食源性单核细胞增生李斯特菌的重金属镉抗性及其与抗生素耐药性的关系研究

食品中单核细胞增生性李斯特氏菌耐药性与分子分型研究作者：逯岩来源：《中国卫生产业》 2014年第21期逯岩辽宁省抚顺市疾病预防控制中心，辽宁抚顺 113006[摘要] 目的了解单核细胞增生性李斯特氏菌（L．monocytogenes LM）的耐药性质以及分子分型的具体特点，探讨耐药表型与PFGE基因组型之间所具备哪些关联。

方法采取自2011—2013年期间我市各区的熟食、牲畜肉类、以及海鲜水产品等食品中采取80株LM,采用微量肉汤稀释法观察抗生素的敏感性。

结果发现16.25％（13/80）的菌株存在耐药。

结论在所选取的LM存在一定的耐药性,LM的PFGE分型与其药敏分型无对应关系。

[关键词] 单核细胞增生性；李斯特氏菌；耐药性；分子分型[中图分类号] R852 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2014）07（c）-0031-021 资料与方法1.1 一般资料在2011年3月—2013年3月期间，主要采用我市的熟食、牲畜生肉类、速冻海鲜水产品，以及各个类型的凉拌菜作为主要研究对象，在选取的食品中采取80株LM,具体食物来源渠道详见表1。

1.2 研究方法1.2.1微量肉汤稀释法通过采用微量肉汤稀释法观察抗生素的敏感性,同时采用PFGE进行分子分型。

[1]按照美国公司临床试验标准推荐的LM药敏试验原则，并相应结合临床使用药物数量共计选择15种抗生素，推荐使用美国Bio-Rad公司的脉冲场电泳仪仪器，同时采用微量肉汤稀释法进行试验，详细操作步骤需要按照说明书严格执行。

1.2.2 PFGE分型方法 PFGE分型方法需要按照参考文献执行。

[1]耐药谱与PFGE型别关系的分析：对菌株的每种耐药谱分别统计其对应的PFGE型别数目，分析比较两者之间的关系。

1.2.3结果判定标准统计软件：BioNumerics分析软件；版本：7.1；PFGE图谱采用软件BioNumerics进行分析处理，选用Nice-UPGMA方法进行分析，同源性为100%的为同一PFGE型，小于100%为不同的PFGE型。

食品中单核细胞增生李斯特氏菌改良增菌液的研究
王乐;陈佳;秦丽
【期刊名称】《现代食品》
【年(卷),期】2022(28)9
【摘要】本文通过改变丙酮酸钠以及酵母浸膏添加量,对李氏增菌肉汤(LB_(1))进
行了改良。

通过吸光度法以及平板计数法测定不同优化条件下单核细胞增生李斯特氏菌生长曲线,并采用实时荧光PCR对增菌结果进行特异性验证。

得到改良后的增菌液配方为:在商品化李氏增菌肉汤(LB_(1))的基础上,添加1 g·L^(-1)的丙酮酸
钠,15 g·L^(-1)的酵母浸膏,此时前增菌时间可缩短至8 h,且经过验证,特异性良好。

使用改良后的李氏增菌肉汤(LB_(1))大大缩短了增菌时间,特异性良好,值得推广和应用。

【总页数】5页(P154-158)
【作者】王乐;陈佳;秦丽
【作者单位】张家口市食品药品检验中心;石家庄学院化工学院;河北省知识产权保
护中心
【正文语种】中文
【中图分类】R378
【相关文献】
1.食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测方法研究进展
2.选择性增菌液对单核细胞增生李斯特氏菌的影响
3.食品中单核细胞增生性李斯特氏菌耐药性与分子分型研究
4.食品中单核细胞增生李斯特氏菌调查及毒力研究
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单核细胞增生李斯特菌InlC基因缺失株的构建及其毒力和环境耐受性的研究单核细胞增生李斯特菌（Listeria monocytogenes）是一种广泛存在于自然环境中的细菌，可以引起人类和动物的严重感染。

在L. monocytogenes 中，InlC是一个重要的表面蛋白，与细胞内和细胞外的相互作用紧密相关。

本研究旨在构建InlC 基因缺失株，并评估其对宿主细胞的感染能力以及在环境中的耐受性。

首先，我们使用克隆技术成功地构建了 InlC 基因缺失株。

通过PCR 验证，确认了目标基因已被成功删除。

通过Western blot分析来确定 InlC 蛋白在缺失株中的表达情况。

结果显示，与野生型菌株相比，InlC 缺失株中完全没有 InlC 蛋白的表达。

这表明成功构建了 InlC 基因缺失株。

接下来，我们对 InlC 缺失株和野生型菌株进行了宿主细胞感染实验。

使用小鼠巨噬细胞系RAW264.7作为宿主模型，比较了两株菌在细胞内的定殖和复制能力。

结果显示，与野生型菌株相比，InlC缺失株对宿主细胞的入侵和复制能力显著降低。

这表明InlC对于L. monocytogenes进入和繁殖在宿主细胞中起到重要的作用。

为了评估 InlC 缺失株在环境中的耐受性，我们将野生型菌株和 InlC 缺失株分别培养在不同温度和pH值条件下，并评估其生长状况。

结果显示，在较高温度（42°C）下，InlC 缺失株的生长受到抑制，生长曲线明显下降。

然而，在正常的生理温度（37°C）下，两株菌的生长特征没有显著差异。

此外，在不同pH值条件下，两株菌的生长表现也相似。

这些结果表明，InlC 缺失株对环境因素的耐受性与野生型菌株类似。

综合以上结果，我们成功地构建了 InlC 基因缺失株，并证明了InlC 蛋白在 L. monocytogenes 对宿主细胞的感染中发挥重要作用。

此外，我们还发现 InlC 缺失株在较高温度下的生长受到明显抑制，但在正常的生理条件下，其生长特征与野生型菌株相似。

Sigma B在单核细胞增生李斯特菌耐受抗生素中的作用的开题报告引言：耐药菌的存在已经成为全球关注的焦点，而李斯特菌作为一种常见的细菌，其耐药性也在不断增强。

目前，单核细胞增生李斯特菌的耐药机制还不明确，也缺乏有效的治疗手段。

本文旨在探究Sigma B在单核细胞增生李斯特菌耐受抗生素中的作用，为研发有效的抗菌药物提供参考。

背景：单核细胞增生李斯特菌是一种能够引起食物中毒和败血症的细菌，其感染范围较广。

在治疗单核细胞增生李斯特菌感染时，广谱抗生素已经失去了治疗效果，因为该菌已经逐渐产生了对抗生素的耐药性。

因此，寻找并了解更多的治疗单核细胞增生李斯特菌的手段已成为亟待解决的问题。

Sigma B是一种激活因子，常出现在细菌感到压力时。

此外，它还可以调节许多重要的适应性反应，从而增加细胞对应激压力的耐受性。

Sigma B在许多细菌的抗生素耐药性中起着重要作用，包括肺炎球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。

然而，在单核细胞增生李斯特菌的耐药性中，Sigma B的作用还不明确。

研究方法：本次实验将采用静态试验和抗生素敏感性试验等方案，评估单核细胞增生李斯特菌的耐药性和Sigma B的作用。

样本将被随机分配到六个实验组中，包括正常菌株组、抗生素组、Sigma B过表达组、Sigma B突变组、抗生素+Sigma B过表达组和抗生素+Sigma B突变组。

抗生素组将受到抗生素的抵抗力检测，Sigma B突变组和Sigma B过表达组将受到基因测序和蛋白质印迹技术的检测。

试验时间预计为两个月。

预期结果：在本次实验中，我们期望发现Sigma B在单核细胞增生李斯特菌的耐受抗生素中具有一定的作用，即Sigma B的过表达可以增强细菌对抗生素的抵抗力。

同时，我们还期望发现Sigma B的突变可能会削弱单核细胞增生李斯特菌的耐药性，并且Sigma B的作用可能依赖于抗生素的类型和剂量，这些发现将为抗生素研发提供有价值的线索和方向。

食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染及耐药现状
邵美丽;杨帆;刘娣
【期刊名称】《黑龙江畜牧兽医》
【年(卷),期】2009()11
【摘要】单核细胞增生性李斯特菌作为一种重要的食源性致病菌已引起世界各国的广泛关注。

文章主要综述了近些年来该菌对食品的污染状况和该菌耐药性的发展趋势,以便人们更好地了解和掌握该菌对人类健康存在的潜在威胁,进而为制订行之有效的公共卫生政策奠定基础。

【总页数】2页(P21-22)
【关键词】食品;单核细胞增生性李斯特菌;污染;耐药
【作者】邵美丽;杨帆;刘娣
【作者单位】东北林业大学博士后流动站黑龙江省农科院博士后工作站;东北农业大学;黑龙江省农科院
【正文语种】中文
【中图分类】S852.6
【相关文献】
1.2004—2005年北京市食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染状况调查 [J], 崔京辉;李达;王永全;王丽萍
2.阜宁县食品中单核细胞增生性李斯特菌污染状况 [J], 杨华
3.四川省食品单核细胞增生性李斯特菌污染监测 [J], 赵晋;杨小蓉;薛晴;辛又川;刘
金秀;许建强;王余华
4.福州市食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染状况 [J], 刘红;潘珍瑜;林萍;江建真
5.深圳市食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染状况调查 [J], 吴平芳;贺连华;王冰;石晓路;扈庆华
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食品中单核细胞增生李斯特氏菌的毒力研究的开题报告一、选题背景及研究意义李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）是一种可以引起人类食品中毒的重要病原体。

其对人类的危害主要表现为食物中毒和产妇感染，前者最严重的后果就是脑膜炎和败血症，而后者则可能导致流产、早产或胎儿死亡等。

从分子角度分析，李斯特氏菌主要通过表面的蛋白质和糖脂素与哺乳动物细胞表面分子相互作用，以侵入人体。

随着对该菌的研究不断深入，我们发现，单核细胞增生和炎症反应对李斯特氏菌的毒力有着重要的作用。

因此，对于食品中单核细胞增生李斯特氏菌的毒力研究，不仅可以拓宽对李斯特氏菌致病机制的认识，还可以为防治该病提供有力的科学依据。

二、研究方案（一）目标本研究旨在探究李斯特氏菌在食品中诱导单核细胞增生的机制以及这种菌株存在的毒力特征，为防治食品中李斯特氏菌提供新的科学思路和参考。

（二）研究内容1. 通过李斯特氏菌感染实验和细胞培养技术，研究该菌株在对单核细胞的互作过程中对单核细胞增生的诱导作用。

2. 利用流式细胞仪等现代化技术，对实验结果进行定量与定性的分析，探究单核细胞增生与李斯特氏菌毒力之间的相互关系。

3. 通过与其他致病菌的比较，筛选出李氏特氏菌与其他病原菌毒力之间的异同点。

4. 探究李斯特氏菌在不同食物基质中的存活特征和传染性特征，并分析其与单核细胞增生特征之间的相关性。

（三）研究方法1. 细胞培养和李斯特氏菌感染实验利用血液和试管中的细胞培养技术，在不同条件下培养单核细胞样本，并对其进行李斯特氏菌的感染过程观察、提取细胞样品并进行实验。

2. 流式细胞仪的应用通过流式细胞仪技术，对实验结果进行定量与定性的分析。

3. 其他技术手段综合运用培养实验、细胞分离、分子生物学处理和数据分析等各种实验手段，全面深入分析李斯特氏菌的毒力特点。

（四）时间安排本研究计划用时约为两年，时间安排如下：第一年：实验准备和细胞培养技术的学习第二年：李斯特氏菌感染实验、流式细胞仪技术分析和数据分析以及结论撰写（五）预期成果及实际应用预期成果：1. 探究李斯特氏菌在食品中诱导单核细胞增生的机制以及相应毒力特征。

食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测方法的探讨张慧珍（谱尼测试集团股份有限公司，北京 100194）摘 要：单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）是一种人畜共患病的病原菌，是一种常见的土壤细菌，能引起严重食物中毒，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。

单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于自然界中，食品中存在的单核细胞增生李斯特氏菌对人类的安全具有一定的威胁，该菌在4 ℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品中威胁人类健康的主要病原菌之一。

本文通过采用国家标准检测方法《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》（GB 4789.30—2016）对大量肉、奶、蛋和水产品等产品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测，总结了一些食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测经验，主要从试剂准备、增菌、划线分离及生化鉴定等方面阐述了对单核细胞增生李斯特检测的一些理解，以期为食品检测工作中单核细胞增生李斯特氏菌的检测提供部分参考。

关键词：食品；单核细胞增生李斯特氏菌；国标检测方法Discussion on Detection Method of Listeria monocytogenes in FoodZHANG Huizhen(Pony Testing Group International Co., Ltd., Beijing 100194, China) Abstract:Listeria monocytogenes is a zoonotic pathogen. It is a common soil bacterium that can cause serious food poisoning. After infection, it is mainly manifested in sepsis, meningitis and mononucleosis. It exists widely exists in nature. Listeria monocytogenes in food is dangerous to human safety. The bacteria can still grow and reproduce in the environment of 4 ℃, and it is one of the main pathogenic bacteria that threaten human health in refrigerated food. By using the national standard detection method GB 4789.30—2016 to detect Listeria monocytogenes in a large number of meat, milk, eggs and aquatic products, this paper summarizes the detection experience of Listeria monocytogenes in some foods, and expounds some understandings of Listeria monocytogenes detection mainly from the aspects of reagent preparation, enrichment, lineation separation and biochemical identification, in order to provide some reference for the detection of Listeria monocytogenes in food testing.Keywords: food; Listeria monocytogenes; national standard detection method李斯特氏菌属隶属革兰氏阳性细菌中厚壁菌门，李斯特氏菌属可划分为6个菌种，即单核增生李斯特氏菌（L. monocytogenes）、英诺克李斯特氏菌（L. innocua）、斯氏李斯特氏菌（L. seeligeri）、威尔斯特氏菌（L. welshimeri）、伊氏李斯特菌（L. ivanovii）和格氏李斯特菌（L. grayi）[1]。

食品中单核细胞增生李斯特氏菌能力验证结果分析与讨论马秋莲，周　露，潘馨竹，王　健，马　蓉，徐程伟（宝应县有机食品质量监督检验中心，江苏扬州 225800）摘　要：目的：通过检验食品中单增李斯特氏菌了解实验室关于食品中微生物的检验和检测水平，通过检验技术的更新和检测方法的不断优化，增强实验室整体竞争能力，提升食品检验检测机构检验能力，使微生物实验室外部质控水平得以维护和巩固。

方法：利用BAX Q7对能力验证中的3个样品进行快速筛查，严格依据《食品安全国家标准食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验》（GB 4789.30—2016），对疑似菌进行鉴定。

结果：编号为270的样品检出为单增李斯特氏菌，编号为318和159的这两个样品中均未检出该致病菌，经过进一步实验，发现这两个样品中的致病菌为英诺克李斯特氏菌。

结论：本实验室顺利完成本次能力验证，结果较满意。

综上表明本实验室具备检验检测单增李斯特氏菌的能力，且检测方法和结果具有一定的准确性。

关键词：食品；能力验证；单核细胞增生李斯特氏菌；检测Proficiency Testing Results and Analysis of Listeriamonocytogenes in FoodMA Qiulian, ZHOU Lu, PAN Xinzhu, WANG Jian, MA Rong, XU Chengwei (Baoying Quality Supervision and Testing Center for Organic Food, Yangzhou 225800, China)Abstract: Objective: Through the inspection of Listeria monocytogenes in food to understand the laboratory on the inspection and detection level of microorganisms in food, through the update of inspection technology and continuous optimization of detection methods, enhance the overall competitiveness of the laboratory, improve the inspection ability of food inspection and detection institutions, so that the microbiology laboratory external quality control level can be maintained and consolidated. Method: BAX Q7 was used to quickly screen 3 samples in the ability verification, and the suspected bacteria were identified in strict accordance with the GB 4789.30—2016. Result: Listeria monocytogenes was detected in the sample numbered 270, while no such pathogen was detected in the two samples numbered 318 and 159. After further experiments, it was found that the pathogenic bacteria in the two samples were Listeria inoknock. Conclusion: The laboratory successfully completed the ability verification, the results are satisfactory. To sum up, this laboratory is capable of testing Listeria monocytogenes, and the detection methods and results have certain accuracy.Keywords: food; capability verification; Listeria monocytogenes; testing自然环境中存在大量的李斯特氏菌，该菌有7个菌株，单增李斯特氏菌作为该菌中的一种，能够引发人、动物共同患病[1]。

分析检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌的能力验证结果分析于 潇（上海中维检测技术有限公司，上海 201600）摘 要：为了提升实验室综合检测能力，保证日常出具的抽检结果准确可靠，本实验室参加了2022年南京市食品药品监督检验院组织的能力验证，能力验证结果评价为满意，表明实验室具备单核细胞增生李斯特氏菌的检验能力。

关键词：单核细胞增生李斯特氏菌；能力验证；质量控制Profificiency Testing Analysis of Listeria monocytogenesin FoodYU Xiao(Shanghai Zhongwei Testing Technology Company, Shanghai 201600, China) Abstract: In order to improve the comprehensive testing ability of the laboratory and ensure the accuracy and reliability of the daily sample test results, the laboratory participated in the ability verification organized by Nanjing Food and Drug Supervision and Inspection Institute in 2022, and the ability verification results were evaluated as satisfactory, indicating that the laboratory has the ability to test Listeria monocytogenes.Keywords:Listeria monocytogenes; profificiency testing; quality control李斯特氏菌属革兰氏阳性菌，广泛存在于自然界中，具有耐低温、耐酸、耐高盐等特点。

食品中单核增生细胞李斯特氏菌快速检测研究单核细胞增生李斯特氏菌在病原学上作为一种人畜共患和食源性疾病的致病菌已得到世界范围普遍的公认。

近年来，如何分离和鉴定食品中单核细胞增生李斯特氏菌已成为研究热点。

本文结合近十年的各种该病菌的快速检测方法作了系统综述，介绍了针对该病菌的快速检测方法，如显色培养基快速检测方法、酶联免疫试验检测方法、结合单克隆抗体技术的免疫学检测方法、反转录-PCR 检测方法、生物芯片，以期对食品中单核细胞增生李斯特菌的检测起到帮助和指导作用。

标签：单核增生细胞李斯特氏菌；检测方法单核细胞增生李斯特氏菌是一种短小的革兰氏阳性无芽孢杆菌[1]，它能引起人畜的李氏菌的病，该病发病率较低，但致死率高达20%～30%[2]，感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。

单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于自然界中，食品中存在的单核细胞增生李斯特氏菌对人类的安全具有危险，该菌在4℃的环境中仍可生长繁殖，是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一，因此，在食品卫生微生物检验中，必须加以重视。

本文拟对单核细胞增生李斯特氏菌的检测方法及其当前存在的问题等作系统介绍，以期为进一步深入研究提供参考。

1快速检测方法1.1 显色培养基快速检测方法显色或荧光鉴别培养基的基本原理是针对李斯特氏菌的β-D-葡萄糖苷酶和毒力因子PI-PLC酶，设计相应的底物，加入到常规选择性培养基中，利用酶对底物的分解，产生荧光或显色物质，使其菌落形态或颜色不同于其他李斯特氏菌和非李斯特氏菌，从而实现对李斯特氏菌快速定性鉴定和菌落数目快速定量。

张淑红等[3]检测了显色培养基的特异性和灵敏度。

实验证明此种检测方法具有较高灵敏度、特异性和选择性，是非常有价值的分离平板。

1.2 免疫学检测方法1.2.1 酶联免疫试验检测方法（ELISA）早期起初人们采用简单直接的细胞计数法进行检测，运用细胞计量术对牛奶中的单核细胞增生李斯特氏菌进行检测。

但是由于病原微生物的含量很低，仅通过细胞计数的方法检测灵敏度无法达到。