ａ ｄ ｏ ｈｅ ｓ ｔ ｇＭ ｒｏ ｂｒｄ ｍ ｅ ｌ ｓ８ ０ ｔ Ｄ ｂ ｌ ｎｇ ｄ ｔ ｇ ａ ｓ ｂｔ ｐ ｎ ｔ ｒ ｏ Ｉ ｓ ｔ ｅ Ｗ ｅ ｔ ｒ ｏ ｓ ａ ｎｄ ｃ ｔ ｄ ｔ ｔｔ ｃ ｂ ａ ｅ ｏ ｉｅ ＰＰＶ Ｖ Ｐ２．Ｔ ｈｅｒ ｓ ｌ ｆＩ ｕｂ ｙｐ ． ｓ ｅ ｎ ｂｌ ｔａ ｓ ｙ ｉ ｉ ａ ｅ ｈａ ｈｅ Ｍ Ａ ｓ ｃ ｎ ｒ ｃ ｇｎ ｚ ｅ ｕ ｔｏ ＦＡ ｎ பைடு நூலகம் ｔ ｄ ｉ ｄｉａ ｅ
Ｄｅ ｅ ｏ ｖ ｌ ｐｍ ｅ ｔｏ ｏ ｃ ｏ ｌａ ｔｂ ｄ ｅ ｇ ｉ ｓ ｎ ｆ ｍ ｎｏ ｌ ｎａ ｎ ｉ ｏ ｉ ｓ ａ ａ ｎ ｔ ＶＰ２ ｐｒ ｔ ｉ ｆＰＰＶ ｏ ｅｎ ０
ＬＩ ｕ ｆ ｎ，ＬＩＹ ｉ ｉ Ｕ Ｘｉ —ｅ — ｎｇ
（ ｌ ｇ ｆＶｅ ｅ ｉ ａ ｙ Ｍ ｅ ｉｉ ｅ Ｃｏ ｌ ｅ ｏ ｔ ｒ ｒ ｄ ｃｎ ，Ｎｏ ｔ ｅ ｓ ｒｃ ｌｕ ａ ｉ ｅ ｓｔ ｅ ｎ ｒ ｈ ａ ｔ Ａｇ ｉ ｕ ｔ ｒ ｌ Ｕｎ ｖ ｒ ｉ ｙ，Ｈ ａ ｂ ｎ １ ０ ３ ｒ ｉ ５ ０ ０，Ｃｈ ｎ ） ｉａ
抗人胰岛素样生长因子-1单克隆抗体的制备与鉴定

抗人胰岛素样生长因子-1单克隆抗体的制备与鉴定

抗人胰岛素样生长因子-1单克隆抗体的制备与鉴定毕立清;刘莉;程蕴琳;施有为;仇镇宁;姜苏蓉【期刊名称】《南京医科大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2008(028)006【摘要】目的:制备稳定分泌抗人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的mAb进行鉴定.方法:用纯化后的hIGF-1重组蛋白免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备抗hIGF-1的mAb,用Western blot法鉴定mAb的特异性,用间接ELISA法检测mAb腹水效价及mAb的亲和力,杂交瘤细胞染色体分析,鉴定Ig亚类.结果:获得2株能稳定分泌抗hIGF-1的mAb 杂交瘤细胞系,Western blot分析显示,该mAb能与具有生物学活性的成熟IGF-1蛋白结合.腹水mAb效价可达6×104.mAb相对亲和力为2.1×109/mol～7.8×109/mol.2株单抗属IgM亚类.染色体分析符合杂交瘤细胞特征.结论:成功制备出抗hIGF-1的2株mAb杂交瘤细胞,为进一步用于hIGF-1的临床检测和实验研究创造了条件.【总页数】6页(P712-716,741)【作者】毕立清;刘莉;程蕴琳;施有为;仇镇宁;姜苏蓉【作者单位】南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏,南京,210029;南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,江苏,南京,210029;南京医科大学第一附属医院老年医学科,江苏,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R329.28【相关文献】1.抗人绒毛膜促性腺激素β亚单位羧基末端肽（hCGβ-CTP）单克隆抗体制备及初步鉴定 [J], 王锐;安晓丽;梁秋波;张道旭;李郑武;2.抗人OX40单克隆抗体的制备和初步鉴定 [J], 侯小娟;陈鸿斌;袁旭东;王双;仇玮祎;孙志伟3.抗人釉原蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 [J], 程岚;束蓉;夏一如;宁航4.重组抗HER2人源化单克隆抗体大规模制备及活性鉴定方法学建立 [J], 陈观平;汪一帆;应栩华5.抗人Ig轻链系列单克隆抗体的研制1．抗人λ轻链亚型／亚群单克隆抗体的制备及特性鉴定 [J], 赵蓉;郑志竑;谢捷明;包少佳;吴国华;邱文萱因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

抗伏马菌素B1单克隆抗体的制备及试剂盒的研制

抗伏马菌素B1单克隆抗体的制备及试剂盒的研制

万方数据
ＩｇＡ，ＩｇＤ，ＩｇＧｌ，ＩｇＧ２。，ＩｇＧ２ｂ，ＩｇＧ３）以上均购自美国Ｓｉｇｍａ公司； ＲＰＭＩ １６４０培养基，ＨＡＴ选择性培养基，ＨＥＰＥＳ，福氏佐剂（完 全、不完全），二甲基亚砜（ＤＭＦ），吐温２０（Ｔｗｅｅｎ ２０），聚乙二醇 （ＰＥＧ，ＭＷ ４０００），青霉素，链霉素，以上均购自Ｇｉｂｃｏ公司；辣 根过氧化物酶羊抗鼠ＩｇＧ（北京中山试剂公司），３０％Ｈ２０２（优 级纯，北京化工厂）。 １．１．３溶液系统ＥＬＩＳＡ使用液
关键词：伏马菌素Ｂ， 中图分类号：Ｒ１５５．５２
单克隆抗体ＥＬＩＳＡ试剂盒
ＴＳ２０７．５
文献标识码：Ａ
Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ ａｇａｉｎｓｔ Ｆｕｍｏｎｉｓｉｎ Ｂｌ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ—ｋｉｔ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｆｏｒ Ｆｕｍｏｎｉｓｉｎ Ｂ１
＋１．７９３（ｒ＝Ｏ．９９，Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｏｆ ｍａｉｚｅ ｏｎ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ５０ｎｇ／ｍｌ，２００ｎｇ／ｍｌ ａｎｄ ５００ｎｇ／ｍｌ ｗａｓ ａｍｏｎｇ
７１．８９％一１１２．９５％．Ｔｈｅ ｋｉｔ ｃａｎ ｂｅ ｓｔｏｒｅｄ ａｔ ｎｏｒｍａｌ ｔｅｍｐｅｒｔａｔｕｒｅ ｉｎ ｔｅｎ ｍｏｎｔｈｓ ａｔ ｌｅａｓｔ．Ｔｈｅ ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｏｆ ｖａｒｉａｎｔ ｗｉｎｔｈｉｎ— ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｎｄ ｂｅｔｗｅｅｎ—ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｗａｓ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ ２０％．
用２～４轮淘选，仅需两周左右的时间；（５）当抗体库容量很大 时，可得到高亲和力抗体。目前认为影响抗体库容量的主要 因素是抗体引物的多样性与细菌转化率的限制。国内报道用 不同的系统构建的库容为２．７×１０６。作者电转一次构建的库 容为１．２×１０６，如果要得到接近体内Ｂ淋巴细胞群数量（约 ｌＯｓ）的抗体库，必须通过增加转化次数来累积库容。有文献 报道经过上百次的电穿孔转化获得了１０”的抗体库№ｏ。
病毒学：MDV-1 CV1988／Rispens疫苗毒体外感染期间VP22的表达及细胞间转导作用

病毒学：MDV-1 CV1988／Rispens疫苗毒体外感染期间VP22的表达及细胞间转导作用

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２０ ｏ．２ ｏ１ ０ ６ｖ １ ，Ｎ ．９ １
解 析 其 结 构 分 别 为 ４（一 咯 基 ）１异喹 一 吡 ２ 一一 啉 酮 ．一 酸 （ ） ４（． 咯 基 ）１异 喹 ３甲 Ａ和 ． 吡 ２ －－ 啉 酮 一一 酸 甲酯 （ ） 在 相 刷 条件 下 ， ３甲 Ｂ． 通 过 单 独 培 养 这 两 株 内 生 真 菌 未 能 得 到 ｍａｉａ ｄ ｓ ｒ ｍｉ ．实验 结 果表 明 ，混合 发酵 ｎ ｅ 技 术 有 可 能 成 为 寻 找 新 颖 代谢 产物 的有 效 途 径 ． 图 １ ２参 ３ 表 ６ 关键词 ：内生真菌；混合发酵：代 谢产
０１１２ ６ ９ １６ １ ０・ ４ 病毒 学 ８ ６
ＭＤ １ＣＶ ９ ８ Ｒｓｅ ｓ疫苗毒体外感 Ｖ一 Ｉ８ ／ ｉ ｎ ｐ 染期 间 Ｖ ２ 的表 达 及 细 胞 间转 导 作 用 Ｐ２ ［ ，中］ 陈鸿军（ 刊 ／ 扬州大学江苏 省动物 预防医学重点实验室 ，扬州 ２ ５ ０ ） ２ ０ ９， 宋 翠 萍 ，秦 爱 建 ， 张晨 飞， 国 科 学 Ｃ ／ 中
物 ： 生物 碱
ｔ １ １ ２ ＇ ９ １５ ６ １ ０ ・６ ８ １
研 究 类 （ 自然科学）
ＣＶ ９ ８ 的 Ｖ ２ 蛋 白转 导功 能 奠 定 了 Ｉ８ 株 Ｐ２
基 础 ．图 ３参 ２ ４
１ ６７
明， 共混膜非常适合角膜细 胞贴 附生长 ，
１ ０ｄ内长 成 良好 单 层 细 胞 ．将 载 有 角膜
０ １ １２ ６的 全 基 因 组 分 析 ００ ［ ， 中］ 杨 帆 （ 毒 基 因 工程 国家 重 点 刊 ／ 病 实验 室，北京 １０ ７ ） ０ １６ ，贾茜，熊朝晖 ， 张笑 冰 ，吴洪 涛 ，赵 颖 ，杨 剑 ，朱俊 萍 ， 董 杰 ，薛 颖 ， 孙 立 连 ， 沈 岩 ，金 奇 ， ／ 科