高效液相HPLC常见故障分析及其排除方法-文档资料
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高效液相色谱仪常见故障及解决方法一、泵故障1. 故障现象:泵无法正常启动或启动后无法正常停止。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧。
2. 故障现象:泵的流量不稳定或无法调节。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧;检查泵头与柱塞之间的密封圈是否损坏,如损坏,更换密封圈。
二、流动相跑空1. 故障现象:流动相液位下降至最低液位以下,导致无法正常进样。
解决方法:检查流动相的储液瓶是否已空,如已空,重新更换储液瓶;检查流动相的流速设置是否正确,如不正确,重新设置流速;检查管路是否有泄漏点,如存在泄漏点,修复泄漏点。
2. 故障现象:流动相液位迅速下降,导致无法正常进样。
解决方法:检查废液瓶是否已满,如已满,倾倒废液;检查管路是否有堵塞或弯折,如有,更换管路或调整管路布局。
三、峰面积重复性差1. 故障现象:同一色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查进样针的清洗是否彻底,如不彻底,加强清洗;检查样品前处理的稳定性是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:不同色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查流动相的组成是否恒定,如不恒定,重新配制流动相;检查色谱柱的稳定性是否可靠,如不可靠,更换色谱柱;检查检测器的波长是否准确,如不准确,重新调整波长。
四、峰丢失1. 故障现象:在色谱图中看不到预期的峰。
解决方法:检查进样针是否堵塞或断裂,如堵塞或断裂,更换进样针;检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查样品前处理是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:在流动相中添加了某种物质后,出现了预期之外的峰。
解决方法:检查流动相中添加的物质是否稳定,如不稳定,重新配制流动相;检查检测器的灵敏度是否足够高,如不够高,调整灵敏度;检查色谱柱的类型是否正确,如不正确,更换色谱柱。
高效液相色谱常见故障及解决方案1.压力过高或过低-压力过高可能是由于柱堵塞或流动阻力增加所致。
解决方案包括更换柱、清洗柱或检查管路是否存在问题。
-压力过低可能是由于泵的磁力搅拌器不工作或进样器封堵所致。
解决方案包括检查泵的磁力搅拌器是否工作正常,清洗进样器。
2.峰形不对称-峰形不对称可能是由于进样量不均匀或柱温度过高所致。
解决方案包括确保进样量均匀和降低柱温度。
3.峰尾或前肩-峰尾可能是由于柱温度过高、流速过快或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括降低柱温度、减慢流速或调整pH值。
-前肩可能是由于流动相中存在杂质或柱堵塞所致。
解决方案包括更换流动相或清洗柱。
4.杂峰或基线噪声-杂峰可能是由于样品纯度不高、固定相老化或试剂污染所致。
解决方案包括提高样品纯度、更换固定相或检查试剂是否污染。
-基线噪声可能是由于进样器密封不良、流动相气泡或电噪声所致。
解决方案包括检查进样器密封情况、减少流动相中的气泡或检查电子设备是否存在干扰。
5.柱寿命短-柱寿命短可能是由于样品预处理不彻底、柱收尾不当或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括增加样品预处理步骤、正确收尾柱或选择合适的流动相pH值。
6.流量不稳定-流量不稳定可能是由于柱堵塞、进样器密封不良或流动相流速波动所致。
解决方案包括清洗柱、检查进样器密封情况或调整流动相流速稳定性。
7.进样量偏差-进样量偏差可能是由于进样器封堵、进样器针头磨损或进样器流速不稳定所致。
解决方案包括清洗进样器、更换进样器针头或调整进样器流速稳定性。
8.柱温度不稳定-柱温度不稳定可能是由于温控系统故障或环境温度变化所致。
解决方案包括检查温控系统是否工作正常或采取措施保持恒定环境温度。
这些是HPLC常见故障及其解决方案的例子。
在实际操作中,操作人员应该根据具体情况诊断和解决故障,并遵循相关的操作规程和安全操作指南。
高效液相色谱仪故障排除指南高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)作为一种常用的分析仪器,可以广泛应用于药物分析、环境检测、食品科学等领域。
然而,在使用过程中,不可避免地会出现一些故障情况。
本文将介绍一些常见的HPLC故障,并提供相应的排除方法。
一、进样器故障1. 进样器漏液若观察到进样口出现漏液现象,首先可以检查密封件是否完好,如若密封件损坏应及时更换。
若密封件完好,还可以检查进样器盖上是否存在污垢,若有,则可清洗并重新安装。
2. 进样器堵塞如果在进样过程中发现进样器堵塞,可以先使用无机溶液进行冲洗,以清除可能存在的样品残留物。
如果仍然无法解决堵塞问题,可以采取拆卸进样器进行彻底清洗的方法。
二、柱温箱故障1. 温度控制不稳定若柱温箱的温度控制不稳定,可能会导致分离信号的漂移,影响分析结果的准确性。
这时,可以首先检查温度控制仪是否设置正确,如有必要,可以重新设置。
另外,也可以检查柱温箱是否存在漏气现象,若存在,应及时修复。
2. 柱温箱泄漏柱温箱泄漏可能会导致温度失控,因而影响分析结果。
检测到泄漏时,应首先检查柱温箱的密封性能,如有必要,可以更换密封圈,确保密封良好。
三、流动相泵故障1. 流量不稳定如果在使用流动相泵时,发现流量不稳定,可能是由于空气进入了系统,导致气泡形成。
这时,可以检查胶管连接是否松动,以及胶管中是否有积气现象。
如果检查后仍然无法解决问题,可以考虑更换胶管或检修流动相泵。
2. 压力异常如果HPLC系统在运行过程中压力异常,可能是由于流动相泵的压力传感器出现问题。
此时,应检查压力传感器是否损坏,如有必要,可以进行维修或更换。
四、检测器故障1. 检测器信号异常如果在分析过程中,检测器的信号异常,可能是由于光源出现故障导致。
这时,可以检查光源是否正常工作,如有必要,可以更换光源。
另外,也可以尝试调整检测器的增益或灵敏度,以改善信号异常问题。
HPLC常见问题与解决方案鉴于HPLC在全行业运用越来越广泛,因此每一个实验室分析人员都应该熟练掌握并应用HPLC,对于一些常见的故障分析应该做到游刃有余,才能在运行故障的时候即使解决问题,提高工作效率。
下面为HPLC可能出现的问题及解决方案,希望对大家能有所帮助。
1、HPLC柱验收测试时,色谱柱压力过高为什么?色谱柱压力过高是HPLC用户最常碰到的问题。
其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的问题,您可按下面步骤检查问题的起因。
①拆去保护预柱,看柱子压力是否还高,否则是保护柱的问题;若柱子压力仍高,需要再检查;②把色谱柱从仪器上取下,看柱子压力是否下降,否则是管路堵塞,需清洗,若压力下降,再检查;③将柱子的进出口反过来接在仪器上,用10倍柱体积的流动相冲洗柱子,(此时不要连接检测器,以防固体颗粒进入流动池)。
这时,如果柱压仍不下降,再检查;(此方法只适用于使用过的柱子)④更换柱子入口筛板,若柱压下降,说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质,正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。
若柱压还高,请与厂商联系。
一般情况下,在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题,过滤器就是解决这一问题的最佳选择。
2、保留时间发生漂移或快速变化原因?关于漂移问题:①温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持色谱柱温度恒定;②流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等;③柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡。
关于快速变化问题:①流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定;②泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出;③流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合。
3、出现拖尾或双峰的原因?①筛板堵塞或色谱柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子;②存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子;改换流动相或更换选择性好的色谱柱;③色谱柱超载,需减少进样量。
4、为何出现鬼峰?①进样阀残余峰--每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗;②样品中未知物--处理样品;③柱未平衡--重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱);④三氟乙酸(TFA)氧化--每天新配,用抗氧化剂;⑤水污染(反相)--通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水。
78宁夏农林科技,Ningxia Journal of Agri.and Fores.Sci.&Tech. 2020,61(11 ):78-80高效液相色谱仪常见故障及解决方法吴江瑞,马燕,黄燕,孔祥明,杜越,魏晓琴,李慧中卫市农产品质量安全检验检测中心,宁夏中卫755000摘要:高效液相色谱法在农产品检测领域发挥着重要作用。
文章分析了高效液相色谱仪在使用中常见故障产生的原因,提出了常见故障解决方法,以期为检测人员提供参考。
关键词:高效液相色谱;常见故障;解决方法中图分类号:0657.31 文献标识码:A文章编号:1002-204X(2020)11-0078-03doi:10.3969/j.issn.1002-204x.2020.11.027Analysis of HPLC Common Faults Causes and SolutionsWu Jiangrui, Ma Yan, Huang Yan, Kong Xiangming, Du Yue, Wei Xiaoqin, Li Hui(Zhongwei City Agricultural Products Quality Safety Detection and Testing Center,Zhongwei,Ningxia 755000) Abstract High performance liquid chromatography plays an important role in the detection and testing of agricultural products.In this paper,the causes of common faults during the application of HPLC were analyzed.The solutions were also put forward,aiming to provide references for more testing personnel.Key words HPLC;Common faults;Solutions高效液相色谱法是农产品质量安全控制过程中不可缺少的重要方法,具有分离速度快、检测效率高、重现性好等特点,尤其在检测极性较强、相对分子质量较大、不易气化或受热易分解的农药中更能显示其优越性[1-2]。
高效液相色谱法一.仪器的维护与常见问题处理若液相出现规律性基线波动,长时间不平稳可能原因是什么?快速解决方法:一般为仪器系统出现气泡,最好使用纯甲醇长时间冲洗系统(不少于3小时,特殊情况要12小时左右)柱压逐渐升高可能原因是什么?快速判断①色谱柱出现堵塞②针座堵塞③进样针出现堵塞④系统管路中有未冲洗干净的盐⑤滤芯脏了解决方法①色谱柱出现堵塞:一种是将堵塞了色谱柱的位置拆卸,取出里面的筛网用水或甲醇超解(不建议采用,除非没有其他方法)另一种是将堵塞一头色谱柱链接在仪器上另一头不要链接,先用10%甲醇根据色谱柱柱压调节流速冲洗一小时左右,然后换成纯甲醇再以此方法继续冲洗,根据其柱压随时调整流速。
②针座堵塞与进样针出现堵塞:情况不严重则将它们拆卸后用水超解几分钟就可以了,若堵塞严重只有更换新的(堵塞不代表不能用,若无明显的质量损坏如:变形,滑口,开裂等,后续修好后还能做备件使用)③系统管路中有未冲洗干净的盐:用水或10%异丙醇对系统冲洗,冲洗后柱压正常,则可正常使用。
(注意不建议对系统反冲洗,会造成管路中的残留盐类物质重新回到系统中造成二次堵塞。
)④滤芯脏了:更换滤芯若出现保留时间飘移可能原因是什么?快速判断原因:①流动相混合不均匀②柱温不稳③压力不稳④密封圈松动⑤对于是四元泵的液相,其比例阀区域有堵塞情况(流动相是按比例配置,若比例阀区域堵塞,进样第一针时,可能有一个阀只进入25%另一个阀则是75%,进样第二针时则会变成一个阀进入20%,另一个阀80%)快速解决方法:①流动相重新配置,并按要求混匀②保证环境温度与仪器设定温度相差不大并稳定③系统冲洗平衡后方能实验④更换或调整密封圈⑤将出现堵塞区域的设备进行超声清洗。
1.气相检验化学残留:对照品重复性必须符合要求,但供试品重复性不做要求(上海海尼是对照品重复性必须符合要求,但配置两个供试品,各进一针不计算重复性。
目前海陵是对照品与供试品都要计算重复性)液相进样针无法正常采集?解决方法:一般为仪器机械故障,若进样器显示信号一直为红色,可能是进样针损坏或机械臂故障。
高效液相色谱仪常见故障分析及解决方法高效液相色谱仪常见故障分析及解决方法高效液相色谱(high performance liquid chromatography, hplc)是近30年发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术。
它既能用于微量组分的分析测定,又能用于大量的制备分离,灵活多样,其应用范围已超过其它各种分离方法,尤其在生化医药样品的分析分离方面更能充分发挥它的特长,为推动这些领域的进步和发展作出了巨大贡献。
液相色谱在使用过程中常会出现一些影响分析结果的小问题,如果使用人员了解常见问题及其成因和相关的解决方法,能做到早预防、勤维护,会使分析结果保持较好的稳定性与较高的精确性。
1 液相色谱仪系统液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱、柱温箱、检测器、数据处理系统组成(如图1所示)。
对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件,同时也是容易出事故的主要场所。
2 常见问题及解决方法2.1 针对柱压问题(表1)柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。
所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值,而是指压力波动范围在50psi之间。
压力过高、过低及波动较大都属于柱压问题,但柱压的高低与色谱柱的种类、品牌、液相系统本身及使用的流动相种类相联系。
值得注意的'是在使用梯度洗脱时,进柱压的平稳缓慢的变化是允许的。
在实际应用中柱压过高可从以下几个方面来考虑[1]。
首先考虑柱子是否被堵,此时可更换一根新柱子进行检测。
2.2 针对保留时间漂移的问题 [2,3] (表2)保留时间的改变是很多液相色谱使用者常碰到的问题,其包括了保留时间增大和减小。
它的产生与很多原因有关。
2.3 针对异常色谱峰问题[2-4]异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。
具体情况与原因分析如表3。
3 高效液相色谱仪的保养[5-7]3.1 hplc的日常操作条件工作温度10~30℃;相对湿度<80%;最好是恒温、恒湿,远离高电干扰、高振动设备。
WATERSHPLC常见故障分析WATERSHPLC(高效液相色谱)是一种常用的分析方法,用于分离和检测化合物。
然而,HPLC仪器在使用过程中一些常见故障可能会影响分析结果和实验的进行。
在以下的文章中,我们将探讨一些WATERSHPLC常见故障的分析和解决方法。
1.峰形不对称峰形不对称可能是由于流动相、柱等问题引起的。
首先,检查流动相是否正确配置,确保使用的溶剂无气泡和杂质。
其次,检查柱的状态,尽量避免在柱上运行样品时破坏柱的封底。
最后,还可以尝试调整梯度和流速等参数以改善峰对称性。
2.噪声干扰噪声干扰可能是由于仪器的光电检测器或环境因素引起的。
首先,检查光电检测器是否干净,清洁检测器表面以去除灰尘和杂质。
其次,尽量将仪器放置在安静的环境中,避免外部噪声的干扰。
最后,检查样品制备的过程,确保样品中没有杂质或颗粒。
3.漏液漏液可能是由于柱连接不紧密或密封圈老化引起的。
首先,检查柱连接是否紧固,确保连接件没有松动。
其次,检查密封圈的状态,及时更换老化的密封圈。
最后,还可以尝试调整流速和压力以减轻压力对密封的影响。
4.柱堵塞柱堵塞可能是由于样品中的杂质、柱背压增加或柱老化引起的。
首先,可以尝试使用过滤器或微孔过滤膜将样品预处理,去除样品中的颗粒和杂质。
其次,检查流动相的组分,避免出现析出物或结晶。
最后,定期检查柱背压,及时更换老化的柱。
5.柱效降低柱效降低可能是由于柱老化、样品残留或流动相组分改变引起的。
首先,定期检查柱的状态,及时更换老化的柱。
其次,对于含有高糖、脂肪或盐的样品,可以考虑进行前处理或柱后处理以减轻柱效降低的影响。
最后,检查流动相的组分,确保流动相没有杂质和过多的溶剂。
总结而言,WATERSHPLC常见故障的分析和解决方法需要综合考虑多个因素,包括流动相、柱、样品和仪器等。
通过仔细检查和调整这些因素,可以解决大多数故障,并确保HPLC仪器的正常运行和准确的分析结果。
高效液相色谱法常见故障排除所长办公室文毅日前,本人参加了高效液相色谱维修、维护及常见故障排除的培训班,现将培训内容总结如下,希望对大家的实际工作有所帮助!一、检测器常见故障排除1、基线噪声·检测池窗口污染:用强溶剂冲洗检测池;卸下检测池,拆开清洗或更换池窗石英片。
·样品池中有气泡:突然加大流量赶出气泡;在检测池出口端加一反压(0.2-0.3MPa)连一个0.3mm×1~2m的不锈钢管,以增大池内压(增加压力不要过大,防止检测池石英片碎裂)。
·检测器或数据采集系统接地不良:拆去原来的接地线,重新连接。
·检测器光源故障:检查氘灯或钨灯设定状态;检查灯使用时间、灯能量、开启次数;更换氘灯或钨灯。
·液体泄露:拧紧或更换连接件。
·很小的气泡通过检测池:流动相要仔细脱气;加大检测池的背压;系统检漏;有微粒通过检测池,清洗检测池;检查色谱柱出口筛板。
2、基线漂移·检测池窗口污染:同基线噪声描述。
·色谱柱污染或固定相流失:更换色谱柱或使用保护柱。
·检测器温度变化:系统恒温。
·光源故障:更换氘灯或钨灯。
·原先的流动相没有完全除去。
·溶剂储液瓶污染:清洗溶剂瓶,用新流动相平衡系统。
·强吸附组分从色谱柱中洗脱:在下一次分离之前用强洗脱能力的溶剂冲洗色谱柱;使用溶剂梯度。
3、工作站上出现大的尖峰·检测池内有气泡通过:溶剂脱气并彻底冲洗系统;检查连接系统是否漏液。
·记录仪或检测器接地不良:消除噪声来源;确保良好接地。
·样品溶解不彻底。
4、负峰·检测器输出信号的极性相反。
·样品的吸收小于流动相,流动相不纯。
·样品溶剂干扰。
·示差折光检测器中样品的折射率较低。
·进样中带入气泡。
5、鬼峰或假峰·进样阀或注射器污染·样品溶剂与流动相不同·样品中有空气·流动相中杂质引起·在线过滤器或过滤沉子污染·溶剂储液瓶污染6、工作站不回零⑴记录仪或工作站信号阶梯式上升·检测器的输出范围设定不当:重新设定检测器的输出范围。
高效液相色谱仪常见故障的断定及解决(一)高效液相色谱仪保留时间变化1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用〉25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱(二)高效液相色谱仪保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温(三)高效液相色谱仪保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5(四)高效液相色谱仪出现肩峰或分叉1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子(五)高效液相色谱仪鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水(六)高效液相色谱仪基线噪声1.气泡(尖锐峰)流动相脱气,加柱后背压2.污染(随机噪声)清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂3.检测器灯连续噪声更换氘灯4.电干扰(偶然噪声)采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压(七)高效液相色谱仪峰拖尾1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相2.峰干扰清洁样品,调整流动相3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品4.同前(四)4同前(四)45.同前(四)35.同前(四)36.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱(八)高效液相色谱仪峰展宽1.进样体积过大同(四)12.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9.样品过载进小浓度小体积样品既使日常精心维护的液相色谱仪,随着使用时间的增加或使用者经验不足也会出现一些问题或故障。
高效液相色谱仪器故障的诊断及其维修液相色谱仪器是一种广泛应用于化学、生物和医药等领域的分离和分析仪器。
然而,由于长期使用或操作不当等原因,液相色谱仪器可能会出现故障。
本文将介绍一些常见的液相色谱仪器故障,并提供诊断和维修方法。
1. 压力异常当液相色谱仪器出现压力异常时,可能是由于柱堵塞或柱压力不足等原因引起的。
首先,可以检查柱是否堵塞,可以通过更换柱或者清洗柱来解决。
另外,也需要检查柱前的过滤器是否堵塞,如果是,则需要更换过滤器。
2. 泵故障液相色谱仪器的泵可能会出现泵头堵塞或密封件损坏等故障。
当出现这种情况时,需要检查泵头是否堵塞,并清洗或更换泵头。
另外,也需要检查泵的密封件是否完好,如果密封件损坏,则需要更换密封件。
3. 检测器信号异常检测器信号异常可能是由于检测器灯管老化或污染、检测器电路故障等原因引起的。
当出现这种情况时,可以先清洗检测器灯管或更换灯管;同时,也需要检查检测器电路是否正常,如果电路故障,则需要修复或更换电路。
总的来说,液相色谱仪器的故障诊断和维修需要具备一定的专业知识和技能。
在进行维修前,建议先查阅液相色谱仪器的使用说明书,了解其工作原理和结构,以便更好地诊断和解决故障。
同时,定期对液相色谱仪器进行维护和保养,可以有效地减少故障的发生,延长仪器的使用寿命。
液相色谱仪器(HPLC)是一种高效、精确的分析仪器,在化学、生物、药学等领域都有着广泛的应用。
然而,由于长期使用、操作不当或者设备老化等原因,液相色谱仪器也会出现各种故障。
在这种情况下,对仪器进行准确的故障诊断,并采取适当的维修措施,是保障仪器正常运行的关键之一。
4. 色谱柱问题液相色谱仪器中的色谱柱是重要的部件,若出现问题则会导致分离效果下降。
柱子可能会发生堵塞、损坏或老化,而影响分离效果。
如果怀疑柱子的问题导致了色谱仪器的故障,第一步就是检查柱子的状态。
可以通过更换柱子或者清洗柱子来解决这一问题。
此外,也要检查柱前的过滤器是否正常运行,如果过滤器故障,也会影响色谱仪器的运行。
效液相色谱仪使用中常见故障及解决方法1 高效液相色谱仪系统液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。
对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。
2 常见问题及解决方法高效液相作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确操作的话,就容易导致一些问题。
其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。
2.1 柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。
所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI(3.3 Bar)之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。
压力过高、过低都属于柱压问题。
2.1.1 压力过高这是高效液相在使用中最常见的问题,指的是压力突然升高,一般都是由于流路中有堵塞的原因。
此时,我们应该分段进行检查。
(1).首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK 管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。
处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。
如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查;(2).打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。
处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。
如果压力降至100PSI (6.7 Bar)以下,过滤白头正常,在检查;(3).把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。
处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。
如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。
假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。
这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。